擬目烏賊生殖腺多糖提取工藝優(yōu)化及自由基清除能力研究

戴宏杰,孫玉林,鄭小林,陳道海,*

(1.嶺南師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,廣東湛江524048;2.浙江工商大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,浙江杭州 310018

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擬目烏賊生殖腺多糖提取工藝優(yōu)化及自由基清除能力研究

戴宏杰1,2,孫玉林1,鄭小林2,*,陳道海1,*

(1.嶺南師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,廣東湛江524048;2.浙江工商大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,浙江杭州 310018

以擬目烏賊生殖腺為材料,在對(duì)料液比、提取時(shí)間及提取溫度進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用Box-Benhken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化熱水浸提法提取多糖工藝,并通過清除超氧陰離子和羥基自由基的能力探究其體外抗氧化活性。結(jié)果表明:擬目烏賊生殖腺多糖熱水浸提法最佳提取工藝條件為料液比1∶30g/mL,提取溫度 90℃,提取時(shí)間1h,在此條件下擬目烏賊生殖腺多糖得率為0.751%;擬目烏賊生殖腺多糖對(duì)超氧陰離子自由基和羥自由基均有一定的清除能力,清除率與多糖濃度呈正相關(guān)性;紅外圖譜顯示該多糖主要是β-型糖苷鍵連接的吡喃型葡聚糖。

擬目烏賊生殖腺,多糖,提取,抗氧化活性,紅外光譜

多糖具有多種生物活性,如提高免疫、降血糖、抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、抗輻射等[1],近年來由于人們對(duì)海洋藥物的重視,從海洋生物中提取多糖得到廣泛關(guān)注,Murray[2]在研究發(fā)現(xiàn)許多海洋動(dòng)物都含具有生物活性的多糖。目前從蛤蜊[3]、鮑魚[4]、文蛤[5]、海參[6]等海洋動(dòng)物中都已分離出具有生物活性的多糖。

擬目烏賊(Sepialycidas)屬于軟體動(dòng)物門(Mollusca),頭足綱(Cephalopoda),烏賊目(Sepiida),烏賊科(Sepiidae),烏賊屬(Sepia),主要分布于我國東海、南海,菲律賓海,越南和婆羅洲海域[7]。由于擬目烏賊體型較大、繁殖周期短、生長迅速、肉質(zhì)鮮美、蛋白質(zhì)含量高以及綜合利用范圍廣等特點(diǎn)[8],越來越多的學(xué)者投入到擬目烏賊人工養(yǎng)殖技術(shù)的研究中并取得較大進(jìn)展[9-10]。隨著擬目烏賊產(chǎn)量的增加,必然會(huì)導(dǎo)致占體質(zhì)量30%的內(nèi)臟等加工副產(chǎn)物增多,生殖腺作為內(nèi)臟的主要組成部分,已有研究表明野生擬目烏賊生殖腺多糖含量約為鮮重的0.23%[11]。研究發(fā)現(xiàn)從烏賊墨[12]、海螵鞘[13]中分離的多糖均有顯著的抗腫瘤活性,但是對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖的提取及生物活性研究尚未見報(bào)道。

本文采用傳統(tǒng)的水提法提取擬目烏賊生殖腺多糖,通過響應(yīng)面法對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,并對(duì)所提取多糖的抗氧化性進(jìn)行初步研究,同時(shí)利用傅里葉紅外光譜對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步探討,以期為擬目烏賊生殖腺多糖的工業(yè)生產(chǎn)、分離純化、結(jié)構(gòu)分析及生物活性研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料與儀器

擬目烏賊 材料購于湛江市霞山水產(chǎn)品批發(fā)市場,經(jīng)鑒定為雌性擬目烏賊成體;苯酚、無水乙醇、濃硫酸、丙酮、葡萄糖、鄰苯三酚、鄰二氮菲、三氨基甲烷、硫酸亞鐵等均為分析純。

