發(fā)熱模型的研究進展

李欣芮 宋惠欣

關鍵詞：發(fā)熱；動物模型；綜述中圖分類號：R254

文獻標志碼：A

文章編號：1007-2349（2015）04-0077-03發(fā)熱大多是由于致熱岡子作用于機體，使得內(nèi)熱原得以產(chǎn)生并釋放，使體溫在一定程度上升高。近年來，建立動物的發(fā)熱模型為解熱藥物的研究提供了非常重要的根據(jù)。到目前為止，常用的致熱原有：LPS，2，4-二硝基酚，干酵母等。近年來有關學者又研究出了腦膜炎奈瑟菌致發(fā)熱模型和新西蘭兔金黃色葡萄球菌感染性發(fā)熱模型。本文將從化學藥品造模法、生物制劑造模法和其它造模法三方面對前人研究的發(fā)熱模型綜述如下。1 化學藥品造模法1.1 2，4-二硝基酚（DNP）導致的發(fā)熱模型 DNP可以刺激細胞氧化過程，使氧化的過程受到刺激所增加的能量不能夠通過磷酰化轉變成ATP或磷酸肌酸，而以熱能散發(fā)，從而引起發(fā)熱I。陳敬然等[2]以160 mg/kg的劑量給大鼠ihDNP溶液，若大鼠溫度升高0.6℃以上，則說明造模成功。張發(fā)艷等[3]在大鼠背部 ih DNP生理鹽水混合溶液制造實熱證大鼠發(fā)熱模型、、劉亞歐等[4]于大鼠頸背部ih 2，4--二硝基苯酚（12.5mg/kg）以復制大鼠發(fā)熱模型。1.2角叉菜膠（卡拉膠）導致的發(fā)熱模型較大劑量的ih角義菜膠會引起一個持續(xù)的炎癥反應，激活巨噬細胞，從而引起發(fā)熱。王之梅等[5]用1%的卡拉膠混懸液0.1 mL給ih大鼠，制造出了發(fā)熱模型。劉亞歐等[4]于大鼠頸背部ih 20%干酵世混懸液（ 10mL/kg）以復制大鼠發(fā)熱模型。1.3

甲狀腺片導致的發(fā)熱模型 甲狀腺激素是甲狀腺片的主要成分，甲狀腺激素增多，會使代謝增強，產(chǎn)熱量增加，從而造成發(fā)熱。黃麗萍等611以0.6g/kg劑量的甲狀腺片，連續(xù)灌胃30 d制造出了動物發(fā)熱模型。廖梅香等[7]將甲狀腺片以0.5%的羧甲基纖維素鈉配制成所需濃度的混懸液，劑量為50mg/kg每日，連續(xù)給藥7d后，得到了需要的發(fā)熱動物模型。2 生物制劑造模法西醫(yī)學認為，發(fā)熱是某些致熱原侵入機體，溫度感受器接受體內(nèi)、外環(huán)境溫度的閩值上移，從而引起了產(chǎn)熱增加的同時散熱減少，導致發(fā)熱。因此，一些可以造成上述現(xiàn)象的生物制劑就可以用來制作動物發(fā)熱模型，發(fā)熱機理較清楚，成功率相對較高。2.1脂多糖（lipopolysaccharide.LPS）導致的發(fā)熱模型到目前為止，脂多糖（ lipopolysaccharide，LPS）動物發(fā)熱模型是實驗研究里最為常用的動物發(fā)熱模型。LPS為c-菌細胞壁的主要成分，內(nèi)毒素作用于巨噬細胞等，使之產(chǎn)生IL一l、IL-6和TNF -α，這些具有內(nèi)源性致熱原效應的細胞因子作用于下匠腦體溫調(diào)節(jié)中樞，引起機體發(fā)熱。張福利等[8]研究LPS導致發(fā)熱模型的劑量從10～250Lg/kg不等，發(fā)現(xiàn)20μg/kg的劑量為引起大鼠發(fā)熱的最佳劑量。