側(cè)金盞花的花部特征與繁育系統(tǒng)觀察

孫 穎，王阿香，陳士惠，馬翠青，何 淼

(東北林業(yè)大學(xué)園林學(xué)院，黑龍江 哈爾濱150040)

側(cè)金盞花屬(Adonis)是毛茛科一年生或多年生草本植物，是一個(gè)廣布?xì)W亞溫帶的小屬，有26 ～30種。側(cè)金盞花屬植物大多屬于早春短命或類(lèi)短命植物，大部分種類(lèi)都有鮮艷的金黃色花朵，小部分種類(lèi)具有赤紅色花朵，是極具開(kāi)發(fā)潛力的野生草本種質(zhì)資源。我國(guó)共有側(cè)金盞花屬植物10 種，1 變種和2變型。其中東北地區(qū)主要分布有兩種:側(cè)金盞花(A. amurensis)、遼吉側(cè)金盞(A. ramosa)［1］。側(cè)金盞花花色明亮艷麗、花形美觀可愛(ài)，株型緊湊矮小，符合人們的審美要求。側(cè)金盞花植株開(kāi)花時(shí)間很早，可以填補(bǔ)2 －4 月的園林空白，而且極度抗寒，這意味著高緯度地區(qū)也可以露地種植觀賞。目前，我國(guó)的側(cè)金盞花基本處于野生狀態(tài)［2］，引種馴化后可應(yīng)用于草坪、花壇、護(hù)坡及林間空地，從而減少養(yǎng)護(hù)成本，形成色彩豐富、層次多樣的草坪景觀;而且其夏眠的獨(dú)特生理特性，不會(huì)影響后續(xù)的景觀設(shè)計(jì)。因此，側(cè)金盞花作為高寒地區(qū)的植物引種栽培用于城市綠化，有著很好的應(yīng)用前景。

繁育系統(tǒng)是指直接影響后代遺傳組成的所有有性生殖特征的總和。包括花部各器官的壽命、花部的綜合特征、傳粉者的種類(lèi)和行為特征、花的開(kāi)放式樣、自交親和程度以及交配系統(tǒng)等［3-4］。繁育系統(tǒng)是植物的遺傳機(jī)制和環(huán)境相互作用的表現(xiàn)，對(duì)植物的表征變異和進(jìn)化有重要影響［5］，是繁育生物學(xué)和生物多樣性保護(hù)管理的重要組成部分［6］，是認(rèn)識(shí)植物生活史的前提，也是開(kāi)展生物學(xué)相關(guān)研究的必備基礎(chǔ)［4，7］。花部綜合特征及交配系統(tǒng)的定量、定性測(cè)定是繁育系統(tǒng)研究中相對(duì)獨(dú)立的內(nèi)容，其方法和實(shí)踐已經(jīng)有較多的相關(guān)報(bào)道［8-11］，而側(cè)金盞屬植物的相關(guān)研究則幾無(wú)開(kāi)展。因此，認(rèn)識(shí)其開(kāi)花過(guò)程的自然規(guī)律，掌握繁育系統(tǒng)類(lèi)型，可以更有效地進(jìn)行種子生產(chǎn)和良種選育，提高其制種效率，從而為側(cè)金盞花在北方高寒地區(qū)的合理應(yīng)用提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試材來(lái)源為哈爾濱市帽兒山老山人工林試驗(yàn)站(45°20' N，127°34' E)。試驗(yàn)地平均海拔300 m，年平均氣溫2.8 ℃，相對(duì)濕度70%，降水量723.8 mm，土壤類(lèi)型為棕褐色森林土。選擇有代表性的落葉松林樣地，取10 個(gè)2 m×2 m 樣方，樣方內(nèi)植物密度為6.93 株·m－2。以樣方內(nèi)正常生長(zhǎng)的側(cè)金盞花作為研究對(duì)象。于2011 年及2012 年4 －6 月進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 花部綜合特征及開(kāi)花動(dòng)態(tài)觀察 于花蕾期隨機(jī)標(biāo)記30 株側(cè)金盞花，每天觀察1 次直至單花開(kāi)放。開(kāi)花當(dāng)天及開(kāi)花第2 天07:00 －17:00 不間斷觀察，之后每天觀測(cè)一次，直到花部萎蔫。記錄花部各部分發(fā)生變化的時(shí)間、特點(diǎn)、過(guò)程，對(duì)所標(biāo)記的花朵進(jìn)行拍照［12-13］。盛花期，隨機(jī)選取正在開(kāi)放的單花30 朵，測(cè)量花朵的直徑以及雄蕊、雌蕊各個(gè)部分的長(zhǎng)度。采集新鮮花藥置于FAA 固定液中，經(jīng)過(guò)一系列脫水、包埋，采用蘇木精染色法［14］染色，對(duì)花藥橫切，切片厚度為8 mm，在顯微鏡下進(jìn)行觀察、拍照。

