2010年福建省腸道病毒71型血清流行病學(xué)調(diào)查

王金章,陳 煒,翁育偉,何文祥,張擁軍,黃 萌,謝劍鋒,鄭奎城,嚴(yán)延生

2010年福建省腸道病毒71型血清流行病學(xué)調(diào)查

王金章,陳 煒,翁育偉,何文祥,張擁軍,黃 萌,謝劍鋒,鄭奎城,嚴(yán)延生

目的 了解經(jīng)過(guò)2008及2009年手足口病流行之后，福建省普通人群血清腸道病毒71型的抗體水平。方法 采集2010年福建省390名普通人群的血清標(biāo)本，采用中和試驗(yàn)檢測(cè)血清EV71中和抗體。結(jié)果 390名普通人群中和抗體陽(yáng)性186人，陽(yáng)性率47.69%。男女性別之間中和抗體陽(yáng)性率及抗體滴度均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=0.42，P=0.52>0.05；U=-0.24，P=0.81>0.05)。各個(gè)年齡組之間的抗體陽(yáng)性率及抗體滴度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=55.69，P=0.00<0.05；HC=50.36,P=0.00<0.05)，抗體陽(yáng)性率最低的為0～歲年齡組，為16.67%，抗體陽(yáng)性率隨年齡增大而增高。0～4歲年齡組的抗體陽(yáng)性率為25.33%，5～年齡組的抗體陽(yáng)性率為61.67%，兩者之間的抗體陽(yáng)性率及抗體滴度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=48.85,P=0.00<0.05；U=-6.39，P=0.00<0.05)。結(jié)論 經(jīng)過(guò)2008及2009年手足口病流行之后，福建省普通人群血清腸道病毒71型的抗體水平仍較低，特別是0～4歲年齡組的兒童。今后福建省仍會(huì)出現(xiàn)EV71作為主要病原體之一引起的手足口病疫情，易感人群仍為5歲組以下兒童，應(yīng)繼續(xù)加強(qiáng)監(jiān)測(cè)和防控。

腸道病毒71型；中和抗體；血清流行病學(xué)調(diào)查

腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)為小RNA病毒科腸道病毒屬成員，是引起手足口病(Hand-foot-mouth disease, HFMD)的主要病原體。EV71感染引起的手足口病，與非EV71感染引起的手足口病相比，臨床表現(xiàn)沒(méi)有明顯的特異性，以發(fā)熱和手、足、口腔和臀部等部位出現(xiàn)皮疹為主要臨床特征的一種常見(jiàn)的急性傳染病。多數(shù)患者預(yù)后良好，但有時(shí)會(huì)出現(xiàn)比較嚴(yán)重的并發(fā)癥，如急性神經(jīng)源性肺水腫、肺出血和心肌炎等心肺并發(fā)癥和腦干腦炎、無(wú)菌性腦膜炎和類脊髓灰質(zhì)炎樣麻痹等神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥[ 1-2 ]。

自1997年開(kāi)始，由EV71病毒引起的手足口病暴發(fā)公共衛(wèi)生事件在東亞及東南亞逐漸增多，并經(jīng)常引起社會(huì)恐慌[3]。2008年3月我國(guó)安徽省阜陽(yáng)市等地區(qū)[ 4-5 ]出現(xiàn)了主要由EV71病毒引起的手足口病暴發(fā)流行，5月2日我國(guó)將手足口病納入丙類法定傳染病進(jìn)行管理。福建省2008年及2009年也出現(xiàn)了手足口病流行，分別報(bào)告11 740例及19 226例手足口病病例，而EV71所占手足口病病原譜的構(gòu)成比例均超過(guò)80%，分別為85.3%及80.7%，說(shuō)明EV71是引起當(dāng)前手足口病的主要腸道病毒。為了解經(jīng)過(guò)2008年及2009年主要由EV71引起手足口病的流行之后，福建省普通人群EV71血清中和抗體水平狀況，我們于2010年開(kāi)展了福建省EV71型血清流行病學(xué)調(diào)查。

