仙鶴草研究進展

靳淼 劉思余

摘要 綜述了近年來仙鶴草的化學成分、提取純化工藝、藥理作用等方面的國內(nèi)外研究進展，為仙鶴草的深入研究和進一步開發(fā)利用提供參考。

關(guān)鍵詞 仙鶴草；化學成分；藥理作用；提純工藝

中圖分類號 S567 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2015）19-078-02

仙鶴草為薔薇科龍芽草屬龍芽草Agrimonia pilosa Ledeb Var.japonica（Miq.）Nakai 的干燥地上部分，別名脫力草、石打穿、狼芽草、瓜香草、老牛筋等，分布范圍廣泛，為常用中藥材。仙鶴草苦、澀、平，歸心、肝經(jīng)，可收斂止血、截瘧、止痢、解毒、補虛，用于咯血、吐血、崩漏下血、瘧疾、血痢、癰腫瘡毒、陰癢帶下、脫力勞傷等癥[1]。近年來，隨著對其研究的不斷拓展，進一步擴展了仙鶴草的藥用價值。筆者在此通過對仙鶴草的研究發(fā)展現(xiàn)狀進行綜述，以期為仙鶴草的進一步開發(fā)利用提供參考。

1 化學成分

仙鶴草的化學成分主要為黃酮類、三萜類、揮發(fā)油、鞣質(zhì)類、酚類等，并含有鎂、鉀、磷、鐵、硫等微量元素。

1.1 黃酮類 近年來研究發(fā)現(xiàn)仙鶴草中黃酮類成分主要有山柰酚3-O-（6-p-香豆?；?β-D-吡喃葡萄糖苷、山柰酚3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、槲皮素3-O-α-L-吡喃鼠李糖、槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山柰酚3-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚、芹菜素、木犀草素、槲皮素、銀鍛苷、漢黃芩素、異槲皮苷、蘆丁等[2-4]。

1.2 酚類 早些年對酚類的研究主要集中在仙鶴草酚類主要成分鶴草酚的含量上，近些年劉紅霞等采用溶劑萃取法和各種分離純化方法，對仙鶴草全草乙酸乙酯萃取部分的化學成分進行了研究，分離出pilosanol C、去氫雙兒茶素A、（+）-兒茶素、（2S，3S）-（-）-花旗松素、異香草酸、反式對香豆酸、原兒茶酸、原兒茶醛[5]。路芳等從仙鶴草中分離得到仙鶴草酚B[4，6]。

1.3 揮發(fā)性成分 趙瑩等通過GS-MS聯(lián)用分析了仙鶴草干燥全草揮發(fā)油中的化學成分，其主要成分為酮、醇、酸、酯及許多烴類化合物，其中含量最多的是6，10，14-三甲基-2-十五烷酮，其次為α-沒藥醇[7]。李雅文等從仙鶴草揮發(fā)油樣品中共分離出56個色譜峰，經(jīng)鑒定其主要組分為醇和單萜類化合物，分別占總化合物的50.58%和18.34%[8]。杜成智等則通過GC-MS方法分析了不同產(chǎn)地仙鶴草揮發(fā)油的化學成分，浙江省產(chǎn)仙鶴草揮發(fā)油主要成分有棕櫚酸、柏木腦、左旋乙酸冰片酯等，湖南省產(chǎn)仙鶴草揮發(fā)油主要成分有棕櫚酸、（-）-α-芹子烯、β-甜沒藥烯等，廣西壯族自治區(qū)產(chǎn)仙鶴草揮發(fā)油主要成分有棕櫚酸、亞油酸、石竹素等[9]。

1.4 微量元素 姜鳳等通過ICP-AES法測定發(fā)現(xiàn)，仙鶴草中含多種微量元素，其中Ca、Mg、K和P 等元素含量較高，F(xiàn)e、S、Na等微量元素含量次之[10-11]。

