通過生豬生產(chǎn)鏈追蹤耐甲氧西林金黃色葡萄球菌

隨著人們對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus，MRSA）愈加了解，其對(duì)公共衛(wèi)生的威脅已有所下降。然而，這并不意味著所有的謎團(tuán)都已解開。比利時(shí)科研人員對(duì)豬肉生產(chǎn)鏈中的MRSA傳播進(jìn)行了廣泛的研究，并對(duì)多株分離株進(jìn)行了分類。

當(dāng)然，這已經(jīng)不是2007年了。在那一年，人們都在圍繞耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus，MRSA）這一炙熱的話題進(jìn)行國(guó)際性討論。該耐藥菌一開始在荷蘭的豬群中發(fā)現(xiàn)，隨后周邊國(guó)家的豬群也相繼出現(xiàn)。直至這些年，MRSA主要影響免疫力下降的住院病人，例如對(duì)老年人；對(duì)老年人來說，該細(xì)菌可能是致命的。因而，在養(yǎng)豬生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)有MRSA的存在，引起人們對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)中使用抗生素及其對(duì)引起細(xì)菌耐藥性的潛在風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了廣泛討論。許多人擔(dān)心人類健康可能會(huì)因此受到威脅。

在2013年，人們對(duì)MRSA已經(jīng)有了較多的了解，來自農(nóng)業(yè)和漁業(yè)研究所（Institute for Agricultural and Fisheries Research，ILVO）的食品安全研究主任Marc Heyndrickx教授說：“我們現(xiàn)在知道與家畜相關(guān)的MRSA并不會(huì)直接威脅人類，基于這一點(diǎn)，我們無須像6年前那樣過分擔(dān)心。然而，所不同的是MRSA的特性在于其有很強(qiáng)的適應(yīng)性。它能夠很容易地獲得及丟失某些基因，因而能輕易地轉(zhuǎn)移某些抗性基因。從長(zhǎng)遠(yuǎn)來看，這可能是需要提防的地方，因此與家畜相關(guān)的MRSA威脅并沒有完全消除?！?/p>

Heyndrickx說到的是與家畜相關(guān)的MRSA——因?yàn)椴⒉皇撬械腗RSA都一樣。常規(guī)的做法是將MRSA分為3種不同的類型，它們都具有（略微）不同的基因組成和毒力。顧名思義，醫(yī)院獲得性MRSA主要存在于醫(yī)院，可感染老年人和免疫力低下的人群，如重癥監(jiān)護(hù)病人。此外，還有一種類型的MRSA被定義為“社區(qū)獲得性MRSA”。ILVO的食品安全研究員Marijke Verhegghe博士解釋稱：“這類變種相對(duì)來說已為人所知。社區(qū)獲得性MRSA在普通人群中廣泛傳播，并已對(duì)醫(yī)院使用的某些抗生素慢慢產(chǎn)生了耐藥性。社區(qū)獲得性MRSA毒力較強(qiáng)，但通常其對(duì)抗生素的耐藥性不是很高。”

Verhegghe解釋說，在歐洲，家畜相關(guān)的MRSA一般來源于ST398克隆株?！霸谛竽翗I(yè)生產(chǎn)中可以發(fā)現(xiàn)這點(diǎn)，而且在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，該病毒能感染人。在醫(yī)院很少發(fā)現(xiàn)這種類型的MRSA，這已得到多項(xiàng)研究證實(shí)。此外，該克隆株通常對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)中使用的抗生素具有耐藥性，甚至對(duì)在醫(yī)院使用的抗生素也有一定程度的耐藥性。

1 臨床試驗(yàn)

家畜相關(guān)的MRSA可能不太容易傳播到醫(yī)院，但它是如何在農(nóng)場(chǎng)傳播并最終導(dǎo)致豬肉污染呢？為了更多地了解MRSA可能利用的確切傳播途徑，在2009～2012年，Verhegghe在比利時(shí)的農(nóng)場(chǎng)中進(jìn)行了廣泛研究。該研究主要在羅斯勒周邊地區(qū)進(jìn)行，該地區(qū)位于法蘭德斯生豬養(yǎng)殖區(qū)的中心地帶。由于混合型農(nóng)場(chǎng)在比利時(shí)是相對(duì)普遍的現(xiàn)象，因而她將這一現(xiàn)象也包括在研究中。屠宰場(chǎng)和屠宰程序在她的概述中都有提及。

