清肝利膽口服液薄層色譜鑒別方法改進(jìn)

陳秀杰，耿冶飛，李 佳

（河南省鶴壁市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 鶴壁 458030）

清肝利膽口服液薄層色譜鑒別方法改進(jìn)

陳秀杰，耿冶飛，李 佳

（河南省鶴壁市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 鶴壁 458030）

目的 對清肝利膽口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中綠原酸、梔子苷薄層色譜鑒別法進(jìn)行改進(jìn)。方法 采用薄層色譜法對清肝利膽口服液中綠原酸、梔子苷進(jìn)行鑒別。結(jié)果 改進(jìn)后薄層色譜斑點(diǎn)清晰，重復(fù)性和適應(yīng)性均好。結(jié)論 改進(jìn)后的方法操作更簡便，重復(fù)性和適應(yīng)性更好，值得推廣。

清肝利膽口服液；薄層色譜法；方法改進(jìn)

清肝利膽口服液標(biāo)準(zhǔn)收載于2010年版《中國藥典（一部）》［1］，臨床常用于熱毒壅盛所致的發(fā)熱面赤、煩躁口渴、咽喉腫痛，流感、上呼吸道感染見上述證候者。筆者在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)，標(biāo)準(zhǔn)中薄層色譜（TLC）法鑒別綠原酸、梔子苷時操作比較煩瑣。為此，對其薄層色譜法進(jìn)行了改進(jìn)，效果不錯，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

半自動點(diǎn)樣儀（Camag Nanomat4公司）；電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；硅膠預(yù)制板G（青島海洋化工廠分廠，批號為20140304，規(guī)格為100 mm×200 mm）；聚酰胺薄膜（浙江省臺州市路橋四甲生化塑料廠，批號為20140215，規(guī)格為100 mm× 200 mm）；DZKW－4型電熱恒溫水浴鍋（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）；CPA225D型電子天平（德國Sartorius公司）；雙超展開缸（上海信宜儀器廠）。綠原酸對照品（批號為110753－200413）、梔子苷對照品（批號為110749－200512），均購自中國藥品生物制品檢定所；清肝利膽口服液（河南信心藥業(yè)有限公司，規(guī)格為10 mL，批號為111104，120202，121010，130307，131105，編號A1－A5；香雪制藥有限公司，規(guī)格為10 mL，批號為201206003，201301006，201303003，201308001，201308001，編號B7－B11）；水為娃哈哈純凈水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 綠原酸

藥典法：取本品10 mL，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至4，離心，取上清液，通過聚酰胺柱（30～60目，內(nèi)徑為1 cm），用水洗至中性，再用丙酮15 mL洗脫，收集丙酮洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取綠原酸對照品1 mg，加甲醇制成1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述2種溶液各2 μL，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果，供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，見圖1 A。

改進(jìn)法：取本品10 mL，水浴蒸干，殘?jiān)右掖? mL使溶解，濾過，濾液濃縮至2 mL，作為供試品溶液。取綠原酸對照品1 mg，加乙醇制成1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述2種溶液各2 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯－甲酸－水（7∶2.5∶2.5）［2］，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，見圖1 B。

圖1 綠原酸薄層色譜圖

2.2 梔子苷

藥典法：取本品30 mL，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次30 mL，合并正丁醇提取液，用氨試液25 mL洗滌，棄去洗滌液，再用正丁醇飽和水洗滌2次，每次25 mL，取正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取梔子苷對照品1 mg，加甲醇制成1 mL含0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述2種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇（11∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，見圖2 A。

改進(jìn)法：取本品10 mL，蒸干，殘?jiān)颖? mL攪拌使溶解，取上清液作為供試品溶液。取梔子苷對照品1 mg，加乙醇制成1 mL含0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述2種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇（3∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在100℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，見圖2 B。

圖2 桅子苷薄層色譜圖

3 討論

［3－5］的基礎(chǔ)上，優(yōu)選了樣品處理方法和薄層色譜展開條件，從不同廠家、不同批號的清肝利膽口服液使用改進(jìn)法的試驗(yàn)結(jié)果看，效果明顯好于藥典法。

改進(jìn)法中把所有的甲醇更換為乙醇，可明顯減小試劑對檢驗(yàn)人員的毒性；供試品溶液的制備均更改為水浴蒸干乙醇溶解即得，可以大大縮短檢驗(yàn)用時，提高工作效率。

由圖譜結(jié)果可見，改進(jìn)法得到的圖譜斑點(diǎn)比藥典法分離效果好且清晰，方法也更簡單，適應(yīng)性比較強(qiáng)，值得推廣。

參考文獻(xiàn)：

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：1 115.

［2］劉訓(xùn)紅.中藥材薄層色譜鑒別［M］.天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，1990：338.

［3］肖宏華，甄 誠，劉開玉.薄層色譜法鑒別雙黃連口服液中金銀花成分的改進(jìn)［J］.首都醫(yī)藥，2013，20（24）：73－74.

［4］翁劍鋒，陳 浩.熱敏灸艾條的薄層色譜鑒別及綠原酸含量的測定［J］.江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，17（3）：49－50.

［5］楊季菱.梔子中梔子苷的薄層色譜鑒別［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2005，11（3）：67.

Improvement of TLC Identification Method of Qinganlidan Oral Liquid

Chen Xiujie，Geng Yefei，Li Jia
（Hebi Municipal Institute for Food and Drug Control，Hebi，Henan，China 458030）

ObjectiveTo improve the TLC identification method of chlorogenic acid and geniposide in the quality standard of Qinganlidan Oral Liquid.MethodsThe chlorogenic acid and geniposide in the qinganlidan Oral Liquid were identificed by TLC.ResultsThe TLC spots were distinct，more reproducible and adaptable after improvement.ConclusionThe method is simple，reproducible and adaptable，which is worthy of promotion.

Qinganlidan oral liguid；TLC；methods to improved

R284.1；R286.0

A

1006－4931（2015）02－0049－02

陳秀杰，女，主管中藥師，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量檢驗(yàn)，（電子信箱）844094017＠qq.com。

2014－06－26）