赤靈芝抗腫瘤作用的研究現(xiàn)狀*

宋代玉 劉有旺 李雅林

(泰山醫(yī)學(xué)院，山東泰安271016)

赤靈芝抗腫瘤作用的研究現(xiàn)狀*

宋代玉 劉有旺 李雅林

(泰山醫(yī)學(xué)院，山東泰安271016)

赤靈芝;抗腫瘤;靈芝酸

赤靈芝又稱靈芝草。多孔菌科，是一種藥用真菌。在我國已有悠久的藥用歷史，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有補(bǔ)中益氣、滋補(bǔ)強(qiáng)壯、扶正固本、延年益壽等功效，被列為名貴藥材，在《本草綱目》中靈芝亦被列為上品，其中記載“靈芝味苦，無毒，可補(bǔ)中，增智慧，久食可輕身不老?！爆F(xiàn)代醫(yī)學(xué)界經(jīng)研究發(fā)現(xiàn):赤靈芝對心臟病、腦血管病、肝肺病、腎臟病等有顯著療效，有提高人體免疫力和抗腫瘤作用，兼有抗衰老、解毒、抗菌抗病毒、提高血液供氧能力、保健等功能等功能［1－2］。而赤靈芝的抗腫瘤作用越來越受到人們的關(guān)注，本文赤靈芝的抗腫瘤作用如下綜述。

1 赤靈芝抗腫瘤的活性成分

赤靈芝具有抗腫瘤作用人們已經(jīng)明確:腫瘤之所以會發(fā)生發(fā)展，這很重要的一個(gè)原因是自身免疫功能的低下或失調(diào)。通過研究提示:赤靈芝確是最佳的自身免疫功能調(diào)節(jié)和激活劑，它能提高機(jī)體免疫功能，靈芝多糖和靈芝總提取物都能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生干擾素－γ(IFN－γ)和腫瘤壞死因子α，誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡［3］。赤靈芝的藥理成分非常豐富，目前已分離的有數(shù)十種之多，主要有靈芝酸(三萜類)、靈芝多糖、腺苷、氨基酸、蛋白質(zhì)、有機(jī)鍺和微量元素等［4－6］。

其中有關(guān)靈芝酸藥理作用的研究近年來取得了相當(dāng)豐富的科研成果。1982年，Kubota等［7］首次分離到靈芝酸A和靈芝酸B;并用波普技術(shù)對其化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定。對靈芝三萜類化合物藥理作用的深入研究，促進(jìn)了對靈芝酸的臨床應(yīng)用。引起了科學(xué)家們關(guān)注的是，靈芝的抑瘤效果與靈芝酸密切相關(guān)。近年來研究人員又在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，靈芝酸能激活可直接破壞腫瘤細(xì)胞核形成的蛋白酶。靈芝三萜類化合物，是從赤靈芝中分離得到的另一類具有重要生物活性的成分，具有較強(qiáng)的生理活性，如增強(qiáng)免疫力，延緩衰老，抗腫瘤、抗病毒，保肝護(hù)膽，低膽固醇、降血脂、降血糖等［8］，目前已分離到的靈芝三萜類化合物有130余種［9］。

多糖類是赤靈芝中除三萜類外研究最深入最廣泛的一類化合物。70年代對靈芝多糖的研究主要集中在多糖和多糖復(fù)合物組分的分離、制備及藥理作用方面，80和90年代則主要集中在靈芝多糖及多糖復(fù)合物的結(jié)構(gòu)及其與功能的關(guān)系方面。。經(jīng)分子生物學(xué)、免疫藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，具有β-(1，3)，β-(1，6)甙鍵的多糖體及肽多糖均表現(xiàn)了較強(qiáng)的生物活性。Pan等［10］用優(yōu)化后的提取方法得到靈芝多糖，并對靈芝多糖抗胃癌作用進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，靈芝多糖能夠緩解MNNG誘導(dǎo)的胃癌大鼠的癥狀，Sun等［11］研究發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)黑色素瘤細(xì)胞B16F10過程中添加靈芝多糖，能夠提高黑色素瘤細(xì)胞的免疫原性，徐晉等［12］對靈芝多糖與氟尿嘧啶聯(lián)合給藥抗人肝癌細(xì)胞HepG2的作用進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)使用氟尿嘧啶對HepG2細(xì)胞的增殖抑制效果較差，而靈芝多糖與氟尿嘧啶聯(lián)合作用后，對HepG2細(xì)胞增殖具有顯著的抑制作用。

