復方腫節(jié)風顆粒及其單方對高尿酸血癥小鼠的影響

彭健波 聶海英 李錦輝 李海蘇 蘇敏 楊善忠 劉磊 何家康

摘要：通過腹腔注射化學誘導劑氧嗪酸鉀建造小鼠急性高尿酸血癥模型， 研究復方腫節(jié)風顆粒及其單方對高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平的影響。結果表明，與空白對照組比較，陽性對照組小鼠血清尿酸值極顯著升高（P<0.01），表明用氧嗪酸鉀造模成功；與陽性對照組相比，復方腫節(jié)風顆粒組小鼠血清尿酸值極顯著降低（P<0.01），單方腫節(jié)風顆粒組顯著降低（P<0.05），單方射干顆粒和單方甘草顆粒降尿酸作用不明顯；復方腫節(jié)風顆粒和單方腫節(jié)風顆粒肝臟勻漿中黃嘌呤氧化酶（XOD）活性與模型組相比差異極顯著（P<0.01），而射干、甘草顆粒差異不顯著。復方腫節(jié)風顆粒降尿酸作用主要來自方中腫節(jié)風，其降尿酸機理與抑制XOD有關。

關鍵詞：腫節(jié)風；顆粒；復方；單方；高尿酸血癥

中圖分類號：R965 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）11-2683-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.11.033

Effects of Unilateral Zhongjiefeng and Compound Zhongjiefeng

Particles in Hyperuricemia Mice

PENG Jian-bo1，NIE Hai-yin1，LI Jin-hui1，2，LI Hai-su1，SU Min1，YANG Shan-zhong3，LIU Lei3，HE Jia-kang1

（1.College of Animal Science and Technology， Guangxi University， Nanning 530005， China； 2.Institute of Guangxi Wuzhou Animal Health Inspection， Wuzhou 543002， Guangxi， China；3. Guangxi BDX Animal Drugs Company LTD.， Nanning 530003， China）

Abstract： In this paper the effects of compound Zhongjiefeng particle and its single herbs on serum uric acid levels in oxonate-induced hyperuricemia mice were studied.The results showed that compared with the control group，the serum uric acid values in the mice of positive control group were significantly increased （P<0.01） which indicated the acute hyperuricemia model were successively constructed by oxonate. Compared with the positive control group，the serum uric acid levels in mice which treated compound Zhongjiefeng particles were extremely significantly lower （P<0.01）， and the treatment group with single zhongjiefeng particles were significantly lower （P<0.05），while the treatment group with single Shegan and licorice particles showed no significant difference. The xanthine oxidase（XOD） activity in liver homogenates of mice in treatment group with compound Zhongjiefeng particles and single Zhongjiefeng particles showed significant difference with the model control group （P<0.01），while the groups of single Shegan and licorice particles showed no significant difference.It indicated that the effect of uric acid reducing was mainly from Zhongjiefeng particles， and its mechanism of uric acid reducing related with the inhibition of XOD.

Key words： Zhongjiefeng； particles； compound preparations； single herb； Hyperuricemia

腫節(jié)風又名九節(jié)茶、草珊瑚，是金粟蘭科植物草珊瑚（Sarcandra glabra ThunbNakai）的干燥全草[1]，始載于《生草藥性備要》。其味辛、苦、性平，歸肝、大腸經(jīng)，具有清熱涼血，活血消斑，祛風通絡的功效[2]。以腫節(jié)風做為君/主藥的中藥復方制劑已有報道[3-5]，本課題組按中獸醫(yī)理論將腫節(jié)風、射干、甘草組方并制成復方制劑，前期研究發(fā)現(xiàn)該制劑具有良好的降尿酸作用[9]。為深入研究組方的合理性以及探討該制劑的降尿酸機理，進行了復方腫節(jié)風顆粒及其單方顆粒對急性高尿酸血癥小鼠的影響試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

SPF級昆明種小鼠72只，雄性，6周齡，體重（20±2） g，由廣西醫(yī)科大學實驗動物中心提供，分籠飼養(yǎng)，自由飲水和進食。

1.2 藥物與試劑

復方腫節(jié)風顆粒：廣西大學動物科學技術學院與廣西北斗星動物保健品有限公司聯(lián)合研制，廣西北斗星動物保健品有限公司中試生產(chǎn)（批號：20101201，規(guī)格：250 g/袋，1 g相當于原生藥1.6 g）。

腫節(jié)風顆粒（不含射干、甘草）、射干顆粒（不含腫節(jié)風、甘草）、甘草顆粒（不含腫節(jié)風、射干），各單方藥物的工藝與復方腫節(jié)風顆粒相同，廣西大學動物科學技術學院與廣西北斗星動物保健品有限公司聯(lián)合研制。

