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    海南香大蕉叢枝菌根真菌研究

    2015-05-30 21:51:28李嵐嵐李增平
    熱帶作物學報 2015年9期
    關(guān)鍵詞:叢枝菌根真菌多樣性海南

    李嵐嵐 李增平

    摘 要 對海南省香大蕉根際土樣中的AMF資源進行調(diào)查,從14個縣(市)采集的43份土樣中分離鑒定出9個屬共45種AMF。其中無梗囊霉屬(Acaulospora)16種、球囊霉屬(Glomus)10種、環(huán)孢囊霉屬(Kuklospora)1種、巨孢囊霉屬(Gigaspora)7種、盾巨孢囊霉屬(Scutellospora)2種、Dentiscutata 4種、Racocetra 3種、Quatunica 1種、Cetraspora 1種。無梗囊霉屬(Acaulospora)為海南香大蕉根際AMF的常見屬,雙網(wǎng)無梗囊霉(A. bireticulata)、疣狀無梗囊霉(A. tuberculata)為常見種。不同香大蕉根際土樣中的AMF種類不盡相同。

    關(guān)鍵詞 海南;香大蕉;叢枝菌根真菌;多樣性

    中圖分類號 S668.1;S154.3 文獻標識碼 A

    Species Diversity of Arbuscular Mycorrhizal Fungus Associated

    with Musa spp. in Hainan Province

    LI Lanlan, LI Zengping*

    College of Environment and Plant Protection, Hainan University, Haikou, Hainan 570228, China

    Abstract The species diversity of AMF in the rhizosphere of Musa spp., Hainan, was investigated. Forty-five species belonging to nine genera were isolated and identified from 43 rhizosphere soil samples of 14 counties,including 16 species of Acaulospora, 10 species of Glomus, 7 species of Gigaspora, 4 species of Dentiscutata, 3 species of Racocetra, 2 species of Scutellospora, 1 species of Kuklospora, 1 species of Quatunica and 1 species of Cetraspora. Acaulospora was the common genera, otherwise, A. bireticulata and A. bireticulatain were the common species in the rhizosphere of Musa spp.

    Key words Hainan; Musa spp.; Arbuscular mycorrhizal fungus(AMF); Species diversity

    doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.09.014

    香大蕉[1]為芭蕉科(Musaceae)芭蕉屬(Musa)的一類熱帶水果,包括香蕉(Musa nana Lour.,AAA Group Cavendish)、大蕉(M. paradisiaca Linn.,ABB Group Dajao)、粉蕉(M. sapientum L. AAB Group Fenjao)等,是僅次于水稻、小麥、玉米的世界第四大糧食作物[2],也是僅次于柑橘的第二大水果, 更是世界水果貿(mào)易量最大的鮮果[2-3]。叢枝菌根(Arbuscualr mycorrhiza fungus,AMF)屬于菌物界、球囊菌門,是一類古老的能與絕大多數(shù)植物根系建立互利共生關(guān)系的專性活體營養(yǎng)型真菌,對植物的進化、分布、生長發(fā)育及增強植物的抗病性、抗逆性等方面發(fā)揮著重要作用[4],目前,國內(nèi)對于香大蕉叢枝菌根真菌的研究較少,且比較簡單,僅有張科立等[5]對海南儋州、樂東、云龍、感城、興隆5個香蕉主栽區(qū)的香蕉叢枝菌根真菌進行過簡單的種類調(diào)查,分離到Glomus、Paraglomus和Gigaspora的菌根真菌;國外Joyce Mnyazi Jefwa等[6-7]于2012年報道了從肯尼亞50個農(nóng)場采集香蕉根際土壤分離鑒定到Acaulospora、Archaespora、Glomus、Scutellospora、Gigaspora的AMF,其中以Acaulospora孢子密度最大。

    2000年李敏等[8]用Gigaspora rosea、Glomus mossea和Glomus versiforme接種盆栽西瓜,能顯著減輕Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum引起的枯萎病的發(fā)病率并促進西瓜生長。王倡憲等[9]2012年用Glomus versiforme與Glomus intraradices接種“津綠3號”黃瓜,不僅能促進黃瓜幼苗生長,還能降低Fusarium oxysporum f.sp.niveum引起的枯萎病的發(fā)病率。香大蕉是海南省產(chǎn)量最大的熱帶水果,是農(nóng)民收入的支柱產(chǎn)業(yè)之一,在全省國民經(jīng)濟中占有重要的位置[10-17],然而近年來越來越嚴重的香蕉枯萎病極大地限制了海南香大蕉產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。筆者對海南省香大蕉種植區(qū)香蕉、芭蕉、粉蕉、皇帝蕉、野芭蕉根際土壤中的AMF物種多樣性進行了較為全面的調(diào)查,以便進一步摸清海南香大蕉根際的AMF種類,為將來篩選抗香蕉枯萎病的有益AMF提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 樣品采集

