枇杷果皮中多酚物質(zhì)提取和純化工藝的優(yōu)化

林建城　林海蘭　黃書(shū)斌　張燕清

摘 要 以枇杷果皮為材料，提取分離和純化枇杷多酚類(lèi)物質(zhì)，試驗(yàn)確定乙醇為多酚浸提溶劑，通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化乙醇浸提枇杷果皮多酚的工藝參數(shù)。結(jié)果表明：液料比10.0 ∶ 1（mL ∶ g），80 ℃下，在50%體積分?jǐn)?shù)的乙醇中浸提90 min，連續(xù)浸提2次，多酚得率可達(dá)34.76 mg/g DW（干重）。運(yùn)用靜態(tài)吸附和動(dòng)態(tài)吸附試驗(yàn)對(duì)大孔吸附樹(shù)脂及對(duì)多酚純化工藝條件進(jìn)行篩選，從AB-8、LX-1、NKA-9、D101、XAD-5和DM301等6種大孔吸附樹(shù)脂中篩選出的XAD-5型樹(shù)脂具有較好的吸附及解吸性能，吸附率和解吸率分別達(dá)到76.44%和74.32%。XAD-5型樹(shù)脂純化枇杷多酚的工藝條件為：進(jìn)樣濃度1.50 mg/mL，樣液體積5 BV，進(jìn)樣流速1.5 BV/h，洗脫劑乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%，洗脫流速1.5 BV/h，洗脫體積1.2 BV，此工藝下枇杷果皮多酚純度可達(dá)76.52%，回收率為56.44%。

關(guān)鍵詞 枇杷果皮；多酚；提取與純化；乙醇；大孔吸附樹(shù)脂

中圖分類(lèi)號(hào) TS209 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

Abstract The polyphenols were extracted and purified from loquat pericarp（Eriobotrya japonica Lind1.）. The extraction and purification technology for loquat pericarp polyphenols were determined through orthogonal experiments based on single factors. Results showed the ethanol was a suitable extraction solvent. The optimal polyphenols extraction conditions were as follows： liquid-to-material ratio 10.0 ∶ 1（mL ∶ g）， extraction temperature 80 ℃， ethanol volume fraction 50%（V/V）， extraction time 90 min， and two successive extraction， and the extraction amount of polyphenols reached 34.76 mg/g（dry weight）. Meanwhile， six different types（XAD-5， NKA-9， LX-1，DM301， AB-8 and D101）of macroporous resin were selected under the condition of static adsorption， and finally the optimum purification parameters were established with dynamic adsorption. Results indicated that XAD-5 was selected as the ideal adsorbent as it had a strong adsorption ability and a high desorption rate. The final adsorption rate and desorption rate was 76.44% and 74.32%， respectively. The best adsorption conditions were found to be 1.50 mg/mL of polyphenols sample solution concentration， poyphenols sample solution volume was five times of the bed volume（BV）， and a flow rate of 1.5 BV/h. Whereas the optimal desorption conditions were found to be a flow rate of 1.2 BV ethanol of 70% volume fraction for elution. The purity of loquat pericarp polyphenols was 76.52% and the recovery was 56.44%.

Key words Loquat pericarp； Polyphenols； Extraction and purification； Ethanol； Macroporous absorbent resin

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.07.027

枇杷（Eriobotrya japonica Lind1.）系薔薇科枇杷屬常綠喬木，是福建省的六大名果之一。枇杷成熟期集中，為了解決枇杷鮮果的供求關(guān)系，枇杷深加工產(chǎn)品越來(lái)越多，如枇杷罐頭、枇杷果汁、枇杷膏及枇杷酒等，這些生產(chǎn)加工后剩余的枇杷果皮，除少量被加工成飼料或作為肥料、燃料使用外，絕大部分被當(dāng)成垃圾深埋，嚴(yán)重污染了環(huán)境，造成了資源的巨大浪費(fèi)，所以綜合利用枇杷資源、開(kāi)發(fā)新型的枇杷深加工產(chǎn)品具有重要意義。

