金蕎麥花茶開發(fā)的初步探討

黃明健，湯洪敏，2，*

（1.貴州民族大學(xué)化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽 550025；2.貴州民族大學(xué)貴州民族醫(yī)藥研究院，貴州貴陽 550025）

金蕎麥花茶開發(fā)的初步探討

黃明健1，湯洪敏1，2，*

（1.貴州民族大學(xué)化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽 550025；2.貴州民族大學(xué)貴州民族醫(yī)藥研究院，貴州貴陽 550025）

摘 要：探討金蕎麥花茶的開發(fā)工藝。以單因素試驗和正交試驗設(shè)計方法尋找金蕎麥花茶的最優(yōu)浸泡條件，以紫外分光光度法測定金蕎麥中總黃酮的含量。金蕎麥花茶以液料比1∶50，90℃浸泡3次，每次30 min，為最佳浸泡工藝。

關(guān)鍵詞：金蕎麥；花茶；總黃酮

金蕎麥Fagopyrum dibotrys（D.Don）Hara在植物分類上屬于蓼科（Polygonaceae）蕎麥屬（Fagopyrum Mill）植物，功效清熱解毒、排膿祛瘀，用于治療肺癰吐膿、肺熱喘咳、乳蛾腫痛[1]。俗稱野蕎麥，為多年生草本，原產(chǎn)于西北、東北、華北、西南一代的高寒地區(qū)，資源十分豐富，現(xiàn)廣泛分布于我國南方大部分省區(qū)，是一種營養(yǎng)豐富并具有重要藥用價值資源的植物。金蕎麥中含有豐富的生物活性成分黃酮類化合物，其主要成分有蘆丁，槲皮素，山奈酚，桑色素，表兒茶素，原矢車菊素等[2]?，F(xiàn)代藥理研究表明，蕎麥屬植物具有抗腫瘤、抗菌、解熱鎮(zhèn)痛抗炎、鎮(zhèn)咳祛痰、抗血小板聚集、調(diào)脂降糖、抗氧化、抗突變、抗衰老等多種生物活性[3]，對癌癥[4-5]、糖尿病、高脂血癥、風(fēng)濕類氣管炎、肺炎、外感發(fā)熱、咽喉腫痛、咳嗽、皮膚化膿性感染、細(xì)菌性痢疾、消化性潰瘍等疾病均有較好的療效[6-7]。但在傳統(tǒng)的應(yīng)用中，金蕎麥的藥材基源為其根部，其他的部位沒有得到充分的利用，造成資源的浪費。本研究以金蕎麥的花為原料，探討金蕎麥花中總黃酮含量，以及各種浸泡工藝對金蕎麥花中總黃酮溶出率的影響，以期為金蕎麥花茶的開發(fā)利用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑和儀器

1.1.1材料

金蕎麥花，采自貴州民族大學(xué)化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院藥用植物園，去除雜質(zhì)后，一份放入烘箱60℃烘干至恒重，放入干燥器備用；另一份自然陰干備用。

1.1.2 試劑

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品購自貴州迪大科技有限公司，純度為98%，無水乙醇，氫氧化鈉，硝酸鋁，亞硝酸鈉均為分析純。

1.1.3 儀器

上海舜宇恒平756pc紫外-可見光分光光度計、臺灣艾柯DZG-303A超純水機(jī)、北京科偉101-1型電熱鼓風(fēng)干燥箱。

1.2 總黃酮含量的測定與計算

將蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品在120℃下減壓干燥至恒重，準(zhǔn)確稱取24 mg蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，用60%乙醇定容至100 mL，獲得0.2 mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取0.00、0.25、0.5、1.00、1.50、2.00、3.00、4.00 mL 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液至10 mL容量瓶中，用60%乙醇補充至4.0 mL，振蕩搖勻，加入0.4 mL 5%亞硝酸鈉溶液搖勻后靜置6 min，加入10%硝酸鋁溶液0.4 mL，搖勻靜置6 min，再加入4%氫氧化鈉4mL，用60%乙醇定容至刻度，搖勻后靜置15 min，在紫外分光光度計上510 nm處測吸光度（A），以蘆丁質(zhì)量濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得回歸方程。

1.3 樣品的處理

準(zhǔn)確稱取0.5 g干燥后的金蕎麥花放入錐形瓶，加入一定量沸水后，立即進(jìn)行水浴提取，經(jīng)減壓抽濾得到提取液，定容到100 mL容量瓶。

1.4 總黃酮含量的測定

準(zhǔn)確吸取0.5 mL提取液按1.2.1步驟操作，重復(fù)3次，記錄平均值，將所得吸光度值代入蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線，按以下公式計算：

式中：c為樣液的濃度，（mg/mL）；W為稱取樣重量，g；V為測定吸光度用樣液的體積，mL。

1.4.1 總黃酮提取的單因素實驗

以金蕎麥干花中總黃酮的提取率為評價指標(biāo)，選取浸泡次數(shù)、液料比、提取溫度、提取時間4個因素做單因素實驗。每個因素設(shè)定5個水平，以確定相關(guān)因素及各因素的合適范圍。

