維生素D受體基因BsmⅠ、ApaⅠ和TaqⅠ位點(diǎn)多態(tài)性與中國(guó)男性骨密度相關(guān)性的Meta分析

韓金寶，王 龍，祖 源，李 超哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 兒外科，黑龍江哈爾濱 5000；北京朝陽(yáng)醫(yī)院 血液凈化科，北京0000

對(duì)雙生子研究發(fā)現(xiàn)，遺傳因素可能是男性骨量差異的原因之一[1]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)人類VDR基因上等位基因改變是影響骨量的重要遺傳因素[2]。VDR基因位于人類第12號(hào)染色體上，限制性內(nèi)切酶BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ及FokⅠ等酶切VDR基因產(chǎn)生不同的基因型。對(duì)于VDR基因的多態(tài)性與骨密度關(guān)系的研究結(jié)果存在爭(zhēng)論，這可能與不同種族，不同地區(qū)人群中VDR基因多態(tài)性的分布不一致有關(guān)，或還處在研究的初期，且大量研究及Meta分析主要涉及婦女。但隨著我國(guó)男性骨質(zhì)疏松發(fā)病率顯著上升，對(duì)于男性骨量的研究也備受關(guān)注。多位學(xué)者針對(duì)上述位點(diǎn)的VDR基因多態(tài)性與我國(guó)大陸多地區(qū)、香港及臺(tái)灣男性骨密度的關(guān)系進(jìn)行了探索研究，結(jié)果不一致，且缺乏對(duì)中國(guó)男性骨密度研究的Meta分析。本研究通過(guò)對(duì)已發(fā)表的VDR基因BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ位點(diǎn)多態(tài)性與中國(guó)大陸多地區(qū)、香港及臺(tái)灣男性骨密度相關(guān)性的研究進(jìn)行Meta分析。旨在對(duì)我國(guó)骨質(zhì)疏松的病因?qū)W和防治提供相關(guān)依據(jù)。

資料和方法

1 文獻(xiàn)檢索 通過(guò)Pubmed、Embase、Cochrane、中國(guó)知網(wǎng)、維普網(wǎng)醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)搜索引擎檢索1990-2014符合條件文獻(xiàn)。中文檢索詞：維生素基因受體或VDR，基因多態(tài)性或SNP，骨密度或BMD。英文檢索詞：vitamin D receptor或VDR，polymorphism或genotype或variant或allele，bone mineral density或BMD，Chinese或China。

2 納入標(biāo)準(zhǔn) 公開(kāi)發(fā)表的VDR基因BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ位點(diǎn)多態(tài)性與股骨頸、大轉(zhuǎn)子、Ward’s三角區(qū)骨密度相關(guān)性研究。文種限中英文，研究對(duì)象限中國(guó)大陸、香港以及臺(tái)灣地區(qū)，種族不限；基因型分布負(fù)荷按照Hard-Weinberg(H-W)遺傳平衡定律；對(duì)源于同一樣本數(shù)據(jù)重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)，納入樣本量最大的文獻(xiàn)；研究提供基因型數(shù)據(jù)以及雙能X線BMD測(cè)量法提供的骨密度值，單位g/cm2。排除標(biāo)準(zhǔn)：數(shù)據(jù)不全、不符合Hard-Weinberg (H-W)遺傳平衡定律、含繼發(fā)性骨質(zhì)疏松、患有影響骨代謝的疾病及長(zhǎng)期服用影響骨代謝藥物者的研究。

3 文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià) 根據(jù)STRGEA(Strengthening the reporting of Genetic Association studies)原則對(duì)納入的研究進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)[3]：樣本量是否充分，診斷標(biāo)準(zhǔn)交待是否清楚，分組配匹情況、基因型分布需符合Hardy-Weinberg(H-W)遺傳平衡定律，基因檢測(cè)方法是否合理，數(shù)據(jù)是否充分6項(xiàng)，每滿足1項(xiàng)為1分，總分3分為質(zhì)量可靠。

4 數(shù)據(jù)提取與統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 Meta分析應(yīng)用加權(quán)均數(shù)差WMD以及以95%置信區(qū)間(95% confidence interval，95% CI)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。選擇的遺傳模型：1)BsmⅠBb vs bb；2)ApaⅠAA vs aa；3)TaqⅠTT vs Tt(BB和tt基因型在中國(guó)人群中出現(xiàn)頻率非常低)。對(duì)大陸地區(qū)進(jìn)行亞組分析。采用Review Manager 5.1進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)所有文獻(xiàn)進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)。若I2≥50%時(shí)采用隨機(jī)效應(yīng)模型。本研究納入文章同質(zhì)性較好，采用固定效應(yīng)模型分析。