    2013年1月至2014年11月間,多次在海南省??谑小⑴R高縣、澄邁縣、瓊海市、儋州市、昌江縣、東方市、樂東縣、五指山市、瓊中縣、保亭縣、三亞市、萬寧市、白沙縣等14個市縣共采集土樣43份,采用五點取樣法,在20 m×20 m的面積內(nèi)隨機選擇5株生長壯旺的香大蕉植株,從其根際采取土樣,首先去除地表面的雜草、枯枝落葉等覆蓋物(1~3 cm),后挖取0~15 cm深的土壤(約2.5 kg)裝入布袋中。樣品采回后倒出放在陰涼通風處自然晾干,去除碎石、枯枝等雜物后涼干保存?zhèn)溆谩2杉翗訒r一同采集香大蕉根樣,用清水洗凈,放入FAA固定液中低溫保存,帶回室內(nèi)進行菌根染色觀察。

    1.2 菌根染色觀察

    將采集回來的根樣從FAA固定液中取出,剪成1 cm長的小段,用5%的KOH溶液浸泡,放入90 ℃恒溫水浴鍋中加熱約1 h(根據(jù)根的老幼程度、粗細和硬度,適當延長或縮短水浴加熱時間;若根樣保存在FAA固定液中超過2 h,適當延長水浴加熱時間);水浴加熱約1 h后,取出根樣洗凈,移入2%HCl溶液中酸化5 min,用清水洗凈;再用0.01%的品紅染液常溫浸泡染色24 h,或經(jīng)90 ℃水浴加熱1 h,取出根樣用清水洗凈,經(jīng)乳酸脫色,最后排列在載玻片上,蓋上蓋玻片進行壓片鏡檢。

    1.3 AMF的分離與鑒定

    1.3.1 AMF的分離 取風干的土樣50 g,放入大燒杯中加水浸泡約30 min,根據(jù)土質(zhì)的不同,適當延長浸泡時間,浸泡一段時間后過雙層分樣篩(上層篩孔徑1 mm,下層篩400目),反復洗刷土樣,收集下層篩中的殘留物于大號離心管中,在離心機中以3 000 r/min的速度離心3 min,去掉上清液后加入45%的蔗糖溶液,攪拌均勻后迅速放入離心機,以1 500 r/min的速度離心1 min,取出將上清液倒入400目篩中,收集殘留物于培養(yǎng)皿中,在解剖鏡下收集并計數(shù)所分離得到的孢子。

    1.3.2 AMF的鑒定 將分離得到的孢子用水作為浮載劑進行觀察,然后加入Melzer's、PVLG染液制片,于光學顯微鏡下觀察孢子的形狀、顏色、孢壁顏色、孢壁結(jié)構(gòu)、組成孢子內(nèi)含物等,測量孢子大小、孢壁厚度。再于OLYMPUS BX51TRF生物攝影顯微鏡下拍照。參考最新分類系統(tǒng)[18]和國際叢枝菌根真菌菌種保藏中心(INVAM,http://invam.caf.wvu.edu)提供的AMF各個種的描述和圖片,王幼珊著[19]《中國叢枝菌根真菌資源與種植資源》中AMF種的描述及國內(nèi)相關(guān)文獻進行種類鑒定。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 菌根染色觀察

    對野外采集的香大蕉根系進行菌根染色后,在粉蕉、香蕉、芭蕉根內(nèi)均觀察到明顯的AMF菌絲、近球形和長橢圓形的泡囊,結(jié)果表明海南香大蕉根系與AMF建立了良好的共生關(guān)系(圖1)。

    2.2 AMF的種類及分布

    2.2.1 各土樣中AMF種類情況 對43份土樣進行AMF的分離鑒定,初步確定有9個屬共45種,其中Acaulospora 16種、Glomus 10種、Kuklospora 1種、Gigaspora 7種、Scutellospora 2種、Dentiscutata 4種、Racocetra 3種、Quatunica 1種、Cetraspora 1種(表1)。

