骨疏顆粒對去卵巢雌性大鼠的骨密度生物力學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究

李冰　杜義斌

摘要：目的觀察骨疏顆粒對去卵巢骨質(zhì)疏松模型大鼠的骨密度、骨生物力學(xué)的影響，為骨疏顆粒治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法48 只 SD 大鼠隨機(jī)分為 4 組：模型組、空白對照組、戊酸雌二醇組、骨疏顆粒組。采用卵巢摘除法制作骨質(zhì)疏松模型，觀察大鼠骨密度、骨生物力學(xué)改變。結(jié)果與模型組比較，骨疏顆粒組及雌激素組均可以改善去勢雌性大鼠骨密度、骨生物力學(xué)水平（P<0.01 或 P<0.05），二者之間無顯著差異（P>0.05）。結(jié)論骨疏顆粒能治療和延緩絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松，與戊酸雌二醇無顯著性差異。

關(guān)鍵詞：骨質(zhì)疏松癥；骨疏顆粒；骨密度；骨生物力學(xué)；實(shí)驗(yàn)研究

中圖分類號：R285.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1007-2349（2015）06-0081-02

隨著對骨質(zhì)疏松的認(rèn)識深入，臨床上對骨質(zhì)疏松的定義發(fā)生改變，認(rèn)為骨質(zhì)疏松是一種以骨強(qiáng)度受損為特征的骨骼疾病。影響骨強(qiáng)度的因素主要為骨量和骨質(zhì)量因素。WHO所制定的骨質(zhì)疏松癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，只是基于對骨密度（BMD）的測量[1]。但大量的動物實(shí)驗(yàn)和臨床研究結(jié)果表明，單純骨礦鹽含量即骨密度的增加，骨質(zhì)量不一定增加，有時反而降低[2]。骨強(qiáng)度的另一重要因素是骨質(zhì)量因素，與骨的力學(xué)強(qiáng)度密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)采用云南省中醫(yī)醫(yī)院老年病科的經(jīng)驗(yàn)方骨疏顆粒治療去卵巢雌性大鼠的骨質(zhì)疏松，模擬絕經(jīng)期女性骨質(zhì)疏松，觀察中藥骨疏顆粒對去卵巢大鼠骨密度、骨生物力學(xué)的影響，并與戊酸雌二醇作為對照，為骨疏顆粒治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松提供動物實(shí)驗(yàn)依據(jù)?，F(xiàn)將骨密度、骨生物力學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

動物與分組、藥品組成、實(shí)驗(yàn)方法已有文章發(fā)表[3]。

1實(shí)驗(yàn)儀器

Prodigy型雙能 X 線骨密度儀（美國 Lunar公司），力學(xué)測試儀（Instron 5565，美國）。

2觀察指標(biāo)及檢測方法

在無菌條件下，腹腔注射 10%水合氯醛麻醉，取左側(cè)股骨、脛骨及腰1，剝離并剔除肌肉等組織。左側(cè)股骨、脛骨放于生理鹽水（20 ℃）中浸泡復(fù)溫 3 ～ 4 h 后，進(jìn)行加工。首先將牙托粉與自凝液以 5∶ 1 融合，待牙托粉變?yōu)轲こ淼牡凵酄钗锖?，將左?cè)股骨、脛骨遠(yuǎn)近端分別用牙托粉作以定型，使股骨、脛骨兩端固定于力學(xué)測試儀，不發(fā)生側(cè)向旋轉(zhuǎn)，基本處于同一水平面。標(biāo)本處理好后，作股骨、脛骨三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)，加載速度為 2 mm/min，兩端跨距為 20 mm，檢測過程中由計(jì)算機(jī)自動記錄股骨、脛骨的直徑、力值、撓曲強(qiáng)度，使用力學(xué)測試分析軟件（Instron Bluehhill 版本號2.0）分析數(shù)據(jù)。腰1采用雙能 X 線骨密度儀，使用小動物軟件（Lunar iDXA 版本號13.60），進(jìn)行離體骨密度測定。