“植物多酚”是由Haslam[1]根據(jù)單寧分子結(jié)構(gòu)和分子量提出的，涵蓋所有單寧及其衍生物，是植物的次生代謝產(chǎn)物，可分為簡(jiǎn)單酚類(lèi)、酚酸類(lèi)、羥基肉桂酸類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物等[2]?，F(xiàn)已從茶葉、葡萄、蘋(píng)果、梨等多種植物中獲取了黃酮類(lèi)、兒茶素類(lèi)、白藜蘆醇、酚酸類(lèi)等多種酚類(lèi)物質(zhì)[3]。植物多酚物質(zhì)除具有抗氧化和抗菌作用外，還表現(xiàn)出抗腫瘤、抗突變和抗病毒等多種生物活性[4]。近年來(lái)，植物葉、花、果中多酚的開(kāi)發(fā)和利用已成為了研究熱點(diǎn)，Nawaz等[5]用乙醇為浸提溶劑從葡萄核中提取多酚，多酚得率達(dá)到11.4%；黃阿根等[6]從茶樹(shù)花中提取純化出多酚，純度達(dá)86.32%；而棗核、棗果、蘋(píng)果中多酚的抗氧化性、蘋(píng)果多酚組分及其多酚在抗過(guò)敏反應(yīng)中的作用也已闡明[7-8]；茶多酚和葡萄多酚等已被廣泛運(yùn)用在醫(yī)藥、保健品、化妝品和食品行業(yè)。此外，從枇杷葉中已提取到類(lèi)黃酮與綠原酸，且具有較強(qiáng)的抗氧化作用[9]；同時(shí)發(fā)現(xiàn)枇杷葉多酚能抑制口腔鱗狀上皮細(xì)胞瘤和唾液腺瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[10]。然而，對(duì)枇杷果實(shí)多酚鮮有研究，枇杷加工副產(chǎn)物的利用研究還是空白。本課題以枇杷果皮為原料，采用浸提法提取枇杷果皮多酚，確定浸提溶劑和浸提技術(shù)參數(shù)，并對(duì)以大孔吸附樹(shù)脂純化的工藝進(jìn)行優(yōu)化，為枇杷果皮深加工利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

選取‘解放鐘枇杷（Eriobotrya japonica Lindl. cv. Jiefangzhong）果皮，清洗干凈、瀝干，50 ℃下烘干后粉碎，經(jīng)100目過(guò)篩，得果皮干粉，4 ℃儲(chǔ)藏。

1.2 方法

1.2.1 枇杷果皮多酚提取 將一定量枇杷果皮干粉裝入具塞試管，加入乙醇，振蕩（120 r/min）提取，2 150×g下離心10 min，上清液定容至50 mL，待測(cè)。

1.2.2 枇杷多酚含量測(cè)定 采用Folin-Ciocalteu法[11]測(cè)定枇杷總酚含量，以沒(méi)食子酸為標(biāo)樣，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立了回歸方程：y=44.028 6x-0.020 9，R2=0.996 7。

1.2.3 浸提溶劑的確定 選擇水、乙酸乙酯、乙醇、甲醇和丙酮5種溶劑，研究體積分?jǐn)?shù)為10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%的乙酸乙酯對(duì)枇杷多酚浸提得率的影響；研究體積分?jǐn)?shù)為40%、50%、60%、65%、70%、75%、80%的乙醇、甲醇和丙酮對(duì)枇杷多酚浸提得率的影響，確定合適的浸提溶劑。