氧嗪酸鉀（批號：101240383），用0.8%羧甲基纖維素鈉配制成終濃度為30 mg/mL混懸液；尿酸（UA）檢測試劑盒、黃嘌呤氧化酶（XOD）檢測試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.3 主要儀器

微量離心機（SIGMA公司）、臺式低速離心機（湖南凱達科學儀器有限公司）、電熱恒溫水浴鍋（天津市泰斯特儀器有限公司）、旋渦混合器（林貝爾儀器制造公司）、紫外分光光度計（型號UA-1800，北京瑞利分析儀器公司）。

1.4 試驗方法

參照國內(nèi)外相關文獻[6-8]，選用氧嗪酸鉀為尿酸酶抑制劑，抑制小鼠體內(nèi)尿酸酶活性，增高其血清尿酸（UA）水平，人工復制小鼠急性高尿酸血癥模型。72只雄性昆明種小鼠隨機分成6組，每組12只。分別為復方腫節(jié)風顆粒組、單方腫節(jié)風顆粒組、單方射干顆粒組、單方甘草顆粒組、陽性對照組、空白對照組。陽性對照組和空白對照組每天上午空腹灌胃（ip）等量滅菌生理鹽水，其余藥物治療組分別灌胃不同藥物，連續(xù)用藥5 d，最后1次灌胃給藥前1 h，空白對照組腹腔注射（ig）滅菌生理鹽水，劑量為10 mL/kg；其余各組腹腔注射氧嗪酸鉀鹽混懸液，劑量為300 mg/kg。各組灌胃給藥1 h后小鼠眼球后靜脈叢采血，室溫條件下自然凝血，4 ℃靜置過夜，3 500 r/min離心10 min，分離血清，按照試劑盒說明測定小鼠血清UA值；取上清液按照試劑盒說明測定肝臟中XOD活性。試驗分組以及給藥方案見表1。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗結果以均值±標準差來表示，采用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件進行數(shù)據(jù)處理，采用單因素方差（ANOVA）分析。

2 結果與分析

2.1 復方腫節(jié)風顆及其單方對急性高尿酸血癥小鼠血清UA值的影響

復方腫節(jié)風顆粒及其單方對急性高尿酸血癥小鼠血清UA值的影響見表2。由表2可知，與空白對照組相比，陽性對照組血清UA值極顯著的升高（P<0.01），表明本試驗小人工復制急性高尿酸血癥模型建立成功；各給藥組小鼠血清UA值與陽性對照組比較，復方腫節(jié)風極顯著降低（P<0.01），單方腫節(jié)風顆粒組顯著降低（P<0.05），表明復方腫節(jié)風顆粒與單方腫節(jié)風顆粒均具有良好的降尿酸作用。而單方射干顆粒、單方甘草顆粒有降尿酸趨勢，但差異不顯著（P>0.05）。

2.2 復方腫節(jié)風顆粒及其單方對急性高尿酸血癥小鼠肝臟中XOD活性的影響

復方腫節(jié)風顆粒及其單方對急性高尿酸血癥小鼠肝臟XOD活性的影響見表3。由表3可知，各給藥組小鼠肝臟XOD活性與陽性對照組比較，復方腫節(jié)風顆粒和單方腫節(jié)風顆粒均具有極顯著的差異（P<0.01），而單方射干、單方甘草顆粒差異不顯著（P>0.05），表明復方腫節(jié)風顆粒、單方腫節(jié)風顆粒具有抑制肝臟XOD活性的作用，而單方射干和單方甘草顆粒的作用不明顯。

3 小結與討論

復方腫節(jié)風顆粒以腫節(jié)風、射干、甘草為主要原料。處方中重用腫節(jié)風，取其祛風通絡，活血化瘀、消腫散結之功作為方中的主藥。取射干降火化痰、消腫散結為輔藥，甘草調(diào)和諸藥，兼具有清熱化痰，緩急止痛之功，為使藥。三藥合用，共奏清化痰濁，活血通絡，消腫散結之功[9]。前期研究發(fā)現(xiàn)復方腫節(jié)風顆粒具有良好的降尿酸作用[9]，但是方中何種藥味起作用，有待考察。

