腎小管上皮及腎臟局部病理改變對腎結(jié)石形成的臨床價值分析

四川省廣元市第四人民醫(yī)院內(nèi)科(廣元 628001)

鄧武成

·臨床病理·

腎小管上皮及腎臟局部病理改變對腎結(jié)石形成的臨床價值分析

四川省廣元市第四人民醫(yī)院內(nèi)科(廣元 628001)

鄧武成

目的：探討腎小管上皮及腎臟局部病理改變在腎結(jié)石形成中的作用機(jī)制。方法：選取89例腎結(jié)石患者作為實(shí)驗(yàn)組，90例腎癌患者的腎標(biāo)本作為對照組，檢測兩組腎小管上皮的骨橋蛋白、骨形成蛋白-2(BMP-2)和II型膠原的表達(dá)情況。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組患者結(jié)石多以混合的形式存在；兩組腎小管上皮及腎臟局部病理改變中均可見骨橋蛋白表達(dá)，實(shí)驗(yàn)組高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，骨橋蛋白主要在腎集合管和腎小管上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)表達(dá)；BMP-2、II型膠原在腎小管上皮及腎臟病理局部組織中均未見表達(dá)。結(jié)論：骨橋蛋白在腎結(jié)石患者的腎小管上皮細(xì)胞中表達(dá)，BMP-2、II型膠原未見表達(dá)，因此腎小管上皮及腎臟局部病理改變時骨橋蛋白可能促進(jìn)腎結(jié)石的形成。

腎結(jié)石是機(jī)體內(nèi)病理生物礦化的結(jié)果，草酸鈣是其主要成分。腎小管上皮細(xì)胞損傷既可以導(dǎo)致細(xì)胞與晶體相互作用，同時細(xì)胞與晶體相互作用也可以促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞的損傷進(jìn)而加重至形成腎結(jié)石[1,2]。本研究探討了腎小管上皮及腎臟局部病理改變在腎結(jié)石形成中的作用機(jī)制，現(xiàn)報道如下。

資料與方法

1 一般資料 收集2012年1月至2013年12月我院收治的行經(jīng)皮腎鏡碎石術(shù)(PCNL)的腎結(jié)石患者89作為本研究的實(shí)驗(yàn)組。其中男52例，女37例；年齡18～76歲，平均年齡47.5±8.3歲。于同一時間收集腎內(nèi)科腎癌患者90例的結(jié)石標(biāo)本作為本研究的對照組。其中男57例，女33例；年齡21～74歲，平均年齡46.8±8.9歲。兩組基線資料具有可比性(P>0.05)。

2 方 法

2.1 分析結(jié)石成分：患者于PCNL手術(shù)后收集患者結(jié)石作結(jié)石成分分析。①打開紅外光譜儀電源，打開計(jì)算機(jī)。②開啟紅外光譜工作站，初始化后儀器自檢。③設(shè)置紅外光譜的范圍為4000～5000cm-1。④進(jìn)行掃描。⑤制備并檢測樣品。⑥保存并分析結(jié)果。

2.2 電鏡掃描觀察：將草酸鈣分別加到置于12孔板的細(xì)胞中，然后用D-Hanks對細(xì)胞進(jìn)行洗滌。加入戊二醛(2.5%)固定2h，用乙醇脫水、二氧化碳進(jìn)行干燥，最后噴金包被在電鏡(美國Philips公)下觀察，觀察晶體生長情況、晶體的組分和細(xì)胞的形態(tài)。

2.3 細(xì)胞損傷檢測：用酶標(biāo)儀[美谷分子儀器(上海)有限公司]檢測細(xì)胞的吸光度A值，設(shè)置波長n=450nm。

3 檢測指標(biāo) 分別檢測兩組腎結(jié)石中的的骨橋蛋白、骨形成蛋白-2(BMP-2)和II型膠原的表達(dá)情況。

結(jié) 果

1 實(shí)驗(yàn)組腎結(jié)石成分分析結(jié)果 經(jīng)過分析，實(shí)驗(yàn)組患者結(jié)石多以混合的形式存在，見表1。

表1 實(shí)驗(yàn)組腎結(jié)石成分分析結(jié)果

2 骨橋蛋白在腎小管上皮及腎臟病理局部組織中的表達(dá) 實(shí)驗(yàn)組與對照組中均可見骨橋蛋白表達(dá),見表2。

表2 骨橋蛋白在兩組的表達(dá)的比較

注：兩組比較P<0.05

討 論

人體的正常細(xì)胞可以通過細(xì)胞間的緊密連接來完成細(xì)胞間的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，同時也有利于抵抗外來的不利因素[3,4]。腎結(jié)石是由機(jī)體內(nèi)病理生物礦化所產(chǎn)生的，草酸鈣是其主要成分，因此草酸鈣水平過高是尿石病的主要危險因素。導(dǎo)致腎結(jié)石的主要因素是腎小管上皮細(xì)胞的損傷，因?yàn)槟I小管上皮細(xì)胞損傷會促進(jìn)草酸鈣的生成。細(xì)胞損傷之后，形態(tài)改變，緊密連接結(jié)構(gòu)被破壞，磷脂雙分子層不再對稱，膜的極性消失，細(xì)胞的防御機(jī)制被破壞[5]。細(xì)胞損傷部位是晶體形成的主要位置，細(xì)胞損傷的產(chǎn)物可促進(jìn)細(xì)胞與晶體的黏附，因而促進(jìn)了腎結(jié)石的形成。由此可知，腎小管上皮細(xì)胞損傷既可以導(dǎo)致細(xì)胞與晶體相互作用，同時細(xì)胞與晶體相互作用也可以促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞的損傷進(jìn)而加重至形成腎結(jié)石。細(xì)胞損傷還會導(dǎo)致蛋白分子表達(dá)量發(fā)生變化，腎小管上皮細(xì)胞受損會使骨橋蛋白、跨膜糖蛋白、膠原蛋白、唾液酸糖蛋白等的含量增加，這些蛋白含量的變化與腎小管上皮細(xì)胞的損傷有密切關(guān)系[6]。