1.2.2 繁育系統(tǒng)檢測(cè) 采用Cruden［15］方法測(cè)定單花花粉量和胚珠數(shù)，估算花粉胚珠比P/O(Pollen-ovule Ratio)。根據(jù)Dafni［16］的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)側(cè)金盞花的直徑、開(kāi)花行為進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算雜交指數(shù)(Outcrossing Index，OCI)值。

1.2.3 座果率的測(cè)定 對(duì)側(cè)金盞花進(jìn)行5 種套袋處理:1)不去雄，不套袋，自由授粉，作為對(duì)照，自然狀態(tài)下檢測(cè)傳粉情況。2)不去雄，套袋，自花授粉，檢測(cè)傳粉是否需要媒介。3)去雄，人工異花授粉，套袋，檢測(cè)雜交是否親和。4)去雄、人工異花授粉，不套袋。5)去雄，套袋，不授粉，檢測(cè)花朵無(wú)融合的生殖率。每個(gè)處理取50 朵花，兩組重復(fù)，統(tǒng)計(jì)不同處理下的座果率。

2 結(jié)果與分析

2.1 側(cè)金盞花花部綜合特征及單花開(kāi)花動(dòng)態(tài)

側(cè)金盞花是多年生草本植物，根狀莖短而粗，有多數(shù)須根。株高5 ～12 cm，先花后葉?；▎紊谥髑o或少數(shù)分枝的頂端，雄蕊多數(shù)，心皮多數(shù)。在花朵開(kāi)放7 ～9 d 后長(zhǎng)出葉子，葉片為三角狀卵形，二至三回細(xì)裂。萼片7 ～17 枚，常為淡灰紫色，長(zhǎng)圓形或卵狀長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)16.51 ～18.93 mm，花瓣12 ～18 枚，黃色，倒卵形或長(zhǎng)倒卵形，長(zhǎng)14.91 ～19.09 mm(表1)。花冠直徑為18. 82 ～45.64 mm?；ㄖ?.00 ～2.06 mm，柱頭成熟時(shí)分泌粘液?；ńz長(zhǎng)2.12 ～4.84 mm，花藥長(zhǎng)1.68～2.60 mm，初為黃綠色，隨后逐漸加深變?yōu)辄S色，散粉后花藥變?yōu)槌赛S色。側(cè)金盞花單花約84 個(gè)花藥，花藥4 室，整個(gè)花藥的橫切面呈“X”型?；ㄋ幈跒樗膶咏Y(jié)構(gòu)，由內(nèi)到外分別為絨氈層、中層、藥室內(nèi)壁及表皮(圖1)，花粉大小約為31.57 μm×22.51 μm。側(cè)金盞花子房長(zhǎng)1.16 ～1.96 mm，顏色初為淡綠色，逐漸加深變?yōu)樯罹G色。

連續(xù)兩年對(duì)側(cè)金盞花的植株觀察發(fā)現(xiàn)，側(cè)金盞花花期在3 －4 月，花蕾的顏色從紫褐色變淺直至花萼開(kāi)始松動(dòng)持續(xù)6 ～7 d。天氣晴好時(shí)，側(cè)金盞花通常08:00 左右開(kāi)放，16:30 左右開(kāi)始閉合。單花開(kāi)放時(shí)，外側(cè)花萼幾乎同時(shí)松動(dòng)，也有1 ～2 個(gè)花萼先伸展開(kāi)，內(nèi)側(cè)的花瓣也隨之松動(dòng)。30 ～60 min內(nèi)，內(nèi)部花瓣全部松動(dòng)。從花萼松動(dòng)到所有花瓣伸展到最大冠幅，需要2 ～5 h?；ǘ涑蹰_(kāi)時(shí)花瓣為黃綠色，逐漸變?yōu)轷r黃色。開(kāi)花2 ～3 d，外輪花藥開(kāi)始開(kāi)裂，其余交替開(kāi)裂。晴天時(shí)花藥全部開(kāi)裂所需時(shí)間約為1 h，而陰天時(shí)花藥散粉時(shí)間長(zhǎng)1 ～2 d，雨天或雪天花朵則一直處于閉合狀態(tài)。開(kāi)花5 d 花萼開(kāi)始皺縮，花藥逐漸萎縮。開(kāi)花6 ～7 d 花瓣開(kāi)始萎縮，部分花瓣脫落，花萼包圍著花瓣呈螺旋狀合攏。開(kāi)花8 d 之后花瓣、花藥全部脫落，僅存發(fā)育中的子房(圖2)。