1.2.4 浸提工藝參數(shù)的確定 先進(jìn)行單因素試驗(yàn)，研究乙醇體積分?jǐn)?shù)（40%～80%）、液料比（5.0 ∶ 1～20.0 ∶ 1）、溫度（40～90 ℃）、浸提時(shí)間（30～120 min）和提取次數(shù)等5個(gè)因素對(duì)枇杷多酚得率的影響。再確定4個(gè)主要影響因素，A：乙醇體積分?jǐn)?shù)（%）；B：液料比（mL ∶ g）；C：溫度（℃）；D：浸提時(shí)間（h），選用L16（45）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)（表1），優(yōu)化枇杷果皮多酚浸提的工藝參數(shù)。

1.2.5 大孔樹(shù)脂靜態(tài)吸附試驗(yàn) 按王思新等[12]的方法，對(duì)AB-8、LX-1、NKA-9、D101、XAD-5和DM301等6種大孔樹(shù)脂進(jìn)行預(yù)處理。再將各樹(shù)脂分別與枇杷多酚樣液混合，25 ℃下振蕩（120 r/min）5 h，每隔1 h取樣1次，測(cè)定OD765nm，計(jì)算吸附量（mg/g），繪制靜態(tài)吸附曲線，篩選吸附樹(shù)脂。

1.2.6 大孔樹(shù)脂靜態(tài)解吸附試驗(yàn) 在3 g已飽和吸附的樹(shù)脂中加入30 mL的解吸劑，比較70%體積分?jǐn)?shù)的乙酸乙酯、丙酮、甲醇及乙醇等4種解吸劑的靜態(tài)解吸效果，25 ℃下振蕩（120 r/min）解吸2 h，計(jì)算解吸率（%），確定適宜的解吸劑（洗脫劑）。

1.2.7 進(jìn)樣流速對(duì)樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附效果的影響 將樣品溶液經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂玻璃層析柱（床體積BV，1 BV=22.4 mL）純化，在進(jìn)樣濃度為1.5 mg/mL下，以多酚漏出率為考察指標(biāo)，研究1.0、1.5和2.0 BV/h 3種不同進(jìn)樣流速對(duì)樹(shù)脂吸附枇杷多酚動(dòng)態(tài)吸附效果的影響。

1.2.8 進(jìn)樣濃度對(duì)樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附效果的影響 選擇0.75、1.50、3.00 mg/mL 3種進(jìn)樣濃度，研究其對(duì)樹(shù)脂吸附枇杷多酚的動(dòng)態(tài)吸附效果的影響，考察適宜的進(jìn)樣濃度。

1.2.9 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)多酚解吸效果的影響 選擇50%、60%、70%、80%、90%、100%體積分?jǐn)?shù)的乙醇，研究其對(duì)大孔樹(shù)脂吸附枇杷多酚解吸效果的影響，確定乙醇洗脫劑的濃度。

1.2.10 乙醇洗脫速度對(duì)多酚解吸效果的影響 洗脫劑乙醇以1.0、1.5、2.0、3.0 BV/h 4種洗脫速度，考察洗脫流速對(duì)大孔樹(shù)脂吸附枇杷多酚解吸效果的影響。

1.2.11 XAD-5樹(shù)脂的動(dòng)態(tài)洗脫曲線測(cè)定 以乙醇為解吸劑（洗脫劑），解吸樹(shù)脂吸附柱，測(cè)定部分收集的流出液中多酚含量，繪制動(dòng)態(tài)洗脫曲線，收集洗脫峰溶液，濃縮后冷凍干燥，求枇杷多酚的回收率（%）與純度（%）。

1.3 數(shù)據(jù)處理

（1）枇杷果皮多酚浸提得率計(jì)算式。

多酚得率=（枇杷多酚浸提量）/（枇杷果皮干粉量）×100，多酚得率以mg/g DW（干重）表示。

（2）大孔樹(shù)脂靜態(tài)吸附試驗(yàn)的吸附量計(jì)算式。

吸附量/（mg/g）=（C0-C1）V/W ①

式①中：C0為吸附前供試液多酚濃度（mg/mL）；C1為吸附后供試液多酚濃度（mg/mL）；V為多酚供試液體積（mL）；W為樹(shù)脂的質(zhì)量（g）。