1.4.2 總黃酮提取的正交試驗

準(zhǔn)確稱取0.5 g金蕎麥樣品9份，分別選取浸泡次數(shù)、每次的液料比、提取溫度、每次的提取時間四個因素及其對應(yīng)的3個較優(yōu)水平，進(jìn)行L9（34）正交試驗，確定提取總黃酮的最佳工藝條件。

1.5 不同干燥方法的比較

為比較烘箱60℃干燥與自然陰干的干燥方法對總黃酮溶出率的影響，在保持原料質(zhì)量，液料比，水浴溫度，浸泡次數(shù)，提取時間相同的條件下，測定總黃酮溶出率，重復(fù)3次，取平均值，比較差異。

2 結(jié)果與分析

L9（34）因素水平表見表1。

表1 L9（34）因素水平表Table 1Factors and levels of L9（34）test

2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性方程

配置一系列蘆丁濃度梯度，在紫外分光光度計上510 nm 處測吸光度（A），以蘆丁質(zhì)量濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，A=12.039c-0.000 4，R2=0.999 4，見圖 1。

圖1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線圖Fig.1 Standard curve of rutin

2.2 單因素試驗

2.2.1 浸泡次數(shù)

選擇以水為溶劑，90℃水浴，液料比為1∶60，每次提取時間為20 min的條件下，比較浸泡次數(shù)對總黃酮溶出率的影響見圖2。

圖2 浸泡次數(shù)對金蕎麥花中總黃酮含量的影響Fig.2 Influence of extraction times on Fagopyrum content

如圖2所示，金蕎麥花總黃酮溶出率隨著浸泡次數(shù)的加大而加大，但是當(dāng)浸泡次數(shù)達(dá)3次時增加緩慢，且提取5次時含量反而降低，這可能是提取次數(shù)過多，導(dǎo)致時間過長，讓其遭到降解，導(dǎo)致得率降低。且過多的提取次數(shù)也容易導(dǎo)致雜質(zhì)的溶出升高，因此選擇提取為3次較為合適。

2.2.2 提取的溫度

選擇以水為溶劑，液料比為1∶60，每次提取時間為20 min，提取次數(shù)為3次的條件下，比較提取溫度對總黃酮溶出率的影響見圖3。

圖3 提取溫度對金蕎麥花中總黃酮含量的影響Fig.3 Influence of extraction temperature on Fagopyrum content

如圖3所示，金蕎麥花總黃酮含量隨提取溫度的升高而升高，由于溫度的升高有利于分子的運動，高溫使得黃酮溶出率上升?？梢钥闯鰷囟葘傸S酮的溶出率影響較大，選定70℃～90℃為提取溫度。

2.2.3 提取時間

選擇以水為溶劑，90℃水浴，液料比為1∶60，提取次數(shù)為3次的條件下，比較提取時間對總黃酮溶出率的影響見圖4。

圖4 提取時間對金蕎麥花中總黃酮含量的影響Fig.4 Influence of extraction time on Fagopyrum

如圖4所示，在提取時間40 min內(nèi)時，金蕎麥花總黃酮溶出率隨時間的增加而增加，到達(dá)30 min后逐漸平緩，到達(dá)40 min后反而下降，從提取效果和經(jīng)濟(jì)兩方面綜合考慮，將單次的提取時間定為10 min～30 min。

2.2.4 液料比

選擇以水為溶劑，90℃水浴，每次提取時間為20 min，提取次數(shù)為3次的條件下，比較液料比對總黃酮溶出率的影響見圖5。

圖5 液料比對金蕎麥花中總黃酮含量的影響Fig.5 Influence of soild-liquid ratio on Fagopyrum content

如圖5所示，適當(dāng)體積的溶劑有利于黃酮類物質(zhì)的溶出，液料比對金蕎麥花總黃酮含量影響不大，將液料比定為 1∶40～1∶60。

2.3 正交實驗結(jié)果

L9（34）正交試驗結(jié)果見表2。

分析K值可知，A3B3C3D2為最佳提取工藝。即試驗條件為：浸泡次數(shù)為3次，提取溫度為90℃，每次提取時間30 min，液料比為1∶50。在此條件下，進(jìn)行水浴提取，結(jié)果總黃酮得率為9.60%，高于正交試驗組的9.06%。

表2 L9（34）正交試驗結(jié)果Table 2 Results of the orthogonal test

2.4 不同干燥方法的比較

依據(jù)1.5和正交試驗結(jié)果，分別取0.5 g經(jīng)自然陰干的金蕎麥花和0.5 g經(jīng)60℃干燥的金蕎麥花，在浸泡次數(shù)為3次，提取溫度為90℃，每次提取時間30 min，液料比為1∶50的條件下，測定總黃酮溶出率。兩種干燥方法的總黃酮溶出率分別為7.32%和9.60%。由此說明，與自然陰干相比，烘箱干燥的方法有助于總黃酮的溶出。新鮮采摘的金蕎麥花最好可以用烘干方式進(jìn)行干燥處理，這樣既節(jié)約時間，又可以使金蕎麥花的外觀和品質(zhì)得到較大的保留。