表1 側(cè)金盞花花部器官數(shù)量特征統(tǒng)計(jì)(n=30)Table 1 Floral parameters of Adonis amurensis(n=30)

2.2 側(cè)金盞花的單花持續(xù)時(shí)間

2011 及2012 年，側(cè)金盞花的單花持續(xù)時(shí)間分別為8.29 和8.26 d，兩者差異不顯著(P ＞0.05)，表明側(cè)金盞花在兩年內(nèi)的單花壽命比較穩(wěn)定。單花持續(xù)時(shí)間頻率最高為8 d，分別占每年統(tǒng)計(jì)100 朵花的41%和44%，之后是9、7 和10 d 的單花持續(xù)時(shí)間，持續(xù)時(shí)間為6 d 的單花所占頻率不到3%(圖3)。

圖1 側(cè)金盞花花部構(gòu)造及花藥橫切面結(jié)構(gòu)Fig.1 Floral structure and cross section view of anther of Adonis amurensis

圖2 側(cè)金盞花開(kāi)花動(dòng)態(tài)過(guò)程Fig.2 Flowering dynamic of Adonis amurensis

圖3 側(cè)金盞花單花持續(xù)時(shí)間頻率分布Fig.3 The frequencies distribution of individual flower longevity of Adonis amurensis

對(duì)側(cè)金盞花單花持續(xù)時(shí)間、花冠直徑、花柱高度、花藥數(shù)量、子房數(shù)量的相關(guān)分析結(jié)果表明(表2)，側(cè)金盞花的單花持續(xù)時(shí)間與花柱高度呈顯著正相關(guān)(P ＜0.005)，與花冠直徑、花藥數(shù)量、子房數(shù)量則無(wú)顯著相關(guān)性(P ＞0.01)。同時(shí)，花柱高度與花冠直徑呈顯著負(fù)相關(guān)(P ＜0.01)。由此可知，花柱高度對(duì)單花持續(xù)時(shí)間有較大影響，花柱越高，單花開(kāi)放時(shí)間越長(zhǎng)。

2.3 側(cè)金盞花繁育系統(tǒng)的確定

2.3.1 套袋試驗(yàn) 通過(guò)檢測(cè)不同條件下側(cè)金盞花的座果率發(fā)現(xiàn)，去雄、套袋、不授粉，其座果率為0，表明側(cè)金盞花不存在無(wú)融合生殖現(xiàn)象。不去雄、不套袋、自由傳粉，座果率為78%，不去雄、套袋、自花授粉條件下座果率為58%，去雄、不套袋、自由傳粉條件下坐果率為44%，而人工自花授粉、人工異花授粉后授粉率均超過(guò)80%。套袋試驗(yàn)結(jié)果表明，側(cè)金盞自花可孕，同時(shí)需要傳粉者進(jìn)行傳粉(表3)。

表2 單花持續(xù)時(shí)間、花冠直徑、花柱高度、花藥數(shù)量、子房數(shù)量的相關(guān)分析Table 2 Correlation analysis among flower longevity，diameter of flower，length of style，anther number and ovary number

表3 側(cè)金盞花不同授粉方式的套袋試驗(yàn)結(jié)果Table 3 The test results of different pollinating ways of Adonis amurensis

