2013年常見革蘭陰性桿菌的臨床分布及耐藥性分析*

劉 欣，劉遠程

(瀘州醫(yī)學院附屬中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，四川瀘州 646000)

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·臨床研究·

2013年常見革蘭陰性桿菌的臨床分布及耐藥性分析*

劉 欣，劉遠程△

(瀘州醫(yī)學院附屬中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，四川瀘州 646000)

目的 了解醫(yī)院感染常見革蘭陰性桿菌的臨床分布及耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物提供實驗室依據。方法 所有標本嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行，用西門子公司WalkAway-40型細菌鑒定儀鑒定細菌及進行藥敏試驗，用WHONET5.5軟件進行數據統計分析。結果 2013年分離出細菌2 316株，革蘭陰性菌1 601株，占69.1%；革蘭陽性球菌611株，占26.4%；真菌104株，占4.5%。其中大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌占革蘭陰性菌的前5位，檢出率分別為27.0%、18.4%、18.1%、16.5%、7.2%。檢出產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)菌株156株，檢出率為9.7%。革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物大多數呈現耐藥趨勢，除肺炎克雷伯菌外，其余革蘭陰性桿菌對三代頭孢的耐藥率都在30%以上；對慶大霉素、妥布霉素的平均耐藥率在30%以上；除鮑曼不動桿菌對阿米卡星耐藥率達53.9%外，其他革蘭陰性桿菌對阿米卡星耐藥率較低，在15.4%～26.4%；對喹諾酮類的耐藥率也在25%以上。其中銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類藥物的耐藥率分別達14.2%、37.5%。結論 革蘭陰性桿菌是醫(yī)院內感染的主要病原菌，特別是產ESBLs的菌株對頭孢菌素類耐藥顯著，多藥耐藥現象嚴重。臨床科室應加強病原學標本的送檢率，參考藥敏結果用藥或多種抗菌藥物聯合用藥，合理使用抗菌藥物。

革蘭陰性桿菌； 產超廣譜β-內酰胺酶： 抗菌藥物； 耐藥性

近年來，由于廣譜抗菌藥物的大量泛用、濫用，細菌耐藥性呈逐年上升趨勢，使醫(yī)院感染控制管理變得日益嚴峻。其中產ESBLs的革蘭陰性桿菌容易引起醫(yī)院感染的暴發(fā)流行，并且所涉菌株多藥耐藥現象嚴重，給臨床治療帶來很大困難。作者回顧性分析了本院2013年1～12月住院患者醫(yī)院感染革蘭陰性桿菌的臨床分布及耐藥狀況，探討其流行病學規(guī)律、耐藥機制、耐藥特征，旨在為臨床醫(yī)師合理使用抗菌藥物提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2013年1～12月本院送檢的各種疑似感染標本中分離革蘭陰性桿菌共計1 601株，剔除同一患者相同部位的同一菌株。

1.2 儀器與試劑 BACT/ALERT 3D血培養(yǎng)儀、MicroScan WalkAway-40微生物自動檢測儀及儀器配套的鑒定和藥敏板條，哥倫比亞血平板、巧克力平板、麥康凱平板、M-H平板等由重慶龐通科貿有限公司提供。藥敏紙片由Oxoid公司提供。

1.3 細菌鑒定和藥敏 均按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行分離培養(yǎng)[1]。不同的標本接種到不同培養(yǎng)基中。分離到的病原菌用MicroScan板條進行鑒定和藥敏試驗，抗菌藥物包括碳青霉烯類(亞胺培南、美羅培南)，氨基糖苷類(阿米卡星、慶大霉素、妥布霉素)，氟喹諾酮類(環(huán)丙沙星、左氧氟沙星)，β-內酰胺類/β-內酰胺酶抑制劑如替卡西林/克拉維酸以及三代頭孢(頭孢他啶、頭孢曲松)和四代頭孢(頭孢吡肟)。產ESBLs 細菌鑒定同時采用NCCLS1999年推薦的抑制劑增強紙片法(頭孢他啶/克拉維酸，頭孢噻肟/克拉維酸)確證。質控菌株大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853均由衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供。

1．4 統計學處理 采用WHONET5.5軟件進行數據統計分析，分析方法包括描述性分析。

2 結 果

2.1 病原菌的構成 從2013年1～12月共分離出病原菌2 316株，革蘭陰性菌1 601株，占69.1%；革蘭陽性球菌611株，占26.4%；真菌104株，占4.5%。革蘭陰性菌是臨床的主要病原菌,其中大腸埃希菌(382株,27.0%)、銅綠假單胞菌(295株,18.4%)、鮑曼不動桿菌(280株,18.1%)、肺炎克雷伯菌(264株,16.5%)、陰溝腸桿菌(103株,7.2%)占革蘭陰性菌的前5位。

表1 主要革蘭陰性菌對主要抗菌藥物的耐藥率[n(%)]

續(xù)表1 主要革蘭陰性菌對主要抗菌藥物的耐藥率(%)