近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，靈芝子實(shí)體中含有Mn，Cr，Cu，F(xiàn)e，Ca，K，Mg，Zn，Se，Ge等微量元素［13］。其中有些微量元素(如鍺和硒)對靈芝多糖的抗腫瘤作用有協(xié)同作用。尚德靜等［14］以靈芝為載體，通過靈芝的深層培養(yǎng)，把無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒。研究結(jié)果表明，靈芝對硒的生物轉(zhuǎn)化能力非常強(qiáng)，硒主要與靈芝多糖結(jié)合。

2 赤靈芝抗腫瘤活性物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)

靈芝酸的前體物質(zhì)是由二分子的焦磷酸合歡酶(FPP)尾接尾縮合成前鯊烯酯，經(jīng)閉環(huán)轉(zhuǎn)位成各種三萜類化合物，為高度氧化的羊毛甾烷類衍生物，按分子中碳原子數(shù)可分為C24，C27，C30三大類。靈芝酸的結(jié)構(gòu)中，環(huán)上的雙鍵大多位于△8(9)位，大部分在C11和C21位有羰基，而且在C3、C7和C15位也大多被羰基或羧基所取代。而在三萜醇、醛和過氧化物的結(jié)構(gòu)中環(huán)上大多存在兩個(gè)不飽和雙鍵，其位置在△7(8)和△9(11)位，C11和C23位也不存在羰基且環(huán)上的取代基明顯減少［15］。

靈芝多糖分子結(jié)構(gòu)中單糖間的連接方式多為β-(1，3)鍵、β-(1，4)鍵和β－(1，6)鍵三種，主鏈上多枝部分多糖還含有膚鏈［16－19］。靈芝多糖的免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤活性與其分子結(jié)構(gòu)中甙鍵的結(jié)合形式密切有關(guān)，當(dāng)甙鍵主要以β-(1，3)(1，6)鍵連接或β-(1，4)(1，6)鍵連接時(shí)，靈芝多糖常具有活性;當(dāng)靈芝多糖的分子結(jié)構(gòu)中完全以β-(1，4)鍵連接的，則沒有抗腫瘤活性。

3 赤靈芝抗腫瘤的機(jī)制

3.1激活NK細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)

機(jī)體免疫調(diào)節(jié)主要依賴T細(xì)胞和NK細(xì)胞，而赤靈芝中的靈芝酸發(fā)酵液抗腫瘤作用與激活NK細(xì)胞有著密切關(guān)系。許多因子如IL-2、IFN-γ激活NK細(xì)胞殺傷腫瘤靶細(xì)胞，活化的NK細(xì)胞可釋放許多細(xì)胞因子如IFN-γ、IL-2、TNF-α、GM-CSF，呈正性調(diào)節(jié)作用，調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的功能擴(kuò)大抗瘤譜［20］。

3.2抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶的活性

DNA的超螺旋程度影響著機(jī)體的活動，而拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用正是調(diào)控DNA的空間構(gòu)型，因此DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶就成為抗腫瘤藥物作用的重要靶點(diǎn)。陳陵際等［21］研究發(fā)現(xiàn)靈芝精粉和孢子粉混合物(MLGLGS)對拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerases，TOPO)Ⅰ和Ⅱ有明顯的酶活性抑制作用，進(jìn)而起到抑制腫瘤的作用。