高速組織搗碎機(jī)(DS-1型) 上海標(biāo)本模型廠;手提式高速中藥粉碎機(jī)(DFY-200) 青州市三寶中藥機(jī)械廠;冷凍干燥機(jī)(LGJ-18型) 北京四環(huán)科學(xué)儀器廠;電子天平(AUX320型) 日本島津公司;電熱恒溫水浴鍋(HHS型) 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(RE-52A 型) 上海亞榮生化儀器廠;臺(tái)式離心機(jī)(H/T 18MM型) 湖南赫西儀器裝備有限公司;紫外可見分光光度計(jì)(UV3000型) 上海美譜達(dá)儀器有限公司;傅立葉紅外光譜分析儀(Nicolet 6700型) 賽默飛世爾科技公司。

1.2 擬目烏賊生殖腺多糖提取工藝

擬目烏賊生殖腺多糖制備[14]:擬目烏賊生殖腺凍干粉的制備:擬目烏賊解剖取生殖腺,切分、搗碎、丙酮脫脂3次,冷凍干燥后粉碎,置于-20℃?zhèn)溆谩龈煞墼谠O(shè)定料液比下熱水浸提一定時(shí)間,離心取上清,濃縮,加入3倍體積無水乙醇4℃沉淀過夜,離心取沉淀透析48h,冷凍干燥24h得擬目烏賊生殖腺多糖。

1.3 擬目烏賊生殖腺多糖含量的測定方法

采用苯酚硫酸法測定樣品中多糖含量[15]。精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖配置成100μg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液于試管中,補(bǔ)水至2mL,然后按順序向各試管內(nèi)加入1mL 6%苯酚溶液,搖勻后速加入5mL濃硫酸,室溫下放置30min,測定490nm處吸光值。按下式計(jì)算擬目烏賊生殖腺多糖得率:

式(1)

式中:R-多糖得率,%;C-待測液中多糖質(zhì)量濃度,mg/mL；V-待測液體積,mL;N-稀釋倍數(shù);m-擬目烏賊生殖腺樣品質(zhì)量,g。

1.4 提取工藝單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在保持其它因素條件相同下,分別設(shè)置料液比1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30g/mL,浸提溫度50、60、70、80、90℃,浸提時(shí)間0.5、1、1.5、2、2.5h,考察各因素對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響,每個(gè)因素平行實(shí)驗(yàn)三次,取平均值。

1.5 提取工藝響應(yīng)曲面法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用 Box-Behnken 設(shè)計(jì)方法以料液比(A)、提取時(shí)間(B)和提取溫度(C)3個(gè)因素為自變量進(jìn)行組合優(yōu)化,多糖得率(Y)為響應(yīng)值,平行實(shí)驗(yàn)三次,進(jìn)行響應(yīng)面分析。利用 Design expert 8.0.6 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和回歸分析。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案見表1。

表1 響應(yīng)面因素水平表Table 1 Factors and levels in the Box-Behnken design

1.6 擬目烏賊生殖腺多糖清除自由基能力的研究

1.6.1 清除超氧陰離子自由基能力的測定 根據(jù)文獻(xiàn)[16]方法,取1mL不同濃度的擬目烏賊生殖腺多糖溶液于試管中,加入4.5mL pH8.2的0.05mol/L Tris-HC1緩沖液、4.2mL蒸餾水混勻置于25℃水浴中預(yù)熱20min,加入25℃水浴預(yù)熱過的3mmol/L的鄰苯三酚溶液0.3mL(鄰苯三酚溶液用10mmol/L HCl配制),混勻后于325nm處測定吸光度A,每隔30s讀取吸光值,4min后結(jié)束。每個(gè)多糖濃度平行實(shí)驗(yàn)三次取平均值,并與VC對(duì)照比較。作吸光值隨時(shí)間變化的回歸方程,其斜率為鄰苯三酚的自氧化速率Ks,以蒸餾水代替樣品為空白對(duì)照的自氧化速率為Ko。清除率計(jì)算公式為:

清除率(%)=(Ko-Ks)/Ko×100

式(2)