Verhegghe的研究分為4個(gè)步驟：

● 首先，調(diào)查30家農(nóng)場(chǎng)，并采集MRSA病例的樣本。

● 其次，選取4家農(nóng)場(chǎng)，對(duì)每家農(nóng)場(chǎng)的12頭母豬產(chǎn)下的仔豬從出生直至屠宰進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

● 再次，在豬運(yùn)往屠宰場(chǎng)的過程中，采集各組中一頭豬的胴體樣本。

● 最后，分析食物鏈——來自屠宰場(chǎng)的豬肉是否存在MRSA？

在研究MRSA的侵襲路徑時(shí)，鑒別和分類的問題又一次出現(xiàn)。由于MRSA基因組的適應(yīng)性極強(qiáng)，似乎存在很多分離株，因而需要一種先進(jìn)有效的方法用以鑒定某一時(shí)期何種MRSA分離株占主導(dǎo)。在研究了幾種分型方法之后，相對(duì)較新的MLVA分型法應(yīng)運(yùn)而生，全稱為“多位點(diǎn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列分析”，該方法能有效區(qū)分MRSA分離株。

根據(jù)縱向研究的結(jié)果制成圖1，由此可有助于了解眾多遺傳變種菌株。在豬生長(zhǎng)的不同階段，通常會(huì)發(fā)現(xiàn)MRSA的不同菌株。一些菌株在每個(gè)農(nóng)場(chǎng)均有出現(xiàn)，一些在部分農(nóng)場(chǎng)出現(xiàn)，而另一些在下次檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)或已消失。

2 高和低的定植率

第1步的結(jié)果：對(duì)30家農(nóng)場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)，與農(nóng)場(chǎng)中其他動(dòng)物相比，豬明顯更易感染MRSA。在30家農(nóng)場(chǎng)中，10家農(nóng)場(chǎng)只飼養(yǎng)豬，10家農(nóng)場(chǎng)混合飼養(yǎng)豬和家禽，另外10家農(nóng)場(chǎng)同時(shí)飼養(yǎng)豬和牛。在這30家農(nóng)場(chǎng)的26家中，發(fā)現(xiàn)豬存在MRSA定植。在混合飼養(yǎng)的農(nóng)場(chǎng)中，從家禽和牛中也能分離到耐藥菌株，但耐藥性不及在豬中分離的菌株強(qiáng)（表1）。

研究的第2步，對(duì)生豬生產(chǎn)各個(gè)階段的MRSA流行情況進(jìn)行縱向研究，得出了不平常的結(jié)論?？梢悦黠@區(qū)分所謂的“高定植率”和“低定植率”農(nóng)場(chǎng)。如圖2所示，在高定植農(nóng)場(chǎng)（農(nóng)場(chǎng)C和D），母豬在產(chǎn)仔時(shí)已有MRSA定植，仔豬在剛出生后出現(xiàn)了MRSA定植，僅幾天后定植率高達(dá)100 %。另一方面，在低定植率農(nóng)場(chǎng)（農(nóng)場(chǎng)A和B），仔豬在哺乳期并未出現(xiàn)或僅有少量的MRSA定植。一旦仔豬進(jìn)入斷奶期，MRSA定植數(shù)急劇上升。

有多種理論可以解釋這其中的差別。Verhegghe指出了一種可能性，即斷奶應(yīng)激可能在MRSA感染過程中發(fā)揮重要作用。Heyndrickx做了以下假設(shè)，“很可能是當(dāng)仔豬感染甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（Methicillin-Susceptible Staphylococcus Aureus，MSSA）或其他金黃色葡萄球菌時(shí)，感染MRSA的機(jī)會(huì)會(huì)減少。即使相互感染，不同的金黃色葡萄球菌會(huì)為了自己的生存位置競(jìng)爭(zhēng)，而且有跡象表明，當(dāng)MSSA已經(jīng)存在時(shí)，MRSA不易定植。當(dāng)斷奶后使用對(duì)其他金黃色葡萄球菌敏感的抗生素時(shí)，MRSA會(huì)有更多的定植機(jī)會(huì)?！?最后出現(xiàn)的情況是，當(dāng)豬年齡增長(zhǎng)且抗生素使用減少時(shí)，在之后的肥育期MRSA的發(fā)病率會(huì)再次回落。

