傷科潔膚液的相關(guān)藥理學實驗研究

楊維建，張 超，李 娟，鄧 毅

1甘肅省中醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050；2甘肅中醫(yī)藥大學；3甘肅省中藥藥理與毒理學重點實驗室

傷科潔膚液的相關(guān)藥理學實驗研究

楊維建1，張 超2，李 娟2，鄧 毅3△

1甘肅省中醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050；2甘肅中醫(yī)藥大學；3甘肅省中藥藥理與毒理學重點實驗室

目的：觀察傷科潔膚液的急性毒性、安全性、抗炎抑菌作用并探討其作用機理。方法：采用經(jīng)典的急性毒性實驗方法，研究傷科潔膚液的急性毒性，觀察記錄小鼠的毒副反應情況。用傷科潔膚液對小鼠進行皮膚刺激實驗和皮膚過敏實驗，研究傷科潔膚液的的安全性。以二甲苯致小鼠耳腫脹、小鼠耳毛細血管通透性實驗及小鼠炎性氣囊中N O的含量，觀察傷科潔膚液的抗炎作用；以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌環(huán)、最小抑菌濃度(M IC)測定，觀察傷科潔膚液的抑菌作用。結(jié)果：傷科潔膚液急性毒性實驗未做出LD 50，最大給藥量（M LD）為1 250倍，說明傷科潔膚液毒性很小，在臨床規(guī)定使用量下使用安全可靠。傷科潔膚液外用未引起小鼠刺激性反應，也未引起小鼠的局部皮膚過敏反應，屬安全制劑。傷科潔膚液各組均能抑制二甲苯引起的小鼠耳腫脹，中、大劑量組作用顯著，與空白組比較差異有統(tǒng)計學意義；小、中、大劑量組均能抑制二甲苯所致的鼠耳毛細血管通透性增加；能降低小鼠氣囊炎性模型氣囊灌洗液中N O的含量，大、中劑量組作用顯著，與生理鹽組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。對金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、鏈球菌有一定的抑制作用。結(jié)論：傷科潔膚液安全、無毒，具有較強的抗炎作用及一定的抑菌作用。

傷科潔膚液；急性毒性；安全性；抗炎；抑菌；組織損傷

傷科潔膚液為甘肅省中醫(yī)院院內(nèi)制劑，由苦參、當歸、黃柏等組成，主要用于急、慢性軟組織損傷的初期治療及開放性傷口的外用清洗。曾用于甘肅岷縣、舟曲泥石流等突發(fā)公共衛(wèi)生事件的現(xiàn)場救治。本實驗通過觀察傷科潔膚液在急性毒性、藥效安全性及抗炎抑菌的作用并探討其作用機理，為臨床用藥提供客觀依據(jù)。

1 動物、試藥與儀器

1.1 實驗動物 健康昆明種(SPF)小鼠220只，體質(zhì)量(20±2)g，雌雄各半，甘肅中醫(yī)藥大學科研實驗中心提供，動物合格證號SCXK(甘)2011-0001。

1.2 藥品試劑 傷科潔膚液(甘肅省中醫(yī)院藥劑科制備，批號：20120032)，8%硫化鈉(廣東西隴化工廠生產(chǎn)，批號：0410012)，100%二甲苯(北京五二九五二化工廠生產(chǎn)，批號：20110828)，金黃色葡萄球菌(甘肅中醫(yī)學院病原微生物教研室提供，菌種號：CMCC54673)、肺炎球菌(甘肅中醫(yī)藥大學病原微生物教研室提供，菌種號：CMCC45270)、鏈球菌(甘肅中醫(yī)藥大學病原微生物教研室提供，菌種號：CMCC4432)、大腸桿菌(甘肅中醫(yī)藥大學病原微生物教研室提供，菌種號：CMCC44102)，角叉菜膠(Sigma公司生產(chǎn)，批號：122k14444)，0.9%NS(山東齊都藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國藥準字H37020765)，伊文思藍生理鹽水溶液(上海新中化工廠生產(chǎn)，批號：20110402)，冰醋酸(廣州化學試劑廠生產(chǎn)，批號：201206.12)，慶大霉素(廣東邦民制藥廠有限公司，國藥準字H44024781)，一氧化氮(NO)測試盒(南京建成生物工程研究所提供，批號：20120918)，呋喃西林(甘肅中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院制劑室自制，批號：993867)、10%水合氯醛(國藥集團化學試劑有限公司生產(chǎn)，批號：T20110403)。脫毛膏(上海威力藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：201209790)。