3.3誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和分化、使細(xì)胞周期停滯

靈芝酸通過阻斷人肝瘤細(xì)胞株BEL7402細(xì)胞周期G1期向S期轉(zhuǎn)變，使細(xì)胞周期停滯從而抑制癌細(xì)胞的生長，在濃度500μg/mL時(shí)，其抑制率可以達(dá)到70%，但對正常人的肝細(xì)胞株L02并沒有影響［22］，Shang D等［23］研究表明靈芝多糖以劑量和時(shí)間依賴方式抑制MCF-7細(xì)胞生長，使其顯示典型凋亡特征。靈芝多糖可以誘導(dǎo)THP-1和U937細(xì)胞的增殖反應(yīng)，誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞轉(zhuǎn)化為典型樹突狀細(xì)胞形態(tài)［24］。

3.4抑制腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移

Wang J等［25］研究發(fā)現(xiàn)化學(xué)修飾后靈芝多糖通過介導(dǎo)S180腫瘤細(xì)胞周期，使其阻滯于G2/M階段、上調(diào)Bax表達(dá)、降低Bcl-2表達(dá)發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)。李穎博等［26］采用transwell雙層小室觀察靈芝多糖對前列腺癌細(xì)胞遷移穿過單層人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的影響。

3.5提高腫瘤細(xì)胞MHC的表達(dá)

SunLX等［27］研究發(fā)現(xiàn)靈芝多糖能增強(qiáng)B16F10細(xì)胞MHC-1類分子H-2D(b)及共刺激分子B7-1和B7-2表達(dá)。說明靈芝多糖有可能通過提高腫瘤細(xì)胞表面的MHC分子表達(dá)，增強(qiáng)淋巴細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的識別。

4 結(jié)語

腫瘤是威脅人類生命的重大疾病，已成為人類死亡的重要因素，嚴(yán)重危害人們的健康。對赤靈芝抗腫瘤作用的研究可為治療腫瘤提供一種新的方法。赤靈芝中的靈芝三萜和靈芝多糖對惡性腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的有效遏止，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)腫瘤治療的不足，成為腫瘤免疫治療中的主力軍，同時(shí)也讓腫瘤患者看到希望。

綜觀近年來相關(guān)研究進(jìn)展，赤靈芝抗腫瘤作用的研究較多，但赤靈芝抗腫瘤作用機(jī)制的相關(guān)研究相對較少。盡管己有研究在靈芝免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤方面取得了一些進(jìn)展，但對赤靈芝的免疫受體、抗腫瘤作用的分子機(jī)制等方面仍不明了，此外，赤靈芝免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤的臨床分析研究也偏少。因此，對赤靈芝抗腫瘤作用的深入研究將會有更廣闊的醫(yī)學(xué)前景。

［1］孫樹英，王洪存，張?jiān)疲?靈芝有效化學(xué)成分的研究［J］.中國食用菌，1997，16(1):8－11.

［2］何晉浙，蕢霄云，楊開，等.ICP-AES法分析靈芝中的微量元素［J］.光譜學(xué)與光譜分析，2009，29(5):1409－1412.

［3］林志彬，靈芝的現(xiàn)代研究［M］.北京:北京醫(yī)科大學(xué)出版社，2001.219－229.

［4］劉超，普瓊惠，王洪慶，等.松杉靈芝的化學(xué)成分研究(Ⅱ)［J］.中草藥，2007，38(11):1610－1612.

［5］陳曉梅，郭順星，高強(qiáng)，等13種靈芝多糖的研究.中國藥學(xué)雜志，2001，36(4):2371.

［6］趙東旭，楊新林，王邦武，等.靈芝研究的若干進(jìn)展［J］.食用菌學(xué)報(bào)，1999，6(3):64－69.

［7］TAKASHI K，YUKIHIRO A，IWAO M，et al.Structuresof ganoderic acid A andB，two new lanostane type bittertriterpenes from Ganoderma lucidum(FR.)Karst［J］.Helvetica Chimica Acta，1982，65(2):611－619.

［8］羅俊，林志彬.靈芝三萜類化合物藥理作用研究進(jìn)展［J］.藥學(xué)報(bào)，2002，37(7):574－578.