總而言之，農(nóng)場(chǎng)中的仔豬和母豬都可能是感染源。有證據(jù)表明，環(huán)境也可能發(fā)揮一定的作用。此外，Verhegge還總結(jié)了其他一些結(jié)論。在用遺傳手段標(biāo)記了一些分離株后，她發(fā)現(xiàn)極少有分離株在感染中真正能占據(jù)主導(dǎo)地位；母豬中的MRSA分離株與其所產(chǎn)仔豬的MRSA分離株并不總是一致；有些MRSA分離株有區(qū)域特異性；有些可能與環(huán)境有關(guān)。

3 屠宰場(chǎng)

第3步在一家屠宰場(chǎng)進(jìn)行，從一批豬的40個(gè)半片胴體中進(jìn)行棉拭采樣：每片胴體采食6個(gè)不同的部位——后肢、腹部、背部、小腸腔、胸骨和前肢。在47 %的胴體樣本中發(fā)現(xiàn)了家畜相關(guān)的MRSA。大部分MRSA發(fā)現(xiàn)于前肢樣本。Verhegghe認(rèn)為，“這最可能與去除內(nèi)臟過程中對(duì)前肢的關(guān)注相對(duì)較少有關(guān)。值得一提的是，這僅是在一家衛(wèi)生狀況極佳的屠宰場(chǎng)得到的研究結(jié)果?！?/p>

最后一步，在4家肉食店進(jìn)行豬肉檢測(cè)——再次采集6種不同的豬肉類型樣本。在6周的時(shí)間里，從排骨、培根、肉末、肋骨、耳朵和前肢采集樣本。在檢測(cè)的所有類型的豬肉樣本中，超過50 %檢測(cè)到了MRSA，不過大部分樣本的污染水平較低。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)肋骨、前肢和耳朵最容易被污染，其中耳朵樣本污染率達(dá)到100 %。Verhegghe評(píng)論說：“排骨污染的原因容易解釋，這是因?yàn)樵谕涝讏?chǎng)搬運(yùn)胴體或從卡車搬運(yùn)到肉食店時(shí)，排骨通常容易被擠壓。前肢和耳朵容易污染的原因在于胴體燙毛時(shí)有時(shí)并不充分?！?/p>

4 研究意義

了解MRSA的所在及其如何傳播顯然會(huì)有助于生產(chǎn)者防止其進(jìn)一步傳播。Verhegghe總結(jié)說：“因此更有效的衛(wèi)生措施可以有助于減少M(fèi)RSA發(fā)生的次數(shù)。” 她指出，如果豬肉生產(chǎn)商與豬直接接觸，則應(yīng)注意手部衛(wèi)生；同時(shí)應(yīng)使用衛(wèi)生防護(hù)品，穿特殊的防護(hù)服。

退一步說，Verhegghe的發(fā)現(xiàn)以及國(guó)際研究勾勒出了豬肉總生產(chǎn)鏈和家畜相關(guān)性MRSA可能傳播路徑的一幅框架圖。

Heyndrickx說：“如果每天與豬接觸，在理論上家畜相關(guān)性MRSA可能會(huì)影響人類。據(jù)了解，養(yǎng)豬生產(chǎn)者、獸醫(yī)和屠宰場(chǎng)人員可能會(huì)攜帶MRSA細(xì)菌。但是，在正常情況下，與人體接觸24 h后MRSA會(huì)消失。 而且，由于MRSA很難在人與人之間傳播，即使豬場(chǎng)中同住一屋的人，或住在豬場(chǎng)但通常不進(jìn)入豬舍的人員，都不容易攜帶該細(xì)菌?！睂?duì)平常人來說，對(duì)豬肉進(jìn)行適當(dāng)?shù)呐腼儗?huì)避免出現(xiàn)很多問題，因?yàn)楦邷貢?huì)殺死該細(xì)菌。Heyndrickx說：“一手拿著生肉，一手擦鼻子，很可能會(huì)傳播該細(xì)菌，但即使這樣，得病的可能性也很小。”□□

原題名：Following MRSA through the pig production chain（英文）

原作者：Vincent ter Beek