SOX2在結(jié)直腸癌表達(dá)的臨床觀察

付靜 郭彥科 劉潛

北京市海淀醫(yī)院（北京大學(xué)第三醫(yī)院海淀院區(qū)）病理科，北京100080

SOX2在結(jié)直腸癌表達(dá)的臨床觀察

付靜#郭彥科 劉潛

北京市海淀醫(yī)院（北京大學(xué)第三醫(yī)院海淀院區(qū)）病理科，北京100080

目的觀察SOX2在結(jié)直腸癌組織的表達(dá)情況，探討SOX2在結(jié)直腸癌中表達(dá)的臨床意義。方法收集103例有60～125個(gè)月（中位隨訪時(shí)間84個(gè)月）隨訪資料的結(jié)直腸癌及其相應(yīng)的正常結(jié)直腸黏膜標(biāo)本，應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)SOX2的表達(dá)，分析SOX2表達(dá)與臨床特征的關(guān)系。結(jié)果結(jié)直腸癌組織中SOX2蛋白的表達(dá)率顯著高于癌旁正常腸黏膜（P＜0.001）；SOX2表達(dá)與結(jié)直腸癌分化程度顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01），與結(jié)直腸癌TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移程度正相關(guān)（P＜0.05）。SOX2表達(dá)與結(jié)直腸癌患者術(shù)后5年生存率和3年無(wú)瘤生存率也具有相關(guān)性（P＜0.05）。結(jié)論SOX2蛋白異常表達(dá)可作為提示結(jié)直腸癌預(yù)后判斷的重要參考指標(biāo)。

SOX2；結(jié)直腸癌；臨床病理特征；預(yù)后

Oncol Prog,2015,13(4)

結(jié)直腸癌是全球常見(jiàn)的惡性腫瘤之一[1]。中國(guó)結(jié)直腸癌的發(fā)病率每年以4%的速度遞增，年均增長(zhǎng)速度高出世界平均水平近2%。2015年中國(guó)衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)資料顯示結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率位居第三[2]。SOX2是一種核轉(zhuǎn)錄因子，被看作是胚胎干細(xì)胞的標(biāo)記基因，存在于成人的許多正常組織中，如大腦、視網(wǎng)膜、舌、食管、肺和胃等。最近的研究表明，SOX2基因在許多惡性腫瘤中過(guò)表達(dá)，與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集北京市海淀醫(yī)院病理科2004年2月至2012年1月行結(jié)直腸癌根治術(shù)的212例患者并進(jìn)行隨訪，隨訪時(shí)間截至2015年1月，獲得131例患者的隨訪資料（隨訪率61.8%）。選取至2015年1月時(shí)已死亡和存活5年以上的患者共103例作為研究對(duì)象，其中男74例，女29例；手術(shù)時(shí)患者的年齡為24～95歲（平均年齡68歲，中位年齡71歲），手術(shù)時(shí)≤60歲者25例、＞60歲者78例。

全部病例重新閱片，并根據(jù)《美國(guó)癌癥研究聯(lián)合會(huì)癌癥分期手冊(cè)》（第7版）重新進(jìn)行TNM分期；根據(jù)WHO標(biāo)準(zhǔn)分為黏液性癌（包括黏液腺癌和印戒細(xì)胞癌）和非黏液性癌兩型，其中黏液性癌16例（包括11例黏液腺癌和5例印戒細(xì)胞癌），非黏液性癌87例。

所有病例均選取癌與癌旁正常黏膜交界處組織作為對(duì)照。

1.2 方法

1.2.1 隨訪 采用電話隨訪，記錄患者的生存情況及復(fù)發(fā)、死亡時(shí)間。隨訪時(shí)間36～125個(gè)月（中位隨訪時(shí)間82個(gè)月）。

1.2.2 免疫組織化學(xué)染色 免疫組織化學(xué)染色采用MaxVision二步法。SOX2兔抗人單克隆抗體（效價(jià)1∶50）、即用型免疫組化MaxVision TM檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)公司，按照試劑盒的操作說(shuō)明進(jìn)行免疫組化染色。以SOX2陽(yáng)性的肺鱗癌組織作為陽(yáng)性對(duì)照。

