固腎定喘丸對老年COPD急性加重期患者血清和呼氣冷凝液中SP-D、CCL18、CC16表達(dá)的影響

胡芬,熊吟

(1.武漢市東湖醫(yī)院 內(nèi)五科，湖北 武漢 430070；2.武漢市普愛醫(yī)院 老年病科，湖北 武漢 430030)

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固腎定喘丸對老年COPD急性加重期患者血清和呼氣冷凝液中SP-D、CCL18、CC16表達(dá)的影響

胡芬1,熊吟2

(1.武漢市東湖醫(yī)院 內(nèi)五科，湖北 武漢 430070；2.武漢市普愛醫(yī)院 老年病科，湖北 武漢 430030)

目的 探討SP-D、CCL18、CC16在老年COPD急性加重期患者血清和呼氣冷凝液中的表達(dá)及固腎定喘丸對上述指標(biāo)的影響。方法 選擇2010年1月～2013年12月武漢市東湖醫(yī)院40例COPD急性加重期患者為研究對象，選擇40例COPD緩解期患者為疾病對照組，選擇健康人群40例為健康對照組。COPD急性加重期患者給予固腎定喘丸治療。檢測受試者血清和呼氣冷凝液中SP-D、CCLl8、CCl6含量，同時檢測COPD急性加重期患者治療后上述指標(biāo)水平，并對各指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI的關(guān)系進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果 急性期呼氣冷凝液SP-D、CCL18含量明顯高于緩解期和對照組(P<0.05)，且緩解期CCL18含量高于對照組(P<0.05)；急性期血清SP-D、CCL18、CC16含量明顯高于緩解期和對照組(P<0.05)，且緩解期SP-D、CCL18、CC16含量高于對照組(P<0.05)；血清SP-D、CCL18水平明顯高于呼氣冷凝液(P<0.01)；治療后，COPD急性期患者血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平明顯較治療前降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；呼氣冷凝液、血清SP-D與煙齡呈正相關(guān)(P<0.05)，與FEV1%預(yù)計值、FEV1/FVC(%)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；血清CC16與FEV1%預(yù)計值、FEV1/FVC(%)負(fù)相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16等指標(biāo)與COPD急性加重密切相關(guān)，監(jiān)測上述指標(biāo)可對COPD病情及預(yù)后進(jìn)行監(jiān)測與判斷，固腎定喘丸具有降低COPD急性期患者SP-D、CCLl8、CC16等指標(biāo)表達(dá)的功效。

慢性阻塞性肺疾?。环伪砻婊钚缘鞍譊；肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子；Clara細(xì)胞蛋白；固腎定喘丸

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)為一種慢性進(jìn)行性肺部疾病，以氣流受限為主要特征，隨著人口老齡化程度的加劇，其發(fā)病有上升趨勢[1]。預(yù)計到2020年，COPD致死率將僅次于心腦血管疾病，給社會及家庭帶來沉重負(fù)擔(dān)[2]。研究顯示，氧化應(yīng)激、感染、炎癥及生物標(biāo)志物表達(dá)變化等多種因素與COPD的發(fā)病關(guān)系密切，在COPD進(jìn)展過程中起重要作用[3-5]。肺表面活性蛋白D(surfactant protein D，SP-D)為膠原凝集素蛋白家族成員，肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(pulmonary and activation-regulated chemokine，CCLl8)、Clara細(xì)胞蛋白(clara cell protein，CCl6)主要在肺中表達(dá)，上述指標(biāo)在肺部疾病中存在異常表達(dá)[6-7]。本研究通過檢測COPD急性加重期患者血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCLl8、CCl6水平，旨在探討SP-D、CCLl8、CCl6在COPD急性加重期患者血清、呼氣冷凝液中的表達(dá)及固腎定喘丸對上述指標(biāo)的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月～2013年12月武漢市東湖醫(yī)院收治的40例COPD急性加重期患者為研究對象，患者年齡在59～85歲；選擇COPD緩解期患者40例為疾病對照組。上述入組對象均符合相關(guān)疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。另選擇同期在我院體檢的健康人群40例為健康對照組。本研究已經(jīng)武漢市東湖醫(yī)院倫理委員會審批通過，并經(jīng)患者知情簽署知情同意書。

1.2 病例組納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)[2]:無嚴(yán)重肝腎疾??；近期未接受激素治療；依從性佳；患者知情同意。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)[2]：伴有其他呼吸系統(tǒng)疾病者；合并免疫系統(tǒng)疾病者；職業(yè)暴露者；有精神疾病者；吸入有害氣體者；未完成研究者。