2.3.2 雜交指數(shù)(OCI) 按照Dafni 的方法測(cè)算，側(cè)金盞花花朵直徑約為32.97 mm，大于6 mm，OCI 記為3;側(cè)金盞花的花藥在開(kāi)花第2 天才開(kāi)始散粉，而柱頭在開(kāi)花前1 天就具有微弱的可授性［17］，即為雌蕊先熟，OCI 記為0;花藥未成熟時(shí)低于柱頭，但成熟后二者逐漸向?qū)Ψ娇拷锌赡芙佑|進(jìn)行授粉，OCI 記為0;綜合以上結(jié)果，側(cè)金盞花的OCI值為3 +0 +0 =3。根據(jù)Dafni［16］的繁育系統(tǒng)劃分標(biāo)準(zhǔn):OCI=0，閉花受精;OCI =1，專(zhuān)性自交，OCI=2，兼性自交;OCI=3，自交親和，有時(shí)需要傳粉者;OCI=4，部分自交親和，異交，需要傳粉者;側(cè)金盞花的繁育系統(tǒng)為自交親和，需要傳粉者。此結(jié)果與套袋試驗(yàn)得出的結(jié)論一致。

2.3.3 花粉胚珠比(P/O) 側(cè)金盞花的單花花粉數(shù)平均為157 352 粒，單花胚珠數(shù)為69 個(gè)，P/O 值為2 280。根據(jù)Cruden［15］對(duì)繁育系統(tǒng)的劃分標(biāo)準(zhǔn):P/O值為2. 7 ～5. 4，閉花授精;P/O 值為18. 1 ～39.0，專(zhuān)性自交;P/O 值為31.9 ～396.0，兼性自交;P/O 值為244. 7 ～2 588. 0，兼性異交;P/O 值為2 108.0 ～195 525.0，專(zhuān)性異交。同雜交指數(shù)測(cè)算結(jié)果及套袋試驗(yàn)結(jié)果相結(jié)合，綜合判定側(cè)金盞花的繁育系統(tǒng)為兼性異交，自交親和，需要傳粉者。

3 討論

3.1 側(cè)金盞花的花部特征與繁育適應(yīng)性

側(cè)金盞花屬于早春類(lèi)短命植物，其花期在3 －4月，為在低溫氣候條件下達(dá)到生殖成功的目的，其發(fā)展出一系列吸引傳粉者的策略:側(cè)金盞花的花徑能達(dá)到32.97 mm，按照Abe［18］的劃分標(biāo)準(zhǔn)屬于大型花;花朵為鮮艷的金黃色，黃色對(duì)于蜂類(lèi)是可見(jiàn)花色［19］，能比雪地吸收更多熱量，達(dá)到吸引昆蟲(chóng)的效果;同時(shí)，側(cè)金盞花產(chǎn)生大量的花粉和花蜜，是昆蟲(chóng)重要的食物來(lái)源，從而增加了植株授粉結(jié)實(shí)的機(jī)會(huì)。

Primack［20］、Schoen 和Ashman［21］分析了35 個(gè)科110 種植物的單花持續(xù)時(shí)間，認(rèn)為系統(tǒng)發(fā)生限制了單花持續(xù)時(shí)間的進(jìn)化，單花持續(xù)時(shí)間的變異不是出現(xiàn)在屬、種的水平，而是出現(xiàn)在科的水平。側(cè)金盞花的單花花期一般為6 ～10 d，按照Abe［18］的分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)，其單花花期屬于很長(zhǎng)類(lèi)型，較長(zhǎng)的花期對(duì)于保證花粉流的穩(wěn)定、增加昆蟲(chóng)的訪花行為具有積極意義。從個(gè)體水平分析，側(cè)金盞花的單花花期除與系統(tǒng)發(fā)生有關(guān)以外，還與花柱高度、單花始花時(shí)間［2］有關(guān)。花柱越高，始花時(shí)間越早的側(cè)金盞花，單花持續(xù)時(shí)間越長(zhǎng)?；ㄐ?、花色、花粉、花期等因子的綜合作用，使得側(cè)金盞花在環(huán)境條件不利的早春也能達(dá)到很高的結(jié)實(shí)率。

