外源酶對(duì)普洱生茶浸提液品質(zhì)的影響

于春花，宋文軍，*，李 霏，于 霞，康 潔，徐詠全，王光路

（1.天津市食品與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院，天津300134；2.云南天士力帝泊洱生物茶集團(tuán)有限公司，云南普洱665000）

外源酶對(duì)普洱生茶浸提液品質(zhì)的影響

于春花1，宋文軍1，*，李 霏1，于 霞1，康 潔1，徐詠全2，王光路2

（1.天津市食品與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院，天津300134；2.云南天士力帝泊洱生物茶集團(tuán)有限公司，云南普洱665000）

向普洱生茶浸提液中添加不同的外源酶（漆酶、蛋白酶、單寧酶），考察酶的種類(lèi)及劑量對(duì)浸提液內(nèi)含成分含量的影響。單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示添加不同濃度外源酶可顯著調(diào)節(jié)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分的比例，改善茶浸提液品質(zhì)。正交實(shí)驗(yàn)以茶褐素為指標(biāo)，結(jié)果顯示三種酶對(duì)茶褐素氧化貢獻(xiàn)由大到小順序?yàn)槠崦?、蛋白酶、單寧酶；三種酶最優(yōu)配比為：0.15%、0.05%、0.03%，此條件下，茶多酚含量28.71%，與酶處理前試樣比較降低了8.45%；可溶性糖、氨基酸、茶褐素含量分別為11.97%、3.58%、8.60%，是酶處理前的3.49倍、1.10倍、4.32倍。與渥堆發(fā)酵相比較，此工藝在較短時(shí)間內(nèi)改變了普洱生茶浸提液內(nèi)含成分配比，快速氧化形成茶褐素，使茶浸提液回甘效果增強(qiáng)，湯色紅濃明亮。本文為實(shí)現(xiàn)普洱茶產(chǎn)業(yè)走向酶法快速提高茶品質(zhì)的液態(tài)化道路奠定基礎(chǔ)。

普洱生茶，外源酶，液態(tài)酶轉(zhuǎn)化

普洱茶歷史悠久，屬云南特色茶，是由曬青毛茶經(jīng)特殊后發(fā)酵工序處理，制成具有醇、厚、甘、甜、滑等優(yōu)良品質(zhì)的普洱茶[1]。近年來(lái)，憑借其獨(dú)特的品質(zhì)特征、傳統(tǒng)的文化內(nèi)涵以及多種保健功能而備受廣大消費(fèi)者青睞，掀起了品與飲的熱潮。

普洱茶屬于后發(fā)酵茶，渥堆過(guò)程是其區(qū)別于其他茶類(lèi)的特殊工序，此工序?qū)ζ斩栊纬蓛?yōu)質(zhì)感官品質(zhì)和保健功效起著至關(guān)重要的作用。相關(guān)研究認(rèn)為：渥堆發(fā)酵是以微生物代謝生長(zhǎng)為中心，在酶促和濕熱共同作用下，曬青毛茶基質(zhì)內(nèi)含物發(fā)生一系列復(fù)雜反應(yīng)的過(guò)程，成為影響普洱茶品質(zhì)的關(guān)鍵步驟[2]。目前，酶技術(shù)在渥堆發(fā)酵中的應(yīng)用研究愈來(lái)愈多，其目的主要是為了縮短發(fā)酵周期及改善茶葉品質(zhì)。李中皓等[3]研究表明：蛋白酶用于普洱茶樣品可以促進(jìn)茶內(nèi)含成分轉(zhuǎn)化，改變內(nèi)含成分間比例，使茶湯滋味轉(zhuǎn)為醇厚且甘甜。楊富亞等[4]研究表明一定濃度的單寧酶、蛋白酶、多酚氧化酶等復(fù)合酶制劑處理普洱茶樣后可以明顯改變內(nèi)含成分含量，進(jìn)而改善茶葉品質(zhì)。還有研究將多酚氧化酶噴灑于普洱茶樣，經(jīng)40 d渥堆發(fā)酵后，茶多酚含量分別由原來(lái)的10.15%下降到8.03%，茶褐素由13.34%上升到13.60%，顯著改善了茶葉品質(zhì)[5]。付贏萱等[6]利用多酚氧化酶進(jìn)行為期18 d普洱茶渥堆發(fā)酵，茶多酚、茶褐素等成分的變化差異顯著，且在酶濃度為1.6、3.2 U/g時(shí)，普洱茶達(dá)到了陳年普洱茶品質(zhì)。目前，這些研究均是酶用于固態(tài)普洱茶發(fā)酵，而酶技術(shù)直接應(yīng)用于曬青毛茶浸提液的研究，國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道。與茶葉固態(tài)渥堆發(fā)酵相比，浸提液的液態(tài)酶解法更加直接，能使底物與酶充分接觸，反應(yīng)更加充分。本文主要研究不同濃度漆酶、蛋白酶和單寧酶及復(fù)合酶對(duì)曬青毛茶浸提液各主要成分及其品質(zhì)的影響，初步摸索在液態(tài)條件下，酶如何快速轉(zhuǎn)化茶的內(nèi)含成分及提高品質(zhì)，為實(shí)現(xiàn)普洱茶產(chǎn)業(yè)走向酶法快速提高茶品質(zhì)的液態(tài)化道路奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