1.3 治療方法 給予COPD急性期患者服用舒氟美(廣州邁特興華，批號: 國藥準(zhǔn)字H44023791)0.2g，q12 h，同時聯(lián)合使用固腎定喘丸(廣州敬修堂藥業(yè)股份有限公司，批號：國藥準(zhǔn)字H106428)，2 g/次，3次/天，上述藥物治療療程均為3個月。

1.4 標(biāo)本收集及指標(biāo)檢測 于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取受試者外周靜脈血4 mL，3500 r/min離心10 min，上清液-80 ℃保存待測。采用德國Jaeger公司呼氣冷凝液收集裝置Ecoscreen收集呼氣冷凝液。該裝置由制冷器和呼氣冷凝液收集管路構(gòu)成，受試者呼氣時，氣體由進(jìn)氣口進(jìn)入冷凝室，再由出氣口排出，氣體在冷凝室遇冷凝集成液體。采用ELISA法檢測血清和呼氣冷凝液中SP-D、CCLl8、CCl6等指標(biāo)，試劑盒購自于上海華大基因科技公司，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。

1.5 統(tǒng)計指標(biāo) 對血清和呼氣冷凝液中SP-D、CCLl8、CCl6水平與年齡、煙齡、肺功能、BMI的關(guān)系進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較結(jié)果 3組年齡、性別、吸煙狀況、體質(zhì)指數(shù)(body mass index，BMI)等數(shù)據(jù)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，有可比性；但3組在煙齡、FEV1%預(yù)計值、FEV1/FVC(%)方面差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

表1 3組基本資料比較Tab.1 Comparison of basic data in three groups ±s)

*P<0.05，與對照組相比，compared with control group

2.2 急性期、緩解期、對照組患者呼氣冷凝液、血清中SP-D、CCL18及血清CC16水平 采用ELISA法檢測所有受試者呼氣冷凝液和血清中相關(guān)指標(biāo)。檢測CC16水平時發(fā)現(xiàn)，呼氣冷凝液中CC16含量極微，幾乎檢測不到，故只對呼氣冷凝液中SP-D、CCL18含量進(jìn)行了檢測。檢測結(jié)果顯示，急性期呼氣冷凝液 SP-D、CCL18含量明顯高于緩解期和對照組(P<0.05)，緩解期CCL18含量高于對照組(P<0.05)；急性期血清SP-D、CCL18、CC16含量明顯高于緩解期和對照組(P<0.05)，且緩解期SP-D、CCL18、CC16含量高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 3組血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平比較Tabl.2 Comparison of SP-D, CCL18 in serum, breath condensate and serum CC16 in the three groups ±s)

*P<0.05，與對照組相比，compared with control group;*P<0.05，與緩解期相比，compared with remission

2.3 COPD急性期患者血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18水平 對COPD急性期患者血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18水平進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，血清SP-D、CCL18水平明顯高于呼氣冷凝液(P<0.01)。見表3。

表3 COPD急性期患者血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18水平比較Tab.3 Comparison of SP-D, CCL18 in serum and breath condensate with acute ±s)

*P<0.05，與呼氣冷凝液組相比，compared with breath condensate group

2.4 COPD急性期患者治療前后血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平 對治療前、治療后COPD急性期患者血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，治療后，COPD急性期患者血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平明顯較治療前降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表4。

表4 COPD急性期治療前后血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平Tab.4 Comparison of SP-D, CCL18 in serum, breath condensate and serum CC16 level in COPD with acute before and after ±s)

*P<0.05，與治療前比較，compared with before treatment

2.5 COPD急性期患者治療前各指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI的相關(guān)性 對COPD急性期患者治療前呼氣冷凝液SP-D、CCL18、血清SP-D、CCL18、CC16指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI等因素進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，呼氣冷凝液SP-D與煙齡呈正相關(guān)(P<0.05)，與FEV1%預(yù)計值、FEV1/FVC(%)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；血清SP-D與煙齡呈正相關(guān)(P<0.05)，與FEV1%預(yù)計值、FEV1/FVC(%)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；血清CC16與FEV1%預(yù)計值、FEV1/FVC(%)負(fù)相關(guān)(P<0.05)；其他指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI等因素?zé)o明顯相關(guān)性。見表5。

表5 各指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI的相關(guān)性分析Tab.5 Correlation analysis between the indexes and age, smoking history, pulmonary function, BMI