［9］曾祥麗，包海鷹.靈芝三萜類成分與藥理學(xué)研究進(jìn)展［J］.菌物研究，2004，2(1):68－77.

［10］Pan K，Jiang QG，Liu GQ，et al.Optimization extraction ofGanoderma lucidum polysaccharides and its immunity andantioxidant activities.Internationaljournalofbiologicalmacromolecules，2013，55:301－306.

［11］Sun LX，Lin ZB，Duan XS，et al.Stronger cytotoxicity in CTLs withgranzyme B and porforin was induced by Ganoderma lucidumpolysaccharides acting on B16F10 cells［J］.Biomedicine＆Preventivenutrition，2012，2:113－118.

［12］徐晉，吳麗，徐巧芳.靈芝多糖誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞HepG2凋亡的研究［J］.中國當(dāng)代醫(yī)藥，2009，16(23):7－9.

［13］藺麗，方能虎，吳旦.靈芝有效成分的研究概況〔J〕.中成藥，2002，24(10):793－796.

［14］尚德靜，王關(guān)林，王孝敏，等.兩種靈芝硒多糖分離純化及性質(zhì)鑒定［J］.大連理工大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，41(2):165－168.

［15］Kubota T，Asaka Y，Miura I，et al.Structures of ganodericacid A and B，two new lanostane type bittertritepenes fromGanoderma lucidum［J］.Helv Chim Acta，1982，62:611－619.

［16］李明春，雷林生.靈芝多糖對小鼠巨噬細(xì)胞cAMP含量的影響［J］.中國中藥雜志，2000(1):41－43.

［17］李明春，雷林生.靈芝多糖對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞蛋白激酶A活性的影響［J］.中草藥，2000，31(5):353－355.

［18］李明春，雷林生.靈芝多糖對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞蛋白激酶C活性的影響［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2000，16(1):36－38.

［19］李明春，梁東生.靈芝多糖體外對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞PH的影響［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2000，15(6):9－15.

［20］梁軍，孫朝陽，李予蓉.靈芝912對受照小鼠免疫功能的影響［J］.中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志，2003，23(1):46－47.

［21］陳陵際，韓家嫻，楊蔚怡，等.靈芝精粉和袍子粉混合物抑制腫瘤細(xì)胞生長的實(shí)驗(yàn)研究［J］.癌癥，2002，21(12):1341－1344.

［22］Li C，Li Y，Sun HH.New ganoderic acids，bioactivetriterpenoid metabolites from the mushroom［J］.Nat Prod Res，2006，20 (11):985－991.

［23］Shang D，Li Y，Wang C，et al.A novel polysaccharide from Seenriched Ganoderma lucidum induces apoptosis of human breastcancer cells［J］.Oncol Rep，2011，25(1):267－272.

［24］Chan W K，Cheung C C，Law H K，et al.Ganoderma lucidumpolysaccharides can induce human monocytic leukemia cells intodendritic cells with immuno-stimulatory functio［J］.J Hematol Oncol，2008，1:1－9.

［25］Wang J，Zhang L，Yu Y，et al.Enhancement of antitumoractivities in sulfated and carboxymethylated polysaccharides of Ganoderma lucidum［J］.J Agric Food Chem，2009，57(22):10565－10572.

［26］李穎博，李宇華，王瑞，等.靈芝多糖對腫瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞相互作用的影響［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2008，24(2):250.

［27］Sun L X，Lin Z B，Li X J，et al.Promoting effects of Ganodermalucidum polysaccharides on B16F10 cells to activate lymphocytes［J］.Basic Clin Pharmacol Toxicol，2011，108(3):149－154.

R961

A文獻(xiàn)標(biāo)識碼:1004-7115(2015)11-1318-03

10.3969/j.issn.1004-7115.2015.11.052

2015-03-18)

2014年國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃(201410439023)。

宋代鈺，男，山東濰坊人，本科，泰山醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院學(xué)生。

劉有旺(1974－)，男，碩士，實(shí)驗(yàn)師，主要從事預(yù)防醫(yī)學(xué)以及中藥方面的研究。