1 材料與方法1.1 血清標(biāo)本來(lái)源 利用2010年福建省甲型H1N1抗體水平調(diào)查所采集的血清標(biāo)本，選擇390份不同年齡組的血清標(biāo)本來(lái)檢測(cè)其EV71中和抗體。具體年齡分組見(jiàn)表1，每個(gè)年齡組隨機(jī)選擇30份血清標(biāo)本。

1.2 病毒抗原的制備 EV71病毒毒株(2010FJLY 008)株，GenBank accession No:HQ426649)由本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)接種2010年福建地區(qū)手足口病患兒咽拭子標(biāo)本于RD細(xì)胞，分離兩代收獲，并進(jìn)行全長(zhǎng)基因組核苷酸序列測(cè)定和分析[6]，確定其為2010年福建省本省的EV71型地方株。毒株的分離、滴定嚴(yán)格按照操作規(guī)程[7]進(jìn)行操作。

1.3 檢測(cè)方法 使用96微孔板中和試驗(yàn)檢測(cè)血清EV71中和抗體，具體操作步驟參照[7]，血清中和抗體<1∶8為陰性，≥1∶8為陽(yáng)性。

1.4 資料分析 數(shù)據(jù)錄入到Excel文檔，使用SPSS13.0(SPSS Inc., Chicago, USA)統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析。

2 結(jié) 果

2.1 不同年齡組抗體陽(yáng)性率的比較 390份血清標(biāo)本中，186份EV71中和抗體陽(yáng)性，陽(yáng)性率為47.69%。各個(gè)年齡組的EV71中和抗體陽(yáng)性率，詳見(jiàn)表1及圖1。EV71中和抗體陽(yáng)性率最低的為0～歲年齡組，為16.67%，4～歲及以下年齡組的抗體陽(yáng)性率均低于35%，5～歲及以上年齡組的抗體陽(yáng)性率均高于50%，抗體陽(yáng)性率隨年齡增大而增高。通過(guò)對(duì)各個(gè)年齡組抗體陽(yáng)性率進(jìn)行χ2檢驗(yàn)分析，各個(gè)年齡組之間的抗體陽(yáng)性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=55.69，P=0.00<0.05)；同時(shí)，采用秩轉(zhuǎn)換的非參數(shù)檢驗(yàn)對(duì)各個(gè)年齡組的血清標(biāo)本抗體滴度進(jìn)行分析，結(jié)果顯示各個(gè)年齡組之間的抗體水平差異也有意義(HC=50.36,P=0.00<0.05)。

2.2 不同性別抗體陽(yáng)性率的比較 390份血清標(biāo)本中，其中男性血清標(biāo)本208份，中和抗體陽(yáng)性96份，陽(yáng)性率46.15%；女性血清標(biāo)本182份，陽(yáng)性90份，陽(yáng)性率49.45%，具體每個(gè)年齡組的男女血清中和抗體陽(yáng)性率見(jiàn)表1。經(jīng)過(guò)χ2檢驗(yàn)，男女之間血清標(biāo)本的EV71中和抗體陽(yáng)性率沒(méi)有差異(χ2=0.42，P=0.52>0.05)；同時(shí)，通過(guò)對(duì)男女之間血清標(biāo)本的EV71中和抗體滴度進(jìn)行秩轉(zhuǎn)換的非參數(shù)檢驗(yàn)，男女之間血清標(biāo)本的EV71中和抗體水平差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=-0.24，P=0.81>0.05)。

2.3 中和抗體水平構(gòu)成比 在調(diào)查的390份血清標(biāo)本中，中和抗體滴度<1∶8的有204份(52.31%)，1∶8-1∶32的有118份(30.26%)，1∶64-1∶128的有55份(14.10%)，≥256的有13份(3.33%)，具體見(jiàn)表2。中和抗體檢測(cè)結(jié)果為陰性及低抗體水平的血清標(biāo)本占主要部分。

