2013 年甘肅省清水縣雞禽流感抗體效價的檢測與分析

汪 旭，蔡小平，李宏喜

（甘肅省清水縣畜牧獸醫(yī)局，甘肅 清水 741400）

禽流感（AI）是由A型流感病毒引起多種家禽及野鳥的一種高度接觸性傳染病，雞體免疫抗體監(jiān)測是了解疫苗免疫狀況的最有效方法。通過分析檢測結果，可以適時指導防疫工作。我們應用血清學方法對清水縣18 鄉(xiāng)鎮(zhèn)健康雞血清進行檢測，并對檢測資料進行分析，以供清水縣防疫工作參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來源 清水縣18 鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機采集的健康雞血清樣品255 份（在-20 ℃儲存）。

1.2 試劑 等滲PBS緩沖液（0.1 mol/L，pH 值7.0～7.2）；阿氏（Alsevr′s）液；禽流感H5 HI 血清以及陰性血清；禽流感H5 HI 抗原；3 只SPF 雞的紅細胞（1%RBC）。

1.3 試驗方法 首先，對255 份雞血清樣品進行滅活，然后制備成雞紅細胞懸液。接著，以高致病性禽流感診斷技術為依據(jù)進行抗原標定。最后，進行血凝抑制（HI）試驗，以《高致病性禽流感診斷技術》為依據(jù)進行操作[2]（見表1）。

表1 血凝抑制試驗操作術式 單位：μL

2 結果

H5 亞型抗原標定的血凝價為210，應用于血凝抑制（HI）試驗的4 個血凝單位抗原的稀釋倍數(shù)為28。清水縣18 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)雞禽流感抗體的血清學檢測結果如表2。

在檢測的陽性結果中，清水縣雞禽流感H5 亞型HI 最高抗體滴度為28；HI 最低抗體滴度為23。全縣總體血清抗體陽性率為79.8%，其中血清抗體陽性率最高是紅堡、白沙兩鎮(zhèn)，陽性率高達100%；陽性率較低的是松樹鄉(xiāng)和豐望鄉(xiāng)，陽性率分別是66.67%和68.42%；根據(jù)農業(yè)部《高致病性禽流感和口蹄疫等重大動物疫病免疫方案》的相關規(guī)定，HI 抗體效價≥25，且存欄禽群免疫抗體合格率必須≥70%判定為合格[5]，清水縣18 鄉(xiāng)鎮(zhèn)中有16 個其雞禽流感H5 亞型疫苗的免疫合格，有豐旺、松樹等2 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)未達到標準，清水縣禽流感血清抗體陽性率具體分布見圖1。

表2 2013年清水縣18個鄉(xiāng)鎮(zhèn)禽流感抗體血清學檢測結果

圖1 清水縣18鄉(xiāng)鎮(zhèn)血凝抑制試驗（H I）血清抗體陽性率分布

3 分析與討論

3.1 抗體效價 從總體監(jiān)測結果來看，清水縣的禽流感免疫抗體效價及抗體水平總體較高，保持在70%～100%左右，基本達到農業(yè)部《高致病性禽流感和口蹄疫等重大動物疫病免疫方案》中規(guī)定的禽流感HI 抗體效價≥25判定為合格的，且合格率大于等于70%的總體要求[5]。說明清水縣家禽禽流感強制免疫密度大，效果較好。2012 年以來，雖然清水縣周邊省市曾暴發(fā)禽流感疫情，而本地家禽飼養(yǎng)量大、交易頻繁，又是候鳥遷徙之地[6]，但發(fā)生禽流感疫情的幾率少之又少，更說明了免疫工作對于預防禽流感疫情的極端重要性。

3.2 季節(jié)對禽流感免疫抗體水平的影響 不同季節(jié)的家禽流感免疫抗體水平存在規(guī)律性的波動，總體合格率在冬春季節(jié)較高。這是因為冬春季節(jié)是禽流感的高發(fā)期，但在此期間，清水廣大養(yǎng)禽戶的免疫意識普遍增強，進行了密度大、覆蓋面廣的免疫工作，有力的防范了疫病的流行。

3.3 養(yǎng)殖管理水平對禽流感免疫抗體水平的影響 散養(yǎng)場的抗體檢測合格率普遍低于規(guī)模場。這是由于散養(yǎng)戶防疫意識相對較差，又容易受市場波動的影響，一旦獸醫(yī)管理部門督促不到位，在免疫注射、防疫消毒等工作就會存在漏洞。因此，一方面需要養(yǎng)殖戶進一步認識，另一方面需要獸醫(yī)管理部門加大監(jiān)管和督促工作力度。

對清水縣18 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)255 份雞血清進行血凝抑制試驗（HI），H5 亞型禽流感病毒總體陽性率較高，抗體滴度也較高，且各鄉(xiāng)鎮(zhèn)春季動物關于禽流感的防疫工作都搞得比較扎實?？沙醪酵茢嘣摰貐^(qū)大多數(shù)家禽對禽流感H5 亞型病毒可以產(chǎn)生較強的保護抗體。但是仍然有部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)抗體陽性率較低，其原因可能是由于抽樣的雞中有補欄禽，還未進行禽流感疫苗的免疫，或禽流感疫苗首免過程中沒有及時形成抗體，這對禽流感的防治存在很大的隱患。因此，對補欄禽的補針免疫工作要盡快進行，各鄉(xiāng)鎮(zhèn)政府和鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)站以及村防疫員要有高度的責任心，及時做好補欄禽的補針免疫工作。

[1]蔡寶祥.家畜傳染病學[M].4 版.北京：中國農業(yè)出版社，2006：169-173，304-310.

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[4]蔡劍平，肖堯，周曉陽，等.禽流感病毒的生物學特性及其實驗室檢測[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2005，28（3）：232-234.

[5]李秀英，禽流感疫苗HI 抗體的免疫力監(jiān)測[J].中國獸醫(yī)雜志，2006，42（2）：32-33.

[6]馬洪雨，徐玲，邵明旭.禽流感及其防治[J].中國畜牧獸醫(yī)，2004（03）：197-200.