不同檢測方法在檢查梅毒螺旋體抗體中的應用價值研究

趙肖云，謝乃亮，鐘美華，莫帆

（1.右江民族醫(yī)學院檢驗學院2012級檢驗醫(yī)學本科，廣西 百色 533000 E－mail：zhaoxiaoyunyy＠163.com；2.廣西梧州市人民醫(yī)院，廣西 梧州 543000）

梅毒是一種由梅毒螺旋體（treponema pallidum，TP）引起的慢性傳染性疾病。95%的梅毒患者是通過性傳播和血液傳播，極少數(shù)可通過物品傳播。TP通過黏膜或者破損的皮膚進入人體后，經(jīng)淋巴系統(tǒng)及血液播散至全身，幾乎可以侵犯全身各臟器和組織，引起人體所有的器官和組織的病變，對人體危害重，傳染性強，且患者感染后的臨床表現(xiàn)極為復雜，部分患者可多年無癥狀而呈潛伏狀態(tài)，嚴重危險公共衛(wèi)生安全［1］。目前，血清學試驗是實驗室診斷梅毒的主要方法，每一種檢測方法都有其特殊的診斷價值，而檢測方法的優(yōu)劣關系到結果的準確性，影響患者的診斷與治療［2］。為進一步了解甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）、梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）、梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA－TP）三種檢測方法在檢查梅毒螺旋體抗體中的應用價值，本研究分別對TRUST、TPPA、ELISA－TP三種檢測方法進行比較，現(xiàn)報告如下。

1 資料和方法

1.1 標本來源 收集2013年1月～2014年6月我院收治的90例經(jīng)臨床確診為梅毒感染患者的90份血清標本，另隨機抽取非梅毒患者的90份血清標本，共180份血清標本為研究對象。

1.2 檢測設備

1.2.1 檢測試劑 TRUST試劑購自上海榮盛生物藥業(yè)有限公司，TPPA試劑購自日本富士瑞必歐株式會社，ELISA－TP試劑購自上海科華生物工程股份有限公司。

1.2.2 檢測儀器 上?？迫AKR13st－360酶標儀，恒溫箱，振蕩器。

1.3 檢測方法 以上各試驗操作步驟及結果判斷均嚴格按照試劑盒所附說明書進行。

1.4 檢測指標 計算三種檢測方法的陽性率，同時分別計算TRUST、TPPA、ELISA－TP三種檢測方法的靈敏度、特異度和Youden指數(shù)。靈敏度＝真陽性數(shù)／（真陽性數(shù)＋假陰性數(shù)）×100%，特異度＝真陰性數(shù)／（真陰性數(shù)＋假陽性數(shù)）×100%，Youden指數(shù)＝（靈敏度＋特異度）－1。

1.5 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)的分析采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗，三組間的兩兩比較采用Bonferroni法調整檢驗水準，以P＜0.0167為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 三種檢測方法檢測血清學標本結果比較 研究結果表明，三種檢測方法在檢測梅毒患者的90份血清標本時，TRUST檢測的陽性率為83.33%，TPPA為95.56%，ELISA－TP為98.89%，三種方法比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。TRUST檢測的陽性率與TPPA比較差異有統(tǒng)計學意義（χ2＝7.120，P＝0.008），與ELISA－TP比較差異具有統(tǒng)計學意義（χ2＝13.445，P＜0.001）。TPPA 檢測的陽性率與ELISA－TP比較差異無統(tǒng)計學意義（χ2＝1.851，P＝0.174）。三種檢測方法在檢測非梅毒患者的90份血清標本時，TRUST檢測的假陽性率為7.78%，TPPA為1.11%，ELISA－TP為2.22%，三種方法比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。TRUST檢測的假陽性率與TPPA比較差異無統(tǒng)計學意義（χ2＝2.854，P＝0.091），與ELISA－TP比較差異無統(tǒng)計學意義（χ2＝1.410，P＝0.235）。TPPA 檢測的陽性率與ELISA－TP比較差異無統(tǒng)計學意義（χ2＝0.339，P＝0.560），見表1。

表1 三種檢測方法檢測血清學標本結果比較 （n，%）

2.2 三種檢測方法檢測血清學標本的靈敏度和特異度比較 研究結果顯示，三種檢測方法中靈敏度最高的 為 ELISA － TP（98.89%），其 次 為 TPPA（95.56%），最后為 TRUST（83.33%）；特異度最高的為TPPA（98.89%），其次為 ELISA－TP（97.78%），最低為 TRUST（92.22%）；Youden指數(shù)最高的為ELISA－TP（0.97），其次為 TPPA（0.94），最后為TRUST（0.78），見表2。

表2 三種檢測方法檢測血清學標本的靈敏度和特異度比較

3 討論

近年來，國內外梅毒的發(fā)病率一直居高不下，且和艾滋病的傳播途徑相同，可大大增加感染和傳播艾滋病的危險，是一個全球關注的公共衛(wèi)生問題。目前，梅毒的血清學檢查已列入我國獻血員和臨床患者輸血前、手術前以及各種創(chuàng)傷性檢查的常規(guī)項目［3］，因此選擇一種靈敏度高、特異度強、方便快捷的檢測方法，對于梅毒的診斷及治療具有重要意義。