（3）大孔樹(shù)脂靜態(tài)解吸附試驗(yàn)的解吸率計(jì)算式。

解吸率/%=[（C×V）/W]×100 ②

式②中：C為解吸液中枇杷多酚的濃度（mg/mL）；V為解吸液總體積（mL）；W為吸附總量（mg）。

（4）大孔樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附試驗(yàn)的漏出率計(jì)算式。

漏出率/%=C1/C0×100 ③

式③中：C0為吸附前供試液多酚濃度（mg/mL）；C1為吸附后流出液多酚濃度（mg/mL）。

（5）大孔樹(shù)脂的動(dòng)態(tài)洗脫的回收率與純度計(jì)算式。

回收率/%=[（C2×V2）/（C1×V1）]×100 ④

純度/%=[（C2×V2）/W]×100 ⑤

式④、⑤中：C1為進(jìn)樣前多酚溶液濃度（mg/mL）；V1為進(jìn)樣前多酚溶液總體積（mL）；C2為純化后多酚濃度（mg/mL）；V2為純化后多酚溶液總體積（mL），W為純化后多酚干重（mg）。

采用SPSS17.0數(shù)據(jù)分析軟件對(duì)以上數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用grapher7.0數(shù)據(jù)繪圖軟件繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 枇杷果皮多酚的浸提工藝

2.1.1 浸提溶劑的確定 比較研究水、乙酸乙酯、乙醇、甲醇和丙酮5種溶劑對(duì)枇杷果皮多酚浸提得率的影響，結(jié)果（圖1）顯示：65%體積分?jǐn)?shù)乙醇浸提的多酚得率較高，70%丙酮、65%甲醇和25%乙酸乙酯依次降低，蒸餾水浸提效果最差。甲醇、丙酮和乙酸乙酯3種溶劑均有毒性，因此，篩選出65%乙醇為枇杷果皮多酚的浸提溶劑。

2.1.2 浸提工藝參數(shù)的確定 研究乙醇濃度、液料比、浸提時(shí)間、浸提溫度和提取次數(shù)等5種單因素條件下對(duì)枇杷多酚得率的影響。結(jié)果表明（表1、2）：在乙醇體積分?jǐn)?shù)為65%，液料比為10.0 ∶ 1，浸提60 min，80 ℃條件下具有較好的提取效果，且連續(xù)浸提2次的利用率較高。進(jìn)一步采用L16（45）正交試驗(yàn)優(yōu)化枇杷多酚浸提的最佳工藝參數(shù)，結(jié)果表明（表3）：各因素列的極差R值均明顯大于空列，說(shuō)明乙醇濃度、液料比、浸提時(shí)間和浸提溫度4個(gè)因素對(duì)枇杷多酚浸提得率均有影響。比較4個(gè)影響因素的極差R值大小為：B>C>A>D，即液料比>浸提溫度>乙醇濃度>浸提時(shí)間，優(yōu)化組合為A1B3C4D4，即80 ℃下，液料比10.0 ∶ 1，在體積分?jǐn)?shù)50%乙醇中浸提90 min，連續(xù)浸提2次，多酚得率達(dá)34.76 mg/g DW。同時(shí)，方差分析與顯著性檢驗(yàn)表明（表4）：液料比對(duì)多酚浸提得率的影響達(dá)到極顯著水平（p<0.01），乙醇體積分?jǐn)?shù)和溫度的影響均達(dá)到顯著水平（p<0.05），浸提時(shí)間的影響無(wú)顯著性意義（p>0.05）。