1.5 其他 仙鶴草中還含有三萜類，如齊墩果酸、烏蘇酸、19α，24-二羥基烏蘇酸、胡蘿卜苷；有機酸，如委陵菜酸；鞣質(zhì)，如3，3′-二甲基鞣花酸；甾醇類，如β-谷甾醇；醇類，如三十二烷醇、三十一烷醇；脂肪酸，如十九烷酸、十六烷酸、二十烷酸、二十七烷酸[3-4]。

2 活性成分的提取純化工藝研究

高速逆流色譜（ high- speed counter cur rent chromat-ogr aphy，HSCCC）是一種液液分配色譜，利用了特殊的流體動力學現(xiàn)象，使2種互不相溶的溶劑在相對高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管中單向分布。如用其中一相溶劑作固定相，則恒流泵可以輸送載著樣品的流動相穿過固定相，利用樣品中各組分在兩相中分配系數(shù)的不同而實現(xiàn)分離[12]。因為不采用任何固體填料，不會產(chǎn)生固體載體所造成的吸附耗損等問題，故而樣品回收率高。除此之外，對樣品的預處理要求較低，一般的粗提取物即可分離，儀器操作簡單、分離快速、重現(xiàn)性好。Wang等首先利用D101大孔樹脂粗提，然后通過高速逆流色譜技術(shù)，很好地分離出仙鶴草的5種活性成分[13]。

微波是一種高頻電磁波，有很強的穿透力，能透射入微波場內(nèi)的物體，使其內(nèi)部的極性分子隨著微波的周期以每秒幾十億次的速度來回振動摩擦，產(chǎn)生高熱，同時這種振動摩擦也會對物體內(nèi)部的細胞產(chǎn)生一定的破壞作用，促進有效成分的溶出。Jin等通過微波輔助萃取法提取了仙鶴草中的鞣質(zhì)，表明當輻照功率500 W、輻照溫度30 ℃、時間為15 min時，提取率可達128.65 mg/g，提取效果最好[14]。說明微波輔助萃取法不失為提取仙鶴草鞣質(zhì)的好方法。Wang等分別用微波輔助水蒸氣蒸餾與水蒸氣蒸餾法提取仙鶴草揮發(fā)油，結(jié)果表明微波輔助水蒸氣蒸餾法更加節(jié)省時間和原料，通過GC-FID和GC/MS對所提揮發(fā)油成分測定，發(fā)現(xiàn)微波輔助水蒸氣蒸餾法并未因微波照射對成分有不良影響[15]。

除此之外，朱立俏等以總多酚和總黃酮比吸附量和解吸附率為指標，動態(tài)吸附法考察4種樹脂的吸附效果，結(jié)果表明以XDA-5 型大孔樹脂吸附分離性能較好，適合于仙鶴草中總多酚和總黃酮的分離純化[16]。李彩霞等通過正交試驗優(yōu)選了仙鶴草中總黃酮的提取工藝，認為最佳提取工藝為50%乙醇、8倍量溶劑、回流提取2次、每次提取1 h[17]。

3 藥理作用研究

3.1 抗氧化活性 仙鶴草對一些疾病的作用很大程度由于其抗氧化作用。王云等以丙酮和水（7∶3）作為提取劑提取黔東南產(chǎn)仙鶴草原花青素，通過鐵鹽催化法測定原花青素含量為236.60 mg/g，在30 μg/ml時，其對DPPH 自由基的清除率高達92.85%，是良好的抗氧化劑[18]。石君杰等研究認為運動性疲勞大鼠心肌MDA 含量顯著升高，SOD、GSH-Px、T-AOC 活性顯著降低，而仙鶴草醇提取物干預能增加運動性疲勞大鼠力竭運動時間，降低心肌MDA 含量，升高SOD、GSH-Px、T-AOC活性，說明仙鶴草醇提取物可能通過提高運動性疲勞大鼠心肌抗氧化能力、降低脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而緩解運動性疲勞的心肌氧化應(yīng)激損傷[19]。此外仙鶴草水提液具有抗衰老作用，其水提液可影響D-半乳糖衰老模型小鼠的衰老指征，使D-半乳糖衰老模型小鼠學習記憶能力提高，大腦SOD 活性增加，而MDA 含量下降[20]。Liu等認為仙鶴草對治療型糖尿病有潛在價值，因為仙鶴草中黃酮類化合物和三萜類化合物對α-葡萄糖苷酶有很強的抑制作用，除此之外黃酮類化合物有較明顯的自由基清除能力，其對DPPH、羥基自由基和ABTS的EC50分別為7.73、3.64和5.90 μg/ml；三萜類化合物在抑制β-胡蘿卜素漂白試驗中也顯示出中度抗脂質(zhì)過氧化作用[21]。