3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較用t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)采用 SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。

4結(jié)果

4.1各組大鼠腰1骨密度變化與空白對照組比較，模型組骨密度有明顯降低（P<0.01），表明造模成功。與模型組比較，骨疏顆粒組的腰1骨密度有顯著性增加（P<0.05）；但與戊酸雌二醇組無明顯差異（P>0.05）。見表 1。

5討論

臨床上使用骨疏顆粒能明顯改善絕經(jīng)后婦女的骨質(zhì)疏松癥狀，緩解腰腿酸痛，疲乏無力，提高其生活質(zhì)量[4-5]。骨疏顆粒能引起大鼠性激素、病理及血生化指標(biāo)的變化[3]，導(dǎo)致骨密度、骨生物力學(xué)的改變。

骨質(zhì)量的評價包括骨的顯微結(jié)構(gòu)、骨密度及骨生物力學(xué)三方面。各組大鼠股骨顯微結(jié)構(gòu)的比較顯示，與模型組比較，骨疏顆粒組可升高骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)、骨小梁厚度，降低骨小梁分離度，與戊酸雌二醇組無顯著差異[3]。本實(shí)驗(yàn)骨生物力學(xué)主要選擇股骨、脛骨的撓曲強(qiáng)度變化。撓曲強(qiáng)度是描述材料承受復(fù)雜應(yīng)力性能的參數(shù)。撓曲強(qiáng)度=3PL/2πr2l，P為最大加荷值，L為樁長度（m）；r為樁直徑（m）。可反映骨骼的的彎曲性能。骨柔韌性高，不易骨折。骨疏顆粒組可升高骨密度，增加撓曲強(qiáng)度，與戊酸雌二醇組無顯著差異。

絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥的變化主要原因是雌激素的降低。補(bǔ)充人工合成雌激素藥劑會增加乳腺癌和子宮癌的危險性[6]，骨疏顆粒有類似雌激素的作用，可使去卵巢雌性大鼠體內(nèi)低下的雌激素水平提高，從而發(fā)揮雌激素對于骨代謝的保護(hù)作用。這應(yīng)該是骨疏顆粒對絕經(jīng)期骨質(zhì)疏松癥具有治療作用的一個重要原因，與雌激素替代治療絕經(jīng)期骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)制一致。但中藥治療骨質(zhì)疏松的治療靶點(diǎn)有多個，骨疏顆粒在改善骨小梁分離度、骨小梁數(shù)方面可達(dá)到接近正常水平，優(yōu)于戊酸雌二醇組[3]，證明骨疏顆粒治療骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制不止一種，有待于更深入的研究。參考文獻(xiàn)：

[1]World Health Organization.Assessment of fracture risk and its application to screening for postmenopausal osteoporosis.WHO Technical Report Series 843.WhO，Genevo，1994.

[2]Sgaard CH，Mosekide L，Schwartz W，et al.Effects of fluoride on rat vertebral body biomechanical competence and bone mass，Bone，1995，16（1）：163.

[3]李冰，杜義斌，李黔云，等.骨疏顆粒對去卵巢雌性大鼠骨質(zhì)疏松影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，37（4）：9-12.

[4]杜義斌，徐翔峰，彭江云.骨疏顆粒治療老年女性骨質(zhì)疏松癥30例療效觀察〔J〕.云南中醫(yī)中藥雜志，2006，27（5）：15.

[5]杜義斌，吳洋，段艷蕊等.骨疏顆粒治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥臨床觀察[J].新中醫(yī)，2013，45（8）：18-21.

[6]陸路.降低骨質(zhì)疏松危險的功能性食物成分[J].國外醫(yī)學(xué)：衛(wèi)生學(xué)分冊，2001，28（5）：282-284.

（收稿日期：2015-03-06）