3.2 側(cè)金盞花的繁育系統(tǒng)判斷

生殖成功是植物適應(yīng)環(huán)境條件的重要組成部分。關(guān)于自交和異交的互相演化是系統(tǒng)發(fā)育檢驗(yàn)的重點(diǎn)［5］。Dafni 根據(jù)花部結(jié)構(gòu)和開(kāi)花行為進(jìn)行繁育系統(tǒng)的判斷。具有相同OCI 值的植物，一般具有相似的形態(tài)和行為特征，繁育系統(tǒng)類(lèi)型也趨于一致。側(cè)金盞花的OCI 值為3，按照Dafni［16］的標(biāo)準(zhǔn)，側(cè)金盞花的繁育系統(tǒng)為自交親和，需要傳粉者。Cruden［15］認(rèn)為P/O 值是表示性比的有效指標(biāo)，其能夠簡(jiǎn)潔、快速地預(yù)測(cè)繁育系統(tǒng)的基本類(lèi)型，P/O 值越低的植物，傳粉效率越高。按照Cruden［15］的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，側(cè)金盞花的繁育系統(tǒng)為兼性異交，自交可孕。Cruden［15］同時(shí)認(rèn)為，在進(jìn)行繁育系統(tǒng)的判斷時(shí)，P/O值的計(jì)算應(yīng)在雜交指數(shù)之后。

人工授粉及套袋試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，人工自花授粉和人工異花授粉后側(cè)金盞花的座果率均超過(guò)80%，說(shuō)明其自交親和，且親和性很高，這驗(yàn)證了上述側(cè)金盞花的繁育系統(tǒng)為混合交配系統(tǒng)的判斷。自然條件下，植物的自交率是多種原因作用的結(jié)果，不但取決于自身的花粉量、而且取決于從其他個(gè)體接受外來(lái)花粉的時(shí)機(jī)、數(shù)量以及自花花粉和異花花粉在獲得受精機(jī)會(huì)上的競(jìng)爭(zhēng)能力［22-24］。側(cè)金盞花在不去雄、套袋、自然自花授粉情況下，座果率僅為58%，說(shuō)明側(cè)金盞花存在一定的自花限制，花粉數(shù)量不足和缺乏花粉與柱頭的有效觸碰是造成這一現(xiàn)象的主要原因。同時(shí)，前期研究結(jié)果［17］表明，側(cè)金盞花在開(kāi)花當(dāng)天部分柱頭即具備一定的可授性，但花藥在開(kāi)花后2 ～3 d 才開(kāi)裂，造成了自花散粉與柱頭可授期在時(shí)間上具有一定間隔，為異花授粉提供了可能性。去雄后自由傳粉條件下，側(cè)金盞花座果率為44%，說(shuō)明傳粉媒介的效率是阻礙自然異花授粉效果的一個(gè)原因。在自然條件下側(cè)金盞花的結(jié)實(shí)率能夠達(dá)到78%，應(yīng)該是異交與自交共同作用的結(jié)果。相關(guān)研究認(rèn)為，在極端環(huán)境下，植物的交配系統(tǒng)有從異交向自交演變的傾向，從而更好地適應(yīng)惡劣的生存條件［25-26］，對(duì)于側(cè)金盞花自交率與自然群落之間的相互關(guān)系應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的深入研究。

4 結(jié)論

通過(guò)對(duì)野生環(huán)境下側(cè)金盞花的花部形態(tài)特征、開(kāi)花動(dòng)態(tài)、授粉特性的觀察研究，側(cè)金盞花花期在3 －4 月，花型大，單花花期持續(xù)6 ～10 d，花部具有吸引傳粉者的特征。側(cè)金盞花雌蕊先熟，花藥與柱頭無(wú)空間間隔，雜交指數(shù)結(jié)果為3，花粉胚珠比為2 280。綜合各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果認(rèn)為，側(cè)金盞花的繁育系統(tǒng)為兼性異交，自交親和，需要傳粉者。

［1］ 萬(wàn)清林，劉鳴遠(yuǎn).側(cè)金盞花成株年生長(zhǎng)節(jié)律生理特性的研究［J］.植物研究，1996，16(3):351-355.

［2］ 何淼，陳士惠，馬翠青，孫穎.野生及引種側(cè)金盞花的開(kāi)花物候與傳粉特性［J］.草業(yè)科學(xué)，2014，31(3):431-437.

［3］ 陳香，胡雪華，肖宜安，謝騫，王春香，李蘊(yùn)，戴文紅.紫茉莉的花部綜合特征與繁育系統(tǒng)［J］.生態(tài)學(xué)雜志，2008，27(10):1653-1658.

［4］ 陳雄偉，邵玲，梁廣堅(jiān)，梁霞.紫背天葵花部特征與繁育系統(tǒng)的研究［J］.園藝學(xué)報(bào)，2013，40(2):363-372.

［5］ 胡春，劉左軍，伍國(guó)強(qiáng)，趙志剛.鈍裂銀蓮花花部綜合特征及其繁育系統(tǒng)［J］.草地學(xué)報(bào)，2013，21(4):783-788.

