某院大腸埃希菌分布及耐藥性分析

周 群 段賢春 任 薇 朱春冬 李春穎 王 勝 季紅燕

某院大腸埃希菌分布及耐藥性分析

周 群 段賢春 任 薇 朱春冬 李春穎 王 勝 季紅燕

目的 了解某院大腸埃希菌的分布特點(diǎn)及其耐藥性，指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用抗菌藥物。方法 對(duì)766株大腸埃希菌的分布及耐藥率進(jìn)行回顧性分析。采用法國(guó)生物梅里埃公司全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀 VITEK2 compact進(jìn)行菌株鑒定，采用K-B法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)2014年標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果。結(jié)果 766株大腸埃希菌主要分離自尿液和痰液標(biāo)本，分別占52.87%和13.84%；其中鑒定出產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)大腸埃希菌366 株，占大腸埃希菌總數(shù)的47.78%。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌(P<0.05)。結(jié)論 大腸埃希菌是泌尿道和呼吸道感染的常見病原菌，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的耐藥率高，臨床上應(yīng)根據(jù)藥敏合理使用抗菌藥物。

大腸埃希菌；耐藥率；超廣譜β-內(nèi)酰胺酶；抗菌藥物；分布

大腸埃希菌是醫(yī)院感染的常見致病菌,由于臨床上廣譜抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，導(dǎo)致大腸埃希菌出現(xiàn)了不同程度的耐藥，特別是產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)菌株，其對(duì)抗菌藥物表現(xiàn)出多重耐藥性[1]。ESBLs菌株引起的醫(yī)院感染位居前列，極大的增加了臨床治療難度。大腸埃希菌的臨床分布以及耐藥趨勢(shì)在不同的地區(qū)和醫(yī)院表現(xiàn)不一。為了解感染患者送檢標(biāo)本的大腸埃希菌的分布及其耐藥性，本研究對(duì)某院分離的大腸埃希菌的分布以及耐藥率進(jìn)行了回顧性分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 菌株來源于該院2013年1月至2014年12月臨床送檢的尿液、痰液、分泌物及胸腹水等標(biāo)本，共分離出大腸埃希菌766株，質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922。

1.2 菌株鑒定 法國(guó)生物梅里埃公司全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀 VITEK2 compact進(jìn)行菌株鑒定，藥敏紙片為英國(guó)Oxoid公司產(chǎn)品。

1.3 藥敏試驗(yàn) 采用K-B法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)2014年標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀,頭孢哌酮/舒巴坦的判定標(biāo)準(zhǔn)參照頭孢哌酮對(duì)腸桿菌科細(xì)菌的折點(diǎn)。

1.4 ESBLs 菌株的檢測(cè) 參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)2014年版推薦的表型篩選及確證試驗(yàn)。以頭孢他啶和頭孢噻肟為底物篩選產(chǎn)ESBLs可疑菌株，再用酶抑制劑增效試驗(yàn)(頭孢他啶和頭孢他啶-克拉維酸，頭孢噻肟和頭孢噻肟-克拉維酸)確認(rèn)產(chǎn)ESBLs 菌株，即含克拉維酸與不含克拉維酸抗菌藥物紙片間的抑菌環(huán)直徑相差≥5 mm為產(chǎn)ESBLs 菌株。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用上海希森美康信息數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)對(duì)相關(guān)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，統(tǒng)計(jì)分析采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)本分布 766株大腸埃希菌，405株分離自尿液，占52.87%，106株分離自痰液，占13.84%，101株分離自膿液，占13.19%。見表1。

2.2 耐藥率 766株大腸埃希菌對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥率≤3.00%，對(duì)阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦、呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢替坦、妥布霉素的耐藥率<50.00%，對(duì)慶大霉素、復(fù)方新諾明、頭孢匹美、氨芐西林/舒巴坦、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、頭孢他定、頭孢曲松、頭孢唑啉、氨曲南的耐藥率為50.00%～70.00%，對(duì)氨芐西林的耐藥率>80.00%。見表2。

2.3 產(chǎn)ESBLs菌株耐藥率 766株大腸埃希菌中,產(chǎn)ESBLs菌株占47.78%，產(chǎn)ESBLs菌株與非產(chǎn)ESBLs菌株的耐藥率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)亞胺培南、厄他培南敏感，但對(duì)氨芐西林/舒巴坦、頭孢曲松、頭孢他定、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、氨曲南、頭孢唑啉、頭孢匹美、復(fù)方新諾明、慶大霉素的耐藥率均>70.00%，對(duì)氨芐西林達(dá)100.00%。產(chǎn)ESBLs 菌株呈現(xiàn)多重耐藥傾向。見表3。

3 討論

大腸埃希菌是醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的重點(diǎn)病原菌之一。該院大腸埃希菌標(biāo)本分布主要集中在尿液和痰液，占66.71%。分離出的大腸埃希菌對(duì)亞胺培南、厄他培南敏感，故碳青霉烯類抗菌藥物是臨床治療大腸埃希菌嚴(yán)重感染的最佳選擇。大腸埃希菌對(duì)除頭孢替坦外的頭孢菌素的耐藥率>50.00%，其對(duì)頭孢替坦、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦耐藥率低(<6.00%)，可以經(jīng)驗(yàn)性選用。對(duì)左氧氟沙星和環(huán)丙沙星的耐藥率高，分別為58.88%和64.88%，這與臨床上喹諾酮類廣泛應(yīng)用，導(dǎo)致細(xì)菌的藥物作用靶位的改變有關(guān)。