2.5 方法學(xué)考查

2.5.1 精密度試驗

取蘆丁對照品溶液，在510 nm波長處重復(fù)測定6次，吸光度未發(fā)生變化，結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.5.2 穩(wěn)定性試驗

取樣品供試液，在510 nm波長處，在0～90 min內(nèi)間隔10 min測定一次吸光度，計算RSD為1.14%，結(jié)果表明，供試樣品在90 min內(nèi)穩(wěn)定。

2.5.3 重復(fù)性試驗

取樣品6份，精密稱定，按樣品供試液的制備方法處理，求得RSD為1.71%，表明該樣品的制備方法穩(wěn)定

2.5.4 回收率試驗

精密稱取樣品6份，每份0.5 g，精密加入蘆丁對照品適量，按樣品供試液的制備方法處理，計算平均回收率為99.83%，RSD為2.35%。

3 結(jié)論

在藥材的傳統(tǒng)應(yīng)用中，金蕎麥的藥材基源為其根部。而金蕎麥作為多年生宿根草本，其地上部分的生物產(chǎn)量也較為豐富。雖然現(xiàn)在對其籽粒的開發(fā)應(yīng)用也有部分文獻(xiàn)報道，但金蕎麥其他地上部位沒有得到充分的利用，造成資源的浪費。

本研究以金蕎麥花為研究對象，對栽培金蕎麥花的總黃酮含量進(jìn)行了測定，并利用L9（34）正交試驗，研究了金蕎麥花總黃酮溶出率的最佳條件，即：金蕎麥花與水的液料比為1∶40，浸泡次數(shù)為3次，提取溫度為90℃，每次提取時間30 min。在此條件下，對自然陰干的花同法操作，結(jié)果自然陰干組的金蕎麥花的總黃酮溶出率為7.32%，低于烘干組的金蕎麥。新鮮采摘的金蕎麥花最好可以用烘干方式進(jìn)行干燥處理，這樣既節(jié)約時間，又可以使金蕎麥花的外觀和品質(zhì)得到較大的保留。

在癌癥、糖尿病和高脂血癥等疾病發(fā)病率日趨升高的今下，食療已成為“治未病”最簡單可行的方法。本研究結(jié)果表明，金蕎麥花中含有豐富的黃酮類物質(zhì)，可將其開發(fā)成一種良好的保健飲品，通過人們?nèi)粘ｏ嬘?，實現(xiàn)保健功能。同時也可通過促進(jìn)傳統(tǒng)醫(yī)藥材進(jìn)入新資源食品目錄，開發(fā)傳統(tǒng)藥材與健康養(yǎng)生產(chǎn)業(yè)的融合發(fā)展，以期充分利用資源，提高金蕎麥的經(jīng)濟(jì)利用價值。

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[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].一部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:203

[2]盛華剛等.金蕎麥的化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展[J].西北藥學(xué)雜志,2011,26(2):156

[3]周潔云等.金蕎麥的藥理作用研究概況[J].湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2012,14(4):68-69

[4]陳占紅,李勇,王曉稼I.FR/MA抑制PG-HUVEC細(xì)胞黏附及黏附分子表達(dá)的研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2009,27(11):2374-2376

[5]姚榮成,吳友仁,楊崇仁．云南產(chǎn)金蕎麥根莖抗腫瘤有效部位的化學(xué)研究[J]．云南植物研究,1989,11(2):215-218

[6]王立波,邵萌,高慧媛,等.金蕎麥抗菌活性研究[J].中國微生態(tài)雜志,2005,17(5):330-331

[7]趙鋼,唐宇,王安虎.金蕎麥的營養(yǎng)成分分析及藥用價值研究[J].中國野生植物資源,2002,21(5):39-40

The Preliminary Study of Fagopyrum Dibotrys Scented Tea's Manufacture Crafts

HUANG Ming-jian1，TANG Hong-min1，2，*
（1.College of Chemistry and Environmental Science，Guizhou Minzu University，Guiyang 550025，Guizhou，China；2.Guizhou Institute of Ethnic Medicine，Guizhou Minzu University，Guiyang 550025 ，Guizhou，China）

Abstract：investigation ofFagopyrum dibotrys（D.Don）Harascented tea's exploit crafts method：designed both in single factor test and orthogonal test to optimize the manufacture crafts of Fagopyrum dibotrys scented tea，in the way of uv spectrophotometry to text the contents of total flavonoids result：Liquid to material ratio 1∶50，soak in 90 ℃ for three times，30 mins everytime was best extraction technology.

Key words：Fagopyrum cymosum；sented tea；total flavonoids

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.06.014

貴州省2014大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃（201410672009）

黃明?。?990—），男（漢），在讀本科，研究方向：中草藥開發(fā)。

湯洪敏，女，教授，博士，研究方向：種植資源保護(hù)。

2014-10-25