王偉,陳桂香,張艷艷,王正榮*(.兵團(tuán)第八師一四三團(tuán)獸醫(yī)站,新疆石河子83000;.新疆農(nóng)墾科學(xué)院)
石河子部分地區(qū)家犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情況調(diào)查
王偉1,陳桂香1,張艷艷2,王正榮2*
(1.兵團(tuán)第八師一四三團(tuán)獸醫(yī)站,新疆石河子832000;2.新疆農(nóng)墾科學(xué)院)
為了解新疆石河子地區(qū)家犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的感染情況,于2013—2014年在本地區(qū)采集家犬糞樣60份,用犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)雙抗體夾心ELISA試劑盒檢測(cè)了采集的樣品,結(jié)果顯示,在60份樣品中檢測(cè)陽(yáng)性樣品為5份,檢測(cè)陽(yáng)性率為8.33%,表明本地區(qū)家犬仍然存在細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染的情況,應(yīng)繼續(xù)重視包蟲(chóng)病防控工作。
細(xì)粒棘球絳蟲(chóng);家犬;感染情況
細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)(Echinococcusgranulosus,Eg)屬于扁形動(dòng)物門(mén),絳蟲(chóng)綱,圓葉目,帶科,棘球?qū)俪蓡T,其幼蟲(chóng)可以感染牛、羊、駱駝等家畜,還可感染人,形成危害嚴(yán)重的細(xì)粒棘球蚴病,又稱包蟲(chóng)病[1]。犬作為細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的終末宿主,在該病的流行過(guò)程發(fā)揮著重要作用。同時(shí)由于終末宿主犬的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于中間宿主牛羊的數(shù)量,因此,犬在該病的防控過(guò)程亦處于極其重要的位置。盡管2005年以來(lái),中央以及各級(jí)地方政府加大了包蟲(chóng)病的防治工作及科普宣傳力度,同時(shí)還安排了專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)對(duì)我國(guó)中西部貧困地區(qū)進(jìn)行包蟲(chóng)病病人篩查和治療、控制犬傳染源、普及健康教育等工作予以支持,有力地推動(dòng)了包蟲(chóng)病流行地區(qū)該病的防治工作,并取得了不錯(cuò)的成績(jī)。但是,由于包蟲(chóng)病流行區(qū)大多處于牧區(qū),經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展水平相對(duì)滯后,人文環(huán)境獨(dú)特,農(nóng)牧民群眾科學(xué)文化知識(shí)普及率低,同時(shí)由于動(dòng)物宿主種類多、數(shù)量較大、分布廣泛、管理困難等因素,我國(guó)包蟲(chóng)病防治仍然面臨很多困難和挑戰(zhàn)。
石河子墾區(qū)地處天山北麓中段,準(zhǔn)噶爾盆地南緣,地理坐標(biāo)位于東經(jīng)84'58"~86'24",北緯43'26" ~45'20"。東以瑪納斯河為界,與瑪納斯縣為鄰;南、西、北三面與沙灣縣環(huán)接市區(qū)。市區(qū)東距自治區(qū)首府烏魯木齊150km,西距霍爾果斯口岸500km。全墾區(qū)面積7529km2。為了解石河子地區(qū)家犬包蟲(chóng)病的流行情況,為包蟲(chóng)病的防治提供理論依據(jù),采集該地區(qū)部分家犬的糞樣,用ELISA檢測(cè)方法調(diào)查了家犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的感染情況。
1.1 試驗(yàn)樣品采集
在轄區(qū)內(nèi)隨機(jī)采集家犬/牧犬糞便樣品,3g/犬。采集時(shí),按無(wú)污染方式采集犬糞樣。采集的家犬/牧犬糞樣品于-70~-80℃下至少凍存1周,以滅活病原體(蟲(chóng)卵)。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 樣品處理
取已滅活犬糞樣1g,放入盛有1mL樣品處理液的試管中,輕輕振蕩使犬糞形成懸液,靜置20min,3000轉(zhuǎn)/min離心10min,取上清進(jìn)行檢測(cè)。
1.2.2 犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)抗原檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法