注：…表示未檢測。

2.2 主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率 1 601株革蘭陰性菌中檢出ESBLs 156株，檢出率為9.7%，其中大腸埃希菌99株，占63.5%，肺炎克雷伯菌57株，占36.5%。革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物大多數呈現耐藥趨勢，除肺炎克雷伯菌外，其余革蘭陰性桿菌對三代頭孢的耐藥率都在30%以上；對慶大霉素、妥布霉素的平均耐藥率在30%以上；除鮑曼不動桿菌對阿米卡星耐藥率達53.9%外，其他革蘭陰性桿菌對阿米卡星耐藥率較低，在15.4%～26.4%；對喹諾酮類的耐藥率也在25%以上。其中銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類藥物的耐藥率分別達14.2%、37.5%。革蘭陰性菌對主要抗菌藥物的耐藥率見表1。

3 討 論

革蘭陰性桿菌是本院院內感染的主要病原菌，這和相關文獻報道相似[2]。隨著抗菌藥物在臨床上的廣泛使用，細菌的耐藥率不斷升高，革蘭陰性桿菌中產ESBLs菌株也在逐年上升，其對抗菌藥物廣譜耐藥可通過質粒傳播，容易引起醫(yī)院感染的暴發(fā)流行，使感染難以控制。表1顯示5種革蘭陰性桿菌對亞胺培南和美羅培南耐藥率最低,頭孢吡肟次之，所以亞胺培南和美羅培南是對抗革蘭陰性桿菌的最有效的抗菌藥物。但本院2013年還是出現了5株大腸埃希菌、2株陰溝腸桿菌、42株銅綠假單胞菌對亞胺培南耐藥，105株鮑曼不動桿菌對美羅培南耐藥，說明本院革蘭陰性桿菌對碳青霉烯類的耐藥性不容樂觀，應引起相關部門的高度重視，加強對碳青霉烯類藥物的規(guī)范應用。除肺炎克雷伯菌外，其余革蘭陰性桿菌對三代頭孢的耐藥率都在30%以上,有的甚至達到60%，主要是近年來是二、三代頭孢的大量使用，使細菌對新一代的β-內酰胺類抗菌藥物廣泛耐藥，主要原因是細菌質?；蛉旧w介導的ESBLs的產生。產ESBLs菌的嚴重危害性在于它的多重耐藥性、流行菌株的擴散以及質粒和耐藥基因的轉移。產ESBLs菌株對頭孢菌素類的耐藥率達到64.0%，對β-內酰胺類/β-內酰胺酶抑制劑如替卡西林/克拉維酸的耐藥性相對較低為38.0%。對氨曲南的耐藥率最高達到60.2%。另外大腸埃希菌和陰溝腸桿菌對氟喹諾酮的耐藥率在40%以上,高于周澄宇[3]的報道。鮑曼不動桿菌對所有抗菌藥物的總體耐藥率較高，是陰性桿菌中耐藥現象最嚴重的，這與鮑曼不動桿菌的多重耐藥機制有關[4]。銅綠假單胞菌除了對亞胺培南、阿米卡星、頭孢吡肟、左氧氟沙星的耐藥率較低，耐藥率在30%以下外，對其他抗菌藥物的耐藥性均較高。

近年來，由于臨床大量廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑的應用以及侵入性醫(yī)療操作的增多，使病原菌的感染率更高、耐藥現象更嚴重，加強耐藥菌的監(jiān)測顯得尤為重要。醫(yī)院感染的重要病原菌如產ESBLs腸桿菌科細菌、多藥耐藥銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌仍是監(jiān)測的重點[5-6]。同時，臨床科室需加強病原學標本的送檢率，在經驗用藥的同時，參考藥敏結果用藥或多種抗菌藥物聯合用藥。在日常工作中應減少不必要的侵入性操作,嚴格執(zhí)行醫(yī)療器械消毒和病房管理制度,特別是醫(yī)務人員的手可能是重要傳染源，應規(guī)范手衛(wèi)生，嚴格執(zhí)行無菌操作，做好嚴重感染患者的隔離，切斷傳播途徑[6]，避免交叉感染,嚴防醫(yī)院感染的暴發(fā)流行。同時加強碳青霉烯類抗菌藥物的規(guī)范應用，以減少產ESBLs的菌株和多藥耐藥菌株的產生，提高治愈率[7]。

[1]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006.

[2]王婧雯，王磊，劉渝，等.我院下呼吸道感染患者細菌分布及耐藥性分析[J].中國藥房，2011,22(10)：896-898.

[3]周澄宇.118株腸桿菌科病原菌分布及耐藥性分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2012,23(9):2945-2946.

[4]李民,王超，劉躍平，等.鮑曼不動桿菌耐藥機制的研究進展[J].現代中西醫(yī)結合雜志,2013,22(4):449-452.

[5]糜祖煌,秦玲,金輝,等.泛耐藥銅綠假單胞菌β-內酰胺酶基因分析及菌株親緣性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2009,19(13):1621-1623.

[6]常虹,張偉,王穎,等.鮑曼不動桿菌在ICU 的感染與預防[J].天津護理,2012,20(1):30-31..

[7]徐麗英，丁卉，陳麗燕，等.30株耐碳青酶烯類腸桿菌科細菌的調查分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2012，22(12)：2678-2680.

四川省科技廳、重慶市科委共建科技平臺項目資助項目(csts2012pt-sy0001)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.02.028

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1672-9455(2015)02-0207-02

2014-05-26

2014-11-13)

△通訊作者，E-mail:lzlylyc@163.com。