云南大葉種曬青毛茶 天津市天士力研究所；中性蛋白酶 諾維信公司，酶活力500 U/g；漆酶 諾維信公司，酶活力200 U/g；單寧酶 南寧東恒華道生物科技有限責(zé)任公司，酶活力200 U/g；福林酚、水合茚三酮、蒽酮、正丁醇、草酸 國(guó)產(chǎn)分析純。

DHG-9070A鼓風(fēng)電熱恒溫干燥箱、HHS-6-S恒溫水浴鍋 上海宜昌儀器有限公司；T6新世紀(jì)可見(jiàn)分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；DS-1高速組織搗碎機(jī) 上海標(biāo)本模型廠。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 茶浸提液制備 將曬青毛茶置于搗碎機(jī)中粉碎后，過(guò)100目篩子，備用。

將1000 mL，85℃熱水加入到盛有20 g粉碎茶樣的燒杯中（保鮮膜封口），在85℃恒溫條件下，浸提15 min后過(guò)濾、定容至1000 mL，茶浸提液冷卻至40℃，分裝至100 mL三角瓶中待用。

1.2.2 酶解實(shí)驗(yàn) 酶制劑添加到100 mL茶浸提液中進(jìn)行內(nèi)含成分酶轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)采用酶轉(zhuǎn)化時(shí)間和溫度分別為4 h、40℃。100 mL不加酶茶浸提液為對(duì)照組。每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。酶轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，立即將對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組浸提液加熱到90℃進(jìn)行滅酶3 min處理，然后趁熱過(guò)濾，分析茶多酚、可溶性糖、茶褐素、氨基酸含量變化。

1.2.3 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 為摸索漆酶、蛋白酶、單寧酶三種酶在不同濃度下對(duì)普洱生茶浸提液品質(zhì)的影響，以不同濃度漆酶、蛋白酶、單寧酶作為變量因子，茶多酚、氨基酸、可溶性糖、茶褐素含量為指標(biāo)，按照

1.2.2 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。三種酶的濃度如下：

漆酶、蛋白酶濃度水平（%）：0.025、0.050、0.075、0.100、0.125、0.150；單寧酶濃度水平（%）：0.005、0.01、0.02、0.03、0.04。

1.2.4 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，設(shè)計(jì)三因素三水平L9（34）正交表，以普洱茶中重要的茶褐素作為主要檢測(cè)指標(biāo)，考察漆酶、蛋白酶、單寧酶對(duì)主要考察指標(biāo)的影響，正交設(shè)計(jì)因素水平表如表1所示。

表1 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表Table 1 Factors and levels of orthogonal experiment

1.2.5 指標(biāo)的測(cè)定

1.2.5.1 茶多酚測(cè)定 按照國(guó)標(biāo)GB/T 8313-2008茶葉中茶多酚和兒茶素類(lèi)含量的檢測(cè)方法[7]進(jìn)行測(cè)定。

1.2.5.2 茶褐素測(cè)定 采用系統(tǒng)比色分析法[8]對(duì)茶褐素測(cè)定。

1.2.5.3 游離氨基酸測(cè)定 采用GB/T 8314-2013茶游離氨基酸總量方法[9]測(cè)定游離氨基酸。

1.2.5.4 可溶性糖測(cè)定 采用蒽酮硫酸比色法[10]測(cè)定茶浸提液中可溶性糖含量。

1.3 數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel處理后，利用SPSS 16.0軟件進(jìn)行顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素實(shí)驗(yàn)

2.1.1 漆酶濃度對(duì)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分的影響不同濃度的漆酶對(duì)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分影響如表2所示。

表2 不同濃度漆酶對(duì)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分影響（x±SD）Table 2 Effect of different concentrations of laccase on Pu’er crude tea extracts components（x±SD）