    從表1可以看出,海南香大蕉根際土壤中的AMF種類非常豐富。海南不同香大蕉根際土壤中的AMF種類有一定差別,所采集回來的土樣中,以粉蕉中篩到的AMF種類最多,共35種,其次是芭蕉和野芭蕉各20種,香蕉最少,僅11種,在所篩到的菌根真菌中,以Acaulospora較為常見。

    2.2.2 同一地區(qū)不同香大蕉根際土樣中AMF的種類情況 同一地點不同蕉類植物,篩到的AMF數(shù)量和種類都有一定的差別,在??诤5樾^(qū)采集的香蕉、粉蕉、芭蕉根際土樣中,篩到的AMF孢子種類和數(shù)量都有不同,以芭蕉根際土樣中所含的孢子種類最多,有7個種,并且都屬于Gigasporales,該屬的各個種孢子數(shù)量都比較少;香蕉根際土樣中篩到2種,以A. tuberculata為常見種(本文中指在該土樣中篩到的頻率較高、數(shù)目相對比較多的種);粉蕉根際土樣中篩到4個種,各個種所含孢子數(shù)量都比較少。臨高加來采集的香蕉土樣中篩到2種,以G. tenebrosum為常見種;粉蕉土樣中篩到3個種,以A. mellea為常見種。萬寧石梅采集的芭蕉土樣中篩到11種類型的孢子,以A. tuberculata、A.bireticulata為常見種;粉蕉土樣中篩到9種類型的孢子,以A. tuberculata、A. bireticulata、G. tenebrosum為常見種。瓊海塔洋采集回來的香蕉土樣中沒有篩到孢子;粉蕉土樣中僅篩到A. bireticulata。儋州采集的野芭蕉土樣中篩到的AMF孢子種類和數(shù)量最多。澄邁白蓮采集回來的芭蕉土樣中篩到2個種,以A. bireticulata為常見種;粉蕉土樣中篩到3個種,以A. bireticulata為常見種。白沙邦溪采集回來的香蕉土樣和粉蕉土樣中篩到的AMF種類數(shù)量相差不大,但是所含的孢子類型卻不完全相同(表2)。

    2.3 香大蕉根際部分AMF種類記述

    從香大蕉根際土樣中鑒別出的9個屬AMF,以Acaulospora種類最多,其次是Glomus,Gagisporales 各個屬種類相對較少(見圖2)。

    2.3.1 無梗囊霉屬Acaulospora (1)雙網(wǎng)無梗囊霉[21-23]Acaulospora bireticulata Rothwell& Trappe.(見圖2-1)

    孢子球形至橢球形,(120~150)μm×(150~180)μm,幼嫩孢子透明,成熟孢子淡黃色,易碎;孢子表面被有明顯的雙層網(wǎng)紋,網(wǎng)紋格呈多邊形。孢子壁有2層壁或不易區(qū)分的多層壁;Melzer's試劑染色反應不明顯。

    標本號:20130430-WNDSL-YBJ-16、20130430-WNDSL-YBJ-17、20130430-WNDSL-YBJ-20、20130430-WNDSL-YBJ-64、20130430-WNDSL-YBJ-05、20131012-WNSMGSLK-FJ-15、20131012-WNSMGSLK-BJ-09、20131012-WNSMGSLK-BJ-23、20131013-BTYND-FJ-01、20131013-SY-FJ-01、20140622-DZLYSTD-FJ-03、20140623-DZLYBQ-FJ-03、20140907-CJDD-FJ-02、20140621-DZLYDDD-XJ-02、20141115-DFBSLGL-FJ-01、20141115-DFBSLGL-XJ-02、20141116-LDHLBB-FJ-03等。

    (2)詹氏無梗囊霉[22-23,25]Acaulospora gerdemannii Blaszk(見圖2-2)。

    孢子近球形,淺黃色至黃棕色,(150~200)μm×(150~250)μm,孢子外輪廓不整齊,表面不光滑、不規(guī)則。孢子壁:L1具有腦紋狀旋繞,破口邊緣不整齊;L2呈層疊鱗片狀,不規(guī)則多角形。

    標本號:20130109-LGGSLK-FJ-08、20130109-LGGSLK-FJ-30、20131012-WNSMGSLK-FJ-38、20131012-WNSMGSLK-BJ-04、20131012-WNSMGSLK-BJ-21、20131013-SY-FJ-12。