江啟煜等[9]分別以15μg/kg和75μg/kg劑量給SD大鼠ip濃度為25pg/mL的內(nèi)毒素生理鹽水溶液制作發(fā)熱模型。金龍等[10]將家兔灌胃給藥（或靜脈注射），l天1次，連續(xù)3天，末次給藥后th，將家兔iv人腸桿菌內(nèi)毒素250n～（mL·kg）建立發(fā)熱模型，陳婷等[11]將家兔經(jīng)耳緣ivLPSl.5μg/Kg（攻毒）建立發(fā)熱模型。2.2疫苗引起發(fā)熱模型疫苗是減毒或滅活的細菌或病毒，當它進入動物體內(nèi)時會攻擊免疫系統(tǒng)，迫使免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體，從而能夠預防相應的細菌或病毒再次侵入動物體時造成的損害。因此，接種疫苗后，動物體的免疫系統(tǒng)被攻擊.就會出現(xiàn)暫時的發(fā)熱等不適現(xiàn)象。張恩戶等[12]取健康的新西蘭兔，iv劑量為0.5mL/kg傷寒、副傷寒三聯(lián)疫苗制作兔發(fā)熱模型。胡春萍等[13]將家兔經(jīng)iv過期三聯(lián)疫苗-NS.稀釋液，造成發(fā)熱模型。趙嬌等[14]按0.5～2.0mL/kg給家兔靜注，注入l-2h后，可見直腸溫度上升1.0～1.5℃，持續(xù)3～4h。2.3細菌引起的發(fā)熱模型①巴氏桿菌馬健等[15]控制實驗室溫度為20qC左右，局部消毒兔頭枕部后用預冷的1 mL注射器連接5號針頭經(jīng)小腦延髓池穿刺抽取腦脊液0.4mL，48h后，按1 mL多殺性巴氏桿菌菌液（含3千個活菌）/kg進行頸根部皮下注射來制作家兔發(fā)熱模型。②肺炎球菌周育平等[16]將實驗家兔將肺炎球菌菌液以1.5mL/Kg的劑量經(jīng)家兔耳緣靜脈注入，制作家兔發(fā)熱模型。③腦膜炎奈瑟菌加曼·沙俄等[17]采用小腦延髓池法固定家兔，模型組家兔每只經(jīng)小腦延髓池注射3×l08 cfu/mL的腦膜炎奈瑟菌溶液，注射完畢開始測體溫、觀察家兔癥候表現(xiàn)，此期間家兔處于自南飲水、進食狀態(tài)。④金黃色葡萄球菌李妤蓉等[18]將凝固酶陽性金黃色葡萄球菌經(jīng)增菌、鑒定、再增菌等程序，最后獲得血清肉湯菌液。實驗前將實驗兔背部皮內(nèi)注射6×107個金黃色葡萄球菌活菌液。⑤注射腐敗干草浸劑趙嬌等[14]將干草浸入適量水中，放在見陽處3—4周，將腐敗浸液過濾煮沸，蒸發(fā)，得到濾液。給家兔靜注，可在1h內(nèi)引起發(fā)熱，持續(xù)8～10 h。⑥大腸埃希菌菌液趙嬌等[14]用生理鹽水配制成0.5 mL溶液中含l06～ 107個細菌濃度的大腸埃希菌菌液，通過給大鼠靜脈注射的方法制造發(fā)熱模型。2.4干酵母導致的發(fā)熱模型用酵母混懸液ih大鼠（或家兔），先引起動物體溫下降。一段時間后動物體溫明顯升高，并持續(xù)較長時間，局部有明顯炎癥反應，與臨床伴內(nèi)臟或皮膚有明顯急性炎癥的里熱證類似，故可用此作為發(fā)熱動物模型以研究藥物的解熱效果。賈德武等[19]將大白鼠從背部ihl0%的鮮啤酒酵母混懸液3 mL/kg制成發(fā)熱模型。趙嬌等[14]用0. 5%羧甲基纖維素鈉分別制成10、5、1、0.2%啤酒酵母混懸液，給大鼠按10 mL/kg的劑量背部皮下注射。6h后體溫升高1.2～2.2℃。2.5病毒病毒致熱成分是病毒體和其所含的血細胞凝集素。