茶多酚是茶葉中的關(guān)鍵品質(zhì)成分，經(jīng)發(fā)酵后其含量適中，茶湯滋味、色澤較好；其含量較高，茶湯滋味苦澀，反之滋味淡薄、湯色較黑[11]。表2顯示茶多酚含量隨著酶添加量增加呈極顯著下降趨勢(shì)（p＜0.01），說(shuō)明漆酶有促進(jìn)茶多酚氧化作用。滋味成分氨基酸含量也達(dá)到了顯著下降水平（p＜0.05）。浸提液經(jīng)漆酶處理后，茶多酚、氨基酸、可溶性糖和茶褐素含量與空白組相比較均發(fā)生不同程度的變化，最高級(jí)的氧化產(chǎn)物茶褐素以及掩蓋茶苦味、表現(xiàn)為“甘”的可溶性糖含量均隨著酶添加量增加達(dá)到呈極顯著上升趨勢(shì)（p＜0.01）。

以上數(shù)據(jù)除了可溶性糖外，其他內(nèi)含成分含量變化趨勢(shì)與吳楨普洱茶渥堆發(fā)酵過(guò)程中主要生化成分的變化趨勢(shì)大致相同[12]，這與漆酶具有使茶多酚、氨基酸、糖等物質(zhì)發(fā)生氧化聚合反應(yīng)形成茶褐色以及一些不溶物作用相一致。本研究中可溶性糖含量大幅度上升，可能原因可能是：束縛狀態(tài)下的茶多糖在酶和濕熱等作用下形成游離態(tài)；此研究中無(wú)微生物消耗糖類(lèi)物質(zhì)茶多糖可以部分積累?？扇苄蕴呛吭黾佑袃煞矫嬉嫣帲阂环矫嫜谏w和協(xié)調(diào)苦味、澀味，改善茶葉品質(zhì)、口感；另一方面發(fā)揮茶多糖降血糖、血脂、抗凝血、抗血栓、增強(qiáng)免疫力等多種對(duì)機(jī)體有利的保健功能[13-15]。

茶褐素和水溶性糖這兩種對(duì)人體有益的活性物質(zhì)含量高低直接反應(yīng)茶湯的色澤和滋味[16-17]，隨著二者含量的增多，茶湯顏色依次加深，回甘依次加強(qiáng)。在酶添加量為0.15%時(shí)，茶水浸提液中茶褐素含量達(dá)到了最大值6.58%，雖然沒(méi)有達(dá)到熟茶水平[18-19]，但是未加酶組的3.31倍，由此可見(jiàn)漆酶有促進(jìn)多酚類(lèi)物質(zhì)氧化，茶褐素積累的作用。若繼續(xù)增大酶用量，茶褐素含量有可能達(dá)到熟茶水平（占茶干重的10%～20%左右），但通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，酶濃度高于0.15%時(shí)，茶湯出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象；且生產(chǎn)成本提高，故酶添加量應(yīng)控制在0.15%以內(nèi)。

綜上，從經(jīng)濟(jì)、效果兩方面考慮，選擇0.05%、0.10%、0.15%為正交實(shí)驗(yàn)的三個(gè)水平。

2.1.2 蛋白酶濃度對(duì)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分的影響 不同濃度的蛋白酶對(duì)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分的影響如表3所示。

表3 不同濃度蛋白酶對(duì)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分影響（x±SD）Table 3 Effect of different concentrations of protease on Pu’er crude tea extracts components（x±SD）

由表3可知，茶多、氨基酸、可溶性糖以及茶褐素含量均呈上升趨勢(shì)。游離氨基酸不僅關(guān)系到茶葉鮮爽度，而且間接反映茶葉香氣物質(zhì)[20]。此數(shù)據(jù)與表2相比較，氨基酸含量變化較大，原因可能為：蛋白酶的作用主要是降解蛋白質(zhì)形成氨基酸，故氨基酸含量呈上升趨勢(shì)；同時(shí)蛋白酶將茶多糖茶中的蛋白質(zhì)降解，致使氨基酸含量上升。

茶褐色是普洱茶非常重要的特征成分，是由多酚類(lèi)、茶黃素、茶紅素進(jìn)一步的氧化、聚合轉(zhuǎn)化而成成分復(fù)雜的化合物[16，21]，其可能由糖類(lèi)、酚類(lèi)、蛋白質(zhì)、生物堿類(lèi)、色素等構(gòu)成[22-23]。本實(shí)驗(yàn)中茶褐素小幅度增加可能是與糖類(lèi)、酚類(lèi)以及蛋白質(zhì)聚合作用有關(guān)。