TP于1905年由Schaudinn和Hoffmann發(fā)現(xiàn)，是小而纖細的螺旋狀微生物，因其透明不染色，故又稱蒼白螺旋體。TP含有很多抗原物質，多數(shù)為非特異性（如心磷脂），少數(shù)為特異性（如TP抗原），一旦侵入人體后，可在機體產(chǎn)生兩種抗體，一種為非特異性抗體，另一種為特異性抗體（即抗TP抗體）［4］。

臨床上常采用TRUST檢測非特異性抗體，即用心磷脂做抗原，檢測血清中的抗心磷脂抗體，該方法操作簡便快捷，可用于大量人群的篩查［5］，但由于非特異性抗體通常出現(xiàn)較晚，在一期梅毒時多呈陰性，對于梅毒的早期篩查易造成假陽性，且該抗體還可多見于其它疾病，如類風濕性關節(jié)炎、紅斑狼瘡等自身免疫性疾病以及腫瘤性疾病，特異性不高［6］。故在本次研究中采用TRUST進行檢測時，TRUST檢測出梅毒患者的陽性率明顯低于TPPA和ELISA－TP，檢測非梅毒患者的假陽性率明顯高于TPPA和ELISA－TP，靈敏度和特異度不高，Youden指數(shù)也明顯低于TPPA和ELISA－TP。

本研究結果顯示，ELISA－TP檢測梅毒患者血清標本陽性率高達98.89%，TPPA達95.56%。原因在于，TPPA和ELISA－TP均為梅毒螺旋體抗原血清實驗，臨床上主要用于檢測特異性抗體，實驗敏感性及特異性均較高，而TPPA的工作原理是將從感染TP的家兔睪丸中提取的TP純化，并以超聲粉碎后作為抗原，以明膠顆粒作為載體，若抗體過多時，抗原抗體的結合不能形成大的復合物，抑制可見的反應出現(xiàn)，造成靈敏度不高。若想避免該現(xiàn)象，需將標本多步稀釋，操作繁瑣，成本較高［7］。研究表明，TPPA檢測非梅毒患者血清標本假陽性率僅為1.11%，ELISA－TP為2.22%，均低于TRUST的7.78%。由于ELISATP易受標本溶血、細菌污染、標本存放過久等因素影響［8］，呈假陽性的概率明顯大于 TPPA，卻又低于TRUST。研究結果顯示，Youden指數(shù)最高的為ELISA－TP（0.97），其次為 TPPA（0.94），最后為TRUST（0.78）。說明，在本次研究中ELISA－TP的實驗效果更好，真實性更強。但鑒于特異性抗體對機體無保護作用，經(jīng)足量抗梅毒治療后仍持續(xù)存在，甚至終身，故TPPA和ELISA－TP檢測結果不能用于觀察療效、復發(fā)及再感染評估。

綜上所述，TPPA和ELISA－TP的靈敏度、特異度以及Youden指數(shù)均高于TRUST，更適合用作臨床診斷梅毒的實驗室檢測方法，但每種檢驗方法均有各自的特點，臨床工作者需根據(jù)患者實際情況，選擇正確的優(yōu)化組合進行檢測，提高檢出率與診斷正確率。

［1］ 胥國強，康清秀，蒲澤宴，等.4種方法檢測梅毒螺旋體抗體結果的比較及應用評價［J］.國際檢驗醫(yī)學雜志，2011，32（16）：1869－1870.

［2］ 王碧玉，曾自如.膠體金法、酶聯(lián)免疫吸附試驗和明膠顆粒凝集試驗檢測血清梅毒抗體的結果比較［J］.右江民族醫(yī)學院學報，2011，33（2）：210－211.

［3］ 劉靜，劉婕，鞏瑜，等.5種血清學方法檢測梅毒螺旋休抗體的評價［J］.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志，2014，29（4）：103－105.

［4］ 顧友祥，姜俊.多種梅毒抗體檢測方法的比較［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2012，9（4）：391－392.

［5］ 楊曉東，吳大富，饒麗華，等.三種梅毒抗體檢測方法在臨床應用中的評價［J］.山西醫(yī)藥雜志，2014，43（22）：2691－2692.

［6］ 汪偉，魯懷偉.梅毒4種檢測方法的比較［J］.安徽醫(yī)學，2013，34（2）：193－194.

［7］ 陳云，王厚照，張玲，等.梅毒螺旋體抗體三種檢測方法的價值比較［J］.臨床軍醫(yī)雜志，2012，40（5）：1197－1198.

［8］ 馬連學，李艷菊.梅毒螺旋體抗體三種血清學方法應用評價［J］.中國實驗診斷學，2010，14（1）：116－117.