3.2 抗腫瘤作用 近些年的研究表明，仙鶴草對腫瘤有很好的療效。宛春雷等通過70%丙酮提取過濾濃縮仙鶴草粉末，再對提取液用正丁醇、乙酸乙酯進行多次萃取，并用AB-8型大孔樹脂純化精制得其鞣質(zhì)成分；然后用精制后乙酸乙酯層的鞣質(zhì)成分對HepG2腫瘤細胞和BEL-7402腫瘤細胞進行MTT藥理試驗研究，發(fā)現(xiàn)2種細胞的生長增殖作用被抑制，并在一定范圍內(nèi)隨著藥物濃度的增大而增強[22]。李鵬等通過MTT試驗以及流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)，仙鶴草酚能有效抑制K562白血病細胞的活性，增加其凋亡率，但對正常造血細胞幾乎沒有抑制[23]。鄒夏慧等用仙鶴草水提液體外作用于SMMC-7721肝癌細胞發(fā)現(xiàn)細胞凋亡率明顯提高，表明誘導細胞凋亡可能是仙鶴草抗肝癌細胞的主要機制之一，通過測定與凋亡有關(guān)的Bcl-2和P53蛋白，認為凋亡機制可能與Bcl-2蛋白表達下調(diào)和P53蛋白表達上調(diào)有關(guān)[24]。

3.3 抗炎作用 仙鶴草甲醇提取物可以減弱被激活的巨噬細胞和嗜堿粒細胞，控制OVA誘導的氣道炎癥，為各種炎癥性疾病包括哮喘提供新的治療策略[25]。Jung等研究認為仙鶴草正丁醇提取物可通過抑制一氧化氮合成酶來抑制一氧化氮合成起到抗炎作用[26]。

3.4 其他 近些年對仙鶴草在其他疾病上的作用也進行了研究。Lee等研究認為仙鶴草可用來改善因雌激素缺乏有關(guān)的更年期癥狀或治療絕經(jīng)后婦女的疾病，可能與仙鶴草提取物不僅能阻滯雌激素拮抗劑傳導，還可增加雌激素敏感基因pS2 和 PR mRNA基因表達有關(guān)[27]。仙鶴草總鞣質(zhì)、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物對煙絲和煙氣中尼古丁有一定的清除作用，原因可能是鞣質(zhì)分子結(jié)構(gòu)中含有大量的酚羥基，可以與多種生物堿發(fā)生分子復合反應(yīng)[28]。費鮮明等研究發(fā)現(xiàn)仙鶴草水提物具有抗凝作用，可能通過抑制血小板Fg-R活化和釋放反應(yīng)途徑而抑制血小板聚集以及可能通過抑制內(nèi)源凝血途徑，也可能通過活化外源凝血途徑并增加血液黏度而具有促凝作用[29]。

4 其他研究

李龍梅等研究了在NaCl 脅迫下龍牙草植株的可溶性糖、SOD、 過氧化氫酶活性、葉綠素含量的變化，說明龍牙草對鹽脅迫有抵抗能力，這種抗性隨鹽濃度的增加而減弱[30-31]。

5 展望

近年來有關(guān)仙鶴草的研究日益增多，但主要集中在化學成分和藥理作用上，除了對其抗腫瘤作用研究外，其他如抗氧化、抗炎等研究也在廣泛進行，為仙鶴草的研究開發(fā)提供了基礎(chǔ)。但大多數(shù)作用機制尚不清晰、研究分析不夠深入、不良反應(yīng)研究較少，此外關(guān)于仙鶴草產(chǎn)地的研究也不是很多，只是進行了小范圍的分析，而這些均有待于進一步的探討。

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