1.3 主要儀器 Sartorius分析天平(德國賽多利斯公司北京分處提供)，JP-350型電熱恒溫培養(yǎng)箱(武漢市武昌實驗儀器廠提供)，SW-CJ-1FD型凈化工作臺(蘇凈集團蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司提供)。濾紙片(PAPER DISC forAntibiotic examination，SIZE8M/MDIA，TOYOSEISAKUSHOCO，LTD)。

2 方法與結(jié)果

參照經(jīng)典的急性毒性實驗方法，進行傷科潔膚液對小鼠的急性毒性實驗研究［1］。

2.1 傷科潔膚液對小鼠的急性毒性預實驗 取小鼠10只，隨機分為傷科潔膚液組和生理鹽水對照組，每組5只，小鼠背部脫毛膏脫毛，范圍約2cm×2cm，給藥組小鼠背部涂藥1mL，即2.14g/mL(實驗前將250 mL傷科潔膚液濃縮至14 mL，即最大可濃縮濃度為68.2%，故生藥含藥量為2.14 g/mL)，對照組涂等劑量的生理鹽水。根據(jù)小鼠死亡情況作適當調(diào)整，分別找出傷科潔膚液LD100值(100%死亡率)、LD0值(0%死亡率)和相應的劑量組間距r值，進行LD50值的測定［2-4］。預實驗結(jié)果表明：觀察小鼠1天，小鼠無1例死亡，難以測定出LD50值。故進行最大給藥量(MLD)的正式實驗。

2.2 小鼠急性毒性M LD正式實驗 取上述小鼠30只，雌雄各半，體質(zhì)量18～22 g，按體質(zhì)量隨機分為3組，每組10只，分別為傷科潔膚液組、呋喃西林組、生理鹽水組，傷科潔膚液組按最大濃度68.2%，最大給藥容量0.5 mL/20 g體質(zhì)量經(jīng)皮給藥，呋喃西林和生理鹽水同劑量，2次/d，連續(xù)觀察7天，詳細記錄動物毒性反應情況［5］。實驗結(jié)束后處死全部動物，解剖，肉眼觀察主要臟器組織變化情況，計算小鼠最大給藥量倍數(shù)。

2.3 小鼠急性毒性正式實驗 各組小鼠給藥后，每籠10只，正常飼養(yǎng)，每天觀察1次，稱取體質(zhì)量，密切觀察各組小鼠的動度進食、飲水情況及7天內(nèi)可能出現(xiàn)的動度、異常肌肉運動、對外反應、瞳孔改變、異常分泌物、大小便異常、眼球凸出、眼瞼下垂、呼吸異常、皮膚顏色改變等毒性反應和死亡情況。若有小鼠死亡，則將其解剖，肉眼觀察心、肝、脾、腎、胃、小腸等臟器的改變。7天觀察期結(jié)束后，將每組存活的小鼠處死進行解剖，按照上述方法對主要臟器大體病理變化進行肉眼觀察［6-8］。