    宿主:粉蕉、芭蕉。

    (3)蜜色無梗囊霉[23,28]Acaulospora mellea Spain & Schenck(見圖2-3)。

    孢子球形、近球形或橢圓形,淺黃色至黃棕色,大?。?00~120)μm×(110~150)μm。孢子壁:三層,L1于Melzer's試劑中呈淺黃色;L2于Melzer's 試劑中無明顯變化;L3于Melzer's試劑中呈現(xiàn)紫紅色。

    標本號:20130430-WNDSL-YBJ-34、20130430-WNDSL-YBJ-43、20131012-WNSMGSLK-BJ-02、20130626-LGJL-FJ-04、20140623-DZLYBQ-BJ-01、20140623-DZLYBQ-FJ-02、20140624-DZGC-BJ-01、20141115-DFBSLGL-FJ-08等

    宿主:粉蕉、野芭蕉、芭蕉。

    (4)瑞氏無梗囊霉[23,30]Acaulospora rehmii Sieverding & Toro.(見圖2-4)。

    孢子淺黃色至淡棕色,球形,直徑90~175μm。孢子壁:L1黃色至紅棕色,外表具迷宮似的紋飾;L2為透明的均一壁或膜狀壁;L3、L4均透明。

    標本號:20131012-QHBSL-FJ-06、20131012-QHBSL-FJ-09、20130626-LGJL-FJ-03、20131013-SY-FJ-01、20131013-SY-FJ-04、20131013-SY-FJ-11、20131013-SY-FJ-22、20131013-SY-FJ-26、20140624-DZGC-BJ-04、20140907-BSBX-XJ-02、20141115-DFBSLGL-XJ-03等。

    宿主:粉蕉、香蕉、芭蕉。

    (5)疣狀無梗囊霉[20,22,31]Acaulospora tuberculata D.P.Janos & J.M.Trappe(見圖2-5)。

    孢子黃棕色至紅棕色,球形或近球形,直徑150~250 μm,孢子表面光滑。孢子壁三層(Ll、L2、L3):Ll易逝壁,無色,常緊貼于L2,與Melzer's試劑無反應;L2層狀,黃棕色,至紅棕色,表面布滿瘤狀突起,在Melzer's試劑中不反應;L3黃色至黃棕色,與Melzer's試劑無反應。

    標本號:20130430-WNDSL-YBJ-19、20130430-WNDSL-YBJ-23、20130430-WNDSL-YBJ-29、20130430-WNDSL-YBJ-45、20130430-WNDSL-YBJ-47、20130430-WNDSL-YBJ-03、20130430-WNDSL-YBJ-04、20131012-WNSMGSLK-FJ-20、20131012-WNSMGSLK-BJ-13、20131014-WZS-YBJ-21、20140517-WNSM-FJ-02、20140907-CJ-FJ(HB)-01、20141115-DFBSLGL-FJ-02、20141115-DFBSLGL-FJ-04等。

    宿主:粉蕉、野芭蕉、芭蕉。

    2.3.2 環(huán)孢囊霉屬,刺環(huán)孢囊霉[32] Kuklospora spinosa B.P. Cai, Jun Y. Chen, Q.X. Zhang & L.D. Guo.(見圖2-6)。

    孢子淡橙棕色,球形或近球形,直徑100~150 μm。孢子壁三組(Sw、Mw、Iw)。Sw三層:Swl易逝壁,無色,成熟孢子中脫落;Sw2層狀,淺黃色,厚3~5 μm,表面密布刺狀突起。Mw兩層:膜狀,無色。Iw兩層(Iwl、Iw2):Iwl膜狀,無色,表面布滿珠狀紋飾;Iw2膜狀,無色。

    標本號:20130109-LGGSLK-FJ-06、20130109-LGGSLK-FJ-26、20140418-HDXQJD-XJ-04。

    宿主:粉蕉、香蕉。

    2.3.3 球囊霉屬Glomus (1)象牙白球囊霉[33]Glomus eburneum L.J.Kennedy.(見圖2-7)。

    孢子球形,直徑100~130μm,透明至淡黃白色。孢子壁:兩層(L1、L2),L1無色透明;L2透明至淺黃色,孢子壓碎易皺縮,厚2~3 μm。

    標本號:20131012-QHBSL-FJ-01、20131012-QHBSL-FJ-08、20131013-BTYND-FJ-06。

    宿主:粉蕉。

    (2)蔭性球囊霉[34]Glomus tenebrosum S.M.Berch & J.A.Fortin(見圖2-8)。

    孢子球形或近球形,200~250 μm。黃棕、紅棕或深棕色。孢子壁:兩層。L1無色,常缺失;L2較厚,斷層處常呈黃色或深棕色。連孢菌絲1根,在孢子基部加寬,隨菌絲的延伸由深棕色、黃色漸變至黃色、無色。連點開放。

