三種方法在尿液白細(xì)胞檢測中的使用分析

梁文彬

(梅州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 梅 州514011)

由于尿液標(biāo)本容易采集，所以尿液檢驗(yàn)已廣泛應(yīng)用于臨床疾病的輔助診斷、疾病進(jìn)展監(jiān)測、治療效果或并發(fā)癥的監(jiān)測，以及對(duì)無癥狀人群進(jìn)行的先天性或遺傳性疾病的篩查[1，2]。隨著尿液分析儀及尿沉渣儀的發(fā)明使用，使尿液檢測更加方便、快捷，準(zhǔn)確，可標(biāo)準(zhǔn)化，改變了傳統(tǒng)單一顯微鏡鏡檢方法提高了工作效率[3-5]。但通過對(duì)1000例尿液樣本的白細(xì)胞分析發(fā)現(xiàn)，三種檢測方法應(yīng)聯(lián)合使用，才能更好地提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1 材料與方法

1.1儀器與試劑 桂林優(yōu)利特200B尿液分析儀，UF-500全自動(dòng)尿沉渣儀及配套試劑和質(zhì)控物；奧林巴斯雙目顯微鏡及玻片。

1.2 標(biāo)本來源 收集2014年5月份共1000例住院病人留取的晨尿各30ml,其中男性385例，女性615例，年齡：8~85歲。晨尿：早晨5~6時(shí)排空小便后，隔段時(shí)間再次留取的中段尿。

1.3 方法

1.3.1 用一次性尿杯收集上述住院病人留取的晨液30ml，避免污染，混勻后分別取10ml分為三管。

1.3.2 第一管尿液標(biāo)本由尿液分析儀檢測，把試紙條浸入尿液中1~2s后取出,浸入濾紙吸收多余的尿液，然后放入優(yōu)利特200B尿液分析儀自動(dòng)檢測。

1.3.3 第二管尿液標(biāo)本放入U(xiǎn)F-500全自動(dòng)尿沉渣儀試管架中，全自動(dòng)檢測尿沉渣。

1.3.4 第三管尿液標(biāo)本，放入離心機(jī)經(jīng)1500r/min離心沉淀5min后，棄去上清液，把剩余的200μl混勻后取其中20μl涂片顯微鏡鏡檢，計(jì)數(shù)10個(gè)高倍鏡視野的白細(xì)胞數(shù)，統(tǒng)計(jì)平均每個(gè)高倍視野值。

1.3.5 以上方法都是在相同條件下，并在儀器運(yùn)轉(zhuǎn)正常，質(zhì)量控制結(jié)果在控的前提下，嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，由熟練的檢驗(yàn)人員進(jìn)行聯(lián)合檢測。

1.4 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 白細(xì)胞值：(1)優(yōu)利特200B尿液分析儀報(bào)告：陰性：(<15/μl)，陽性：(≥15/μl)。 (2)UF-500全自動(dòng)尿沉渣儀報(bào)告：陰性：(<15/μl)，陽性：；(3)顯微鏡鏡檢報(bào)告：陰性：0~5/HP，陽性： >5/HP[7]。

2 結(jié)果

2.1 表1顯示尿液分析儀,尿沉渣儀,顯微鏡人工鏡檢測陰性率分別為：78.5%、74.5%、76.8%，尿液分析儀陰性率最高，尿沉渣儀陰性率最低。見表1。

表1 三種方法檢測白細(xì)胞陰性率

2.2 表2尿液分析儀假陽性率為4.4%，假陰性率為8.6%，與鏡檢符合率為87%，尿沉渣儀假陽性率為3.3%，假陰性率為1.7%，與鏡檢符合率為95%。白細(xì)胞檢測尿沉渣儀各種指標(biāo)都優(yōu)于尿液分析儀。見表2。

3 討論

尿液分析儀試帶法檢查尿液白細(xì)胞的原理：尿中中性粒細(xì)胞含酯酶能水解吲哚化合物，其產(chǎn)物與重氮鹽反應(yīng)生成紫色物質(zhì)，其顏色與酯酶活性成正比，借此原理估計(jì)尿中白細(xì)胞的數(shù)量[8]。此法只能測中性粒細(xì)胞，尿液中污染甲醛或含有高濃度膽紅素或使用某些藥物時(shí)，會(huì)產(chǎn)生假陽性；尿蛋白>3g/L；不新鮮尿液或酸堿度的變化對(duì)白細(xì)胞破壞崩解可造成尿液分析儀結(jié)果陽性，而顯微鏡鏡檢為陰性[9]。