黃厚才[23]將日本大耳白兔接種仙臺病毒后體溫漸生，至8h（注射N.S6h），體溫高達（40.79±0.40）℃，與造模前比較，體溫有非常顯著差異。（P<0.01）。蔡定芳等[24]將西德純種成年白毛兔ipl50兔出血熱病毒（RHFV）1mL制作兔發(fā)熱模型。3其它造模法除上述造模方法外，還有物理造模法、中藥造模法、食品提取物造模法等。3.1 物理造模法楊志仙等[22]直接利用熱水浴使大鼠高熱驚厥，隔日誘導驚厥1次，共誘導10次。魏偉等[23]直接刺激下丘腦的體溫調(diào)節(jié)中樞，從而引起體溫升高。3.2中藥造模法 賀庭楨等[24]將附子、干姜、肉桂按1：1：1的比例或者將附子、干姜按1：1比例配成中藥處方制成l00%水煎劑給大鼠灌服復制大鼠熱證模型。3.3牛奶、脫脂牛奶導致的發(fā)熱模型 陳洪等[25]把實驗豬分為不同劑量試驗組、不同品種試驗組以及不同日齡和不同體重試驗組，攻毒劑量分別為：低劑量組每1kg體重注射lmL，中劑量組每1kg體重注射2mL，高劑量組每1kg體重注射3mL。試驗豬均經(jīng)下腹部ih脫脂消毒牛奶，使豬體溫升高。3.4蛋白胨導致的發(fā)熱模型劉永錄等[26]通過兔iml0%蛋白胨制作家兔發(fā)熱模型。3.5其它發(fā)熱模型筆者查閱相關文獻發(fā)現(xiàn)，相關研究人員用寒、熱交替法復制出了大、小鼠發(fā)熱模型。4結語到目前為止，大多數(shù)醫(yī)療用發(fā)熱模型以化學或生物致熱原為致病因子，向動物體內(nèi)注入脂多糖（ LPS）、干酵母、2，4-二硝基酚等制作發(fā)熱模型。上述模型是適應西醫(yī)學角度的研究方法和應用單純西藥的藥物試驗，具有方便.耗費時間短、成功率高、對實驗條件要求也比較低等優(yōu)點。雖然上述經(jīng)典發(fā)熱模型與中醫(yī)外感傷寒發(fā)熱病癥有一定程度的契合，但無法完全模擬中醫(yī)理論中感受外邪的模型，所以真正符合中醫(yī)理論的傷寒發(fā)熱模型少之又少，隨著中醫(yī)藥發(fā)展的科學化，構建符合中醫(yī)理論的傷寒發(fā)熱模型迫在眉睫。在今后的實驗過程中，尋找和中醫(yī)學基礎理論相結合，符合中醫(yī)熱證的辯證特點的發(fā)熱模型是總體趨勢?？梢远嗫紤]物理法構建發(fā)熱模型，這種方法構建的發(fā)熱模型將會具有較強的實用性、適用性和可行性，同時具有深遠的社會效益和潛在的經(jīng)濟價值。參考文獻：[1]唐曉峰，薛漫清，王暉，大鼠發(fā)熱機制的研究進展[J].廣東藥學院學報，2009，03：327-331.[2]陳敬然，孫紅梅，尹曉飛，等.牛黃解毒滴丸解熱鎮(zhèn)痛和抗炎作用實驗J.中國藥師2010 13 9 1257-1259[3]張發(fā)艷.大黃、黃連及其提取物對實熱證模型大鼠肝基岡表達譜的影響[D].山東中醫(yī)藥大學，2012.[4]劉亞歐，黃利，李利民芩術顆粒對發(fā)熱和疼痛模型鼠的解熱鎮(zhèn)痛作用[J].中國藥房，2014，23：2134-2136.[5]王之梅，萬鵬，黃崇剛，等.止嗽退熱合劑主要藥理作用研究[J].中國中醫(yī)急癥，2011，20（7）：1099-1100.[6]黃麗萍，彭淑紅，蒙曉芳，胡強，陳凱峰，余日躍，劉紅寧，孫建寧熱證大鼠脂肪代謝及解耦聯(lián)蛋白1 mRNA表達的相關研究[J].