1.2.3 結(jié)果評(píng)價(jià) SOX2陽(yáng)性表達(dá)部位為細(xì)胞核，細(xì)胞質(zhì)及背景不著色。根據(jù)細(xì)胞核的陽(yáng)性強(qiáng)度和細(xì)胞陽(yáng)性率兩項(xiàng)評(píng)分之和進(jìn)行評(píng)價(jià)：①依據(jù)細(xì)胞核陽(yáng)性強(qiáng)度計(jì)分：細(xì)胞核無(wú)著色記0分，細(xì)胞核著淺棕色（弱陽(yáng)性）記1分，細(xì)胞核著棕色（陽(yáng)性）記2分，細(xì)胞核著棕褐色（強(qiáng)陽(yáng)性）記3分；②依據(jù)細(xì)胞陽(yáng)性率計(jì)分：每張切片鏡下隨機(jī)選擇5個(gè)高倍視野（×400），每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，以細(xì)胞陽(yáng)性率進(jìn)行計(jì)分。無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)0分，細(xì)胞陽(yáng)性率≤25%計(jì)1分，25%～50%計(jì)2分，≥50%計(jì)3分。③將上述兩項(xiàng)評(píng)分相加，結(jié)果≤2分者定為低表達(dá)，≥3分者定為高表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。各組SOX2陽(yáng)性表達(dá)水平之間差異采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，雙向有序數(shù)列的相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 隨訪結(jié)果

截至2015年1月，入組患者中仍存活者37例（隨訪時(shí)間60～125個(gè)月，中位隨訪時(shí)間84個(gè)月），死亡者66例（術(shù)后存活時(shí)間1～87個(gè)月，中位時(shí)間18.5個(gè)月）；術(shù)后生存時(shí)間≤5年者61例，術(shù)后生存時(shí)間＞5年者42例；有明確復(fù)發(fā)資料者87例：術(shù)后無(wú)瘤生存期者≤3年者41例，術(shù)后無(wú)瘤生存期＞3年者46例。

2.2 SOX2蛋白在結(jié)直腸癌和癌旁組織中的表達(dá)情況

SOX2蛋白在結(jié)直腸癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為39.81%（41/103），僅有1例癌旁正常腸黏膜有SOX2低表達(dá)，表達(dá)率為0.97%（1/103）。結(jié)直腸癌組織中SOX2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于癌旁正常黏膜，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=48.042，P＜0.001）（。圖1）

圖1 SOX2在結(jié)直腸癌組織和癌旁組織的表達(dá)情況

2.3 SOX2蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)與臨床特征的相關(guān)性

SOX2蛋白的表達(dá)水平與結(jié)直腸癌患者年齡及性別均無(wú)相關(guān)性（分別χ2=2.305，P=0.316；χ2= 0.666，P=0.717），與腫瘤分型無(wú)明顯相關(guān)性（χ2= 1.069，P=0.586）。

SOX2蛋白的表達(dá)水平與結(jié)直腸癌分化程度呈負(fù)相關(guān)（rs=－0.231，P=0.019），TNM分期呈正相關(guān)（rs=0.204，P=0.039），結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù)呈正相關(guān)（rs=0.275，P＜0.01），結(jié)直腸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移程度呈正相關(guān)（rs=0.263，P＜0.01）。（表1）

表1 SOX2蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)與臨床特征的相關(guān)性

2.4 SOX2蛋白表達(dá)與結(jié)直腸癌患者術(shù)后5年生存率和3年無(wú)瘤生存率的相關(guān)性

入組患者術(shù)后5年生存率為40.8%（42/103）。SOX2表達(dá)情況與結(jié)直腸癌術(shù)后5年生存率有相關(guān)性，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.872，P=0.032）。（表2）

表2 結(jié)直腸癌組織中SOX2蛋白表達(dá)情況與術(shù)后5年生存期的關(guān)系

87例有明確復(fù)發(fā)證據(jù)資料的病例中，術(shù)后3年無(wú)瘤生存率為52.9%（46/87）。SOX2表達(dá)情況與結(jié)直腸癌術(shù)后3年無(wú)瘤生存率有相關(guān)性，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.357，P=0.042）。（表3）