2.2 大孔吸附樹(shù)脂純化枇杷果皮多酚工藝

2.2.1 大孔樹(shù)脂靜態(tài)吸附試驗(yàn) 從圖2可知，6種樹(shù)脂在前1 h內(nèi)樹(shù)脂的吸附量迅速增加，后隨吸附時(shí)間延長(zhǎng)，吸附量緩慢增加。XAD-5樹(shù)脂對(duì)枇杷多酚的吸附量最大，而NKA-9、LX-1、DM301和D101樹(shù)脂依次降低，AB-8樹(shù)脂的吸附量最小。XAD-5樹(shù)脂吸附1 h達(dá)到了總吸附量的76.44%；吸附2 h，達(dá)吸附總量的85.40%，說(shuō)明該樹(shù)脂對(duì)枇杷多酚的選擇性較強(qiáng)。XAD-5樹(shù)脂對(duì)多酚的飽和吸附量為7.71 mg/g，飽和吸附時(shí)間為5 h。

2.2.2 大孔樹(shù)脂靜態(tài)解吸附試驗(yàn) 研究6種大孔吸附樹(shù)脂對(duì)枇杷多酚的解吸性能，結(jié)果表明：70%體積分?jǐn)?shù)的乙醇解吸劑對(duì)XAD-5、NKA-9、LX-1、DM301、AB-8和D101等6種大孔樹(shù)脂吸附多酚的解吸率分別為74.32%、72.89%、71.87%、62.1%、56.01%和54.22%，而且發(fā)現(xiàn)在解吸2 h內(nèi)均達(dá)到解吸平衡?？梢?jiàn)，XAD-5大孔樹(shù)脂對(duì)枇杷多酚不僅靜態(tài)吸附量大，乙醇對(duì)XAD-5樹(shù)脂解吸率也最大，且吸附和解吸效果均好，價(jià)格便宜，適合用于枇杷多酚的純化工藝中。以XAD-5大孔樹(shù)脂為吸附樹(shù)脂，進(jìn)一步比較研究乙酸乙酯、丙酮、甲醇及乙醇4種解吸劑的靜態(tài)解吸效果。結(jié)果顯示：體積分?jǐn)?shù)均為70%的乙酸乙酯、丙酮、甲醇及乙醇對(duì)XAD-5樹(shù)脂吸附多酚的解吸率分別為50.23%、65.83%、68.80%和75.82%，乙醇的靜態(tài)解吸效果好于另外3種解吸劑。因此，乙醇不僅是枇杷多酚良好的浸提劑，也適宜作為多酚的解吸劑（洗脫劑）。

2.2.3 進(jìn)樣流速對(duì)樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附效果的影響 從圖3可看出，隨流出液體積的增大，流出液中多酚含量也逐漸增大，漏出率不斷提高，以2.0 BV/h進(jìn)樣流速的多酚漏出率較高，1.5 BV/h流速下流出液體積為5.0 BV時(shí)吸附逐漸趨于飽和，而1.0、2.0 BV/h進(jìn)樣流速此時(shí)漏出率還有所增大，未達(dá)到飽和吸附。流速主要是影響溶質(zhì)向樹(shù)脂表面的擴(kuò)散，當(dāng)進(jìn)樣流速大，多酚與樹(shù)脂間接觸時(shí)間短，多酚分子來(lái)不及擴(kuò)散到樹(shù)脂表面，漏出率則提高；若進(jìn)樣流速慢，吸附量提高，漏出率則下降，但流速太慢又會(huì)降低生產(chǎn)效率[4]。為了有效提高樹(shù)脂的吸附效果和提高生產(chǎn)效率，枇杷多酚浸提液以1.5 BV/h進(jìn)樣流速較為適宜。

2.2.4 進(jìn)樣濃度對(duì)樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附效果的影響 圖4結(jié)果顯示，0.75、3.00 mg/mL兩種進(jìn)樣濃度的漏出率高于1.50 mg/mL進(jìn)樣濃度的漏出率。樣品濃度太高，因發(fā)生多層吸附，影響樹(shù)脂內(nèi)孔的吸附作用，漏出率也會(huì)提高[13]；同時(shí)，樣品濃度高，溶液中含有的競(jìng)爭(zhēng)吸附的雜質(zhì)也增多，影響了對(duì)多酚的吸附。因此，應(yīng)選擇1.50 mg/mL的進(jìn)樣濃度。