本試驗通過對比、考察復方腫節(jié)風顆粒及單方對急性高尿酸血癥小鼠血清UA值，來證明方中起作用的藥味。結果顯示，復方腫節(jié)風顆粒和單方腫節(jié)風顆粒具有良好的降尿酸作用，而單方的甘草顆粒和射干顆粒具有降尿酸趨勢但作用并不明顯，表明復方顆粒中降尿酸的成分主要來自于腫節(jié)風。但本試驗也發(fā)現(xiàn)，復方腫節(jié)風顆粒與單方腫節(jié)風顆粒的降尿酸水平差異顯著（P<0.05），預示著除腫節(jié)風外其他成分也有降尿酸作用，或者是復方制劑的協(xié)同作用。

本試驗還考察了復方和單方顆粒對急性高尿酸血癥小鼠肝臟XOD活性的影響，以揭示藥物的降尿酸機理。結果表明，復方腫節(jié)風顆粒和單方腫節(jié)風顆粒均對XOD有抑制作用，表明腫節(jié)風降尿酸的主要機理是抑制黃嘌呤氧化酶的活性。而甘草顆粒和射干顆粒沒有顯示出抑制作用。但是在試驗中人們發(fā)現(xiàn)射干和甘草也有一定的降尿酸作用。有報道，甘草的復方制劑茯苓甘草湯[10]、茯苓桂枝甘草大棗湯[11]、麻黃-甘草藥對[12]有良好利尿作用。促進尿酸排泄是某些中藥的降尿酸機理，本研究甘草有一定的降尿酸作用，但它不是抑制XOD活性，很有可能是通過促進尿酸排泄而起作用。很多中藥制劑的降尿酸機理除了抑制XOD活性，還有促進尿酸排泄作用[13，14]，從而達到雙重降尿酸效果。通過本試驗結果，可以推測復方腫節(jié)風顆粒的主要降尿酸機理是抑制XOD活性，可能還有其他機理，如促時尿酸排泄。當然需要人們進一步深入研究。

本試驗在高尿酸血癥小鼠模型上探討了復方腫節(jié)風顆粒降尿酸的主要成分及其機理，表明方中主藥是腫節(jié)風，為中藥復方制劑的配伍提供了一定的理論依據(jù)。腫節(jié)風與射干、甘草配伍作用、配比及其降尿酸機制仍需要進一步探索。

參考文獻：

[1] 周 斌，劉可越，常 軍，等.中藥腫節(jié)風的化學成分和藥理作用研究進展[J].中國現(xiàn)代應用藥學雜志，2009，26（12）：982-983.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：中國科技出版社，2008.

[3] 王海華.HPLC法測定萬通炎康片中異嗪皮啶的含量[J].廣西中醫(yī)學院學報，2004，7（2）：55-56.

[4] 嚴喜鸞，肖義陂，張 寶.復方腫節(jié)風噴霧劑的制備及其質量標準研究[J].江西中醫(yī)學院學報，2006，18（1）：30.

[5] 王曉芝.復方腫節(jié)風顆粒劑藥效學實驗研究[J].中國醫(yī)療前沿，2007，2（10）：14-16.

[6] 劉文波.高尿酸血癥模型的建立及抗痛風中藥的篩選[D]. 濟南：山東大學，2008.

[7] IRIS H H，SCOVILLE J P， DAVIDE J，et al. Substituted cyclicim ides as potencial anti-gout agents[J]. Life Sciences，1990，46（26）：1923-1927.

[8] KONG L D. Aesculin possesses potent hypouricemic action in rodents but is devoid of xanthine oxidase dehydrogenase inhibitory activity[J]. Plants Medica，2002，68（2）：175.

[9] 鐘舒紅，何家康，胡庭俊，等.復方腫節(jié)風顆粒對小鼠急性高尿酸血癥的影響[J].湖北農(nóng)業(yè)科學，2014，53（4）：860-876.

[10] 王孝先，孫維敏，向志偉.茯苓甘草湯抑菌和利尿作用實驗觀察[J].新疆醫(yī)科大學學報，1999，22（4）：283-284.

[11] 孫維敏，王孝先，胡邦仁，等.茯苓桂枝甘草大棗湯利尿作用實驗觀察[J].新疆中醫(yī)藥，2003，21（1）：8-9.

[12] 趙 杰，徐文杰，方 芳，等.麻黃-甘草藥對的抗炎—利尿作用研究[J].中藥藥理與臨床，2012，28（3）：12-14.

[13] 蘇友新，賴 震，鄭良樸，等.痛風寧顆粒對雞痛風模型血清黃嘌呤氧化酶活性的影響[J].福建中醫(yī)藥，2006，37（2）：41-42.

[14] 胡耀中，胡慶華，王 星，等.二妙丸水提取物對高尿酸血癥小鼠尿酸失衡及其相關基因和蛋白水平的影響[J].中草藥，2010， 41（3）：418-423.