治療手足癬中藥處方優(yōu)選試驗＊

張 煒，馬守江，時利民

海島部隊官兵訓(xùn)練、工作和生活條件艱苦，流行病學(xué)調(diào)查顯示，部隊官兵以風(fēng)濕、痛風(fēng)、手足癬、體癬、濕疹及日光性皮炎等皮膚病多發(fā)［1］。手足癬的誘發(fā)因素較多，療程較長，因此容易復(fù)發(fā)而難以治愈，治療該病以水楊酸、咪唑、激素等化學(xué)藥物為主。作者針對海島部隊官兵的常見病——手足癬及濕疹，在經(jīng)驗治療的基礎(chǔ)上，設(shè)計純中藥處方并深入研究。

根據(jù)中醫(yī)藥理論和傳統(tǒng)驗方，筆者選取了土荊皮、蛇床子、黃柏、苦參、徐長卿5味藥進行組方篩選。土荊皮具有祛風(fēng)除濕、殺蟲止癢的功效，用于治療癬癥［2，3］。蛇床子燥濕祛風(fēng)、殺蟲止癢。黃柏清熱燥濕、瀉火除蒸、解毒療瘡?？鄥⑶鍩嵩餄?、殺蟲、利尿。徐長卿祛風(fēng)、化濕、止痛、止癢［4］。中藥復(fù)方的藥效是各藥味綜合作用的結(jié)果，各藥味對藥效的貢獻是非獨立的，隨著復(fù)方中各藥味的取舍、藥量的加減，藥效的變化是非線性的。筆者將以上藥味進行正交設(shè)計，以體外抗霉菌試驗、小鼠耳腫脹試驗為考察指標，對處方進行優(yōu)化，結(jié)果如下。

1 實驗材料

1.1 供試品溶液的制備 土荊皮粉碎，用95%乙醇浸泡7天，濾除藥材，水浴回收乙醇，徐長卿、蛇床子、黃柏、苦參藥材以10倍量水浸泡0.5 h，煎煮2次，1 h／次，合并煎液濾過，與提取的土荊皮溶液混合，混合液濃縮至濃度為4 g（生藥）／ml，分裝至玻璃瓶中，貼標簽，密封，流通蒸汽滅菌，備用。上述藥材均由安徽亳州德昌藥業(yè)提供。

1.2 儀器與試劑 培養(yǎng)箱：電熱恒溫培養(yǎng)兩用箱，型號HWB－2。電子天平：梅特勒－托利多，型號ABB5－S。二甲苯：分析純（煙臺市雙雙化工有限公司），批號：111015。地塞米松注射液：辰欣藥業(yè)有限公司，批號：11121020。

1.3 霉菌培養(yǎng)基 孟加拉紅培養(yǎng)基（北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司，批號：110218）根據(jù)藥典方法制備（稱取36.6 g培養(yǎng)基于1 L蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解，121℃高壓滅菌）。

1.4 菌株 須癬毛癬菌、紅色毛癬菌均由107醫(yī)院檢驗科從非特異性足癬患者足部皮膚中分離，經(jīng)全軍微生物實驗中心主任陳世平教授鑒定，實驗均采用第二代純培養(yǎng)菌株。

1.5 實驗動物 KM小鼠，由煙臺綠葉制藥有限公司動物實驗中心提供，SPF級，［SCXK （魯）2009 0009］。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理方法 采用組間顯著性檢驗處理數(shù)據(jù)，與陰性對照組相比，用SPSS17.0軟件進行顯著性分析。

2 方 法

2.1 因素－水平設(shè)計

表1 處方組成表

2.2 體外抗菌試驗 分別取處方組成項下的復(fù)方提取液各1 ml，置培養(yǎng)皿中，加入剛制備未凝固的霉菌培養(yǎng)基15 ml，混勻，待凝固后，取菌點樣，在每個培養(yǎng)基中均勻接種5個點，將培養(yǎng)基置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5～7 d，觀察菌落生長情況并計數(shù)。

2.3 小鼠耳腫脹試驗 雄性小鼠80只，體重18～22 g，隨機分成16組，每組5只，用不同配比的中藥復(fù)方提取液涂抹小鼠右耳前后兩面，每鼠0.5 ml，0.5 h后再涂抹1次，陰性對照組涂抹生理鹽水，陽性對照組涂抹濃度為0.25 mg／ml的地塞米松，劑量同上，0.5 h后在受試耳涂抹100%二甲苯0.2 ml，0.5 h后將小鼠頸椎脫臼致死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8 mm打孔器分別在左右兩耳相同部位打下圓耳片，用電子天平稱重。每鼠兩耳片之差與左耳片重量之比即為耳腫脹度。

3 結(jié) 果

體外抗菌試驗、小鼠耳腫脹試驗結(jié)果見表2，各個觀測指標影響因素主次順序及最優(yōu)處方組合見表3。

表2 不同組方的復(fù)方提取液體外抗霉菌試驗、小鼠耳腫脹試驗結(jié)果

表3 影響因素主次順序及最優(yōu)處方組合

由表2、3可見，在體外抗菌試驗及小鼠耳腫脹試驗中，因素D、E對結(jié)果影響均最大，因素A對結(jié)果影響最小。

綜合上述試驗的最優(yōu)組合，可知B2D3E2水平互相重疊。對于因素A，因其對X、Y這2個指標的影響均最低，方差分析時均以A為誤差計算，因此在處方中將A因素刪除。對于因素C，其對X的影響大于Y，在手足癬的治療中，以抗霉菌作用為主，以消腫作用為輔，因此在本試驗中將C因素選擇為C4水平。

通過上述綜合分析，可得最優(yōu)處方為B2C4D3E2，即蛇床子30 g、黃柏20 g、土荊皮10 g、苦參10 g。

4 討 論

蛇床子燥濕祛風(fēng)、殺蟲止癢，為君藥；土荊皮、黃柏、苦參共為臣藥。

現(xiàn)代藥理研究表明，土荊皮含土荊甲酸、土荊乙酸等多種新二萜酸及白樺脂酸等三萜類成分，尚含鞣質(zhì)及揮發(fā)油等［5］，對多種致病真菌有殺滅作用。蛇床子含揮發(fā)油，油中主要成分為蒎烯、莰烯、異戊酸龍腦酯、異龍腦等，尚含蛇床子素等香豆精類成分，有殺滅陰道滴蟲作用，對金黃色葡萄球菌、耐藥性金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌及真菌有抑制作用［6，7］。黃柏主要含小檗堿及少量木蘭堿、黃柏堿、掌葉防己堿等，尚含內(nèi)酯等成分［8］，煎劑、水浸劑于體外對多種致病性皮膚真菌有抑殺作用?？鄥⒅饕喾N生物堿，其主要成分為苦參堿、氧化苦參堿等30余種［9］，尚含苦參醇等黃酮類、醌類及三萜皂苷等，煎劑、醇提物以及所含的多種成分對陰道滴蟲、鞭毛蟲有一定的抑制作用，對多種致炎劑所引起的炎癥反應(yīng)有明顯抑制作用，氧化苦參堿還具有抗過敏作用［10］。上述藥物聯(lián)合應(yīng)用，對手足部真菌感染以及由感染引起的炎癥有良好的治療作用。

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