小鼠最大給藥量倍數(shù)=每只小鼠最大給藥量/小鼠平均體質(zhì)量(g)×成人平均體質(zhì)量(g)/成人每日用量。

2.4 小鼠局部皮膚刺激性實驗 取小鼠20只，雌雄各半，按體質(zhì)量隨機分為2組，分為完整皮膚組和破損皮膚組，每組10只［9］。給藥前24小時用脫毛劑將小鼠背部脊柱兩側(cè)區(qū)域脫毛，范圍約2 cm×2 cm，檢查脫毛皮膚是否因脫毛而受傷，受傷皮膚不用于本實驗。10%水合氯醛腹腔麻醉小鼠后，破損組小鼠左右兩側(cè)脫毛區(qū)用細針頭刮傷，以滲血為度，左側(cè)破損程度與右側(cè)一致，采用同體自身對比，左側(cè)受損皮膚取1.5 cm2消毒濾紙片滴加1 mL傷科潔膚液敷于左側(cè)背部，無刺激性膠布固定，右側(cè)濕敷生理鹽水對照，覆蓋同左側(cè)［10］。完整組給藥方法同上。每日給藥3次，間隔半小時，小鼠分籠飼養(yǎng)，連續(xù)給藥3天，3天后溫水去除殘留受試藥物，觀察7天，肉眼觀察并記錄動物涂藥部位有無紅斑和水腫，有無色素沉著、出血點、皮膚粗糙等情況，按表1—2進行評分并判斷結(jié)果。

表1 皮膚刺激、過敏反應評分標準

表2 皮膚刺激強度評價標準

2.5 傷科潔膚液皮膚過敏實驗 取小鼠30只，雌雄各半，按體質(zhì)量隨機分為3組，每組10只，設(shè)傷科潔膚液組、呋喃西林組、生理鹽水組(對照)，給藥前24小時用脫毛劑將小鼠背部脊柱兩側(cè)區(qū)域脫毛，范圍約2 cm×2 cm，檢查脫毛皮膚是否因脫毛而受傷，受傷皮膚不用于本實驗。取傷科潔膚液0.5 mL、呋喃西林0.5 mL、生理鹽水0.5 mL涂在各組小鼠脫毛區(qū)左側(cè)，消毒薄紗布覆蓋，脫敏膠布固定，每只小鼠分籠飼養(yǎng)，使藥物持續(xù)接觸6小時，1次/d，共3次［11］。于末次給藥致敏后第7天，在各組小鼠脫毛右側(cè)分別均勻涂抹傷科潔膚液0.5 mL、呋喃西林0.5 mL、生理鹽水0.5 mL，給藥部位薄紗布覆蓋，脫敏膠布固定，6小時后去掉受試物，即刻觀察，于24、48、72小時后再次觀察皮膚過敏反應情況［12］，按表1評分，計算致命率和反應平均值。致敏率：將出現(xiàn)皮膚紅斑或水腫(不論體重)的小鼠例數(shù)/受試小鼠總數(shù)。反應平均值=(紅斑形成總分+水腫形成總分)/合計小鼠數(shù)，按表3判斷過敏評價標準［13-14］。

表3 皮膚致敏性評價標準

2.6 抗炎作用

2.6.1 傷科潔膚液對二甲苯致小鼠耳廓炎癥的影響［15］取60只小鼠，雌雄各半，隨機分為空白組、基質(zhì)對照組(生理鹽水0.1 g/耳，5 g/kg)、陽性對照藥組(呋喃西林0.2 g/耳，12 g/kg)、傷科潔膚液小劑量組(0.12 g/耳，6 g/kg)、傷科潔膚液中劑量組(0.24 g/耳，12 g/kg)、傷科潔膚液大劑量組（0.36g/耳，18 g/kg）。于每只小鼠右耳廓滴100%二甲苯2滴致炎30分鐘。除空白組外，其余各組分別于小鼠右耳炎癥部位涂抹對應的生理鹽水及藥物。45分鐘后頸椎脫臼處死小鼠，剪下左右耳廓并用蒸餾水沖去右耳廓殘留的藥物，以直徑7 mm角膜環(huán)鉆切下兩耳相應部位耳片，求其兩耳重量差值作為炎癥腫脹程度指標。用分析天平稱重，計算腫脹抑制率