［6］ 劉芬，李全健，王彩霞，連靜靜，田敏.瀕危植物扇脈杓蘭的花部特征與繁育系統(tǒng)［J］.林業(yè)科學(xué)，2013，49(1):53-60.

［7］ 趙天榮，蔡建崗，施永泰，倪建剛，沈嵐.大花萱草‘金娃娃’的花器結(jié)構(gòu)和繁育系統(tǒng)觀察［J］.草業(yè)科學(xué)，2013，30(1):52-57.

［8］ 何亞平，劉建全.植物繁育系統(tǒng)研究的最新進(jìn)展和評(píng)述［J］.植物生態(tài)學(xué)報(bào)，2003，27(2):151-163.

［9］ 方炎明.森林植被的顯花、傳粉與繁育系統(tǒng)［J］.南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2012，36(6):1-7.

［10］ 劉宗才，焦鑄錦，董旭升，代金星.鳶尾的花部結(jié)構(gòu)及繁育系統(tǒng)特征［J］.園藝學(xué)報(bào)，2011，38(7):1333-1340.

［11］ 林辰壹，韓文娟，祁晨霞，葉強(qiáng).新疆高葶韭雄蕊開(kāi)花動(dòng)態(tài)特征與花粉育性研究［J］.草業(yè)科學(xué)，2012，29(4):561-566.

［12］ 段友愛(ài)，李慶軍.少花柊葉傳粉生物學(xué)的研究［J］.植物分類(lèi)學(xué)報(bào)，2008，46(4):545-553.

［13］ 關(guān)文靈，李葉芳，陳賢，楊德.蝴蝶花花器結(jié)構(gòu)和開(kāi)花授粉生物學(xué)特性［J］.園藝學(xué)報(bào)，2009，36(10):1485-1490.

［14］ 張志良，瞿偉菁.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［M］.北京:高等教育出版社，2005:127-128.

［15］ Cruden R W.Pollen-ovule ratios:A conservative indicator of breeding system in flowering plants［J］. Evolution，1977，31:32-46.

［16］ Dafni A.Pollination Ecology:A practical approach［M］.New York:Oxford University Press，1992:1-57.

［17］ 孫穎，王阿香，陳士惠，馬翠青，何淼.野生側(cè)金盞花的花粉活力與柱頭可授性［J］.草業(yè)科學(xué)，2014，31(6):1045-1051.

［18］ Abe T.Threatened pollination systems in native flora of the Ogasawara(Bonin)Islands［J］.Annuals of Botany，2006，98(2):317-334.

［19］ 施翔，劉會(huì)良，張道遠(yuǎn)，王建成，楊?yuàn)櫫?，董金?沙丘稀有種準(zhǔn)噶爾無(wú)葉豆花部綜合特征與傳粉適應(yīng)性［J］.生態(tài)學(xué)報(bào)，2013，33(18):5516-5522.

［20］ Primack R B.Longevity of individual flowers［J］.Annual Review of Ecology and Systematics，1985，16:15-37.

［21］ Schoen D J，Ashman T L.The evolution of flower longevity:Resource allocation to maintenance versus construction of repeated parts in modular organisms［J］.Evolution，1995，49:131-139.

［22］ Holsinger K E.Pollination biology and the evolution of mating systems in flowering plants［J］.Evolutionary Biology，1996，29:107-149.

［23］ Buide M L，Díaz-Peromingo J A，Guitián J. Flowering phonology and female reproductive success in Silene acutifolia Link ex Rohrb［J］.Plant Ecology，2002，163(1):93-103.

［24］ Brys R，Jacquemyn H，Edels P，Rossum F V，Hermy M，Triest L.Reduced reproductive success in small populations of the selfincompatible Primula vulgaris［J］.Journal of Ecology，2004，92:5-14.

［25］ 翟新瑩，馬登坦，王成章，嚴(yán)學(xué)兵.海拔對(duì)高山植物交配系統(tǒng)的影響［J］.草業(yè)科學(xué)，2012，29(4):640-645.

［26］ 張丙林，穆春生，王穎，王彥靜.五脈山黧豆開(kāi)花動(dòng)態(tài)及有性繁育系統(tǒng)的研究［J］.草業(yè)學(xué)報(bào)，2006，15(2):68-73.