(1)打開(kāi)試劑盒,在室溫條件下做平衡處理30min。然后將洗滌儲(chǔ)存液用去離子水做10倍稀釋。(2)根據(jù)檢測(cè)樣品數(shù)量將板條固定于板架之上。然后用微量移液器加入處理后的樣品100μL。另設(shè)陰陽(yáng)對(duì)照各1孔,臨界對(duì)照3孔,空白對(duì)照1孔,加好后于37℃靜置1h。(3)洗板前甩掉樣品孔中液體,洗板3次,每次1min,洗完后每孔加入50μL酶標(biāo)記物,然后37℃靜置30min。(4)同步驟3洗板3次,滴加顯色液各1滴,37℃避光靜置30min,立即加終止液,最后用酶標(biāo)儀讀取數(shù)值。(5)質(zhì)量控制及結(jié)果判定。預(yù)設(shè)空白孔調(diào)零,陰性對(duì)照吸光度應(yīng)小于臨界對(duì)照孔平均值,同時(shí)臨界對(duì)照值應(yīng)大于0.15,陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)大于0.3,則實(shí)驗(yàn)檢測(cè)有效。最終結(jié)果判定方法為陰性樣品的吸光度應(yīng)小于預(yù)設(shè)臨界對(duì)照的平均值,而陽(yáng)性樣品的吸光度應(yīng)大于等于臨界對(duì)照吸光度的平均值。
1.2.3 陽(yáng)性感染率計(jì)算
表1 60份犬糞樣ELISA檢測(cè)結(jié)果
2.1 質(zhì)量控制及結(jié)果判定
由表1可以看出,陽(yáng)性對(duì)照G1的吸光值為1.003,大于0.3;3個(gè)臨界對(duì)照G3、G4、G5的值分別為0.252、0.256和0.258,平均值為0.255,大于0.15;且陰性對(duì)照G2的值為0.103,小于臨界平均值0.255,說(shuō)明本次檢測(cè)有效,數(shù)據(jù)可信。
由表1可見(jiàn),B3、B8、D11、E3和E5的值分別為0.864、0.840、0.315、1.376和0.266,均大于臨界值平均值0.255,因此判定為陽(yáng)性。
2.2 陽(yáng)性感染率計(jì)算
根據(jù)上述判定結(jié)果,陽(yáng)性樣品數(shù)為5份,陰性樣品數(shù)為55份,檢測(cè)樣品總數(shù)為60份。經(jīng)陽(yáng)性感染率公式計(jì)算,此次檢測(cè)的60份犬糞樣中細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染陽(yáng)性率為8.33%。
包蟲(chóng)病為世界流行性疾病,截至目前已在澳大利亞、中亞、中東、拉丁美洲、非洲和南歐部分國(guó)家發(fā)現(xiàn)均存在該病的發(fā)生。我國(guó)是該病的高發(fā)區(qū),已在21個(gè)?。ㄊ校┳灾螀^(qū)發(fā)現(xiàn)該病,尤其是處于西北部的青海、西藏、甘肅、新疆、四川、內(nèi)蒙古、寧夏等畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的省份該病的流行更為嚴(yán)重。有研究表明,在該病的高發(fā)地區(qū),每10萬(wàn)人中就有超過(guò)50人感染此病,并且在某些高發(fā)地區(qū),可造成高達(dá)5%~10%的死亡率。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,我國(guó)至少有100萬(wàn)的包蟲(chóng)病患者,同時(shí)受包蟲(chóng)病威脅人口可達(dá)幾千萬(wàn)之多,而每年由于包蟲(chóng)病感染動(dòng)物使我國(guó)畜產(chǎn)品的直接經(jīng)濟(jì)損失達(dá)到30億元以上,這直接影響了當(dāng)?shù)鼐用竦纳眢w健康和畜牧業(yè)的健康發(fā)展。
犬作為細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的終末宿主,是有效防控該病的主要環(huán)節(jié),因此,對(duì)犬感染情況的調(diào)查就顯得尤為重要。近年來(lái),有學(xué)者開(kāi)展了新疆部分地區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情況的調(diào)查工作。如:2014年,韓菲等[4]采用分層隨機(jī)抽樣法對(duì)采自兵團(tuán)13個(gè)包蟲(chóng)病流行師共計(jì)5391份犬糞樣進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果表明犬的感染率為0.69%;2013年,江宇等[5]對(duì)新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)昭蘇墾區(qū)第四師七十六團(tuán)和七十七團(tuán)飼養(yǎng)的家犬進(jìn)行包蟲(chóng)病調(diào)查,結(jié)果表明,2個(gè)團(tuán)場(chǎng)分別飼養(yǎng)犬1004條和620條,犬感染細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染率為9.76%(98/1004)和15.98%(81/507);2011—2013年度,馬增光等[2]對(duì)新疆察布查爾錫伯自治縣240只犬感染細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