    標本號:20130109-LGGSLK-FJ-10、20130109-LGGSLK-FJ-14、20130109-LGGSLK-FJ-17、20130109-LGGSLK-FJ-21、20130109-LGGSLK-FJ-27、20130626-LGJL-XJ-03、20130625-DZJYJD-YBJ-07、20130109-LGGSLK-FJ-35、20130625-DZJYJD-YBJ-11、20130625-DZJYJD-YBJ-23、20131012-WNSMGSLK-FJ-25、20131014-WZS-YBJ-13。

    宿主:粉蕉、香蕉、野芭蕉。

    2.3.4 巨孢囊霉屬Gigaspora (1)Gigaspora aldia[35]N.C.Sehenck&G.S.Smith(見圖2-9)。

    孢子透明至淺黃色;球形至近球形,大小200~260 μm。孢壁三層:L1為表面光滑;L2于Melzer's染液中呈紅棕色至暗紫紅色。產(chǎn)孢細胞淺黃色,與孢子間連點封閉。

    標本號:20130625-DZJYJD-YBJ-02、20130625-DZJYJD-YBJ-08、20130625-DZJYJD-YBJ-10、20131014-WZS-YBJ-05、20131014-WZS-YBJ-18、20140907-BSBX-FJ-04、20140907-BSBX-FJ-05、20130625-DZJYJD-YBJ-25、20130625-DZJYJD-YBJ-26。

    宿主:粉蕉、香蕉、野芭蕉。

    (2)微白巨孢囊霉[36]Gigaspora albida N.C.Sehenck & G.S.Smith.(見圖2-10)。

    孢子無色透明至淡黃色,球形、近球形,大小240~250 μm,表面光滑。孢子壁:L2在Melezr's試劑中變成深紅色。產(chǎn)孢細胞透明,于Melzer's試劑中變成淡黃色。

    標本號:20131012-WNSMGSLK-FJ-03、20131012-WNSMGSLK-FJ-34、20140517-WNSM-FJ-09、20130625-DZJYJD-YBJ-36、20130625-DZJYJD-YBJ-37、20131012-WNSMGSLK-BJ-27、20140622-DZLYSTD-FJ-02、20140623-DZLYBQ-FJ-05等。

    宿主:粉蕉、芭蕉、野芭蕉。

    (3)珠狀巨孢囊霉[35]Gigaspora margarita W. N. Becker & I. R. Hall, 1976.(見圖2-11)。

    孢子多呈白色或乳白色;孢子球形至近球形,大小260~400 μm。孢壁三層:L1表面光滑無紋飾;L2于Melzer's染液中呈暗紅棕色至暗紫紅色;L3內(nèi)表面分布疣狀突起,芽管多從突起處萌發(fā)。產(chǎn)孢細胞淺黃色。

    標本號:20140508-HDXQJD-BJ-02、20140508-HDXQJD-BJ-04、20130625-DZJYJD-YBJ-18、20140508-HDXQJD-BJ-05、20140508-HDXQJD-BJ-06。

    宿主:芭蕉、野芭蕉。

    2.3.5 盾巨孢囊霉屬Scutellospora (1)美麗盾巨孢囊霉[23,40]Scutellospora calospora(T.H.Nicolson & Gerd.)C. Walker & F. E. Sanders.(見圖2-12)。

    孢子透明,球形至長橢圓形,大小120~220 μm。孢壁三組:第一組壁于PVLG染液中呈暗紅紫色;第二組壁于PVLG染液中不被染色;第三組壁于PVLG染液中呈淡粉色。發(fā)芽盾室淺黃色。產(chǎn)孢細胞透明至淺黃色;與孢子連接處封閉。