3 討論

COPD是一種慢性全身性疾病，發(fā)病原因復(fù)雜，與多種因素相關(guān)，如老齡、遺傳、炎癥等因素均可引起COPD[7]。COPD以氣流受限為特征，同時伴有氣道、肺組織等呼吸系統(tǒng)慢性炎癥反應(yīng)，因此C反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞介素等炎性介質(zhì)可作為COPD診斷、治療的參考指標(biāo)，但上述指標(biāo)在評判COPD嚴(yán)重程度方面效果欠佳[8-11]。新近的研究發(fā)現(xiàn)，SP-D、CCL18、CCL16等指標(biāo)在COPD發(fā)病機(jī)制中起重要作用，與COPD的發(fā)病、進(jìn)展及嚴(yán)重程度相關(guān)[12-16]。Kelly等[2]研究發(fā)現(xiàn)，與健康人群相比，COPD患者血清CCL18水平明顯較高，且COPD急性加重期患者血清CCL18表達(dá)明顯增強(qiáng)。本研究顯示，COPD患者血清CCL18含量高于健康人群，且COPD急性加重期患者血清CCL18水平高于COPD緩解期患者，檢測呼氣冷凝液中CCL18含量亦有相似發(fā)現(xiàn)，與相關(guān)文獻(xiàn)[3]基本一致。提示CCL18在不同嚴(yán)重程度COPD患者呼氣冷凝液及血清中表達(dá)狀況存在差異，因此可以作為COPD嚴(yán)重程度及預(yù)后評判的參考指標(biāo)。

SP-D為肺源性的膠原凝素，近年來研究發(fā)現(xiàn)其在一些慢性疾病的發(fā)病及進(jìn)展中起重要作用[11-15]。Liu等[11]研究發(fā)現(xiàn)，COPD患者血清中SP-D表達(dá)水平明顯高于健康人群，且COPD在急性加重時SP-D表達(dá)水平可明顯增強(qiáng)。Güzel等[12]報道，COPD患者血清SP-D比基線水平高出95%以上時，COPD急性加重的發(fā)病風(fēng)險明顯增加。本研究顯示，COPD患者血清、呼氣冷凝液中SP-D水平明顯高于健康人群，且在COPD急性加重期，SP-D在血清、呼氣冷凝液中的表達(dá)強(qiáng)度高于COPD緩解期。與相關(guān)文獻(xiàn)[11-12]報道基本一致。提示血清、呼氣冷凝液中SP-D可作為COPD急性加重風(fēng)險的預(yù)測指標(biāo)。COPD急性加重時血清、呼氣冷凝液中SP-D表達(dá)增強(qiáng)主要與COPD急性加重期患者炎癥反應(yīng)加重、缺氧反應(yīng)明顯、肺泡毛細(xì)血管通透性增強(qiáng)等因素有關(guān)，上述因素可引起機(jī)體血清、呼氣冷凝液中SP-D表達(dá)增強(qiáng)。

CC16可抑制炎癥介質(zhì)的表達(dá)，因此具有較強(qiáng)的抗炎作用，且可拮抗外源性蛋白的抗原性。MacNee等[5]研究發(fā)現(xiàn)，COPD患者血清CC16檢測含量明顯高于正常人群，且COPD病情惡化時機(jī)體血清CC16水平明顯升高，即血清CC16含量與COPD病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。本研究顯示，COPD患者血清、呼氣冷凝液中CC16含量均明顯高于健康人群，且在COPD急性加重時，血清、呼氣冷凝液中CC16水平亦明顯上升，與文獻(xiàn)[5]報道基本一致。COPD急性加重期患者受炎癥、氧化應(yīng)激、感染等因素影響，機(jī)體肺泡-毛細(xì)血管通透性明顯加強(qiáng)，進(jìn)而導(dǎo)致CC16表達(dá)增強(qiáng)，并釋放入血液及其他組織中，繼而引起機(jī)體血清、呼氣冷凝液中CC16水平明顯升高。

本研究對呼氣冷凝液SP-D、CCL18，血清SP-D、CCL18、CC16指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI等因素進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，呼氣冷凝液、血清中SP-D與煙齡呈正相關(guān)(P<0.05)，與肺功能呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；血清CC16與肺功能呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。吸煙是COPD病情惡化的危險因素，肺功能可反應(yīng)COPD病情及預(yù)后情況，因此呼氣冷凝液、血清中SP-D、血清CC16與肺功能的相關(guān)性結(jié)果表明，上述指標(biāo)對監(jiān)測COPD病情具有重要意義。