腫脹抑制率=(對照組耳片差值-給藥組耳片差值)/對照組耳片差值×100%。

2.6.2 小鼠耳毛細血管通透性實驗 取小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組，直腸給藥，傷科潔膚液給藥劑量，大、中、小劑量組分別為0.12g(1mL)/只、0.36 g(3 mL)/只、0.72(6 mL)g/只，空白組和模型組不給予任何處理，連續(xù)給藥6天。于末次給藥后1小時小鼠尾靜脈推0.5%伊文思藍生理鹽水溶液0.1 mL/只，10分鐘后腹腔注射0.6%冰醋酸生理鹽水注射液0.1mL/只，20分鐘后脫頸椎處死小鼠，蒸餾水5 mL充分洗滌腹腔，并輕揉腹部3分鐘，然后從腹腔內(nèi)收集沖洗液3 mL左右(若沖洗液如被血液污染，則棄去不用，1 000 r/min離心5分鐘，用754分光光度計于590 nm波長處比色，測定光密度(OD)值［16］。

2.6.3 對小鼠氣囊炎性模型氣囊灌洗液中N O含量的影響［17］取60只小鼠，雌雄各半，分組同上。經(jīng)皮給藥，各組于給藥前24小時用8%硫化鈉溶液于小鼠背部脊柱兩側(cè)脫毛，面積為2 cm2，3天后重復脫毛1次，并于2次脫毛部位后局部給藥，1次/d，連續(xù)7天。第1天給藥前先于小鼠背部肩胛區(qū)皮下無菌注入空氣5 mL形成氣囊，第4天補充注射空氣3 mL維持氣囊膨脹。末次給藥1小時后在氣囊內(nèi)注入0.25%角叉菜膠1 mL，遂即將鼠背向下，緩慢轉(zhuǎn)動，致炎6小時后以生理鹽水4 mL灌洗氣囊，收集灌洗液并定量其體積，4 000 r/min離心15分鐘，取上清液0.16 mL，按照NO試劑盒檢測方法測定NO含量。

2.7 傷科潔膚液抑菌作用的觀察

2.7.1 對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的抑菌作用［18］選用金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎球菌、鏈球菌作為受試菌，對照組選用慶大霉素和生理鹽水。金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎球菌、鏈球菌每組3×6=18只培養(yǎng)皿，實驗前在培養(yǎng)皿中接種好細菌。用黑色碳素筆在每個培養(yǎng)皿底部畫出“人”字形區(qū)域，以區(qū)分傷科潔膚液、慶大霉素、生理鹽水的不同區(qū)域。將傷科潔膚液的濃度稀釋成6種不同倍數(shù)，即原液、100倍、101倍、102倍、103倍、104倍。慶大霉素稀釋至原液的106倍。同理，大腸桿菌組分組及濃度同前，共計72只培養(yǎng)皿。在每個接種好細菌的培養(yǎng)皿中小心加入浸泡過不同濃度傷科潔膚液的濾紙片(濾紙片直徑約2 mm)，同樣將浸泡過生理鹽水和慶大霉素的濾紙片小心加入培養(yǎng)皿中的區(qū)域，以作為對照。然后將培養(yǎng)皿置35℃孵育箱24小時，測量抑菌環(huán)直徑。

2.7.2 最小抑菌濃度(M IC)測定 采用2倍稀釋法，將傷科潔膚液用滅菌蒸餾水倍比稀釋成濃度為 500、250、125、62.5、31.3、15.7、7.9、3.95 g/L的不同提取液，每個濃度設(shè)5個平行管，分別和等量的雙倍濃度的營養(yǎng)肉湯相混合，并分別設(shè)不含傷科潔膚液的肉湯培養(yǎng)基為對照管。然后將實驗菌液(金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎球菌、鏈球菌，菌液濃度用比濁管比濁，并調(diào)整密度為105～106 CFU/mL，分別接種各試管中，置37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時，觀察有無細菌生長，肉湯清亮透明表示無細菌生長(-)，肉湯渾濁表示有細菌生長(+)，以能抑制細菌生長的提取物最高稀釋度作為其最低抑菌濃度(MIC)。