酶添加量為0.15%時(shí)，茶中茶多酚、氨基酸、可溶性糖以及茶褐素含量均達(dá)到了較高水平，且在此濃度下，可溶性糖含量達(dá)到最大值15.56%，而可溶性糖是茶的主要甜味成分，可掩蓋茶多酚的部分苦味，且含量越高，茶湯就越甘醇[17]。預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，酶添加量超過(guò)0.15%時(shí)，茶湯回甘的效果雖然顯著，但是茶湯出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，不利于茶品質(zhì)形成。

綜上，從經(jīng)濟(jì)和效果兩方面考慮，選擇0.05%、0.1%、0.15%為正交實(shí)驗(yàn)的三個(gè)水平。

2.1.3 單寧酶濃度對(duì)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分的影響 不同濃度的單寧酶對(duì)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分影響如表4所示。

表4 不同濃度單寧酶對(duì)普洱生茶浸提液內(nèi)含成分影響（x±SD）Table 4 Effect of different concentrations of tannin enzyme on Pu’er crude tea extracts components（x±SD）

由表4可以看出：普洱茶茶浸提液經(jīng)單寧酶處理后，其中內(nèi)含成分含量與空白組相比較均發(fā)生不同程度變化，茶多酚含量隨著酶添加量的增加而升高；氨基酸和茶褐色含量變化均呈顯著上升趨勢(shì)（p＜0.05），而糖的含量達(dá)到了極顯著上升水平（p＜0.01）。酶用量0.04%時(shí)，雖然茶湯含糖量達(dá)到最大值，但略帶酸味，而酸味不利于高品質(zhì)普洱茶形成，故酶用量控制在0.03%以內(nèi)。從經(jīng)濟(jì)、效果雙方面出發(fā)，梯度選擇0.005%、0.02%、0.03%為正交實(shí)驗(yàn)的三個(gè)水平。

2.2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

普洱茶發(fā)酵是微生物及其產(chǎn)生的酶系、濕熱作用等綜合作用下發(fā)生復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)，形成不同品質(zhì)茶的過(guò)程，微生物在此過(guò)程中形成的酶種類(lèi)較多，各種酶協(xié)調(diào)作用，因此本實(shí)驗(yàn)對(duì)漆酶、單寧酶以及蛋白酶按照表1進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5所示。

表5 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 5 Scheme and experimental results of the orthogonal experiment

茶褐素是茶多酚的最終氧化產(chǎn)物，水平的高低不僅反映茶發(fā)酵的程度，而且影響著茶湯的色澤及品質(zhì)。有研究顯示，普洱熟茶中茶褐素含量達(dá)到干茶重的10%～20%左右，而其含量低于5%時(shí)，為發(fā)酵不足[18-19]。還有研究分析了高、中、低三級(jí)普洱熟散茶中內(nèi)含成分，其中茶褐素在三等級(jí)茶中平均含量分別為：14.96%、13.99%、13.37%[24]。因此，本正交實(shí)驗(yàn)以茶褐素為主要指標(biāo)，探索復(fù)配酶促進(jìn)茶內(nèi)含成分氧化效果。

由表5可知，7號(hào)實(shí)驗(yàn)酶組合條件A3B1C3實(shí)驗(yàn)結(jié)果（茶褐素含量8.60%）最大，且與單酶處理茶浸提液后形成茶褐素含量最高數(shù)據(jù)（6.58%）相比較提高了30.70%，但是低于各個(gè)單酶處理茶浸提液的效果總和（茶褐素含量10.21%），說(shuō)明組合酶作用效果高于單一酶，但組合酶作用效果不是單一酶的效果簡(jiǎn)單相加。根據(jù)R值可知三種酶對(duì)茶褐素含量影響的主次順序?yàn)椋篈＞B＞C，即漆酶＞蛋白酶＞單寧酶，由k值確定最佳酶組合方式為：A3B1C3，恰為7號(hào)實(shí)驗(yàn)，即漆酶、蛋白酶、單寧酶的濃度分別為0.15%、0.05%、0.03%。在此條件下進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，茶多酚含量28.71%，與酶處理前組比較降低了8.45%；可溶性糖、氨基酸、茶褐素含量分別為11.97%、3.58%、8.60%，分別是酶處理前的3.49倍、1.10倍、4.32倍。此條件下處理的茶水浸提液與酶處理前相比較回甘強(qiáng)、澀味低、紅濃明亮。