2.2.5 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)多酚解吸效果的影響 圖5結(jié)果表明，隨乙醇濃度增大，多酚解吸率不斷提高，70%體積分?jǐn)?shù)的乙醇為洗脫劑時(shí)，解吸率達(dá)93.36%；而后隨乙醇濃度增大，解吸率反而下降。因此，可選用體積分?jǐn)?shù)70%的乙醇溶液為解吸劑。不同乙醇濃度對(duì)多酚呈現(xiàn)不同解吸性能，主要原因之一是多酚在不同極性的乙醇溶液中溶解度不同[14]。樹(shù)脂吸附多酚主要是依靠它們之間所形成的如氫鍵等次級(jí)鍵的結(jié)合力，隨乙醇濃度減小溶液極性增大，環(huán)境中溶液極性的適當(dāng)增大會(huì)削弱這種結(jié)合力，多酚得以解吸，解吸率增大；而當(dāng)乙醇溶液極性提高到一定程度，與多酚極性相差較大時(shí)，可能反而減少了這種削弱作用，解吸作用呈現(xiàn)下降，解吸率也下降。

2.2.6 乙醇洗脫速度對(duì)多酚解吸效果的影響 從圖6可見(jiàn)，洗脫劑乙醇以1.5 BV/h的流速洗脫，多酚的解吸效果最好，解吸率達(dá)到92.17%；后隨流速增大，解吸率反而有所下降。乙醇的解吸附作用可能還取決于它與多酚之間的相互作用程度，流速太快，乙醇與被吸附的多酚之間未能進(jìn)行充分的作用，多酚被置換出來(lái)速率下降，解吸率反而降低[4]；洗脫劑流速慢，乙醇與多酚間進(jìn)行了充分作用，但多酚不能及時(shí)從大孔樹(shù)脂微孔表面離開(kāi)，可能導(dǎo)致多酚與乙醇間的置換量有所減少，解吸率則出現(xiàn)降低現(xiàn)象，而且流速太慢，又延長(zhǎng)了生產(chǎn)周期。因此，選擇乙醇以1.5 BV/h的流速洗脫。

2.2.7 XAD-5樹(shù)脂的動(dòng)態(tài)洗脫曲線 枇杷多酚浸提液以1.5 BV/h進(jìn)樣流速上柱，進(jìn)樣濃度為1.5 mg/mL，70%乙醇洗脫劑以1.5 BV/h的流速洗脫。從XAD-5樹(shù)脂的動(dòng)態(tài)洗脫曲線（圖7）可知，乙醇對(duì)樹(shù)脂吸附多酚具有良好的解吸性能，僅0.5 BV就開(kāi)始洗脫枇杷多酚，到0.8 BV時(shí)洗脫的多酚達(dá)到最大值23.63 mg/mL，洗脫液達(dá)到1.2 BV時(shí)枇杷多酚洗脫基本完成。收集洗脫峰多酚溶液，離心后濃縮，冷凍干燥得多酚制品，測(cè)得多酚純度為76.52%，回收率為56.44%。