正常的腎小管上皮細(xì)胞具有抑制晶體黏附的作用，表明暴露的部分成核位點(diǎn)可形成COD，并無明顯的促進(jìn)結(jié)石形成的作用。晶體增大的過程中，腎小管上皮細(xì)胞能夠誘導(dǎo)單個的COD的生成，不利于晶體的成核生長，因此具有抑制晶體黏附的作用。正常人體內(nèi)含有草酸鈣晶體，但是不形成結(jié)石。因?yàn)檎Ｈ瞬菟徕}晶體的COD水平較高，而結(jié)石患者的草酸鈣晶體中主要是COM，由此表明COD對人體無害，并且可能是人體中的一種保護(hù)機(jī)制用來抵制尿液中草酸鈣過飽和的狀態(tài)。

本研究探討了腎小管上皮及腎臟局部病理改變在腎結(jié)石形成中的作用機(jī)制。研究結(jié)果表明骨橋蛋白含量的變化與腎小管上皮細(xì)胞的損傷有密切關(guān)系。BMP-2、II型膠原在腎小管上皮及腎臟病理局部組織中均未見表達(dá)。結(jié)果說明尿結(jié)石成分分析可以有效的反映由于結(jié)石的形成對尿液造成的改變，以及對正常機(jī)體形成的影響。目前腎小管上皮細(xì)胞損傷在腎結(jié)石形成中的作用是很明確的，所以想要預(yù)防腎結(jié)石的發(fā)生，必須及早的抑制腎小管上皮細(xì)胞的損傷，由此可知如能對已損傷的上皮細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)，也是一種治療腎結(jié)石的有效方法。

骨橋蛋白在腎結(jié)石患者的腎小管上皮細(xì)胞中表達(dá)，BMP-2、II型膠原未見表達(dá)，因此腎小管上皮及腎臟局部病理改變時骨橋蛋白可能促進(jìn)腎結(jié)石的形成，對腎結(jié)石的形成有很重要的臨床價值，值得繼續(xù)研究。

[1] 陳書尚,孫穎浩,高小峰,等. 草酸和草酸鈣結(jié)晶損傷腎小管上皮細(xì)胞的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J].中華泌尿科雜志.2011,32(6):387-391.

[2] 孟冬冬,鄧耀良,黎承陽,等. 鈣化性納米微粒與人腎小管上皮細(xì)胞相互作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華泌尿科雜志.2011,32(11):754-757.

[3] 余小祥,張瑞明,周大慶,等.502例尿路結(jié)石患者資料分析[J].華南國防醫(yī)學(xué)雜志,2012,26(6):599-601.

[4] 劉建河,潘 駿. 鈣化納米微粒誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞自噬的研究[J].中華泌尿科雜志,2012,33(1):37-40.

[5] 辛文虎,明 星. 腎小管上皮細(xì)胞損傷與草酸鈣腎結(jié)石形成機(jī)制的研究進(jìn)展[J].國際泌尿系統(tǒng)雜志.2013,33(4):539-542.

[6] 王艷梅, 趙豫鳳, 楊加周, 等. TGF-β-1 在人胎兒腎臟發(fā)育中的表達(dá)[J]. 陜西醫(yī)學(xué)雜志, 2012 41(8): 959-961.

(收稿：2015-08-06)

Clinical value analysis of renal tubular epithelium and renal local pathological changes on kidney stone formation Department of Internal Medicine，The Mental Health Center In GuangYuan

(Guangyuan 628001)

Deng Wucheng

Objective: To study the role of renal tubular epithelium and kidney local pathological changes in kidney stone formation. Methods: 89 cases of renal calculi patients were selected as the experimental group, 90 cases of patients with renal cell carcinoma renal specimens as control group, the expression of renal tubular epithelial osteopontin, bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) and type II collagen were detected. Results: The calculi mostly existed in the form of mixture, including of mixture was the calcium calculi (91.01%), calcium oxalate calculi (84.27%), uric acid/uric acid salt (14.61%), carbonate apatite (8.99%), and ammonium magnesium phosphate hexahydrate (11.24%). Osteopontin was expressed in both two groups and the experimental group was significantly higher than that in the control group. Osteopontin was mainly expressed in the cytoplasm of renal collecting renal tubular epithelial cells. Expression of BMP-2 and collagen II were not observed in renal tubular epithelial or renal pathological local tissues. Conclusion: Osteopontin is expressed in the renal tubular epithelial cells of patients with kidney stones, while BMP-2 and type II collagen were not. Thus, osteopontin might promote the formation of kidney stones during the pathological change of renal tubular epithelium osteopontin and kidney local.

Kidney calculi/ Pathology @Renal tubular epithelial cell

腎結(jié)石/病理學(xué) @腎小管上皮細(xì)胞

R692.4

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.12.059