3 結(jié)論

向云南普洱生茶浸提液中添加漆酶、蛋白酶、單寧酶外源酶，通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)考察酶對(duì)普洱茶品質(zhì)的影響：在40℃下處理4 h，三種酶的最優(yōu)添加量，分別為0.15%、0.05%和0.03%，此時(shí)茶浸提液主要成分茶多酚、可溶性糖、氨基酸、茶褐素含量分別為28.71%、11.97%、3.58%和8.60%，其中茶褐素含量是未經(jīng)酶處理的4.32倍。此工藝在較短時(shí)間內(nèi)顯著改變了普洱生茶浸提液內(nèi)在成分含量，品質(zhì)有大幅度提高，是十分有潛力的液態(tài)化生產(chǎn)高品質(zhì)普洱茶的工藝。

4 展望

普洱生茶浸提液酶解工藝使酶與底物充分接觸，進(jìn)而加快了茶內(nèi)含成分轉(zhuǎn)化，為縮短普洱生茶發(fā)酵周期，形成高質(zhì)量普洱茶提供了可能。此研究是酶液態(tài)化發(fā)酵普洱生茶工藝的初步探索，雖然取得了一定效果，但是普洱茶由“生”轉(zhuǎn)“熟”的發(fā)酵過(guò)程是多種酶參與、復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)，要形成高質(zhì)量的普洱茶（熟）還需要進(jìn)一步探索，還有諸多問(wèn)題有待解決：a.高效酶制劑開(kāi)發(fā)，由于普洱茶后發(fā)酵過(guò)程是多種酶協(xié)同作用的結(jié)果，因此，開(kāi)發(fā)合適的復(fù)合酶制劑可能會(huì)快速將普洱茶由“生”轉(zhuǎn)“熟”；b.普洱茶發(fā)酵過(guò)程中，酶種類(lèi)很多，且不同的酶在不同階段發(fā)揮作用，復(fù)合酶制劑的開(kāi)發(fā)可能存在弊端，故研究酶分段作用十分必要。c.廉價(jià)、高效酶制劑開(kāi)發(fā)，普洱茶發(fā)酵所用微生物擁有豐富的酶系，如果將微生物自身酶系制成酶種子液進(jìn)行普洱茶液態(tài)發(fā)酵，即可以解決利用復(fù)合酶制劑復(fù)配帶來(lái)的復(fù)雜問(wèn)題，又縮短發(fā)酵周期、降低生產(chǎn)成本。筆者進(jìn)一步需要解決的問(wèn)題是模擬渥堆發(fā)酵中酶的作用時(shí)段，探索酶分段作用機(jī)制，為普洱生液態(tài)化快速生產(chǎn)高品質(zhì)普洱茶的工藝的研究提供理論和實(shí)踐基礎(chǔ)。

[1]中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB/T 22111-2008地理標(biāo)志產(chǎn)品普洱茶國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

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Effect of exogenous enzymes on the quality of Pu’er crude tea extract

YU Chun-hua1，SONG Wen-jun1，*，LI Fei1，YU Xia1，KANG Jie1，XU Yong-quan2，WANG Guang-lu2
（1.Tianjin Key Laboratory of Food Biotechnology，College of Biotechnology and Food Science，Tianjin University of Commerce，Tianjin 300134，China；2.Yunnan Tasly Deepure Biological Tea Group Co.，Ltd，Pu’er 665000，China）

Studying on the influence of the type and dose of laccase，protease and tannase enzyme，which were added to Pu’er tea extract，on extract intrinsic component content.The single factor experimental results demonstrate that exogenous enzymes could significantly adjust Pu’er tea extract intrinsic component ratio and improve the quality of tea.To theabrownin prime targets for the main study，orthogonal experiment results showed that three enzymes contribution to theabrownin formation from big to small order for laccase，protease，tannin enzyme.The optimal proportion for three kinds of enzymes were 0.15%，0.05%，0.03%.The result showed that tea polyphenol contained 28.71%which was decreased 8.45%comparing with that before the treatment. The concentration of soluble sugar，amino acid acquire，theabrownin to 11.97%，3.58%，8.60%respectively under the conditions，which were 3.49，1.10，4.32 times than that before the process of enzyme treatment.This process revised the composition ratio of Pu’er crude tea extract and oxidates theabrownin rapidly in a short term，these transform significantly improved the quality of tea ranging from pure and mellow taste to glow color. It would promote the liquid process，that using enzyme to ameliorate the quality of tea.

Pu’er tea；exogenous enzyme；liquid enzymatic conversion

TS272

A

1002-0306（2015）22-0143-05

10.13386/j.issn1002-0306.2015.22.021

2015－04－02

于春花（1990-），女，碩士研究生，研究方向：發(fā)酵生物技術(shù)，E-mail：13682037285@163.com。

*通訊作者：宋文軍（1967-），男，博士，副教授，研究方向?yàn)椋喊l(fā)酵生物技術(shù)，E-mail：songwenjun@tjcu.edu.cn。