影響銀杏葉中萜內酯含量的因素

甘靜玉 朱 華

（廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧 530001）

影響銀杏葉中萜內酯含量的因素

甘靜玉 朱 華

（廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧 530001）

銀杏葉萜內酯是血小板活化因子（PAF）的特異性受體拮抗劑，被廣泛應用于臨床。文章分析了近年來影響銀杏葉萜內酯含量和萜內酯種類間比例的因素，此綜述對銀杏葉萜內酯研究工作中藥材來源的選擇和對于栽培出銀杏葉萜內酯含量較高的植株有一定的參考價值。

銀杏葉萜內酯；植株個體差異；水分環(huán)境；季節(jié)；栽培措施

1 引言

銀杏葉為銀杏科植物銀杏Ginkgo biloba L.的干燥葉[1]。銀杏又名公孫樹、白果樹。被稱為裸子植物“活化石”，是中國特有的最古老的珍貴藥材。銀杏葉味苦、甘、澀，性平，有小毒。具有活血養(yǎng)心，斂肺澀腸的功效。具有改善微循環(huán)，對腦細胞缺血、缺氧、水腫的保護，清除自由基、抗脂質過氧化，抗血小板活化因子，降血脂，抗微生物等藥理作用[2]。因銀杏葉具有如此顯著的藥用價值，自20世紀60年代以來國內外學者對其進行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)銀杏葉的主要有效成分為萜內酯類和黃酮類。銀杏葉萜內酯類成分是血小板活化因子（PAF）的特異性受體拮抗劑，被廣泛應用于臨床，固一直是研究學者關注的焦點所在[3，4]。銀杏葉中萜內酯含量的高低，影響著醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展，因此本文就近年來對影響銀杏葉萜內酯含量和萜內酯種類間比例的因素進行綜述。

2 銀杏葉萜內酯

銀杏葉中的萜類主要是倍半萜和二萜，銀杏內酯（ginkgilides）屬二萜類化合物，銀杏內酯有7種，用GA、GB、GC、GM、GJ、GK、GL命名，白果內酯（bilobalide）屬倍半萜內酯，用BB命名。它們都具有 3 個五元內酯環(huán)和一個罕見的異丁基等結構特征，迄今尚未發(fā)現(xiàn)存在于其他任何植物中[5，6]。

3 影響銀杏葉中萜內酯含量和萜內酯種類間比例的因素

不同的環(huán)境條件，不同年齡時期，不同植株性別，不同枝型葉型，不同采葉部位，不同的栽培措施等對銀杏葉中萜內酯的含量和萜內酯種類間的比例均有不同程度的影響。

3.1植株個體差異

3.1.1樹齡

早在十幾年前就有對不同生長年限的銀杏葉中萜內酯含量變化有所研究，基本認為樹齡為1～6年植株的銀杏葉萜內

酯含量較高[7][8]1027[9]1390。近5年來的研究[10]174－175[11]381[12]認為不同樹齡銀杏葉的銀杏內酯含量變化規(guī)律基本一致，均為先上升，隨后經歷一個平穩(wěn)的高峰期，最后再迅速下降；不同樹齡銀杏葉中萜內酯的含量差異較大，樹齡小于 10 年銀杏葉萜內酯含量較高，隨著樹齡的增長，內酯含量逐漸降低，這些研究結果與往年的研究相符合。許峰[10]175－176對 5、9、14年生的銀杏葉進行了研究，實驗得出銀杏葉總萜內酯最高峰含量的高低順序為9年生實生苗＞5年生實生樹＞14年生嫁接樹；而銀杏葉 4種萜內酯含量不同樹齡間存在差異：對GA來說，在最高峰時，5年生實生樹含量顯著高于9年生實生苗和14年生嫁接苗含量；對BB、GB和GC而言，在含量最高峰時9年生實生樹含量高于5年生實生苗和14年生嫁接苗。綜上所述得出樹齡小于10年的銀杏葉中萜內酯的含量較高，此結論對科研工作和醫(yī)藥行業(yè)均有參考意義。