2.8 統(tǒng)計學方法 所有結(jié)果采用SPSS 17.0軟件進行分析，其中急性毒性實驗、安全性實驗數(shù)據(jù)以(±s)表示，組間比較采用t檢驗；抗炎抑菌實驗數(shù)據(jù)以(±s)表示，組間采用單因素方差比較，檢驗水準為α=0.05。

3 結(jié)果

3.1 傷科潔膚液對小鼠急性毒性M LD值測定 小鼠急性毒性MLD值測定按25 mL/kg小鼠體質(zhì)量經(jīng)皮給藥2次，呋喃西林和對照組給予同體積，傷科潔膚液組小鼠給藥劑量，計算MLD為90.0g/(kg·d)。相當于臨床每kg體質(zhì)量日用劑量的1 250.0倍。結(jié)果給藥后觀察，小鼠的一般行為、精神反應、體毛膚色、呼吸步態(tài)、攝食飲水、排泄物及其他情況均無異常，未見明顯毒性反應及死亡情況(見表4—6)。

表4 傷科潔膚液急性毒性實驗小鼠死亡情況

表5 傷科潔膚液急性毒性實驗小鼠反應情況

表6 傷科潔膚液液急性毒性實驗小鼠的體質(zhì)量變化(±s)

表6 傷科潔膚液液急性毒性實驗小鼠的體質(zhì)量變化(±s)

注：與生理鹽水組比較，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01，***表示P＜0.001。

組別 例數(shù) 給藥前 給藥后1天 給藥后2天 給藥后3天 給藥后4天 給藥后5天 給藥后6天 給藥后7天傷科潔膚液組 30 21.38±1.94 21.45±1.04***21.71±1.64***21.98±1.19 22.21±1.73*22.59±1.61*22.81±1.76 23.19±1.99呋喃西林組 30 21.11±1.69 21.23±1.18***21.62±1.21***21.88±1.18 22.19±1.76 22.35±1.41 22.75±2.62 22.91±2.60生理鹽水組 30 21.35±1.88 21.43±1.24 21.67±1.04 21.87±1.73 22.17±1.61 22.32±1.43 22.67±1.62 22.89±1.74

3.2 對小鼠局部皮膚刺激性實驗 各組小鼠給藥24小時后，給藥局部未出現(xiàn)紅斑和水腫。連續(xù)給藥7天，給藥期間各組小鼠給藥區(qū)域未出現(xiàn)明顯紅斑和水腫，未見其他異常改變。見表7。

3.3 傷科潔膚液皮膚過敏實驗 傷科潔膚液組、呋喃西林組及生理鹽水組在涂藥24、48、72小時后涂藥部位均未出現(xiàn)紅斑和水腫，見表8。傷科潔膚液0.5 mL外用時，觀察7天小鼠皮膚未出現(xiàn)過敏反應，24、48、72小時觀察也未發(fā)現(xiàn)對小鼠皮膚有明顯過敏反應，因此傷科潔膚液對小鼠完整皮膚無過敏性反應，見表9。

表7 傷科潔膚液對小鼠局部皮膚刺激性實驗

表8 傷科潔膚液連續(xù)觀察7天分值

表9 傷科潔膚液皮膚過敏實驗結(jié)果

3.4 二甲苯致小鼠耳腫脹的影響 與空白組比較，傷科潔膚液各組均能抑制二甲苯引起的小鼠耳腫脹，根據(jù)單因素方差分析，小劑量傷科潔膚液組與空白組、生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，而傷科潔膚液中、大劑量組與空白組、生理鹽水組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。但小、中、大劑量傷科潔膚液組與呋喃西林組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表10。