與呼氣冷凝液比較，血清SP-D、CCLl8、CC16的表達(dá)受諸多因素干擾。肝臟、淋巴結(jié)等器官組織均可表達(dá)SP-D、CCLl8、CC16，因此SP-D、CCLl8、CC16檢測結(jié)果受肺外器官SP-D、CCLl8、CC16的表達(dá)狀況影響。而呼氣冷凝液中SP-D、CCLl8、CC16隨呼出氣冷凝而成，檢測特異性高，受影響的因素較少，能可靠地反映肺部SP-D、CCLl8、CC16含量的變化，結(jié)果更為準(zhǔn)確、可靠。本研究中給予COPD急性加重期患者固腎定喘丸進(jìn)行治療，患者經(jīng)治療后，血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16水平較治療前顯著降低，表明固腎定喘丸具有抑制COPD急性期患者SP-D、CCLl8、CC16等指標(biāo)表達(dá)的功效，固腎定喘丸一定程度上可以通過降低患者血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCLl8、CC16的水平進(jìn)而改善臨床癥狀。

綜上所述，血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18及血清CC16等指標(biāo)與COPD急性加重密切相關(guān)，監(jiān)測上述指標(biāo)可對COPD病情及預(yù)后進(jìn)行監(jiān)測與判斷，固腎定喘丸具有降低COPD急性期患者SP-D、CCLl8、CC16等指標(biāo)表達(dá)的功效。

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(編校：王冬梅)

Effect of Gushen Dingchuan pill on SP-D, CCL18, CC16 in serum and in exhaled breath condensate in the elderly with acute exacerbation of COPD

HU Fen1,XIONG Yin2

(1.The Fifth Department of Internal Medicine, East Lake Hospital of Wuhan City, Wuhan 430070, China;2.Department of Geriatrics, PuAi Hospital of Wuhan City, Wuhan 430030, China)

ObjectiveTo study effect of Gushen Dingchuan pill on SP-D,CCL18,CC16 in serum and in exhaled breath condensate in the elderly with acute exacerbation of COPD.MethodsFrom January 2010 to December 2013,East Lake Hospital of Wuhan City,40 cases of COPD patients with acute aggravating period were selected as the research object,40 patients with COPD remission were selected as disease control, and 40 cases of healthy people were selected as the healthy controls.COPD patients with acute aggravating period were given Gushen Dingchuan pill treatment.patients’ serum and breath condensate,SP-D,CCLl8,CCl6 content were detected,and the index levels of COPD patients with acute aggravating period after treatment were also tested, and the relations between the various indexes and age, smoking, pulmonary function,BMI correlation analysis were made.ResultsAcute group’ exhaled breath condensate,SP-D and CCL18 content were significantly higher than that of stable group and the control group (P<0.05),and the stable groups’ CCL18 levels were higher than that in control group (P<0.05).Acute group’s serum SP-D,CCL18,CC16 content was significantly higher than that of stable group and the control group (P<0.05),and the stable group’s SP-D,CCL18,CC16 levels were higher than that in control group (P<0.05).Serum SP-D,CCL18 levels were significantly higher than those in exhaled breath condensate(P<0.01).After treatment, COPD patients with acute phase SP-D,CCL18 in serum and breath condensate and serum CC16 levels were reduced, and the difference was statistically significant (P<0.01); Exhaled breath condensate and serum SP-D positively associated with smoking age(P<0.05),and showed a negative correlation with FEV1% the expected value,FEV1/FVC (%)(P<0.05); the serum levels of SP-D positively associated with tobacco (P<0.05),and showed a negative correlation with FEV1% the expected value,FEV1/FVC(%)(P<0.05); serum CC16 showed a negative correlation with FEV1% predicted value,FEV1/FVC(%)(P<0.05). ConclusionSP-D,CCL18 in serum, breath condensate, and serum CC16 are closely related with COPD exacerbations, and monitoring the indicators for COPD disease and prognosis monitoring and judgment, and Gushen Dingchuan pill can decrease SP-D,CCL18 in serum, breath condensate, and serum CC16 in COPD patients with acute period.

chronic obstructive pulmonary disease; surfactant protein D; pulmonary activation regulated chemokine; Clara cell protein; Gushen Dingchuan pill

胡芬，女，本科，主治醫(yī)師，研究方向：老年病內(nèi)科，E-mail：hf11413@163.com。

R563.9

A

1005-1678(2015)02-0133-04