3.1.2性別與枝型葉片

過去有認為雌株的銀杏萜內酯含量高于雄株，有認為二者之間無差異或差異不明顯。近年來新研究表明，雌株和雄株不同部位的枝葉的萜內酯含量不同，但是總體來說雄株的枝葉所含萜內酯含量最高。黃小花[13]對不同性別和枝型的銀杏葉萜內酯的含量做了研究，認為就最高峰時總萜的絕對含量來說，雄葉叢枝葉最高，雌長枝葉、雌葉叢枝葉、雄長枝葉、雌短枝葉含量依次減??；不同枝型按照 GA 含量由大到小排列依次為：雄葉叢枝、雄長枝、雌葉叢枝、雌長枝、雌短枝，所以，不能絕對地說雄樹葉萜內酯含量高于雌樹葉，或者說雌樹葉萜內酯含量高于雄樹葉，也不能武斷地說葉叢枝葉萜內酯含量高于長枝葉。廖詠玲[14]認為不同葉位銀杏葉變化規(guī)律基本一致，均為先上升到達最高峰后迅速下降；對BB 而言，在最高峰時，頂部葉含量顯著高于中部葉和基部葉；對GA、GB、GC和總萜而言，在含量最高峰時基部葉含量高于中部葉和頂部葉，說明不同葉位對銀杏葉萜內酯含量有影響，由于基部葉生長發(fā)育較長，有效做功時間長，光合積累相對較大，加上銀杏葉萜內酯是光合產物的轉化產物，因此，銀杏葉萜內酯按基部葉到中部葉再到頂部葉的順序逐漸減少是可以理解的。

3.2水分環(huán)境

水分是植物的重要組成部分，是植物賴于生存的物質基礎。水分處理和干旱脅迫環(huán)境下銀杏萜內酯類物質的合成受到一定影響。王磊[15]研究發(fā)現(xiàn)分根區(qū)交替灌溉和輕度干旱脅迫利于銀杏葉片萜內酯的累積，其中適度干旱可以增加銀杏內酯含量，可能是脅迫嚴重時，植物首先盡可能進行初生代謝，而不是次生代謝，所以不能為提高次生代謝物含量而一味的增加脅迫程度。朱燦燦[16]認為干旱脅迫下，生長季節(jié)不同，銀杏葉內BB、GC、GA、GB 及總萜內酯含量變化具有顯著差異，隨著生長季節(jié)的變化銀杏葉萜內酯類物質含量變化呈“先升高后降低”的趨勢；朱燦燦同樣認為適度干旱條件下可以促進銀杏萜內酯類物質的合成，尤其輕度和中度干旱條件下，萜內酯含量比適宜水分條件下明顯增多。綜上得出適度干旱可以增加銀杏內酯含量。

3.3季節(jié)

不同生長季節(jié)，銀杏葉中萜內酯含量不同，十幾年前鞠建明[9]1390和仲英[17]的研究認為 5～7月份含量最高；錢大瑋[8]1027、王先榮[18]和冷平生[19]的研究則認為8～10月份含量最高。近幾年來的研究，孫興力[20]認為總內酯含量以 6月份為最高，12月份含量最低。周恩麗[11]382和陳再興[21]認為 5～7月采收的銀杏葉中總內酯含量較高。黃小花[22]研究結果得出銀杏雄葉叢枝、雌長枝、雌葉叢枝、雄長枝總萜內酯含量均在9月初達到1年中的最大值；銀杏雌短枝 GA含量在10月初到達含量的高峰，銀杏雄葉叢枝、雄長枝、雌葉叢枝、雌長枝均在 9月初達到高峰。綜上所述，銀杏葉中萜內酯含量在5～10月份較高。