的情況做了3年的跟蹤調(diào)查,結(jié)果顯示,該地區(qū)240只犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的感染率3年來(lái)在4%以上;2007—2010年度,祖力胡馬力·尼拉木丁等[3]采用氫溴檳榔堿集中測(cè)試瀉下法,分別對(duì)阿勒泰地區(qū)、塔城地區(qū)、哈密地區(qū)、吐魯番地區(qū)、伊犁州、博州、巴州、阿克蘇地區(qū)、喀什地區(qū)、克州、和田地區(qū)、昌吉州、烏魯木齊市、克拉瑪依市14個(gè)地區(qū)(州)共計(jì)633只犬進(jìn)行了細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情況的調(diào)查,結(jié)果顯示,總的感染陽(yáng)性率為28%,感染強(qiáng)度最高可達(dá)65條之多。由以上數(shù)據(jù)可以看出,總體來(lái)說(shuō),新疆地區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的感染率較前幾年有所下降,但部分地區(qū)依然存在高感染率的現(xiàn)象,應(yīng)引起獸醫(yī)工作人員的重視。
2013—2014年間,在石河子地區(qū)總共采集農(nóng)牧區(qū)家犬糞樣60份,經(jīng)檢測(cè)陽(yáng)性樣品為3份,陽(yáng)性率為8.33%。犬科動(dòng)物作為包蟲(chóng)病的終末宿主,是整個(gè)傳播鏈中重要環(huán)節(jié)。雖然石河子地區(qū)開(kāi)展包蟲(chóng)病的防治工作已有數(shù)年時(shí)間,但通過(guò)此次調(diào)查,發(fā)現(xiàn)犬依然存在細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染的情況,且呈現(xiàn)出散發(fā)特點(diǎn);存在再次污染周邊環(huán)境,進(jìn)而再次感染周邊牛羊以及人類的風(fēng)險(xiǎn)。因此,根據(jù)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的生活史以及該病的流行特點(diǎn),建議在石河子地區(qū)包蟲(chóng)病的防治中應(yīng)采取以下措施:(1)加強(qiáng)包蟲(chóng)病科普知識(shí)宣傳教育工作,從根本上提升廣大農(nóng)牧民群眾對(duì)包蟲(chóng)病危害性的深刻認(rèn)識(shí),使農(nóng)牧民意識(shí)到防治該病的重要性。(2)繼續(xù)實(shí)行對(duì)牛、羊等家畜集中屠宰管理,加強(qiáng)衛(wèi)生檢疫。對(duì)檢疫過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的帶有棘球蚴的動(dòng)物內(nèi)臟應(yīng)進(jìn)行無(wú)害化處理。嚴(yán)禁隨意拋棄,尤其嚴(yán)禁喂狗,從而減少犬的感染機(jī)率。(3)加強(qiáng)犬的管理,逐步施行家/牧犬登記管理制度,同時(shí)開(kāi)展家犬拴養(yǎng),野犬捕殺等措施。并堅(jiān)持實(shí)施以“犬犬投藥,月月驅(qū)蟲(chóng)”為中心的包蟲(chóng)病預(yù)防控制措施,達(dá)到有效防控并最終根除該病的目的。
[1]葛平.家畜包蟲(chóng)病病原流行病學(xué)及其防治[M].北京:人民出版社,1985:2-4.
[2]馬增光,張壯志,張旭,等.新疆察布查爾縣家畜和犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情況調(diào)查[J].疾病預(yù)防控制通報(bào),2013(6):16-17. [3]祖力胡馬力·尼拉木丁,努斯來(lái)提,馬力克.新疆家犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染調(diào)查[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2012,48(3):49.
[4]韓菲,王炳權(quán),王立杰,等.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)家犬和家畜細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情況調(diào)查[J].中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志,2014,32(3):245-246.
[5]江宇,張壯志,黃建林,等.新疆兵團(tuán)昭蘇墾區(qū)家畜包蟲(chóng)病防控情況調(diào)查[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2013,34(2):134-136.
2015—04—13
*通訊作者:王正榮,男,助理研究員,主要研究方向?yàn)榧纳x(chóng)分子生物學(xué)。E-mail:wzrtiger@sina.com。