表10 對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響

3.5 小鼠耳毛細血管通透性實驗 傷科潔膚液小、中、大劑量組及呋喃西林均能顯著抑制二甲苯所致的鼠耳毛細血管通透性增加(P＜0.05)。見表11。

表11 傷科潔膚液對小鼠耳毛細血管通透性影響

3.6 對小鼠氣囊炎性模型氣囊灌洗液中N O含量的影響 傷科潔膚液能降低小鼠氣囊炎性模型氣囊灌洗液中NO的含量，大、中劑量組作用顯著，與生理鹽組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。小劑量組作用較弱(P＜0.05)。見表12。

3.7 金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的抑菌作用 經(jīng)測量，傷科潔膚液原液對金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)為13 mm，對肺炎鏈球菌抑菌環(huán)為11 mm，對鏈球菌抑菌環(huán)為11 mm，其他濃度傷科潔膚液未見抑菌環(huán)；傷科潔膚液原液對大腸桿菌未見抑菌環(huán)；慶大霉素對4種細菌均有抑菌環(huán)。打孔法抑菌作用判斷標準：觀測抑菌圈的有無及直徑大小判斷敏感度及藥物效果，以抑菌圈＜6 mm為不敏感，6～7 mm為低敏感，7～15 mm為中敏，大于15 mm為高敏，無抑菌環(huán)為無效［19］，說明傷科潔膚液對金葡菌、球菌有明顯抑菌能力，見表13。

3.8 傷科潔膚液最低抑菌濃度實驗 傷科潔膚液對金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、鏈球菌、均有抑菌作用，其MIC分別為125，15.7，62.5 mg/kg，而對大腸桿菌無明顯抑菌作用，與抑菌圈實驗一致，見表14。

表12 傷科潔膚液對小鼠氣囊炎性模型氣囊灌洗液中N O含量的影響

表13 對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的抑菌圈直徑的影響 m m

表14 傷科潔膚液最低抑菌濃度

4 討論

中藥外用洗劑用于治療急性軟組織損傷，可發(fā)揮中醫(yī)藥傳統(tǒng)優(yōu)勢，療效佳，便捷，安全，副作用少，避免抗生素大量應用所帶來的弊端。將中藥外用洗劑用于軟組織損傷的初期治療，突出中醫(yī)藥對軟組織損傷治療的便捷和潔膚生新的獨特優(yōu)勢。中醫(yī)藥廣泛應用于急性損傷中，已經(jīng)引起國內(nèi)外不少醫(yī)學專家的重視。

傷科潔膚液是中醫(yī)理論指導下研制的中成藥，具有清熱解毒、潔膚生新、祛瘀消腫的功效，用于治療初期急性軟組織損傷。本研究對傷科潔膚液小鼠急性毒性進行了觀察和評價，實驗觀察發(fā)現(xiàn)，小鼠給藥后在攝食、飲水、糞便、尿液及精神、四肢活動和體質(zhì)量方面，給藥組與對照組相比，沒有差異，均表現(xiàn)為精神狀態(tài)良好、活動靈活積極、正常飲食，無一死亡。據(jù)此，傷科潔膚液急性毒性很小，可供臨床應用及實驗研究，但其抗炎抑菌的藥效學試驗還有待進一步研究。

實驗按照謝秀瓊等［20］方法進行動物安全性實驗。結(jié)果表明，藥物濃度為10.7%的傷科潔膚液外用，在完整和破損皮膚的小鼠身上未引起皮膚過敏反應和刺激性反應，因而是該制劑臨床使用安全高效的有力佐證，但這還遠遠不夠,我們將更深入全面的研究下去，盡可能從藥效學方面說明其作用機制。