1.6.2 清除羥自由基能力的測定 按照文獻(xiàn)[17]方法,取0.75mmol/L 鄰二氮菲無水乙醇溶液1mL加入pH7.4的0.15mol/L的磷酸緩沖液2mL,加入1mL不同濃度擬目烏賊生殖腺多糖樣品溶液,混勻后加入0.75mmol/L的硫酸亞鐵溶液1mL,最后加入0.01% H2O2溶液1mL,在 37℃水浴反應(yīng)60min,536nm測定其吸光度AC(樣品管);以同樣體積的蒸餾水代替樣品及H2O2溶液,于536nm測定其吸光度AB(未損傷管);以同樣體積的蒸餾水代替樣品溶液,于536nm測定其吸光度AO(未損傷管)。每一樣品平行測三次,取平均值,并與VC對(duì)照比較。清除率計(jì)算公式如下:

清除率(%)=(AC-AB)/(AO-AB)×100

式(3)

1.7 紅外光譜(IR)分析

取2mg干燥生殖腺多糖,KBr壓片,Nicolet 6700傅立葉紅外光譜分析儀4000～400cm-1區(qū)間掃描。

1.8 數(shù)據(jù)處理方法

所有數(shù)據(jù)均重復(fù)測定三次,采用Design expert 8.0.6軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

采用苯酚硫酸法測定得到的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:Y=7.5157X-0.0088,R2=0.9991;其中Y為吸光值,X為葡萄糖含量(mg/mL)。

2.2 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 料液比對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響 分別選定料液比為1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30g/mL,在70℃條件下提取1.5h,研究料液比對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響,結(jié)果見圖1。

圖1 料液比對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響Fig.1 Effect of ratio of raw material to water on the yield of Sepia lycidas gonad polysaccharides

由圖1可知,料液比對(duì)多糖得率的影響較為明顯。隨著料液比的增加,擬目烏賊生殖多糖得率逐漸升高,當(dāng)料液比在1∶10～1∶25g/mL時(shí),多糖得率急劇增加;高于1∶25g/mL時(shí),得率增加緩慢。分析原因可能是料液比影響多糖的溶出,料液比較低時(shí),溶液黏度較高,不利于多糖擴(kuò)散;達(dá)到一定料液比之后,多糖擴(kuò)散將不再受影響。考慮到節(jié)約資源以及后續(xù)離心、濃縮、醇沉等操作,料液比不宜過大,選擇1∶25g/mL為最適提取料液比。

2.2.2 提取溫度對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響 設(shè)定料液比為1∶25g/mL,分別在50、60、70、80、90℃條件下提取1.5h,考察提取溫度對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響,結(jié)果見圖2。

圖2 提取溫度對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響Fig.2 Effect of extraction temperature on the yield of Sepia lycidas gonad polysaccharides

由圖2可知,隨著提取溫度的升高,擬目烏賊生殖腺多糖得率逐漸增加。分析其原因,溫度較低時(shí),多糖的溶解度較低,不利于多糖的溶出;當(dāng)溫度逐漸升高,多糖分子熱運(yùn)動(dòng)加劇,擴(kuò)散速度加快,多糖得率上升。但是過高的提取溫度可能會(huì)導(dǎo)致多糖分子的結(jié)構(gòu)破壞,綜合考慮80℃為最適提取溫度。

2.2.3 提取時(shí)間對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響 在料液比為1∶25g/mL、提取溫度為80℃條件下,分別提取0.5、1、1.5、2、2.5h,研究提取溫度對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響,結(jié)果見圖3。

圖3 提取時(shí)間對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響Fig.3 Effect of extraction time on the yield of Sepia lycidas gonad polysaccharides

從圖3可以看出,隨著提取時(shí)間的增加,擬目烏賊生殖腺多糖得率也隨之增加,在提取時(shí)間達(dá)到1h之后,多糖得率增加趨勢變緩。這可能是擬目烏賊生殖腺經(jīng)過脫脂、凍干、粉碎之后,凍干粉能與提取溶劑充分接觸,可在較短時(shí)間內(nèi)使多糖溶出,繼續(xù)延長提取時(shí)間對(duì)多糖得率的增加不再明顯。因此,綜合考慮選擇1h為最適提取時(shí)間。