    標本號:20130611-QSLQLW-FJ-04、20130611-QSLQLW-FJ-09、20130611-QSLQLW-FJ-18、20131014-WZS-YBJ-17、20131012-WNSMGSLK-FJ-14。

    宿主:粉蕉、野芭蕉。

    (2)雙紫盾巨孢囊霉[35]Scutellospora dipurpurescens J.B.Morton & R.E.Koske(見圖2-13)。

    孢子淺黃色;孢子球形至橢圓形,大小150~200 μm。孢壁三組:Ow三層,Mw于Melzer's染液中呈粉紅色。Iw于Melzer's染液中呈淡粉紅色。發(fā)芽盾室淺黃色。產(chǎn)孢細胞透明至淺黃色;與孢子連接處封閉。

    標本號:20131013-SY-FJ-10。

    宿主:粉蕉。

    2.3.6 Dentiscutata (1)Dentiscutata nigra[22-23,35](J.F.Redhead)Sieverd,F(xiàn).A.Souza & Oehl=Scutellospora nigra J.F.Redhead.(見圖2-14)。

    孢子黑色;球形,大小300~520 μm。孢壁三組,孢壁具有明顯的網(wǎng)格狀紋飾:Ow三層,Ow-L2具有網(wǎng)格狀紋飾,網(wǎng)格內(nèi)分布細小的突起。Mw兩層,無染色反應。Iw兩層,發(fā)芽盾室成熟前不明顯。產(chǎn)孢細胞棕色至紅棕色,與孢子連接處封閉。

    標本號:20140624-DZGC-XJ-01、20140624-DZGC-BJ-03、20140907-CJDD-FJ-05、20140907-BSBX-FJ-06。

    宿主:粉蕉、香蕉、芭蕉。

    (2)Dentiscutata reticulata[35](Koske, D.D.Mill & C.Walker)Sieverd, F.A.Souza & Oehl=Scutellospora reticulate Koske, Miller&Walker.(見圖2-15)

    孢子暗棕色;球形,大?。?50~450)μm×(250~340)μm。孢壁三組,孢子表面具有顯著的網(wǎng)格狀紋飾:表面具有凸起的筆直或彎曲的嵴狀結(jié)構(gòu),且互相連通,形成網(wǎng)格狀紋飾;網(wǎng)格呈4至8邊形;嵴間密布滿突起。發(fā)芽盾室環(huán)形至腎形。產(chǎn)孢細胞上有鉤狀枝。

    標本號:20131012-WNSMGSLK-BJ-24、20140517-WNSM-FJ-01、20140517-WNSM-FJ-07、20140517-WNSM-FJ-13、20140624-DZGC-BJ-02、20140907-CJDD-FJ-07、20140907-BSBX-FJ-06等。

    宿主:粉蕉、芭蕉。

    2.3.7 Racocetra (1)Racocetra fulgida[35](Koske & C. Walker)Oehl, F.A.Souza& Sieverd=Scutellospora fulgida Koske & C.Walker.(見圖2-16)。

    孢子白色,偶見乳黃色;近球形,大小120~240 μm。孢壁兩組:Ow三層,光滑無紋飾;Ow-L3在Melzer's染液中呈淺棕色;Iw無染色反應。產(chǎn)孢細胞透明至淡黃色。

    標本號:20140508-HDXQJD-BJ-09、20140623-DZLYBQ-FJ-01、20140907-BSBX-XJ-03。

    宿主:粉蕉、香蕉、芭蕉。

    (2)Racocetra gregaria[35](N. C. Schenck & T. H. Nicolson)Oehl, F.A.Souza & Sieverd=Scutellospora gregaria T. H. Nicolon & N. C. Schenck.(見圖2-17)。

    孢子球形,暗紅棕色;大小400~500 μm。孢壁兩組,具有紋飾:Ow三層,Ow-L1表面布滿鈍圓疣狀突起;Ow-L2于Melzer's染液中呈暗紅棕色;Iw兩層。發(fā)芽盾室淺黃色,邊緣整齊,褶皺少。產(chǎn)孢細胞淺黃色,與孢子連接處封閉。

    標本號:20140508-HDXQJD-BJ-01。

    宿主:芭蕉。

    2.3.8 Quatunica erythropus[22,35] (Koske & C.Walker) F.A.Souza, Sieverd & Oehl,=Scutellospora erythropus Koske & C.Walker.(見圖2-18)。

    孢子橙棕色,球形或近球形,大?。?70~500)μm×(205~600)μm。孢壁光滑四組:Ow三層,Mw二組四層;Iw兩層,Iw-L2于Melzer's染液中呈紫色或深紫色。發(fā)芽盾室黃棕色。產(chǎn)孢細胞倒卵圓形至棍棒形,黃棕色,與孢子連接處封閉。

