宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中成纖維活化蛋白α的表達(dá)*

徐麗偉，張夢(mèng)真

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科；河南省高等學(xué)校臨床醫(yī)學(xué)重點(diǎn)學(xué)科開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室 鄭州 450052

宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中成纖維活化蛋白α的表達(dá)*

徐麗偉，張夢(mèng)真#

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科；河南省高等學(xué)校臨床醫(yī)學(xué)重點(diǎn)學(xué)科開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室 鄭州 450052

#通信作者，女，1965年2月生，博士，主任醫(yī)師，研究方向：婦科腫瘤，E-mail:13683806877@163.com

宮頸癌；宮頸上皮內(nèi)瘤變；成纖維活化蛋白α；浸潤(rùn)；轉(zhuǎn)移

目的：檢測(cè)宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)組織中成纖維活化蛋白α(FAPα)的表達(dá)情況。方法：采用免疫組化SP法檢測(cè)10例宮頸炎、40例CIN及81例宮頸癌組織中FAPα的表達(dá)。結(jié)果：FAPα在宮頸炎組織中不表達(dá)，宮頸癌組織中FAPα陽(yáng)性表達(dá)率高于CIN組織(χ2=81.706，P<0.001)。不同組織學(xué)類(lèi)型(Z=2.069，P=0.039)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(Z=3.382，P=0.001)和浸潤(rùn)深度(Z=2.185，P=0.029)的宮頸癌組織中FAPα表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：FAPα可能參與了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。

宮頸癌是全球女性的第三大惡性腫瘤。找到宮頸癌發(fā)生發(fā)展的分子標(biāo)記物是早期診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宮頸癌的關(guān)鍵[1]。最近研究[2-4]發(fā)現(xiàn)，成纖維活化蛋白α(fibroblast activation protein α,FAPα)在多種上皮性癌組織中表達(dá)，參與細(xì)胞基質(zhì)的降解及腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程，與腫瘤的發(fā)生及擴(kuò)散有關(guān)。該研究采用免疫組化SP法檢測(cè)正常宮頸、CIN及宮頸癌組織中FAPα的表達(dá)，分析其與宮頸癌患者臨床病理因素的關(guān)系，探討其在宮頸癌變和早期浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中所起的作用。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 10例慢性宮頸炎、40例CIN和81例宮頸癌組織標(biāo)本均取自鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2012年至2014年手術(shù)切除并經(jīng)病理科確診的組織，所有患者術(shù)前均未進(jìn)行放化療。宮頸癌患者的臨床病理因素如下：年齡40～71歲，中位年齡48歲，其中<48歲43例，≥48歲38例；FIGO分期：Ⅰ期58例，Ⅱ期23例；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移69例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例；組織學(xué)類(lèi)型：鱗癌68例，腺癌13例；分化程度：G1/G2期60例，G3期21例；浸潤(rùn)深度：>1/2宮頸厚度41例，≤1/2宮頸厚度40例。

1.2 3種組織中FAPα的檢測(cè)方法

1.2.1 主要試劑 FAPα多克隆兔抗人抗體(Bioss公司)、免疫組化即用型SP試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)等。

1.2.3 結(jié)果判定 由2位病理科醫(yī)師雙盲閱片， FAPα產(chǎn)物為棕黃色顆粒，位于胞膜、胞質(zhì)和(或)胞核內(nèi)。觀察10個(gè)400倍視野，根據(jù)染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比進(jìn)行分級(jí)：陰性(-)，細(xì)胞無(wú)染色；弱陽(yáng)性(+)，細(xì)胞呈淺棕黃色染色，陽(yáng)性細(xì)胞百分比<10%；陽(yáng)性()，細(xì)胞呈棕黃色染色，陽(yáng)性細(xì)胞百分比10%～50%；強(qiáng)陽(yáng)性()，細(xì)胞呈深黃色染色且陽(yáng)性細(xì)胞百分比>50%。以(+)～()為陽(yáng)性表達(dá)[5]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17.0進(jìn)行分析。CIN和宮頸癌組織中FAPα陽(yáng)性表達(dá)率的比較采用χ2檢驗(yàn)，不同臨床病理因素宮頸癌組織中FAPα表達(dá)水平的比較采用秩和檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 FAPα在3種組織中的表達(dá) 宮頸炎組織未見(jiàn)FAPα陽(yáng)性細(xì)胞(圖1A)，宮頸癌和CIN組織中FAPα呈陽(yáng)性表達(dá)(圖1B和1C)。CIN和宮頸癌組織中FAPα陽(yáng)性表達(dá)率的比較見(jiàn)表1。

圖1 3種宮頸組織中FAPα的表達(dá)(SP)

組織類(lèi)型nFAPα/例-+陽(yáng)性表達(dá)率*/%CIN組織4017136457.50宮頸癌組織81147201398.77

*:χ2=81.706，P<0.001。

2.2 FAPα表達(dá)與宮頸癌患者臨床病理因素的關(guān)系 FAPα表達(dá)與患者年齡、FIGO分期無(wú)關(guān)，組織學(xué)類(lèi)型為腺癌、分化程度達(dá)G3期、浸潤(rùn)深度>1/2宮頸厚度和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組織中FAPα的表達(dá)強(qiáng)度更高，見(jiàn)表2。

表2 不同臨床病理因素人群宮頸癌組織中FAPα表達(dá)水平的比較 例(%)