3.4栽培措施

3.4.1植物內源激素

植物激素是微量的有機分子，對植物的生長、發(fā)育、衰老、休眠、抗逆性具有極其重要的作用，銀杏葉萜內酯含量的變化規(guī)律與其植物內源激素之間有著一定的相關性。朱俊[23]對銀杏葉中內源激素和銀杏萜內酯的含量進行了年周期測定，初步找到了內源激素與銀杏萜內酯之間的關系，葉片生長及萜內酯含量的變化是受赤霉酸（GA3）、吲哚乙酸（IAA）和脫落酸（ABA）協(xié)調控制的結果，而不是受單一激素的調控，當銀杏葉處于生長階段時，IAA/GA3的比值起主要調控作用，隨著IAA/GA3的比值的增大，萜內酯的含量呈上升趨勢，當進入成熟期后，ABA則起主要調控作用，此時銀杏葉萜內酯含量逐漸降低。綜上可知，吲哚乙酸（IAA）對銀杏葉萜內酯的含量起到調控的作用，然而是否可以人工施予吲哚乙酸（IAA）的方式來增加銀杏葉萜內酯含量仍需進一步研究。但是，以上所述對銀杏的栽培還是具有一定的指導意義。

3.4.2生長調節(jié)劑

矮壯素（CCC）是一種廣泛使用的植物生長延緩劑，主要是抑制赤霉素( GA) 生物合成而發(fā)揮作用[24]。許峰[25]研究顯示 CCC 處理能顯著提高銀杏葉萜內酯含量，銀杏葉萜內酯含量與葉綠素含量高度正相關?？赡苁且驗镃CC 處理使葉片厚度、光合色素含量以及氣孔活性增加，所以能顯著提高葉的光合作用，既顯著提高了銀杏葉葉綠素含量，因此CCC處理促進了銀杏葉萜內酯的積累。

4 結語

目前銀杏萜內酯的獲取主要途徑是天然提取，然而銀杏萜內酯在銀杏葉中的含量很低。因此如何提高其含量成為當前研究工作的重點與難點。

銀杏萜內酯的含量不是受單一因素的影響，不同的環(huán)境條件，不同年齡時期，不同植株性別，不同枝型葉型，不同采葉部位，不同的栽培措施等對銀杏葉中萜內酯的含量和萜內酯種類間的比例均有不同程度的影響。綜上得出的結論為樹齡小于10年的銀杏葉中萜內酯的含量較高；雄株的枝葉的萜內酯含量最高；適度干旱可以增加銀杏內酯含量；銀杏葉中萜內酯含量在 5～10月份較高；銀杏葉萜內酯的含量與IAA/GA3的比值呈正相關；CCC促進銀杏葉萜內酯的積累。本綜述對銀杏葉萜內酯研究工作中藥材來源的選擇有一定的參考價值；對培育出銀杏葉萜內酯含量較高的植株有一定的參考價值。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:Ⅰ部[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:296-297

[2] 國家中醫(yī)藥管理局.中華本草 2[M].上?？茖W技術出版社,1999:280-284.

[3] 崇銳,時繪繪,程剛,等.銀杏葉提取物的藥物相互作用[J].沈陽藥科大學學報,2014,(3):217-223.

[4] Drieu,K.,Jaggy, H. History,development and constituents of EGb 761. In:van Beek, T.A.(Ed.), Ginkgo Biloba. Harwood Academic Publishers, Amsterdam,2000,(12):267-277.

[5] 劉彬果,張新萍,劉巖.銀杏葉中萜內酯類化合物的研究進展[J].藥學實踐雜志,2011,(6):421-425.

[6] 金東浩.銀杏化學成分及藥理研究[J].科技風,2010,(9): 157.

[7] 郁青,沈兆邦,陳祥,等.銀杏葉內酯含量的變化規(guī)律研究[J].林產化學與工業(yè),1998,(4):3-8.

[8] 錢大瑋,鞠建明,朱玲英,等.不同樹齡銀杏葉在不同季節(jié)中總黃酮和總內酯的含量變化[J].中草藥,2002,(11):68-70.

[9] 鞠建明,段金廒,錢大瑋,等.不同樹齡邳州銀杏葉在不同采收期指紋圖譜比較[J].中草藥,2005,(9):112-115.

[10] 許鋒,廖詠玲,程水源,等.不同樹齡銀杏葉萜內酯含量的年周期變化規(guī)律[J].貴州農業(yè)科學,2012,(6):173-177.

[11] 周恩麗,李雪峰,王偉,等.樹齡、采收期和干燥方法對銀杏葉中總內酯的影響[J].現(xiàn)代藥物與臨床,2012,(4):380-382.