    標本號:20140508-HDXQJD-BJ-03、20140508-HDXQJD-BJ-10、20130625-DZJYJD-YBJ-01、20130625-DZJYJD-YBJ-03、20130625-DZJYJD-YBJ-07。

    宿主:芭蕉、野芭蕉。

    2.3.9 Cetraspora pellucida[22,35] (T.H.Nicolson & N.C.Schenck)Oehl, F.A.Souza & Sieverd=Scutellospora pellucida T.H.Nicolon & N.C.Schenck.(見圖2-19)。

    孢子透明至黃色;球形或近球形,大小120~240 μm。孢壁三組,產(chǎn)孢細胞透明至淺黃色,與孢子間連點封閉。發(fā)芽盾室透明至淺棕黃色,邊緣褶皺。

    標本號:20140508-HDXQJD-BJ-13。

    宿主:芭蕉。

    2.3.10 多孢囊霉屬Diversispora sp.1(見圖2-20)。

    孢子直徑約為263 μm,橙色,球形,是具有球囊霉型的孢子,孢壁結(jié)構(gòu)為:一層薄的外壁、層狀壁和在Melzer's試劑中不會被染色的韌性內(nèi)壁,無發(fā)芽盾室。

    標本號:20140517-WNSM-FJ-08。

    宿主:粉蕉。

    3 討論與結(jié)論

    從研究結(jié)果來看,海南不同地區(qū)香大蕉根際的菌根真菌種類存在明顯差異,其中以???、澄邁、萬寧石梅高速路口、臨高加來采集土樣中的AMF種類差異最為明顯。??诓杉陌沤陡H土樣中Gigasporales種類最豐富;澄邁采集回來的土樣中,以粉蕉根際土樣中的AMF種類最豐富,Glomus為常見屬;萬寧石梅以粉蕉根際土樣中的AMF種類最豐,Acaulospora為常見屬;臨高加來采回的香蕉根際土樣僅篩到Acaulospora的真菌;瓊海、儋州光村、昌江、東方、樂東等地采集回來的土樣篩到的AMF種類和數(shù)量相對較少。在所有采集回來的土壤樣品中臨高加來的香蕉和粉蕉、昌江十月田的香蕉、東方八所的香蕉和樂東東孔的粉蕉屬人工種植,樣品中篩到的AMF數(shù)量和種類相對較少,表明農(nóng)事耕作對于AMF真菌的定殖和產(chǎn)孢會產(chǎn)生一定影響;在昌江采集患香蕉枯萎病的粉蕉的土樣中僅篩到A. tuberculata。海南香大蕉以Acaulospora為常見屬,A. bireticulata、A. tuberculata為常見種,AMF種類更豐富,且不同香大蕉根際土壤中的AMF種類也有一定差別,粉蕉的AMF種類最多,共35種,芭蕉和野芭蕉均為20種,香蕉最少,僅11種,前人研究發(fā)現(xiàn)在同一地區(qū),菌根真菌的種類會隨宿主、環(huán)境耕作栽培等的變化而發(fā)生一定程度上的改變[41-42],此結(jié)果在本研究中再一次得到驗證。

    2008年張科立等[5]對海南儋州、樂東、云龍、感城、興隆5個香蕉主栽區(qū)的香蕉AMF研究發(fā)現(xiàn)了Glomus、Paraglomus和Gigaspora共4個屬,但未確定到種,與他們的研究相比,本研究初步明確了海南香大蕉的AMF共有9屬45種,且調(diào)查了海南的14個市縣,調(diào)查地區(qū)更多、更全面,并有4種香大蕉,只是未分離到Paraglomus的孢子;2012年Jefwa等[6]報道肯尼亞50個農(nóng)場香蕉的AMF有5個屬的AMF,其中以Acaulospora孢子密度最大,本研究結(jié)果與其研究基本相似,只是未發(fā)現(xiàn)Archaespora,多發(fā)現(xiàn)了Kuklospora、Dentiscutata、Racocetra、Quatunica 4個屬,且確定的種更豐富,同時表明了海南獨特的氣候條件造就了香大蕉豐富的AMF資源。研究香大蕉根際的AMF資源,可為進一步篩選防治香大蕉土傳病害生防真菌提供有用的參考。

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