續(xù)表2

3 討論

FAPα是具有二肽基肽酶活性和明膠酶活性的細(xì)胞膜整合糖蛋白[6]，通過(guò)與細(xì)胞表面蛋白質(zhì)分子形成二聚體發(fā)揮作用，能明顯降解細(xì)胞外基質(zhì)[7]，與多種上皮性癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。FAPα參與了骨肉瘤[8]、非小細(xì)胞肺癌[9]、卵巢癌[10]等的發(fā)生和發(fā)展，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和擴(kuò)散。該研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌和CIN組織中FAPα呈陽(yáng)性表達(dá)，而宮頸炎組織中FAPα不表達(dá)。

宮頸癌組織中FAPα陽(yáng)性表達(dá)率為98.77%，而CIN組織中陽(yáng)性表達(dá)率為57.50%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外，隨著宮頸癌浸潤(rùn)深度的增加、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，F(xiàn)APα的表達(dá)增加，提示FAPα的表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有關(guān)。宮頸腺癌組織中FAPα的表達(dá)強(qiáng)于鱗癌組織。由于宮頸腺癌的預(yù)后較鱗癌差，這一差異可能反映FAPα的表達(dá)與預(yù)后相關(guān)，受樣本量的限制，這一結(jié)果有待進(jìn)一步研究。

FAPα在正常人組織、上皮來(lái)源的良性和癌前病變組織中通常不表達(dá)，但是在惡性腫瘤間質(zhì)成纖維細(xì)胞中表達(dá)[11]。該研究發(fā)現(xiàn)FAPα在CIN組織中表達(dá)，與其他研究結(jié)果不一致。推測(cè)可能是不同的癌前病變組織中FAPα的功能發(fā)生了變化，F(xiàn)APα在不同程度上參與了宮頸細(xì)胞從CIN至宮頸癌進(jìn)程中的調(diào)控。

總之，F(xiàn)APα在宮頸癌和CIN組織中表達(dá)，可能參與了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展，是宮頸癌早期浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的一個(gè)標(biāo)志物。

[1]武海英,史惠蓉.不同宮頸病變組織中C-MYC基因與P16蛋白的表達(dá)[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2011,46(5):739

[2]Augoff K,Hryniewicz-Jankowska A,Tabola R,et al.Upregulated expression and activation of membrane-associated proteases in esophageal squamous cell carcinoma[J].Oncol Rep,2014,31(6):2820

[3]Shi M,Yu DH,Chen Y,et al.Expression of fibroblast activation protein in human pancreatic adenocarcinoma and its clinicopathological significance[J].World J Gastroenterol,2012,18(8):840

[4]Kraman M,Bambrough PJ,Arnold JN,et al.Suppression of antitumor immunity by stromal cells expressing fibroblast activation protein-alpha[J].Science,2010,330(65):827

[5]苑文娜,張夢(mèng)真.DPPⅣ蛋白和Seprase蛋白在卵巢上皮性癌中的表達(dá)及意義[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2012,28(1):57

[6]Wikberg ML,Edin S,Lundberg IV,et al.High intratumoral expression of fibroblast activation protein(FAP) in colon cancer is associated with poorer patient prognosis[J].Tumor Biol,2013,34(2):1013

[7]Williams KC,Coppolino MG.SNARE-dependent interaction of Src,EGFR and β1 integrin regulates invadopodia formation and tumour cell invasion[J].J Cell Sci,2014,127(Pt 8):1712

[8]Yuan DT,Liu BB,Liu KX,et al.Overexpression of fibroblast activation protein and its clinical implications in patients with osteosarcoma[J].J Surg Oncol,2013,108(3):157

[9]Liao Y,Ni Y,He R,et al.Clinical implications of fibroblast activation protein-α in non-small cell lung cancer after curative resection: a new predictor for prognosis[J].J Cancer Res Clin Oncol,2013,139(9):1523

[10]Chen H,Yang WW,Wen QT,et al.TGF-beta-induced fibroblast activation protein expression, fibroblast activation protein expression increases the proliferation, adhesion, and migration of HO-8910PM[J].Exp Mol Pathol,2009,87(3):189

[11]Zhang J,Valianou M,Simmons H,et al.Identification of inhibitory scFv antibodies targeting fibroblast activation protein utilizing phage display functional screens[J].FASEB J,2013,27(2):581

(2014-10-10 收稿 責(zé)任編輯姜春霞)

Expression of fibroblast activation protein α in cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia tissue

XULiwei，ZHANGMengzhen

DepartmentofGynecologyandObstetrics，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity；Key-DisciplinesLaboratoryforClinicalMedicineofHenanProvince,Zhengzhou450052

cervical cancer; cervical intraepithelial neoplasia; fibroblast activation protein α; invasion; metastasis

Aim: To detect the expression of fibroblast activation protein α (FAPα) in cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia tissue. Methods: FAPα expression in 10 cases of human cervicitis, 40 cases of cervical intraepithelial neoplasia and 81 cases of cervical cancer tissue was detected by SP method.Results: FAPα expression was higher in cervical cancer tissue than that in cervical intraepithelial neoplasia tissue(χ2=81.706，P<0.001). FAPα expression in cervical cancer tissue was different with different histopathologic type(Z=2.069，P=0.039), lymph node metastasis(Z=3.382，P=0.001), and depth of invasion(Z=2.185，P=0.029).Conclusion: FAPα may take part in invasion and metastasis of cervical cancer.

10.13705/j.issn.1671-6825.2015.03.017

*河南省科技攻關(guān)項(xiàng)目 142102310538

R737.33