2.3 響應(yīng)曲面法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3.1 回歸模型的建立及顯著性檢驗(yàn) 在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,對(duì)料液比(A)、提取溫度(B)和提取時(shí)間(C)按表1設(shè)計(jì)方案,采用Box-Behnken 設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)響應(yīng)面,優(yōu)化擬目烏賊生殖腺多糖提取工藝。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見表2。利用Design expert 8.0.6軟件,對(duì)表2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立二次回歸模型,得擬合二次多元回歸方程:

多糖得率(%)=0.73+0.018A+0.011B+0.011C+7.500E-3AB-0.014AC+4.000 E-3BC-4.333 E-3A2-3.333 E-4B2-0.011C2

式(4) 表2 響應(yīng)曲面法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Experimental design and results of response surface methodology

表3 回歸模型的方差分析結(jié)果Table 3 Variance analysis of the regression model

注:*表示在α=0.05 水平上顯著;**表示在α=0.01 水平上極顯著。 對(duì)上述模型進(jìn)行方差分析,結(jié)果見表3。由表3可知,此模型的p=0.0005<0.01,響應(yīng)面回歸模型達(dá)到極顯著水平;失擬項(xiàng)能表示模型預(yù)測值與實(shí)際值不擬合的概率,該失擬項(xiàng)p=0.1986>0.05,不顯著,說明該模型對(duì)本實(shí)驗(yàn)擬合程度較好。R2(R-Square)=0.9822,表明該模型對(duì)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)的適配度達(dá)到98.22%,具有較高的擬合度;修正R2(Adj R-Square)=0.9502,表明該模型能解釋95.02% 響應(yīng)值變化,實(shí)驗(yàn)誤差較小,可以利用該模型預(yù)測上述提取條件對(duì)多糖得率的影響。分析模型回歸方程系數(shù)的p值,A、B、C、AC和 C2項(xiàng)的影響極顯著(p<0.01),AB影響顯著(p<0.05),AC、A2和B2影響不顯著。

根據(jù)方差分析結(jié)果,消去不顯著項(xiàng),擬合方程簡化為:

多糖得率(%)=0.73+0.018A+0.011B+0.011C+7.500E-3AB-0.014AC-0.011C2

式(5)

2.3.2 響應(yīng)面分析 利用Design expert 8.0.6軟件對(duì)表2數(shù)據(jù)進(jìn)行二次多元回歸擬合,所得到的二次回歸方程的響應(yīng)面及其等高線見圖4。響應(yīng)面圖形能較直觀地反映出各因素對(duì)響應(yīng)值的影響,等高線的形狀可以反映出交互效應(yīng)的強(qiáng)弱,橢圓表示二因素交互作用顯著,而圓形則與之相反[18]。從圖4可以看出,料液比對(duì)擬目烏賊生殖腺多糖得率的影響最顯著,表現(xiàn)為曲面相對(duì)較陡,提取溫度和提取時(shí)間對(duì)多糖得率的影響次之。料液比和提取時(shí)間的交互作用極顯著,表現(xiàn)為等高線圖較扁平;料液比與提取溫度的交互影響次之,提取溫度與提取時(shí)間的相互影響最小。在所考察的因素范圍內(nèi),多糖得率隨料液比的增大而顯著增加;隨提取溫度的升高變化不明顯;隨提取時(shí)間的增加呈現(xiàn)緩慢上升的趨勢。

圖4 料液比、提取溫度和提取時(shí)間交互作用的響應(yīng)面圖Fig.4 Response surface plots showing the effect of the ratio of raw material to water, extraction temperature and extraction time

2.3.3 優(yōu)化與驗(yàn)證 采用Design expert 8.0.6軟件運(yùn)用回歸模型優(yōu)化的擬目烏賊生殖腺多糖的最佳提取工藝為:料液比1∶30g/mL,提取溫度 90℃,提取時(shí)間1.02h,預(yù)測擬目烏賊生殖腺多糖得率為0.758%。為方便實(shí)際操作,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)時(shí)將上述最佳工藝條件修正為料液比1∶30g/mL,提取溫度90℃,提取時(shí)間1h,在該條件下平行實(shí)驗(yàn)3次,多糖得率0.751%,與理論預(yù)測值相對(duì)誤差為0.92%,說明該模型能較好地預(yù)測擬目烏賊生殖腺多糖提取工藝,指導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)。