圖1 2010年福建省EV71血清抗體陽(yáng)性率

3 討 論

EV71是引起手足口病(Hand-foot-mouth disease, HFMD)的主要病原體，全球很多國(guó)家和地區(qū)報(bào)道了EV71引起的手足口病疫情及其EV71的流行基因型等相關(guān)的病原學(xué)特征。但是，目前針對(duì)普通人群EV71中和抗體的血清流行病學(xué)報(bào)道研究較少。本研究利用2010年福建省甲型H1N1抗體水平調(diào)查所采集的普通人群血清標(biāo)本，標(biāo)本覆蓋的年齡組從0～10歲的每個(gè)年齡組，同時(shí)涵蓋了成人組等年齡組，并使用χ2檢驗(yàn)和秩轉(zhuǎn)換的非參數(shù)檢驗(yàn)兩種方法對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。因此，能夠比較全面和客觀地反映了EV71中和抗體水平在普通人群中的變化特征。

表1 不同年齡段及性別的EV71中和抗體陽(yáng)性率

表2 不同年齡段的EV71中和抗體構(gòu)成比

通過(guò)對(duì)不同年齡組的EV71抗體陽(yáng)性率及抗體滴度分別采用χ2檢驗(yàn)和秩轉(zhuǎn)換的非參數(shù)檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示不同年齡組的抗體陽(yáng)性率和抗體滴度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明普通人群不同年齡組抗體水平是有差異。0～4歲年齡組的抗體陽(yáng)性率為25.33%，5～年齡組的抗體陽(yáng)性率為61.67%，對(duì)0～4歲年齡組與5～年齡組的抗體陽(yáng)性率及抗體滴度分別采用χ2檢驗(yàn)和秩轉(zhuǎn)換的非參數(shù)檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示0～4歲年齡組與5～年齡組的抗體陽(yáng)性率及抗體滴度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=48.85,P=0.00<0.05；U=-6.39，P=0.00<0.05)，表明5～年齡組人群的EV71血清抗體水平比0～4歲年齡組人群高。同時(shí)，從表1及圖1可以得到人群中EV71抗體陽(yáng)性率隨年齡增大而增高，0～4歲年齡組每個(gè)年齡組的EV71抗體陽(yáng)性率均<35%，而5～年齡組的抗體陽(yáng)性率均≥50%，維持在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的水平。這些與手足口病發(fā)病率以4歲及以下年齡組為主，同時(shí)發(fā)病率隨著年齡的增長(zhǎng)而降低的疫情特點(diǎn)相符合。也與國(guó)內(nèi)外有關(guān)報(bào)道[8-10,12]基本一致。

對(duì)手足口病主要患者人群0～4歲組中男女抗體水平進(jìn)行比較，男性抗體陽(yáng)性率為23.86%，女性的抗體陽(yáng)性率為27.42%，雖然女性的抗體陽(yáng)性率比男性高，但是分別采用χ2檢驗(yàn)和秩轉(zhuǎn)換的非參數(shù)檢驗(yàn)對(duì)其抗體陽(yáng)性率及抗體滴度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示0～4歲組中男女之間的抗體陽(yáng)性率及抗體滴度均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.24，P=0.62>0.05；HC=-0.25,P=0.80>0.05)。提示0-4歲組中男女之間的EV71血清抗體水平是相似的，這與手足口病疫情中的男性發(fā)病率明顯高于女性存在差異，其原因有待進(jìn)一步研究。

本研究的標(biāo)本覆蓋年齡組從0～10歲的每個(gè)年齡組，同時(shí)涵蓋了成人組等年齡組，但缺少嬰兒1～12月月齡組的EV71血清抗體水平變化資料。Eng-Eong Ooi等[8]在對(duì)新加坡EV71血清流行病學(xué)調(diào)查中報(bào)道，帶母親血清抗體的新生兒血清44.0%具有EV71抗體，但1個(gè)月后迅速消退；Mei Zeng等[9]對(duì)上海兒童的EV71血清抗體流行病學(xué)調(diào)查中報(bào)道，1月新生兒的EV71血清抗體陽(yáng)性率為67%，然后隨著月齡的增大逐漸下降，10月及11月嬰兒的EV71血清抗體陽(yáng)性率為0。本研究0～歲組人群的中和抗體陽(yáng)性率是所有年齡組中最低的，僅為16.67%，考慮為月齡相對(duì)較大的嬰兒，因?yàn)樵慢g較大的血清相對(duì)于月齡較小的特別是0或1月新生兒來(lái)說(shuō)，更容易獲得。

