參歸五加顆粒對蛋雛雞免疫功能的影響

程 佳，孫耀貴，段智變，艾榮強，李宏全

（山西農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，山西 太谷 030801）

在我國的養(yǎng)禽生產(chǎn)實踐中，禽病直接影響禽類養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益。其中，一個不容忽視的核心問題便是免疫抑制。病毒感染、應激等引起的免疫抑制性疾病不僅損害禽體的免疫器官，使免疫功能降低，生產(chǎn)性能下降，而且會導致繼發(fā)感染、混合感染的大量發(fā)生，使一些過去很容易控制的疾病變得難以防控。中藥作為飼料添加劑兼有藥物和營養(yǎng)的雙重作用，既可防病治病，又能提高禽類的生產(chǎn)性能?，F(xiàn)代中藥藥理研究表明，中藥中含有的生物堿、多糖、苷類、揮發(fā)油、有機酸等生物活性物質(zhì)，能夠通過多靶向的作用，提高機體的免疫力和抗病力。在養(yǎng)殖過程中，通過添加無公害的純中藥飼料添加劑提高禽體的免疫功能，對于疾病的防控和健康養(yǎng)殖具有重要的現(xiàn)實意義。中藥配方顆粒是在中醫(yī)藥理論的指導下，經(jīng)現(xiàn)代制藥工藝將單味中藥飲片制成的一種可供臨床直接配方使用的顆粒中藥，作為一種新的中藥應用形式，它既保留了原藥材飲片的有效成分和功效，又具有劑量準確、安全高效、質(zhì)量可控、使用便利等優(yōu)點，可有效滿足中藥標準化、產(chǎn)業(yè)化、現(xiàn)代化和國際化的需求[1]。目前，有關中藥配方顆粒在動物養(yǎng)殖中的應用還未見報道?；谏鲜鲈颍驹囼炦x取黨參配方顆粒、當歸配方顆粒、刺五加配方顆粒，按一定比例混合成參歸五加配方顆粒，研究其對蛋雛雞免疫功能的影響，以為該顆粒劑的進一步開發(fā)利用和深入研究提供依據(jù)，同時為新型禽用中草藥飼料添加劑的研制提供思路。

1 材料與方法

1.1 試驗藥物和疫苗 參歸五加顆粒：由黨參配方顆粒、當歸配方顆粒、刺五加配方顆粒（廣東一方制藥有限公司），按一定比例配比組成。

雞新城疫LaSota 株活疫苗（山西海森生物制品有限公司）。

1.2 試驗動物、分組與處理 1 日齡海藍褐蛋雛雞240 只，購自山西康牧禽業(yè)有限公司。按常規(guī)方法在相同條件下進行飼養(yǎng)和管理。雛雞在7 日齡時用雞新城疫LaSota 株活疫苗點眼，每只雞點眼2 頭份。在14 日齡時，挑選200 只體重均勻的雛雞，用LaSota 株活疫苗進行第2 次點眼免疫（2頭份/只），隨機分為4 組，每組5 個重復，每個重復10 羽。1 組為空白對照組，2～4 組在飼料中分別添加0.05%參歸五加顆粒、0.1%參歸五加顆粒、0.2%參歸五加顆粒。整個飼養(yǎng)期為35 d。所用配合飼料，購自山西正大有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 免疫器官指數(shù)的測定 在雛雞14、21、28、35 日齡時，每個試驗組取雞5 只，處死，取腔上囊、胸腺和脾臟，稱重。按以下公式計算免疫器官指數(shù)：免疫器官指數(shù)（mg/g）=免疫器官重量（mg）/體重（g）。

1.3.2 血液樣品采集與處理 分別于21、28、35日齡時，隨機從每組取雞5 只，稱重并編號，無菌心臟采血3 mL，待自然析出血清后，將血清分裝入EP 管，置于冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3 血清NDHI 抗體效價的測定 采用β-微量血凝抑制試驗法測定，抗體效價用log2的平均值表示[2]。

1.4 數(shù)據(jù)處理 采用SPSS17.0 軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。以ONE-WAY ANOVA程序計算各組各項指標平均數(shù)和標準差，用LSD（最小顯著級差）法和Duncan's 多重比較對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。試驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差（Mean±SD）表示。

2 結果與分析

2.1 參歸五加顆粒對蛋雛雞免疫器官指數(shù)變化的影響

2.1.1 胸腺指數(shù)測定結果 見表1。

表1 胸腺指數(shù)測定值

表1 顯示，在21 日齡時，第2、3、4 組與第1 組相比，胸腺指數(shù)均顯著增高（P＜0.05）；第3 組的胸腺數(shù)顯著高于第2、4 組（P＜0.05）。在28 日齡時，第3、4 組與第1 組相比，胸腺指數(shù)顯著增高（P＜0.05）。在35 日齡時，第3、4 組與第1 組相比，胸腺指數(shù)顯著增高（P＜0.05）；第3 組的胸腺指數(shù)顯著高于第4 組（P＜0.05）。

2.1.2 脾臟指數(shù)測定結果 見表2。

表2 脾臟指數(shù)測定值

由表2 可以看出，在21 日齡時，第2、3、4 組與第1 組相比，脾臟指數(shù)均顯著增高（P＜0.05）；第3組的脾臟指數(shù)顯著高于第2、4 組（P＜0.05）。在28日齡時，第3、4 組與第1 組相比，脾臟指數(shù)顯著增高（P＜0.05）；第3 組的脾臟指數(shù)顯著高于第4 組（P＜0.05）。在35 日齡時，第3、4 組與第1 組相比，脾臟指數(shù)顯著增高（P＜0.05）；第3 組的脾臟指數(shù)顯著高于第4 組（P＜0.05）。