傷科潔膚液由苦參、當歸、黃柏等組成。方中苦參具有清熱燥濕、殺蟲、利尿的作用，對結(jié)核桿菌、痢疾桿菌、金黃色葡萄球菌、多種皮膚真菌均有抑制作用；研究表明苦參中生物堿類化合物具有明顯的免疫抑制、抑菌抗炎的作用［21-22］。當歸具有活血散瘀、消腫、養(yǎng)血生肌之功效；其主要成分正丁烯內(nèi)酯及苯內(nèi)酯可對抗組織胺-乙酰膽堿引起的炎癥反應［23-24］。黃柏具有清熱、瀉火解毒、止血、療瘡之功效；其有效成分小檗堿對金黃色葡萄球菌、表皮球菌、化膿性鏈球菌等陽性球菌有較強的抑菌效果，對隱球菌和紅色發(fā)癬菌具有較強的抑菌作用［25］；水煎液對巴豆油所致小鼠耳廓腫脹及醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性有明顯的抗炎作用，其作用機理可能與對細菌呼吸及RNA合成的強烈抑制有關(guān)［26-27］。因此，該制劑通過清熱燥濕、解毒、消腫、補血生肌之作用，消除局部瘀腫、減少炎性滲液、降低或抑制NO的生成，并抑制多種細菌而達到抗炎抑菌作用的。本實驗表明，傷科潔膚液是一種安全，無毒的外用洗劑具有較強的抗炎抑菌作用，可廣泛推廣用于臨床及實驗。

附圖1 傷科潔膚液與慶大霉素對金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)比較

［1］ 徐叔云.藥理實驗方法學［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1992：201-206.

［2］ 劉紹莉.養(yǎng)血生發(fā)膠囊致藥物性肝炎1例［J］.中國醫(yī)院藥學雜志，2006，26(12):1584-1585.

［3］ 霍敏英，凌世華.首烏片、養(yǎng)血生發(fā)膠囊同服引起肝炎［J］.藥物不良反應雜志，2004，6(5):335.

［4］ 杜俊蓉，白波，余彥.當歸揮發(fā)油的毒性研究［J］.中國中藥雜志，2005，30(18):1400-1405.

［5］ 金智生，何建成，賈育新，等.復方川芎滴鼻液毒性實驗研究［J］.甘肅中醫(yī)學院學報，1999，16(1):13-14.

［6］ 謝元璋，孫蓉.養(yǎng)血生發(fā)膠囊對小鼠急性毒性實驗研究［J］.中國藥物警戒，2011，8(4)：122-124.

［7］ 黃多術(shù)，胡波，張玉菁.過量服食菟絲子致中毒反應1例［J］.中華中醫(yī)藥雜，2005，20(5):301-302.

［8］ 韓珍，賀弋.白芍總苷的藥理作用及其毒性研究進展［J］.寧夏醫(yī)學院學報，2008，30(4)：538-541.

［9］ 趙惠民.軟組織損傷及藥理學治療的現(xiàn)代概念［J］.頸腰痛雜志，1996，17(4)：254-256.

［10］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.2010版.北京:化學工業(yè)出版社，2005：946.

［11］李儀奎.中藥藥理實驗方法學［M］.上海：上海科學技術(shù)出版社，1991：528-540.

［12］李興志.骨痛靈軟膏安全性實驗研究［J］.吉林醫(yī)學，2008，29(20)：1803-1804.

［13］劉衛(wèi)，鄧淑鳳.柳葉洗眼液對豚鼠皮膚過敏性實驗研究［J］.醫(yī)學動物防制，2011，27(5)：445-446.

［14］王海東，趙俊喜.嘛呢止痛搽劑的安全性研究［J］，甘肅中醫(yī)，2006，19(7)：45-46.

［15］王鋒，李文娜.蒙藥消腫散涂膜劑皮膚刺激和皮膚過敏實驗研究［J］.遵義醫(yī)學院學報，2008，31(3)：243-244.

［16］鄭桃曉，周賢剛.益氣溫陽膏治療面癱的安全性實驗研究［J］.山東中醫(yī)雜志，2010，29(12)：849-851.

［17］楊宜華，陳玉祥.注射用黃芪凍干粉的安全性試驗和急性毒性試驗［J］.徐州醫(yī)學院學報，2007，27(2)：88-89.

［18］宋立人，洪洵，丁緒亮，等.現(xiàn)代中藥學大辭典［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：2308-2309.

［19］陳奇.中藥藥理研究方法學［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：109.