2008年3月份手足口病在中國(guó)大陸地區(qū)開(kāi)始大規(guī)模流行，2008年及2009年引起手足口病的主要病原體為EV71。在中國(guó)2008年手足口病大規(guī)模流行之前，部分研究者開(kāi)展了EV71回顧性流行病學(xué)調(diào)查，如周世力等[10]檢測(cè)1999-2003年深圳市584份正常人血清，其中5歲組以下的人群的EV71抗體陽(yáng)性率為23.47%；郭學(xué)斌等[11]對(duì)2005年中國(guó)東南、西北、西南的3個(gè)縣總計(jì)371名1～6歲兒童人腸道病毒71型血清進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，3個(gè)縣兒童HEV 71中和抗體陽(yáng)性率不同，但差異無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中5歲組以下的人群的EV71抗體陽(yáng)性率為40.40%；Zhen Zhu等[12]對(duì)2005年中國(guó)6個(gè)不同省份的900份5歲組及以下的兒童進(jìn)行EV71回顧性流行病學(xué)調(diào)查，其EV71抗體陽(yáng)性率為32.00%。本研究是在08年、09年的手足口病(主要病原體為EV71)大規(guī)模流行之后開(kāi)展普通人群EV71血清中和抗體水平調(diào)查，0～4歲年齡組的抗體陽(yáng)性率僅為25.33%，其抗體水平甚至比上述報(bào)道的2008年之前我國(guó)其它省份的相應(yīng)年齡組人群還低，提示今后一段時(shí)間福建省仍然會(huì)有EV71作為主要病原體之一引起的手足口病流行，其主要的易感人群為5歲組以下兒童。因此，應(yīng)繼續(xù)加強(qiáng)手足口病的監(jiān)測(cè)和防控工作，特別要防控EV71引起的暴發(fā)和EV71引起的重癥死亡事件。

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Sero-epidemiological investigation of Enterovirus 71 antibodies in Fujian Province, China, 2010

WANG Jin-zhang,CHEN Wei,WENG Yu-wei,HE Wen-xiang,ZHANG Yong-jun,HUANG Meng,XIE Jian-feng,ZHENG Kui-cheng,YAN Yan-sheng

(FujianCenterforDiseaseControlandPrevention,Fuzhou350001,China)

In order to investigate EV71 antibody levels among general population from Fujian Province after the 2008-2009 HFMD epidemics, 390 sera-specimens were collected from 390 participants in 2010. EV71-specific antibody was detected by neutralization test, indicating 186 (47.69%) sera of 390 were EV71-seropositive. Although the difference by gender was not statistically significant on positive rates and antibody titers, significant differences were observed in positive rates and antibody titers among age groups. The positive rate was increasing with age, while the 0 age-group yielded the lowest positive rate of 16.67%. Subsequently, significant difference was detected among positive rates and antibody titers between age groups of 0 to 4 years-old and 5-years-old, with the positive rate of 25.33% and 61.67%, respectively. Therefore, the EV71 antibody levels among general population from Fujian Province after the 2008-2009 HFMD epidemics was still in the low level, especially the age groups of 0 to 4 years-old. The epidemic of HFMD mainly caused by EV71 will still occur in the future, and children under 5 years old are major susceptible population, continuously intensive surveillance, prevention and control are required.

Enterovirus 71; neutralizing antibody; seroepidemiology survey

Yan Yan-sheng, Email: yysh@fjcdc.com.cn

10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.03.008

國(guó)家科技重大專項(xiàng)《艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治》(2012ZX10004-210-003)

嚴(yán)延生，Email：yysh @fjcdc.com.cn

福建省疾病預(yù)防控制中心，福建省人獸共患病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福州 350001

R183.4

A

1002-2694(2015)03-0227-05

Supported by the National Mega-Project of Science & Technology for Infectious Diseases in China (No. 2012ZX10004-210-003)

2014-05-16；

2014-08-07