2.1.3 腔上囊指數(shù)測定結果 見表3。

表3 腔上囊指數(shù)測定值

由表3 可知，在21 日齡時，第3、4 組與第1 組相比，腔上囊指數(shù)顯著增高（P＜0.05）；第3 組的腔上囊指數(shù)顯著高于第4 組（P＜0.05）。在28 日齡時，第2、3、4 組與第1 組相比，腔上囊指數(shù)顯著增高（P＜0.05）；第3 組的腔上囊指數(shù)顯著高于第2、4組（P＜0.05）；第4 組的腔上囊指數(shù)顯著高于第2 組（P＜0.05）。在35 日齡時，第3、4 組與第1 組相比，腔上囊指數(shù)顯著增高（P＜0.05）；第3 組的腔上囊指數(shù)顯著高于第4 組（P＜0.05）。

2.2 參歸五加顆粒對蛋雛雞血清NDHI 抗體效價的影響 見表4。

表4 血清NDH I抗體效價測定值（log2）

由表4 可知，在21 日齡時，第2、3、4 組與第1 組相比，NDHI 抗體水平顯著增高（P＜0.05）；第3 組的NDHI 抗體水平顯著高于第4 組（P＜0.05）；第4 組的NDHI 抗體水平顯著高于第2 組（P＜0.05）。在28 日齡時，第3、4 組與第1 組相比，NDHI 抗體水平顯著增高（P＜0.05）。在35 日齡時，第3、4 組與第1 組相比，NDHI抗體水平顯著增高（P＜0.05）；第3組的NDHI抗體水平顯著高于第4 組（P＜0.05）。

3 討論與結論

傳統(tǒng)中藥飼料添加劑直接將中藥粉碎作為散劑使用，存在添加量大、質(zhì)量可控性差等問題，加之禽類消化道相對較短，不利于傳統(tǒng)散劑的消化吸收，為此本研究首次嘗試用配方顆粒作為用藥形式，觀察其對蛋雛雞免疫功能的影響。免疫器官（胸腺、脾臟和腔上囊）指數(shù)是判斷禽類整體免疫水平或免疫功能的評價指標[3]。本研究在蛋雛雞飼料中添加中草藥飼料添加劑參歸五加顆粒后，對3 種免疫器官指數(shù)的變化情況進行了檢測，結果顯示，添加0.1%參歸五加顆粒的第3 組雛雞的脾臟指數(shù)、腔上囊指數(shù)和胸腺指數(shù)均顯著高于空白對照組；添加0.2%參歸五加顆粒的第4 組的3 種免疫器官指數(shù)也明顯高于空白對照組，但效果不及添加0.1%參歸五加顆粒的第3 組。血清中NDHI 效價是機體免疫活性細胞產(chǎn)生的特異性免疫分子，是評價特異性體液免疫功能狀態(tài)的重要檢測指標[4]。本試驗結果顯示，雛雞飼料中按0.1%添加參歸五加顆粒后，血清NDHI 抗體效價與空白對照組相比，顯著升高，說明參歸五加顆粒明顯提高了機體的免疫功能，發(fā)揮了明顯的免疫增強作用。

黨參為桔?？浦参稂h參的根，味甘性平，具有補中益氣、健脾益肺之功，其主要活性成分為黨參多糖、三萜皂苷類、黨參炔苷、黨參苷及萜類[5]。當歸為傘形科植物當歸的干燥根，味辛、甘而性溫，主要具有補血活血之功，其主要活性成分是當歸多糖、有機酸和揮發(fā)油類。其中，阿魏酸是有機酸部分的主要成分[6]。刺五加為五加科植物刺五加的干燥根和根莖或莖，葉和果實也可作藥用。味辛、微苦，溫，具有益氣健脾、補腎安神之功，其主要活性成分是刺五加多糖和皂苷[7]?，F(xiàn)代藥理研究表明，參歸五加顆粒中主要活性成分多糖、皂苷、有機酸等均具有一定的免疫增強作用。本研究證實，飼料中添加0.1%和0.2%參歸五加顆粒均可提高蛋雛雞的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和腔上囊指數(shù)，提高血清NDHI 抗體效價，從而增強蛋雛雞的免疫功能。在生產(chǎn)實踐中以添加0.1%參歸五加顆粒為最佳。研究結果為中藥配方顆粒在禽類養(yǎng)殖業(yè)中的應用提供了依據(jù)。

[1]王金鳳，張欽德.中藥配方顆粒藥效學研究進展[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2013，8：110-112.

[2]姚火春.獸醫(yī)微生物學實驗指導[M].2 版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：105-107.

[3]程相朝，張春杰，李銀聚，等.中藥免疫增強劑對肉仔雞免疫器官生長發(fā)育及免疫活性細胞影響的研究[J].中獸醫(yī)學雜志，2002，3：28-31.

[4]操繼躍，周洪波，盧笑叢.氟苯尼考和中草藥黃芪淫羊藿合劑對雞體液免疫反應的影響[J].畜牧獸醫(yī)學報，2003，34（4）：412-416.

[5]馮佩佩，李忠祥，原忠.黨參屬藥用植物化學成分和藥理研究進展[J].沈陽藥科大學學報，2012，29（4）：307-311.

[6]李明，李慧芬，崔偉亮，等.當歸主要化學成分及抗病毒、抗炎藥理作用研究進展[J].山東中醫(yī)雜志，2013，32（9）：694-695.

[7]賈繼明，王宏濤，王宗權，等.刺五加的藥理活性研究進展[J].中國現(xiàn)代中藥，2012，12（2）：7-12.