結(jié) 果

1 納入研究的基本特征 初篩獲得42篇英文文獻(xiàn)，69篇中文文獻(xiàn)，剔除重復(fù)發(fā)表、不符合納入標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)，最終納入8篇文獻(xiàn)[4-11]，中文6篇，英文2篇，質(zhì)量評(píng)價(jià)得分為4 ~ 6分。8篇文獻(xiàn)共納入1 934例中國(guó)成年男性。其中1項(xiàng)研究的3個(gè)維生素D受體基因位點(diǎn)中BsmⅠ基因分布不符合Hardy-Weinberg(H-W)遺傳平衡定律，剔除此項(xiàng)研究的BsmⅠ資料。納入文獻(xiàn)見(jiàn)表1。

2 Meta分析結(jié)果 6篇文獻(xiàn)報(bào)道了VDR BsmⅠ基因多態(tài)性與中國(guó)男性骨密度相關(guān)性的研究。因BB基因型我國(guó)分布極少，4項(xiàng)研究未發(fā)現(xiàn)BB基因型，所以選擇Bb vs bb基因模型比較。股骨頸、大轉(zhuǎn)子和Ward’s三角區(qū)的骨密度與兩種基因型差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖1、圖2、圖3)。考慮到地域差異，剔除中國(guó)香港和臺(tái)灣，分析發(fā)現(xiàn)中國(guó)大陸地區(qū)男性Bb基因型股骨頸骨密度較高，加權(quán)均數(shù)差WMD的95% CI為0.03[0.00,0.06](P=0.03)(圖4)。因此在中國(guó)大陸地區(qū)BsmⅠ基因多態(tài)性與骨密度可能存在一定的相關(guān)性。3篇文獻(xiàn)報(bào)道了VDR ApaⅠ基因多態(tài)性與中國(guó)男性骨密度相關(guān)性的研究，選擇AA vs Aa基因模型比較；3篇文獻(xiàn)報(bào)道了VDR TaqⅠ基因多態(tài)性與中國(guó)男性骨密度相關(guān)性的研究，選擇TT vs Tt基因模型比較；上述6篇文獻(xiàn)研究結(jié)果顯示股骨頸、大轉(zhuǎn)子和Ward’s三角區(qū)的骨密度與VDR ApaⅠ，TaqⅠ位點(diǎn)基因多態(tài)性無(wú)關(guān)(表2)。

討 論

隨著老齡化社會(huì)的到來(lái)，骨質(zhì)疏松癥已經(jīng)成為危害國(guó)人健康的重大公共衛(wèi)生問(wèn)題。其特征是骨量和骨密度的降低。許多內(nèi)分泌調(diào)節(jié)因子以及基因位點(diǎn)影響骨骼代謝，從而使人群骨量和骨密度存在差異。被人們熟知的包括雌激素受體，維生素D受體和亞甲基四氫葉酸還原酶。VDR基因在調(diào)解骨轉(zhuǎn)化以及平衡破骨和成骨方面發(fā)揮重要作用[12]。維生素D促進(jìn)腸和腎鈣重吸收以及骨礦化和重塑等生物學(xué)功能是通過(guò)VDR介導(dǎo)調(diào)節(jié)靶基因轉(zhuǎn)錄實(shí)現(xiàn)的。

Morrison等[13]首先報(bào)道了白種人群維生素D受體等位基因多態(tài)性與骨密度密切相關(guān)，VDR基因上等位基因改變是影響骨量的重要遺傳因素。隨后國(guó)內(nèi)外很多研究探討了在不同人群中VDR單核苷酸多態(tài)性與骨密度的關(guān)系，但遺憾的是還沒(méi)有確鑿的證據(jù)或一致性結(jié)論。Uitterlinden等[14]通過(guò)對(duì)歐洲9個(gè)中心26 242名受試者進(jìn)行研究，認(rèn)為VDR基因BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ及FokⅠ位點(diǎn)的基因多態(tài)性與骨密度以及骨折風(fēng)險(xiǎn)無(wú)相關(guān)性。Jia等[15]通過(guò)對(duì)14項(xiàng)研究含3 234名健康亞洲絕經(jīng)婦女VDR單核苷酸多態(tài)性與骨密度的關(guān)系進(jìn)行Meta分析，發(fā)現(xiàn)VDR基因FokⅠ位點(diǎn)多態(tài)性與亞洲絕經(jīng)婦女骨密度密切相關(guān)，相比FF基因型ff基因型受試者骨密度更低。Li等[16]對(duì)中國(guó)絕經(jīng)婦女VDR單核苷酸多態(tài)性與骨密度關(guān)系進(jìn)行Meta分析發(fā)現(xiàn)，BsmⅠ、ApaⅠ位點(diǎn)基因多態(tài)性與骨密度存在微弱的相關(guān)性。2010年Ji等[17]對(duì)高加索人VDR基因BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ及FokⅠ位點(diǎn)的基因多態(tài)性與骨折風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行Meta分析，發(fā)現(xiàn)BsmⅠ位點(diǎn)bb基因型骨折發(fā)生率低。而2015 Gao等[18]對(duì)高加索人VDR基因BsmⅠ位點(diǎn)基因多態(tài)性與骨折風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行Meta分析，結(jié)論是BsmⅠ位點(diǎn)基因多態(tài)性與發(fā)生骨折風(fēng)險(xiǎn)無(wú)相關(guān)性。

