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    上饒地區(qū)真菌性角膜炎的病原學(xué)調(diào)查分析

    2015-03-09 11:36:08徐雅萍
    中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥 2015年28期
    關(guān)鍵詞:角膜炎真菌性曲霉菌

    徐雅萍 張 敏 陳 歡 董 科

    江西省德興市人民醫(yī)院五官科,江西德興 334200

    真菌性角膜炎為眼科常見(jiàn)感染性疾病,具有對(duì)視力損傷嚴(yán)重、治療困難等特點(diǎn),隨著抗生素、免疫抑制劑及糖皮質(zhì)激素的廣泛應(yīng)用,其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)[1]。真菌性角膜炎發(fā)病與患者職業(yè)、地區(qū)、氣候、植物外傷史密切相關(guān),江西省上饒地區(qū)為亞熱帶地區(qū),具有充足的雨水和光照,以農(nóng)作物為主,為真菌性角膜炎發(fā)病提供了有利條件,發(fā)病率較高[2]。為探究上饒地區(qū)真菌性角膜炎的病原學(xué)特征,筆者選取本地區(qū)88例(88 眼)真菌性角膜炎患者進(jìn)行研究,旨在為臨床提供治療、預(yù)防參考依據(jù)。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取2008 年1 月~2014 年10 月上饒地區(qū)確診為真菌性角膜炎患者88 例為研究對(duì)象,所有患者均為單眼發(fā)病。其中左眼48 例,右眼40 例;男60 例,女28 例;年齡21~78 歲,平均(50.2±2.5)歲;病程4 d~2 周;職業(yè):農(nóng)民74 例,工人10 例,干部2 例,學(xué)生1 例,其他1 例;植物外傷史63 例,無(wú)植物外傷史25 例。所有患者通過(guò)病史、臨床癥狀,結(jié)合相關(guān)輔助檢查均明確診斷為真菌性角膜炎,患者均自愿參加本次研究,并簽署知情同意書(shū)。

    1.2 方法

    1.2.1 標(biāo)本采集 采用1%鹽酸奧布卡因滴眼液于患眼滴3 滴,5 min 后在裂隙燈下用開(kāi)瞼器開(kāi)大眼瞼,用消毒針頭刮取病灶邊緣菌絲苔被。

    1.2.2 真菌涂片 取病灶邊緣的菌絲苔被均勻涂在已消毒的載玻片上,加1 滴10%KOH 液,蓋上蓋玻片,顯微鏡下查找真菌。

    1.2.3 真菌培養(yǎng) 取病灶邊緣的菌絲苔被,直接接種于沙氏瓊脂(SDA)培養(yǎng)基上,置于28℃溫箱孵育培養(yǎng)2 周,觀(guān)察有否真菌生長(zhǎng)。

    1.2.4 菌種鑒定 對(duì)SDA 上生長(zhǎng)出真菌種類(lèi)進(jìn)行鑒定。根據(jù)菌落肉眼和鏡下特征做出初步判定,將不同菌種接種于不同培養(yǎng)基上:曲霉菌屬接種于Czapek-Pox瓊脂培養(yǎng)基,念珠菌屬移種吐溫80 米粉瓊脂培養(yǎng)基,其余接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。將接種好的培養(yǎng)基置于27℃溫箱中培養(yǎng)48~72 h,后每天鏡下觀(guān)察真菌菌絲和分生孢子生長(zhǎng)情況,根據(jù)菌絲、分生孢子的形態(tài)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn),與標(biāo)準(zhǔn)菌珠的形態(tài)對(duì)照進(jìn)行菌種鑒定。

    2 結(jié)果

    2.1 兩種方法陽(yáng)性率的檢測(cè)

    真菌涂片鏡檢檢出陽(yáng)性60 份,陰性28 份,涂片陽(yáng)性檢出率為68.18%。真菌培養(yǎng)陽(yáng)性72 份,陰性16份,陽(yáng)性培養(yǎng)率為81.81%。

    2.2 培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本中菌種分屬的統(tǒng)計(jì)

    72 份真菌培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本中共檢出12 屬24 種病原菌。其中鐮刀菌屬比例最高,為44 株,占61.1%,鐮刀菌屬共有10 種病原菌,其中茄病鐮刀菌比例最高,共20 株,占45.5%。其次為曲霉菌屬,共11 株,占15.3%,其中黃曲霉比例最高,共6 株,占54.5%。少見(jiàn)有彎孢霉屬和其他菌屬(表1)。