表3 結(jié)直腸癌組織中SOX2蛋白表達(dá)情況與術(shù)后3年生存期的關(guān)系

3 討論

SOX2是SOX家族重要成員之一，參與正常組織細(xì)胞增殖發(fā)育、分化和自我更新的調(diào)節(jié)過(guò)程。SOX2突變和表達(dá)異常與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及惡性轉(zhuǎn)化等生物學(xué)行為相關(guān)，在食管癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌、前列腺癌、肺癌等腫瘤組織中均被發(fā)現(xiàn)存在異常表達(dá)。Neumann等[3]和Tsukamoto等[4]檢測(cè)到結(jié)腸癌和胃癌中SOX2的表達(dá)有所增高；Rybak等[5]發(fā)現(xiàn)SOX2能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，并在表皮因子受體介導(dǎo)的前列腺癌干細(xì)胞生長(zhǎng)中起重要作用；Chen等[6]和牛艷清等[7]發(fā)現(xiàn)非小細(xì)胞肺癌組織中SOX2陽(yáng)性率明顯高于癌旁組織，SOX2在非小細(xì)胞肺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用，且隨著TNM分期的增加，其表達(dá)量也逐漸增加。陳尚忠等[8]和Park等[9]提出SOX2在結(jié)腸黏液腺癌及印戒細(xì)胞癌中呈高表達(dá)，且SOX2高表達(dá)患者的五年生存率小于SOX2低表達(dá)者。

本研究的結(jié)果顯示，SOX2蛋白主要在結(jié)直腸癌的癌組織中表達(dá)，而在癌旁正常黏膜組織中很少表達(dá)；結(jié)直腸癌中SOX2蛋白表達(dá)與腫瘤分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移程度具有相關(guān)性，而與患者性別、年齡、腫瘤分型無(wú)關(guān)，這與大多數(shù)研究的結(jié)果一致[8，10]。

由于黏液性結(jié)直腸癌具有更易發(fā)生腹膜轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)性更強(qiáng)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目更多、生存率低及預(yù)后差等特點(diǎn)[11]，本研究探究了SOX2蛋白在黏液性結(jié)直腸癌中的表達(dá)情況。本研究并未顯示出SOX2在黏液性結(jié)直腸癌和非黏液性結(jié)直腸癌中存在表達(dá)差異，這與Raghoebir等[10]的結(jié)論一致，與陳尚忠等[8]和Park等[9]的結(jié)論不符。入組病例中5例印戒細(xì)胞癌均呈SOX2高表達(dá)，而11例中至高分化黏液腺癌中只有3例有SOX2表達(dá)，且其中2例為SOX2低表達(dá)；本研究的結(jié)果顯示SOX2在大腸印戒細(xì)胞癌和黏液腺癌中表達(dá)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），雖然入組的黏液性結(jié)直腸癌病例較少，但可以推測(cè)SOX2在低分化的結(jié)直腸印戒細(xì)胞癌中的表達(dá)水平高于中至高分化的結(jié)直腸癌黏液腺癌，這也驗(yàn)證了SOX2異常表達(dá)與結(jié)直腸癌分化程度相關(guān)，而與其分型不相關(guān)。入組患者的隨訪結(jié)果顯示，SOX2表達(dá)情況與患者術(shù)后5年生存率及3年無(wú)瘤生存率有相關(guān)性。

本研究結(jié)果顯示SOX2蛋白在結(jié)直腸癌中的表達(dá)率顯著增高；SOX2蛋白表達(dá)與結(jié)直腸癌分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)；患者SOX2蛋白的表達(dá)情況與其術(shù)后5年生存率和3年無(wú)瘤生存率具有相關(guān)性。SOX2蛋白異常表達(dá)可作為提示結(jié)直腸癌預(yù)后判斷的重要參考指標(biāo)。

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The clinicopathologic observation of the SOX2 expression in colorectal cancer

FU Jing#GUO Yan-ke LIU Qian
Departmentof Pathology,Beijing Haidian Hospital(Haidian Section of Peking University Third Hospital),Beijing 100080,China

ObjectiveTo evaluate the expression of SOX2 in colorectal cancer(CRC)and to explore its clinicopathological significance.MethodThe expression of SOX2 was exam ined immunohistochem ically in 103 specimens of CRC and matched normal colorectalmucosae.The relationship between SOX2 expression and clinical pathology was analyzed.Patient follow-up ranged from 60-125 months.The median follow-up period was 84 months.ResultWe detected a significant increase in the expression of SOX2 in CRC tissues compared w ith adjacent normalmucosae(P＜0.001).The expression level of SOX2 was significantly and reversely related w ith degree of differentiation (P＜0.01),while positively associated w ith TNM stage(P＜0.05),lymph node metastases and distantmetastases(P＜0.01),and was correlated w ith 5-year postoperative survival and 3-year postoperative tumor-free survival(P＜0.05)in CRC.ConclusionOur findings suggest that enhanced expression of SOX2 is a predictor of prognosis for patients w ith CRC.

SOX2;colorectal cancer;clinicopathologic features;prognosis

R735.3

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2015.13.04.21

#通信作者（corresponding author），e-mail：fj50627@163.com

2015-04-27）