六種野生植物提取物對草莓蚜蟲的生物活性

王鋒++任守才++郭琪玖

摘要：用乙醇做溶劑，測定6種野生植物乙醇提取物對草莓（Fragaria ananassa）蚜蟲（Aphidoidea）的生物活性。結(jié)果表明，6種野生植物的乙醇提取物對草莓蚜蟲均有不同程度的拒食和毒殺活性。在10 mg/mL濃度下，紫莖澤蘭（Eupatorium adenophora）提取物對蚜蟲的拒食率最高，處理12 h后，拒食率為84.24%，其次為澤漆（Euphorbia helioscopia）提取物，拒食率為83.54%；蒲公英（Taraxacum mongolicum）提取物拒食活性雖然最低，但12 h拒食率仍能達(dá)到56.14%以上。隨著時(shí)間的延續(xù)，各提取物的拒食活性逐漸變?nèi)?，但紫莖澤蘭、澤漆提取物72 h拒食率仍能保持在67.45%和62.34%。紫莖澤蘭提取物對蚜蟲的毒殺活性最高，72 h毒殺校正死亡率為93.04%；蒲公英提取物的毒殺活性最低，但72 h毒殺校正死亡率仍能達(dá)到80.54%。

關(guān)鍵詞：野生植物；提取物；草莓（Fragaria ananassa）；蚜蟲（Aphidoidea）；生物活性

中圖分類號(hào)：S433 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2015）17-4181-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.17.018

在生長期間，危害草莓（Fragaria ananassa）的蚜蟲（Aphidoidea）種類有桃蚜（Myxus persicae）、棉蚜（Aphis gossypii）、蘿卜蚜（Lipaphis erysimi）等[1]，主要群集在植株的嫩葉上，以成蚜和若蚜集中刺吸草莓的葉、花、心葉汁液，大量發(fā)生時(shí)布滿全株，使葉、花和心葉扭曲畸形，整個(gè)植株生長發(fā)育不良，嚴(yán)重時(shí)可致植株死亡[2]。在蚜蟲吸食的同時(shí)，還排出大量的水分和蜜露，不僅影響葉片正常的光合作用和呼吸作用，而且易滋生病原菌。此外，蚜蟲還能傳播多種病毒[3]。目前，草莓蚜蟲還主要依靠化學(xué)農(nóng)藥防治。但大量、長期地使用單一化學(xué)農(nóng)藥會(huì)出現(xiàn)破壞農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)、污染環(huán)境、殺傷有益生物、使害蟲產(chǎn)生抗藥性、農(nóng)藥殘留超標(biāo)等問題。

植物源農(nóng)藥源于自然，選擇性高，較易自然降解，低毒低殘留，一般不會(huì)污染環(huán)境及農(nóng)產(chǎn)品，對高等動(dòng)物相對安全，對害蟲天敵傷害小，且對害蟲作用機(jī)制獨(dú)特，不易產(chǎn)生抗藥性[4]，近年來逐漸成為新型環(huán)保農(nóng)藥開發(fā)的熱點(diǎn)[5-8]。張建英等[9]利用11種植物提取物檢測了對枸杞蚜蟲的生物活性，韓秀英等[10]研究了22種植物提取物對黃瓜白粉病菌的抑制作用。眾多研究結(jié)果表明，多種植物的提取物對蔬菜、農(nóng)作物害蟲和病原菌具有一定的驅(qū)避作用和毒殺活性，越來越多的植物源農(nóng)藥應(yīng)用于綠色農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。

紫莖澤蘭（Eupatorium adenophora）、扁蓄（Polygonum aviculare）、葎草（Humulus japonicus）、龍葵（Solanum nigrum）、澤漆（Euphorbia helioscopia）、蒲公英（Taraxacum mongolicum）是中國北方農(nóng)田常見的雙子葉雜草。其中，紫莖澤蘭、龍葵的提取物曾被用作對病原真菌的抑制活性研究[11-13]。本研究測定了這6種野生植物的乙醇提取物對草莓蚜蟲的生物活性，以期為開發(fā)安全、高效、低毒的植物源殺蟲劑提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗(yàn)所用6種野生植物分別采集自棗莊市薛城區(qū)周邊農(nóng)田，具體植物名稱及供試部位見表1。

將新鮮植株洗凈背光自然風(fēng)干，然后置于55 ℃烘箱烘干至恒重，用分析型研磨機(jī)粉碎后過40目篩，得到干粉末于4 ℃冰箱密封儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

供試蚜蟲來源于棗莊市薛城區(qū)草莓生產(chǎn)基地未使用過農(nóng)藥的植株。采集后置于RZH-850A型人工氣候培養(yǎng)箱，用草莓植株在25 ℃下飼養(yǎng)，繁殖多代后，挑取生長發(fā)育一致的無翅成蚜進(jìn)行測試。

1.2 方法

1.2.1 植物活性物質(zhì)的提取 分別稱取各植物干粉20 g，用濾紙包好，置于500 mL三角瓶內(nèi)，加入5倍干粉量的95%乙醇，用超聲波提取30 min。將提取液過濾后，用減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸發(fā)濃縮至膏狀，用95%乙醇溶解并定容至1 g/mL，即得到6種植物的乙醇提取液，然后分別裝入棕色廣口瓶中密封，置于4 ℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 提取物對蚜蟲拒食活性的測定 將6種植物提取物（1 g/mL）用95%乙醇稀釋至10 mg/mL，以95%乙醇溶液作為空白對照。采摘大小一致、面積約5 cm2的鮮嫩草莓葉片，分別在各提取液和對照液中浸潤4 s，取出晾干。在葉背面轉(zhuǎn)接30頭無翅成蚜，隨后將葉片背面向下置于培養(yǎng)皿中，葉柄用濕棉球包裹保濕，培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，并扎孔通氣，然后置于25 ℃人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)飼養(yǎng)。12、24、48、72 h后檢查各處理葉片上棲息蚜蟲數(shù)。每個(gè)處理重復(fù)4次，計(jì)算拒食率。

