玉米須多糖和黃酮的半仿生提取及抗氧化活性

郭志紅+周鴻立

摘要：通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，采用半仿生法水浸提、醇提玉米須2種方法，并與傳統(tǒng)水提、傳統(tǒng)醇提方法作比較，以多糖、黃酮的提取量和抗氧化活性為考察指標(biāo)，確定最佳提取條件。結(jié)果表明，半仿生水提多糖提取量為35.29 mg/g，比傳統(tǒng)水提法提高了14.39%，半仿生水提黃酮提取量為5.16 mg/g，比傳統(tǒng)水提低36.6%。2種水提取物均有抗氧化活性且半仿生法更弱。半仿生醇提多糖提取量為49.53 mg/g，比傳統(tǒng)醇提提高了19.75%，醇提黃酮提取量為 15.59 mg/g，比傳統(tǒng)醇提高了59.4%。2種醇提取物均有抗氧化活性且半仿生法較強(qiáng)。半仿生水提有利于玉米須多糖的提取;半仿生醇提玉米須黃酮、多糖均提高，且有較高的生物活性，是提取分離玉米須活性成分的有效方法。

關(guān)鍵詞：玉米須;多糖;黃酮;半仿生;抗氧化;正交試驗(yàn)

中圖分類(lèi)號(hào)： R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2015）04-0273-04

收稿日期：2014-05-21

基金項(xiàng)目：吉林省科技廳科研項(xiàng)目（編號(hào)：20130303050NY）;吉林省教育廳2013第319號(hào)。

作者簡(jiǎn)介：郭志紅（1987—），女，河北邯鄲人，碩士研究生，從事有機(jī)化學(xué)研究。E-mail：gzh881011@163.com。

通信作者：周鴻立，博士，教授，從事天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)。E-mail：zhl67@126.com。

玉米須為禾本科玉蜀黍?qū)僦参镉衩椎幕ㄖ爸^，含有黃酮類(lèi)、多糖類(lèi)、皂苷、生物堿、單寧酸、綠原酸、蛋白質(zhì)、揮發(fā)性油、類(lèi)固醇等多種生物活性成分[1-2]。現(xiàn)代藥理研究證明，玉米須具有顯著的利尿、降血糖、抑菌、降壓、增強(qiáng)免疫、抗癌等功效[3]。目前多糖、黃酮的提取方法主要包括浸漬法、煎煮法、回流提取法、連續(xù)回流提取法等，新興的提取方法包括超聲波輔助提取法、微波輔助提取法、酶解法、超臨界流體萃取法、半仿生提取法（semi-bionic extraction，SBE） 、破碎提取法、空氣爆破法、亞臨界流體萃取等，其中半仿生提取法是模仿口服藥物在人體胃腸道中的轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，采用選定pH值的酸性、堿性溶劑依次提取得到活性混合物[4]。目前，半仿生法提取法已被應(yīng)用于提取柚皮總黃酮[8-9]（水提）、了哥王總黃酮[6]（醇提）、半邊蓮黃酮苷[7]（醇提）、葉下珠總黃酮[8]（水提）等，尚未見(jiàn)玉米須多糖、黃酮的半仿生浸提工藝研究報(bào)道。本研究運(yùn)用半仿生法原理，以特定pH值的水、乙醇為溶劑，比較相同條件下傳統(tǒng)水提、醇提黃酮、多糖的提取率以及粗提取物的抗氧化性能，旨在為提高玉米須的藥用價(jià)值提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

玉米須（安徽省亳州市藥材市場(chǎng)），蕓香苷對(duì)照品（批號(hào)：0080-9705，純度>98%，購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所）。試驗(yàn)用水為蒸餾水，無(wú)水乙醇、濃鹽酸、氫氧化鈉、濃硫酸、苯酚、無(wú)水氯化鋁均為分析純。752型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海菁華科技儀器有限公司）、FA2004N 電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）、GZX-GW-2-BS高溫干燥箱（上海博泰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）、PHS-3C型數(shù)字酸度計(jì)（上海理達(dá)儀器廠）、SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）、HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋（國(guó)華電器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 多糖含量測(cè)定 以葡萄糖為對(duì)照品，采用苯酚-硫酸法[10]測(cè)定玉米須多糖含量，得回歸方程：y=6.667 1x+0.020 2，r2=0.999 4，多糖質(zhì)量濃度在20.84～125.04 μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。多糖提取率計(jì)算公式如下：

多糖提取率=樣品中多糖質(zhì)量/藥材質(zhì)量×100%。

（1）

1.2.2 黃酮的含量測(cè)定 以蕓香苷為對(duì)照品，采用氯化鋁顯色法[11]測(cè)定玉米須黃酮含量，得回歸方程：y=24.834x+0007 1，r2=0.999 5，黃酮質(zhì)量濃度在10～30 μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。黃酮提取率計(jì)算公式如下：

黃酮提取率=樣品中黃酮含量/藥材質(zhì)量×100%。

（2）

1.2.3 提取溶劑的制備 根據(jù)仿生學(xué)原理，人體消化道胃、小腸、大腸體液的pH值分別為2.0、7.5、8.3[9]。水作溶劑時(shí)，由于磷酸緩沖溶液與氯化鋁溶液混合后有白色的絮狀沉淀，經(jīng)多次嘗試，改用5%鹽酸溶液、2%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值;乙醇作溶劑時(shí)用磷酸緩沖溶液調(diào)節(jié)pH值，備用。

1.2.4 樣品的處理與制備 玉米須清洗去塵，晾干，粉碎，過(guò)60目篩，稱(chēng)取2.0 g置于250 mL圓底燒瓶中，先在pH值為2.0的溶劑中提取，冷卻過(guò)濾，收集濾液，所得濾渣再在pH值為7.5、8.3的溶劑中各提取1次，合并濾液，減壓濃縮得提取液，定容到100 mL容量瓶中備用。

1.2.5 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 半仿生水提取試驗(yàn)選取提取時(shí)間、提取溫度、料液比3個(gè)因素，進(jìn)行3因素3水平試驗(yàn)，優(yōu)選提取工藝條件;每試驗(yàn)分別在pH值為2.0、7.5、8.3的水溶劑中提取1次，合并濾液后測(cè)定多糖、黃酮的含量（表1）。半仿生法醇提試驗(yàn)選取提取時(shí)間、提取溫度、料液比、乙醇體積分?jǐn)?shù)4個(gè)因素進(jìn)行4因素4水平試驗(yàn)，其他同水提試驗(yàn)（表2）。

表1 半仿生水提正交試驗(yàn)因素水平

水平

因素

A：時(shí)間

（h） B：溫度

（℃） C：料液比

（g ∶ mL）

1 1.0 70 1 ∶ 15

2 1.5 80 1 ∶ 25

3 2.0 90 1 ∶ 35endprint