表1 納入研究的基本特征Tab. 1 Basic characteristics of all eligible studies

表2 ApaⅠ, TaqⅠ位點(diǎn)VDR基因多態(tài)性與中國(guó)男性股骨密度相關(guān)性Meta分析結(jié)果Tab.2 Results of meta-analysis of association of VDR gene ApaⅠ, TaqⅠ polymorphism with BMD in Chinese men

圖 1 BsmⅠ基因多態(tài)性與中國(guó)男性股骨頸骨密度相關(guān)性Meta分析Fig. 1 Meta-analysis of association between Bb and bb genotype of VDR gene BsmⅠpolymorphism and femoral neck BMD in Chinese men

圖 2 BsmⅠ基因多態(tài)性與中國(guó)男性大轉(zhuǎn)子骨密度相關(guān)性Meta分析Fig. 2 Meta-analysis of association between Bb and bb genotype of VDR gene BsmⅠpolymorphism and trochanter BMD in Chinese men

圖 3 BsmⅠ基因多態(tài)性與中國(guó)男性Ward’s三角區(qū)骨密度相關(guān)性Meta分析Fig. 3 Meta-analysis of association between Bb and bb genotype of VDR gene BsmⅠpolymorphism and Ward’s triangle BMD in Chinese men

圖 4 BsmⅠ基因多態(tài)性與中國(guó)大陸地區(qū)男性股骨頸骨密度相關(guān)性Meta分析Fig. 4 Meta-analysis of association between Bb and bb genotype of VDR gene BsmⅠpolymorphism and femoral neck BMD in mainland Chinese men

我們對(duì)中國(guó)多地區(qū)男性骨密度與VDR基因BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ位點(diǎn)的多態(tài)性關(guān)系進(jìn)行Meta分析，未發(fā)現(xiàn)它們存在相關(guān)性?？紤]到地域種族差異，剔除中國(guó)香港和臺(tái)灣。我們對(duì)大陸地區(qū)的中國(guó)男性進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)BsmⅠ位點(diǎn)基因多態(tài)性與股骨頸骨密度相關(guān)，95% CI：0.03[0.00，0.06](P=0.03)。Bb基因型研究對(duì)象股骨頸骨密度相對(duì)高。

本研究的局限性在于納入的研究數(shù)量有限，部分研究樣本量不夠大，可能影響統(tǒng)計(jì)學(xué)效能；年齡不同鈣離子攝入水平不同，生活及飲食條件不同等因素都可能在一定程度上影響合并分析的一致性。在對(duì)VDR基因多態(tài)性進(jìn)行研究的同時(shí)，除考慮遺傳因素外還應(yīng)考慮非遺傳因素，如環(huán)境職業(yè)因素等。本Meta研究?jī)?yōu)勢(shì)在于所納入研究對(duì)象均為中國(guó)大陸、香港以及臺(tái)灣地區(qū)男性，對(duì)于指導(dǎo)我國(guó)骨質(zhì)疏松的病因?qū)W和防治提供更有利的依據(jù)。

目前的證據(jù)表明，VDR基因BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ位點(diǎn)的多態(tài)性與中國(guó)多地區(qū)男性骨密度無(wú)明顯相關(guān)性。剔除中國(guó)香港、臺(tái)灣，分析中國(guó)大陸地區(qū)男性股骨頸骨密度與VDR基因BsmⅠ位點(diǎn)多態(tài)性有微弱的相關(guān)性，Bb基因型骨密度高，但證據(jù)尚不充分。由于本Meta分析納入的研究數(shù)量有限，尚需開(kāi)展更多大規(guī)模、高質(zhì)量的關(guān)于VDR基因多態(tài)性與骨密度關(guān)系的研究。

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