2.4 擬目烏賊生殖腺多糖對(duì)自由基清除能力結(jié)果分析

2.4.1 清除超氧陰離子自由基能力 按1.6.1實(shí)驗(yàn)方法測定,并計(jì)算清除率,結(jié)果如圖5所示。超氧陰離子是生物體類產(chǎn)生的第一個(gè)氧自由基,能引起自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng),產(chǎn)生活性更強(qiáng)的自由基,如羥基自由基等,引起細(xì)胞損傷[19]。擬目烏賊生殖腺多糖對(duì)鄰苯三酚自氧化產(chǎn)生的超氧陰離子自由基具有一定的抑制作用,并隨濃度的增加其清除率逐漸增加,二者呈正相關(guān)。當(dāng)多糖濃度達(dá)到10mg/mL時(shí),對(duì)超氧陰離子自由基清除率接近70%,表明擬目烏賊生殖腺多糖對(duì)超氧陰離子自由基有一定的清除效果。但是和VC相比,其清除能力相對(duì)較弱,達(dá)到相同清除效果的VC濃度遠(yuǎn)低于擬目烏賊生殖腺多糖,VC濃度為0.25mg/mL時(shí),其清除率可達(dá)到100%。

圖5 多糖對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用Fig.5 Superoxide anion free radical scavenging abilities of polysaccharides

2.4.2 清除羥自由基能力 按1.6.2實(shí)驗(yàn)方法測定,并計(jì)算清除率,結(jié)果如圖6所示。擬目烏賊生殖腺多糖和VC對(duì)羥自由基均有一定的清除作用,隨著質(zhì)量濃度的增加,其清除羥自由基能力也相應(yīng)增加,呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系。當(dāng)多糖質(zhì)量濃度達(dá)到10mg/mL時(shí),對(duì)羥自由基的清除率為39.77%,表明擬目烏賊生殖腺多糖對(duì)羥自由基具有一定的清除能力。當(dāng)VC濃度為0.6mg/mL時(shí),其清除率可達(dá)到41.52%,說明擬目烏賊生殖腺多糖對(duì)羥自由基的清除能力也遠(yuǎn)低于維生素C。這可能和所提粗多糖未進(jìn)行脫蛋白操作有關(guān),呂明生等[20]對(duì)雪蓮薯多糖脫蛋白后,其清除羥自由基的能力大幅增強(qiáng)。

圖6 多糖對(duì)羥基自由基的清除作用Fig.6 Hydroxyl free radical scavenging abilities of polysaccharides

2.5 擬目烏賊生殖腺多糖紅外光譜分析

擬目烏賊生殖腺多糖的紅外圖譜如圖7所示。在3449cm-1的較強(qiáng)峰是糖類-OH的伸縮振動(dòng)峰,在2935cm-1的較弱峰是糖類C-H的伸縮振動(dòng),這兩個(gè)峰是糖類化合物典型的特征吸收峰。1650cm-1有一強(qiáng)吸收峰,是-CHO中C=O的伸縮振動(dòng);1447cm-1和1379cm-1是=CH2的變形吸收峰[21-22];在1044～1079cm-1處的吸收峰是吡喃環(huán)糖苷(C-O-C)的伸縮振動(dòng),是糖類的特征吸收峰,也是葡聚糖的典型吸收光譜信號(hào);930-700cm-1為糖類的環(huán)振動(dòng)吸收區(qū),在889cm-1處是典型的吡喃型葡聚糖和β-型糖苷鍵吸收峰[23]。綜上,擬目烏賊生殖腺多糖主要是β-型糖苷鍵連接的吡喃型葡聚糖。