ESBLs主要由腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生，產(chǎn)ESBLs是大腸埃希菌最主要的耐藥機(jī)制。耐藥率監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)該院產(chǎn)ESBLs菌株占大腸埃希菌的47.78%，低于中國(guó)CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)水平(54.00%)[2]。可能與該院為中醫(yī)類醫(yī)院，多采用中醫(yī)中藥方法輔助控制醫(yī)院感染，抗菌藥物使用較西醫(yī)院相對(duì)較少有關(guān)。產(chǎn)與非產(chǎn)ESBLs菌的耐藥率明顯不同。非產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對(duì)亞胺培南、厄他培南、呋喃妥因、哌拉西林他唑巴坦、頭孢哌酮舒巴坦、頭孢替坦、阿米卡星、呋喃妥因較敏感(耐藥率<2.00%)，耐藥率較高的主要是喹諾酮類、青霉素類、一代頭孢。產(chǎn)ESBLs 大腸埃希菌對(duì)碳青霉烯類、頭孢替坦、頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星、呋喃妥因敏感(耐藥率<10.00%)，對(duì)常用的一代、三代頭孢菌素、青霉素類、氨曲南、復(fù)方新諾明、慶大霉素、喹諾酮類抗菌藥物耐藥率較高(耐藥率>70.00%)，產(chǎn)ESBLs菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率顯著高于非產(chǎn)ESBLs菌(P<0.05)。臨床上治療產(chǎn)ESBLs菌株嚴(yán)重感染首選碳青霉烯類藥物，對(duì)于一般感染可選用頭霉素、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，可聯(lián)合氨基糖苷類藥物。多數(shù)非產(chǎn)ESBLs菌株感染可選用頭孢替坦、阿米卡星、呋喃妥因等。

表3 766株大腸埃希菌產(chǎn)與非產(chǎn)ESBLs的耐藥比較

本文結(jié)果顯示有耐亞胺培南的產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌(耐藥率6.28%)，與國(guó)內(nèi)學(xué)者報(bào)道的耐藥率不一致[3,4]。隨著亞胺培南等碳青霉烯類藥物的廣泛應(yīng)用，誘導(dǎo)耐藥菌株產(chǎn)生，耐藥形勢(shì)嚴(yán)峻。細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類藥物的耐藥機(jī)制有：①產(chǎn)生碳青霉烯酶，如KPC型碳青霉烯酶、金屬酶、OXA系列等；②外膜蛋白缺失及產(chǎn)Amp C酶；③引起藥物作用靶位的改變、藥物外排機(jī)制等[5]。該院大腸埃希菌耐碳青霉烯類藥物的機(jī)制考慮由產(chǎn)生碳青霉烯酶引起，具體有待進(jìn)一步檢測(cè)。

在耐藥基因分布上，CTX-M型、TEM型、SHV型均可見[6]，以TEM型為主[7]。質(zhì)粒介導(dǎo)[8]及其他形式的耐藥基因傳遞[9]，導(dǎo)致大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs耐藥的復(fù)雜性，其多藥耐藥問題非常嚴(yán)重。為減少產(chǎn)ESBLs株的產(chǎn)生與流行，臨床醫(yī)師應(yīng)及時(shí)掌握醫(yī)院大腸埃希菌的分布及耐藥趨勢(shì)，嚴(yán)格限制廣譜β-內(nèi)酰胺酶類抗菌藥物的應(yīng)用，若無感染依據(jù)，需盡量減少三代頭孢及喹諾酮類抗菌藥物的預(yù)防和經(jīng)驗(yàn)性應(yīng)用，應(yīng)據(jù)藥敏選擇抗菌藥物，有策略的替換應(yīng)用抗菌藥物，延緩細(xì)菌耐藥性的出現(xiàn)[10,11]，并積極發(fā)揮中醫(yī)治療優(yōu)勢(shì)，充分利用中藥的抗菌作用，減少抗菌藥物的使用。

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(2015-03-30 收稿 2015-05-27 修回)

Distribution of Escherichia coli and analysis of its drug resistance in a hospital

ZhouQun,DuanXianchun,RenWei,etal

DepartmentofCadresRespiratoryMedicine,theFirstAffiliatedHospitalofAnhuiUniversityofChineseMedicine,Hefei230031,China

Objective To study the distribution and its drug resistance of Escherichia coli in a hospital in order to introduce a reasonable clinical use of antibiotics. Methods We retrospectively analyzed the distribution and drug resistance rates of 766 strains of clinical Escherichia coli collected in the hospital, made the bacteria identifications by BioMerieux automatic bacteria identification analyzer(VITEK2 compact) and adopted Kirby-Bauer method for the drug-sensitivity tests. The results were determined according to the standard of Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) issued in 2014. Results It was found that 766 strains of Escherichia coli were mainly isolated from urine (52.87%) and sputum (13.84%) specimens. There were 366 strains (47.78%) of Escherichia coli producing extended-spectrum β-lactamases (ESBLs). The drug resistance rates of Escherichia coli result in ESBLs to the common antibiotics were significantly higher than those of the non-ESBLs-producing Escherichia coli (P<0.05). Conclusion Escherichia coli is a type of common pathogen leading to urinary tract and respiratory tract infections. It is necessary to strengthen the reasonable clinical use of antibiotics in accordance with susceptibility testing because of the higher drug resistance rate of the ESBLs-producing Escherichia coli.

Escherichia coli;Drug resistance;Extended-spectrum β-lactamases;Antibiotics;Distribution

230031 合肥 安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院干部呼吸內(nèi)科

10.3969/j.issn.1000-0399.2015.09.009