表2 尿液分析儀和尿沉渣儀白細(xì)胞測定結(jié)果與顯微鏡鏡檢符合率及假陰性率和假陽性率

尿沉渣分析儀應(yīng)用了流式細(xì)胞和電阻抗原理：根據(jù)每個(gè)尿液標(biāo)本的直方圖和散射圖來區(qū)分細(xì)胞及其形態(tài)。它為尿沉渣的檢測提供自動(dòng)化的檢測手段，能客觀的分析尿沉渣的各種有形成分，快速檢測尿液標(biāo)本，并對(duì)有形成份進(jìn)行定量檢測。其影響因素有:(1)小圓上皮細(xì)胞及小管型，酵母菌，連體孢子，精子及磷狀上皮細(xì)胞等都能夠干擾白細(xì)胞的計(jì)數(shù)。(2)白細(xì)胞形態(tài)在尿液不同的酸堿度及滲透壓，形態(tài)變化較大，破壞及死亡的白細(xì)胞形態(tài)體積及顆粒密度變化較大，容易計(jì)錯(cuò)。(3)當(dāng)尿液中白細(xì)胞成團(tuán)聚集在一起時(shí)，儀器則視為非白細(xì)胞，不會(huì)對(duì)其計(jì)數(shù)[10]。

鏡檢是利用顯微鏡技術(shù)對(duì)尿沉渣進(jìn)行檢查，在尿中能夠看到的有形成份有各種細(xì)胞、管型及結(jié)晶等，對(duì)這些有形成份的識(shí)別、鑒定及計(jì)數(shù)，對(duì)泌尿系統(tǒng)的鑒別診斷，病情觀察，判斷預(yù)后等有重要意義[11,12]。但是白細(xì)胞在不同因素下容易變形破碎，造成無法識(shí)別。所以此法雖然直觀，但比較繁瑣，不能標(biāo)準(zhǔn)化，誤差率較高。

可見，三種方法檢測尿中白細(xì)胞原理及影響因素不同，單獨(dú)任何一種或兩種聯(lián)合檢測，都不能保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

尿沉渣定量檢測自動(dòng)化程度高，易標(biāo)準(zhǔn)化，重復(fù)性又好，能夠精確地測量到白細(xì)胞的準(zhǔn)確數(shù)量，并能夠依靠數(shù)量上的微弱變化，更好的指導(dǎo)臨床的治療用藥。但易受各種因素的影響，會(huì)出現(xiàn)假陽性和假陰性[13,14]。尿液分析儀檢測方式自動(dòng)化程度高，易標(biāo)準(zhǔn)化，又簡便、快捷、檢測項(xiàng)目多，標(biāo)本用量少，重復(fù)性又好，但其是一種半定量的檢測方法，不能精確的測定白細(xì)胞的數(shù)量，易受各種因素的影響，假陽性和假陰性都偏高[15]。尿沉渣鏡檢作為最傳統(tǒng)的檢查方法缺點(diǎn)很多，優(yōu)點(diǎn)不突出，但不可或缺，在所有教科書都將它作為尿沉渣檢查的金標(biāo)準(zhǔn)。在相當(dāng)長的時(shí)間里，它與尿液分析儀聯(lián)合使用，優(yōu)點(diǎn)明顯，因?yàn)槟蛞悍治鰞x檢查白細(xì)胞受其原理的影響，假陰性率較高，易漏檢，兩者聯(lián)合，避免了尿液分析儀的漏檢現(xiàn)象，但有一定的局限性，不能定量計(jì)數(shù)且速度慢[15,16]。

尿沉渣分析儀可同時(shí)定量檢測多種項(xiàng)目，優(yōu)點(diǎn)突出，現(xiàn)今很多醫(yī)院在檢查尿常規(guī)時(shí)，使用尿沉渣分析儀與尿液分析儀聯(lián)合檢測，提高了效率，基本上放棄了顯微鏡人工鏡檢。但是尿中白細(xì)胞受多種因素的影響，要保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，顯微鏡鏡檢不可忽視。如今各醫(yī)院標(biāo)本檢測量都非常大，不可能對(duì)檢測結(jié)果都一一進(jìn)行顯微鏡鏡檢，從而降低檢測的速度，不能發(fā)揮先進(jìn)儀器的作用。筆者認(rèn)為，尿沉渣儀跟尿液分析儀聯(lián)合測定白細(xì)胞，根據(jù)尿沉渣儀假陰性率低，與顯微鏡鏡檢符合率高的特點(diǎn)，對(duì)尿沉渣儀跟尿液分析儀測定陰性，可考慮不用顯微鏡鏡檢，如兩者不符，須進(jìn)行顯微鏡鏡檢。尿沉渣儀跟尿液分析儀屬快速過篩試驗(yàn)，有其的優(yōu)越性，但上表統(tǒng)計(jì)可見，受各種因素的影響，其假陽性，假陰性并不少見，跟傳統(tǒng)的顯微鏡鏡檢符合率也不能達(dá)到百分之百，只有三者聯(lián)合檢測才能提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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