拒食率=（對照葉片棲息蚜蟲數(shù)-處理葉片棲息蚜蟲數(shù)）/對照葉片棲息蚜蟲數(shù)×100%

1.2.3 提取物對蚜蟲毒殺活性的測定 采取毛細(xì)管微量點(diǎn)滴法。在溫室中培植草莓，在幼嫩葉片上接種無翅成蚜，使其自然繁殖，直至蚜蟲數(shù)量達(dá)到試驗(yàn)要求。剪取帶蚜葉片，剔除若蚜，僅保留30頭無翅成蚜。

將各提取液用95%乙醇稀釋至10 mg/mL，用毛細(xì)管將提取液點(diǎn)滴在蚜蟲背上，使藥液濕潤蟲體即可。每個(gè)處理4次重復(fù)，以95%乙醇溶液做空白對照。將處理后的載蚜葉片置于有保濕濾紙的培養(yǎng)皿中，將培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，并扎孔通氣，于常溫下培養(yǎng)。定期統(tǒng)計(jì)蚜蟲死亡數(shù)，計(jì)算死亡率和校正死亡率。

校正死亡率=（處理死亡率-對照死亡率）/（1-對照死亡率）×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 6種植物提取物對草莓蚜蟲的拒食活性

6種植物提取物對草莓蚜蟲的拒食活性見表2。結(jié)果表明，6種野生植物的乙醇提取物在10 mg/mL濃度下，對草莓蚜蟲均有不同程度的拒食活性。其中，紫莖澤蘭、澤漆和葎草提取物對蚜蟲的拒食活性較強(qiáng)，在處理12 h后的拒食率均達(dá)到80%以上。紫莖澤蘭提取物拒食率最高，達(dá)到84.24%；澤漆次之，為83.54%；而龍葵、蒲公英的拒食活性較低，分別為60.43%和56.14%。隨著處理時(shí)間的延長，各植物提取液的拒食作用逐漸下降。其中，紫莖澤蘭、澤漆下降幅度較小，在72 h后仍能保持60%以上的拒食活性，表明這2種植物的提取物對蚜蟲的拒食作用持續(xù)時(shí)間較長。

2.2 6種植物提取物對草莓蚜蟲的毒殺活性

6種植物提取物對草莓蚜蟲的毒殺活性見表3。結(jié)果表明，6種野生植物的乙醇提取物對草莓蚜蟲均表現(xiàn)為較高的毒殺作用。在10 mg/mL濃度下，紫莖澤蘭提取物的毒殺作用較強(qiáng)，72 h后的毒殺校正死亡率達(dá)到93.04%，澤漆和龍葵提取物毒殺活性次之，分別為92.01%和90.86%；蒲公英提取物的毒殺效果低于其他5種植物，但其72 h后的毒殺校正死亡率仍能達(dá)到80%以上。

3 小結(jié)與討論

6種野生植物95%乙醇提取液對草莓蚜蟲的生物活性測試結(jié)果表明，6種植物提取物對蚜蟲均有較強(qiáng)的驅(qū)避活性和較高的觸殺活性，但不同植物間存在一定差異。其中，紫莖澤蘭提取物的生物活性最高，其次為澤漆提取物。紫莖澤蘭提取物在處理12 h后的拒食活性和處理72 h后的毒殺校正死亡率分別達(dá)到84.24%和93.04%；澤漆提取物的拒食活性和毒殺活性分別為83.54%和92.01%。其他4種植物提取物的拒食活性和毒殺活性也分別達(dá)到50%以上和80%以上。預(yù)示著這些野生植物作為植物源殺蟲劑可能會(huì)有一定的利用價(jià)值，具有良好的開發(fā)前景。

農(nóng)業(yè)害蟲的防治應(yīng)禁止高毒、高殘留農(nóng)藥的使用。植物體內(nèi)含有天然的殺蟲活性物質(zhì)，如生物堿類、萜類、黃酮類、精油類、羧酸酯類等，這些物質(zhì)對昆蟲具有毒殺、忌避、拒食、麻醉、抑制生長發(fā)育等作用[14]，積極研究和開發(fā)植物源殺蟲劑，生產(chǎn)與環(huán)境相容的無公害農(nóng)藥，對農(nóng)產(chǎn)品安全具有深遠(yuǎn)的意義。植物源農(nóng)藥對害蟲的作用機(jī)制獨(dú)特，不易產(chǎn)生抗藥性，無殘留，且對天敵和人畜低毒，有利于保持農(nóng)田生態(tài)環(huán)境。

紫莖澤蘭、葎草、龍葵、扁蓄、蒲公英、澤漆是中國北方常見的田間雜草，這些雜草適應(yīng)性強(qiáng)，蔓延快，防除困難，與農(nóng)作物爭奪養(yǎng)分和光照，影響作物的生長發(fā)育，降低作物的產(chǎn)量。控制這些雜草滋生蔓延最有效的措施是對其進(jìn)行合理的開發(fā)利用。因此，充分利用和開發(fā)這些野生資源，加快對野生植物粗提物活性成分的分離鑒定和應(yīng)用，變害為利，是當(dāng)前生態(tài)農(nóng)業(yè)發(fā)展面臨的新任務(wù)。

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