圖7 擬目烏賊生殖腺多糖的紅外光譜圖Fig.7 IR spectrum of Sepia lycidas gonad polysaccharides

3 結(jié)論

熱水浸提法是多糖提取最常用的方法,較其它方法更溫和、經(jīng)濟(jì)、簡單。本研究以擬目烏賊生殖腺為材料,采用熱水浸提法提取多糖,經(jīng)過濃縮、醇沉、凍干等工藝得到白色海綿狀粗多糖。響應(yīng)面優(yōu)化所得的擬目烏賊生殖腺多糖水提最佳工藝參數(shù)為:料液比1∶30g/mL,提取溫度90℃,提取時(shí)間1h,此條件下的平均得率為0.751%,與理論預(yù)測值相符,該工藝操作簡單,重復(fù)性好,可指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐。

生物體內(nèi)自由基過多或清除緩慢均會(huì)引起分子、細(xì)胞甚至器官損傷,對(duì)于自由基清除作用的研究已成為新的熱點(diǎn)。目前人們使用較多主要是維生素C、維生素E和甘露醇等幾種抗自由基藥物,開發(fā)具有強(qiáng)效抗氧化功能的新型藥品具有重要意義。擬目烏賊生殖腺多糖具有一定的清除羥自由基、超氧陰離子自由基的能力,清除效果呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系,可以探索作為食品工業(yè)和制藥行業(yè)的天然抗氧化劑;IR圖譜顯示擬目烏賊生殖腺多糖是β-型糖苷鍵連接的吡喃型葡聚糖,后續(xù)分離純化后可對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)一步分析。

對(duì)擬目烏賊生殖腺水提殘?jiān)M(jìn)行堿法提取時(shí),得到一定量的堿溶性多糖。但是和水提多糖操作相比較,堿提多糖操作較繁瑣,提取液粘度較大且呈深黃色,有較濃的堿味,醇沉后得到黃色多糖,但相比水提法,其多糖得率更高,這可能和動(dòng)物組織中酸性多糖較多有關(guān)。改善其脫色工藝后可對(duì)水提、堿提多糖分離純化、結(jié)構(gòu)以及生物活性進(jìn)行探討比較。

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食品安全責(zé)任險(xiǎn)試點(diǎn)范圍擴(kuò)至全國

中國保監(jiān)會(huì)會(huì)同國務(wù)院食品安全委員會(huì)辦公室、國家食品藥品監(jiān)管總局聯(lián)合印發(fā)《關(guān)于開展食品安全責(zé)任保險(xiǎn)試點(diǎn)工作的指導(dǎo)意見》,標(biāo)志著我國食品安全責(zé)任保險(xiǎn)制度初步建立,相關(guān)試點(diǎn)工作將在全國范圍內(nèi)啟動(dòng)。

所謂食品安全責(zé)任保險(xiǎn),是以被保險(xiǎn)人對(duì)因其生產(chǎn)經(jīng)營的食品存在缺陷造成第三者人身傷亡和財(cái)產(chǎn)損失時(shí)依法應(yīng)負(fù)的經(jīng)濟(jì)賠償責(zé)任為保險(xiǎn)標(biāo)的的保險(xiǎn)。

《指導(dǎo)意見》鼓勵(lì)以下領(lǐng)域的食品生產(chǎn)經(jīng)營單位積極投保食品安全責(zé)任保險(xiǎn):食品生產(chǎn)加工環(huán)節(jié)的肉制品、食用油、酒類、保健食品、嬰幼兒配方乳粉、液態(tài)奶、軟飲料、糕點(diǎn)等企業(yè);經(jīng)營環(huán)節(jié)的集體用餐配送單位、餐飲連鎖企業(yè)、學(xué)校食堂、網(wǎng)絡(luò)食品交易第三方平臺(tái)的入網(wǎng)食品經(jīng)營單位等;當(dāng)?shù)靥赜械摹儆谑称钒踩鹿矢甙l(fā)的行業(yè)和領(lǐng)域。

據(jù)了解,在《指導(dǎo)意見》下發(fā)之前,浙江、上海、山東等地就已率先通過政府引導(dǎo)的方式開展了食品安全責(zé)任保險(xiǎn)的地方性試點(diǎn)。以首批獲得批準(zhǔn)試點(diǎn)食品安全責(zé)任保險(xiǎn)的長安責(zé)任保險(xiǎn)股份有限公司為例,其客戶之一就是一家主要面向?qū)W校的用餐配送企業(yè)。