遼寧中醫(yī)雜志，2010，03：541-543.[7]廖梅香，李銀保，朱衛(wèi)豐，等熱證大鼠模型肝臟組織中腺苷酸含量的測定[J].湖北農(nóng)業(yè)科學，2010，04：954-955.[8]張福利，許宏連，馬艷春，等脂多糖對寒體、熱體、常體大鼠攻毒發(fā)熱后體溫曲線、一氧化氮的影響[J].中醫(yī)藥學報，2007，35（1）：17-19.[9]江啟煜，黃文恒，柴銀口服液對大鼠內(nèi)毒素誘導發(fā)熱模型的 影響[J].貴陽中醫(yī)學院學報，2010，03：71-73.[10]金龍，李軍梅，洪曉華，等.中藥方劑對實驗性發(fā)熱模型動物體溫的影響[J]中國中西醫(yī)結合雜志，2004，Sl：236-239[11]陳婷，任秋生，楊愛東，等、山藥替代白虎湯中粳米干預發(fā)熱模型的比較研究[J].中國醫(yī)學工程，2014，08：158 +160.[12]張恩戶，趙勤，侯建平，等.補中益氣湯對家兔脾虛發(fā)熱模型體溫、腦脊液PCE_2和PO/AH區(qū)組織cAMP含量的影響[J].中醫(yī)藥學刊，2003，09：1529 - 1552.[13]胡春萍，蔣加進，石磊，等，牦牛角等6種角類藥超細粉對發(fā)熱家兔的影響[J].醫(yī)學動物制，2006，04：235-238.[14]趙嬌.白虎湯中石膏清熱作用的成分研究[D].黑龍江中醫(yī)藥大學.2012.[15]馬健，樊巧玲，周群，蔡定芳.截營湯對細菌性高熱模型家兔發(fā)熱影響的實驗研究[J].中國中醫(yī)藥科技，1995，06：28-29[16]周育平，李春生，肺炎雙球菌復制家兔溫病發(fā)熱模型的研究[J].北京中醫(yī)，2007，08：536-538.[17]加曼·沙俄，額爾敦朝魯，紀月嶺.腦膜炎奈瑟菌致蒙醫(yī)未成熟熱、成熟熱期發(fā)熱模型建立研究[J].內(nèi)蒙古民族大學學報（自然科學版），2014，03：323 - 325.[18]李妤蓉，劉文利，王麗霞，等，新西蘭兔金黃色葡萄球菌感染性發(fā)熱模型的制備[J].醫(yī)學動物防制，2014.05：516-517.[19]賈德武，葉壽山抗感滴丸主要藥效學實驗研究[J].中醫(yī)藥臨床雜志，2007 ，04：351-353[20]黃厚才，家兔病毒性發(fā)熱模型的研制[J].江蘇藥學與臨床研究，1997，02：5-6[21]蔡定芳，鄔祥惠，沈白尹，等，病毒性發(fā)熱的家兔模型[J].中華傳染病雜志，1995，02：95-97[22]楊志仙，秦炯，周國平，等，發(fā)育期大鼠高熱驚厥腦損傷模型的建立[J].北京大學學報：醫(yī)學版，2002，34（3）：225 -228[23]魏偉，吳希美，李元建.藥理實驗方法學（第4版）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：769-770.[24]賀庭楨.熱結腸道型氣分證大鼠模型的構建及腸道黏膜免疫病理評價研究[D].西南大學，2014.[25]陳洪，唐廷崇，盛蘭弟，等，建立實驗室豬發(fā)熱模型[J].中國獸藥雜志，2005，11：20 - 22.[26]劉永錄，湯法銀，李艷玲，獸用中藥制劑溫毒清浸膏的解熱作用研究[J].中獸醫(yī)學雜志，2011，02：7-8.（收稿日期：2015-01-12）