3討論與結(jié)論

3.1 枇杷果皮多酚的浸提工藝

多酚類(lèi)物質(zhì)在植物組織中通常與蛋白質(zhì)、多糖以氫鍵和疏水鍵形式結(jié)合成化合物，多酚分子間也是如此。甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等有機(jī)溶劑，由于能破壞多酚所形成的氫鍵，從而減弱了多酚的締合作用，促進(jìn)多酚的溶出，且不與多酚物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，浸出的雜質(zhì)少，易于分離，所以它們是提取多酚中最常用的溶劑。此外，提取溫度、時(shí)間、料液比以及溶劑濃度等因素都會(huì)直接影響酚類(lèi)物質(zhì)提取效果，對(duì)植物多酚的充分溶出，以及對(duì)多酚有效成分的保護(hù)作用產(chǎn)生影響，所以浸提多酚的最佳工藝參數(shù)研究成為一個(gè)重要的課題。胡婉珊等[15]采用正交試驗(yàn)研究了乙醇浸提磨盤(pán)柿多酚的工藝參數(shù)，確定的最佳工藝條件是：乙醇體積分?jǐn)?shù)60%，溫度55 ℃，提取時(shí)間30 min，液固比15 ∶ 1（mL ∶ g）時(shí)，此條件下多酚得率為3.07 mg/g（鮮柿）；而范濟(jì)民等[16]研究了葡萄皮多酚的乙醇浸提最佳條件為：浸提溫度80 ℃，乙醇體積分?jǐn)?shù)50%，浸提時(shí)間30 min，液料比9 ∶ 1（mL ∶ g），連續(xù)浸提2次，葡萄皮多酚浸提量達(dá)13.07 mg/g DW?？梢?jiàn)，不同來(lái)源的多酚采用乙醇浸提的工藝存在差別，提取率也有差異，這可能與原料固有的多酚含量、原料本身細(xì)胞壁的厚度及通透性、所含多酚的種類(lèi)及性質(zhì)等影響因素密切相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果表明：乙醇為枇杷果皮多酚適宜的浸提溶劑，在浸提溫度80 ℃，乙醇體積分?jǐn)?shù)50%，液料比為10.0 ∶ 1（mL ∶ g），浸提時(shí)間90 min，連續(xù)浸提2次，多酚得率可達(dá)34.76 mg/g DW。

3.2 枇杷果皮多酚的純化工藝

大孔吸附樹(shù)脂是一類(lèi)有機(jī)高分子聚合物吸附劑，不同樹(shù)脂網(wǎng)狀孔徑大小不同，對(duì)通過(guò)微孔的化合物根據(jù)其分子量的不同和吸附力的不同而進(jìn)行篩選，再經(jīng)一定溶劑洗脫而達(dá)到分離的目的。不同來(lái)源的多酚分離純化采用的樹(shù)脂不盡相同，目前AB-8、NKA-9、D101、DM301等大孔吸附樹(shù)脂常用于多酚類(lèi)物質(zhì)的分離純化中。郭雄飛等[17]采用超聲波結(jié)合乙醇浸提提取到葡萄籽多酚，利用D101樹(shù)脂進(jìn)一步純化，多酚總得率達(dá)80%以上；呂群金等[18]運(yùn)用AB-8型樹(shù)脂分離楊桃渣多酚物質(zhì)，純化樣品多酚含量達(dá)58.82%；郭麗萍等[19]的研究結(jié)果表明：DM301樹(shù)脂對(duì)香蕉皮多酚具有良好的吸附和解吸性能，適合用于對(duì)香蕉皮多酚的分離純化；而NKA-9型大孔樹(shù)脂對(duì)沙棗多酚表現(xiàn)出較好的吸附與解吸性能[20]，飽和吸附量為19.58 mg/g，解吸率最高值達(dá)87.07%，NKA-9 樹(shù)脂也是蘋(píng)果多酚的較佳吸附樹(shù)脂[21]，以60%乙醇濃度為洗脫劑，多酚回收率可達(dá)85.39%。而本試驗(yàn)選取6種不同極性的聚苯乙烯型樹(shù)脂，從中篩選出了XAD-5樹(shù)脂，其對(duì)枇杷多酚的吸附率和解吸率分別達(dá)到76.44%和74.32%，具有較好的吸附與解吸附性能，是分離純化枇杷多酚的理想樹(shù)脂。結(jié)果表明，XAD-5樹(shù)脂純化枇杷多酚的工藝條件為：進(jìn)樣濃度1.50 mg/mL，樣液體積5 BV，進(jìn)樣流速1.5 BV/h；洗脫劑乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%，洗脫流速1.5 BV/h，洗脫體積1.2 BV，此工藝下枇杷果皮多酚純度可達(dá)76.52%，回收率為56.44%。

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