“學(xué)校配餐如果管理不好,后果很嚴(yán)重?！遍L安責(zé)任保險(xiǎn)股份有限公司總經(jīng)理李峰認(rèn)為,有了食品安全責(zé)任保險(xiǎn)后,萬一發(fā)生事故,保險(xiǎn)公司可以預(yù)先支付,給予消費(fèi)者及時(shí)賠付,也能有效轉(zhuǎn)移和減少企業(yè)的風(fēng)險(xiǎn)損失。

對(duì)于企業(yè)來說,投保食品安全責(zé)任保險(xiǎn)也是一種信用背書。據(jù)保監(jiān)會(huì)有關(guān)負(fù)責(zé)人士介紹,《指導(dǎo)意見》將食品安全責(zé)任保險(xiǎn)試點(diǎn)情況納入地方食品安全工作考核評(píng)價(jià)體系,企業(yè)投保情況也將納入企業(yè)信用記錄和分級(jí)分類管理指標(biāo)體系,已投保企業(yè)可優(yōu)先獲得行業(yè)專項(xiàng)支持和政府扶持政策。

《指導(dǎo)意見》還提出,各地要充分發(fā)揮保險(xiǎn)的風(fēng)險(xiǎn)控制和社會(huì)管理功能,探索建立政府、保險(xiǎn)機(jī)構(gòu)、企業(yè)、消費(fèi)者多方參與、互動(dòng)共贏的激勵(lì)約束機(jī)制和風(fēng)險(xiǎn)防控機(jī)制,為全面推行食品安全責(zé)任保險(xiǎn)制度積累經(jīng)驗(yàn)。

來源：慧聰食品工業(yè)網(wǎng)

Study on the extraction optimization and antioxidant activity ofpolysaccharides in gonad ofSepialycidas

DAI Hong-jie1,2,SUN Yu-lin1,ZHENG Xiao-lin2,*,CHEN Dao-hai1,*

(1.Life Science and Technology School,Lingnan Normal University,Zhanjiang 524048,China;2.College of Food and Biological Engineering,Zhejiang Gongshang University,Hangzhou 310018,China)

Using the gonad ofSepialycidasas raw material,optimization of extraction polysaccharides process was studied by using Box-Behnken design based on the results of single-factor test;antioxidant activity of polysaccharides was evaluated by its superoxide anion and hydroxyl free radical scavenging abilities. The results showed that the optimal extraction parameters were as follows:1∶30g/mL for ratio of raw material to water,90℃ for extraction temperature,and 1h for extraction time. Under the optimal conditions,the extraction rate of polysaccharides was 0.751%. The polysaccharides had good abilities to scavenge hydroxyl and superoxide anion free radical. It was indicated to a positive correlation with concentration of polysaccharides. IR spectrum showed that the polysaccharide was pyranoid glucan with β-glycosidic bond.

Sepialycidasgonad;polysaccharides;extraction;antioxidant activity;IR spectrum

2014-06-11

戴宏杰 (1990-)，男，碩士研究生，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏。

*通訊作者:陳道海(1963-)，男，博士，教授，研究方向：海洋藥用動(dòng)物的開發(fā)利用與保護(hù)研究。 鄭小林(1966-)，男，博士，教授，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏。

國家星火計(jì)劃項(xiàng)目(2012GA780020)；廣西科技合作與交流計(jì)劃項(xiàng)目，桂科合(1346011-25)；廣東省教育部產(chǎn)學(xué)研合作專項(xiàng)(2011B090400274)；廣東省海洋漁業(yè)技術(shù)推廣專項(xiàng)(A200899E01)；湛江市科技攻關(guān)項(xiàng)目(2011D0244)；嶺南師范學(xué)院博士啟動(dòng)項(xiàng)目(ZL1313)。

TS254.1

B

1002-0306(2015)05-0198-06

10.13386/j.issn1002-0306.2015.05.033