[12] 姚鑫,周桂生,唐于平,等.基于 UPLC-TQ-MS考察不同樹齡果用銀杏葉萜內酯含量變化規(guī)律[J].中國中藥雜志,2013,(3):376-380.

[13] 黃小花,廖詠玲,許鋒,等.銀杏不同類型枝條葉片萜內酯含量年周期變化規(guī)律[J].經濟林研究,2013,(1):48-52.

[14] 廖詠玲,程水源,許鋒,等.銀杏雌樹長枝不同葉位葉萜內酯含量變化及分布規(guī)律[J].中南林業(yè)科技大學學報, 2013,(11):47-52.

[15] 王磊.銀杏對分根區(qū)交替灌溉的適應性研究[D].南京:南京林業(yè)大學,2013.

[16] 朱燦燦,曹福亮,汪貴斌,等.干旱脅迫對銀杏葉萜內酯年動態(tài)變化的影響[J].林業(yè)科技開發(fā),2011,(6):15-20.

[17] 仲英,唐文照,丁杏苞,等.不同樹齡的銀杏葉在不同生長季節(jié)中銀杏總黃酮和總內酯的含量變化[J].中草藥, 1999,(12):909-910.

[18] 王先榮,周正華,杜安全,等.不同生長季節(jié)及生長年限銀杏葉總萜內酯含量的相關性研究[J].中國藥科大學學報,2000,(2):10-12.

[19] 冷平生,王天華,蘇淑釵,等.銀杏黃酮苷和萜類內酯含量的季節(jié)變化[J].植物資源與環(huán)境學報,2001,(3):15-18.

[20] 孫興力,周金彩,龍紅萍,等.不同生長季節(jié)銀杏葉中總黃酮醇苷和總內酯的含量變化[J].中南藥學,2009,(8): 564-567.

[21] 陳再興,朱旭,王琳,等.不同季節(jié)銀杏葉中總黃酮、總黃酮醇苷及萜類內酯的含量變化[J].中國醫(yī)院藥學雜志, 2010,(12):1067-1069.

[22] 黃小花,廖詠玲,許鋒,等.銀杏不同類型枝條葉片萜內酯含量年周期變化規(guī)律[J].經濟林研究,2013,(1):48-52.

[23] 朱俊,許鋒,程水源.銀杏葉萜內酯含量與內源激素含量相關性研究[J].湖北農業(yè)科學,2010,(11):2807-2810,2814.

[24] 翟宇瑤,郭寶林,程明. 植物生長延緩劑在藥用植物栽培中的應用[J].中國中藥雜志,2013,(17):2739-2744.

[25] 許鋒,張威威,孫楠楠,等.矮壯素對銀杏葉片光合代謝與萜內酯生物合成的影響[J].園藝學報,2011,(12):2253-2260.

Factors affecting the content of the Ginkgolides of Ginkgo Leaf

The Ginkgolides of Ginkgo Leaf were specific platelet activating factor receptor antagonist, widely used in clinical. Reviewed the factors affecting the content of the Ginkgolides of Ginkgo Leaf and the ratio between species of Ginkgolides, This Summary for Ginkgolides research sources medicines choice and for the cultivation of a higher content Ginkgolides of Ginkgo Leaf have some reference value.

The Ginkgolides of Ginkgo Leaf; Individual differences in plant; Water Environment; Season; Cultivation measures

R93

A

1008-1151(2015)04-0104-03

2015-03-10

廣西壯瑤藥重點實驗室（桂科基字[2014]32號）；壯瑤藥協(xié)同創(chuàng)新中心（桂教科研[2013]20號）；廣西重點學科（壯藥學）（桂教科研[2014]14號）；“中藥創(chuàng)新理論與藥效研究”八桂學者項目；廣西自然科學基金項目：中藥新藥基礎研究（2011GXNSFF018006）。

甘靜玉（1989-），女（壯族），廣西南寧人，廣西中醫(yī)藥大學在讀碩士研究生，研究方向為中藥及民族藥的鑒定與開發(fā)。