［20］謝秀瓊.中藥新制劑開發(fā)與應用［M］.3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2000:540.

［21］薛愛華，宋文靜.苦參堿藥理作用研究概況［J］.天津藥學，2010，22(5):62-63.

［22］孫宏博，于婧.苦參藥理作用研究進展［J］.黑龍江醫(yī)藥，2009，22(1)：83-84.

［23］玄陽.當歸的藥理作用研究進展分析［J］.醫(yī)學信息，2011，25(5)：1938-1939.

［24］高尚進，毛艷，周漢東，等.11種中草藥對8種常見細菌的體外抑菌試驗［J］.川北醫(yī)學院學報，2009，29（5）：466-468.

［25］胡俊青，胡曉.黃柏化學成分和藥理作用的現(xiàn)代研究［J］.當代醫(yī)學，2009，15(7):139-140.

［26］周娟，張夢軍，郭嘉偉，等.小鼠耳腫脹模型及藥理應用［J］.國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33(17):2102-2104.

［27］楊巧芳，孟慶剛.炎癥動物模型探要［J］.中華中醫(yī)藥學刊，2008，33（3）：516-517.

Research on Pharmacological Experiments of ShangKe JieFuYe

YANG Weijian1,ZHANG Chao2,LI Juan2,DENG Yi3△
1 Gansu Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730050,China;
2 Gansu University of Traditional Chinese Medicine;
3 KeyLaboratoryofPharmacologyandToxicologyforTraditionalChineseMedicinesofGansuProvince(nurturingstation)

Objective:To observe acute toxicity,the safety,anti-inflammatory effects and antibacterial activity of ShangKe JieFuYe,and to explore its mechanism.Methods:Acute toxicity of ShangKe JieFuYe to the mice was performed by adopting classical acute toxicity test,to observe and record toxic reactions of the mice.Dermal irritability test and allergic reaction of ShangKe JieFuYe were conducted in mice to study the safety of ShangKe JieFuYe in mice.Anti-inflammatory effects of ShangKe JieFuYe were observed by using dimethylbenzene-induced ear swelling of the mice,ear capillary permeability experiments of the mice and the contents of NO in inflammatory cells of the mice;antibacterial activity of ShangKe JieFuYe was observed by detecting the inhibition ring test of Staphylococcus aureus(SA)and Escherichia coli(E.coli),as well as minimal inhibitory concentration(MIC).Results:There was no result of LD50 in acute toxicity test of ShangKe JieFuYe,minimum lethal doses(MLD)were 1250 times,which demonstrated that the toxicity of ShangKe JieFuYe was low,and it's safe and reliable in clinical application under the specified usage.External application of ShangKe JieFuYe wouldn't cause irritability reaction and local allergic reaction of the mice,and it's of safe preparations.ShangKe JieFuYe could inhibit dimethylbenzene-induced ear swelling of the mice,especially moderate and high doses groups of ShangKe JieFuYe,the difference was significant compared with the blank group;different doses groups of ShangKe JieFuYe could inhibit mice ear capillary permeability increasing;it could decrease the contents of NO in irrigating solution of mice with inflammatory cells,especially moderate and high doses groups of ShangKe JieFuYe,the difference was notable compared with physiological saline group(P＜0.01).It could inhibit SA,pneumococcus and streptococcus to a certain degree. Conclusion:ShangKe JieFuYe is safe and nontoxic;it shows stronger anti-inflammatory effects and antibacterial activity definitely.

ShangKe JieFuYe;acute toxicity;safety;anti-inflammation;antibacterial;tissue damage

R285.5

A

1004-6852(2015)10-0025-07

2014-12-27

楊維建(1964—)，男，碩士研究生導師，主任醫(yī)師。研究方向：胃腸道疾病的中西醫(yī)結(jié)合治療。

△通訊作者：鄧毅(1964—)，男，博士研究生導師，教授。研究方向：中藥及復方臨床應用基礎(chǔ)研究。