    表1 72 例真菌性角膜炎病原性真菌分離鑒定的結(jié)果

    3 討論

    真菌性角膜炎發(fā)病滿(mǎn)、病程長(zhǎng),臨床表現(xiàn)缺乏特征,臨床中根據(jù)病史、癥狀診斷較為困難,常需實(shí)驗(yàn)室輔助診斷[3]。角膜共焦顯微鏡為新型無(wú)創(chuàng)檢查儀器,可從細(xì)胞水平對(duì)活體角膜結(jié)構(gòu)作出即時(shí)觀(guān)測(cè),具有較高檢測(cè)陽(yáng)性率[4]。但其不能對(duì)組織進(jìn)行染色,無(wú)法鑒別菌種,且價(jià)格昂貴,不利于在基層醫(yī)院中廣泛開(kāi)展。目前臨床中應(yīng)用廣泛檢測(cè)方法為真菌涂片和真菌培養(yǎng),本次研究88 例患者中真菌涂片陽(yáng)性率為68.18%,而真菌培養(yǎng)陽(yáng)性率為81.81%,兩者檢測(cè)結(jié)果總一致性為81.67%。兩種檢測(cè)方法均需角膜刮除,在裂隙燈下角膜刮除操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)快捷,適合廣泛開(kāi)展。通過(guò)角膜刮除涂片在顯微鏡下直接觀(guān)察菌絲,可快捷、簡(jiǎn)便作出檢測(cè),但其檢測(cè)陽(yáng)性率欠佳,且不能鑒別菌屬。而真菌培養(yǎng)可彌補(bǔ)上述不足,不僅可提高檢測(cè)陽(yáng)性率,還能對(duì)菌種進(jìn)行鑒定,必要時(shí)還可行藥敏試驗(yàn),為臨床針對(duì)性用藥提供依據(jù)。真菌涂片和真菌培養(yǎng)陽(yáng)性檢出率與臨床取材、涂片、培養(yǎng)等操作技術(shù)密切相關(guān),取材上應(yīng)盡量刮取角膜深層上皮和潰瘍邊緣組織,涂片和培養(yǎng)應(yīng)嚴(yán)格按照操作流程進(jìn)行,以提高陽(yáng)性檢出率[5]。

    大量研究指出,真菌性角膜炎致病菌多達(dá)70 余種,常見(jiàn)致病菌包括鐮刀菌屬、曲霉菌屬、青霉菌屬、枝頂孢霉屬、念珠菌屬和暗色孢科真菌[6-10]。不同真菌菌株在角膜內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)生和特點(diǎn)不盡相同,主要分為3 種類(lèi)型[11-13]。①表層型(水平生長(zhǎng)):真菌表現(xiàn)為表層地毯式生長(zhǎng),藥物敏感性高,刮片陰性率高;②局灶型(板層生長(zhǎng)):真菌可垂直和斜行生長(zhǎng),病灶較局限,抗真菌藥物穿透力較差,治療較困難;③彌散型(垂直和斜行生長(zhǎng)):此型感染較重,有特異性真菌感染偽足、衛(wèi)星灶等,抗真菌藥物使用通常無(wú)效,PK 時(shí)應(yīng)盡可能切除病灶外0.5 mm 范圍以上。不同菌株生長(zhǎng)方式和生長(zhǎng)特點(diǎn)不同,臨床可根據(jù)菌株不同特點(diǎn)進(jìn)行分類(lèi),并有針對(duì)性地進(jìn)行治療。研究指出,我國(guó)真菌屬分別存在地區(qū)差異,可能與地理位置、氣候、經(jīng)濟(jì)水平和生產(chǎn)環(huán)境有相關(guān)性[14]。謝立信[12]培養(yǎng)并鑒定我國(guó)北方674 例真菌性角膜炎的真菌菌屬,發(fā)現(xiàn)鐮刀菌屬占77.6%,其中主要菌種有茄病鐮刀菌(37.3%),串珠鐮刀菌(30.0%)和尖孢鐮刀菌(27.9%);曲霉菌屬占10.8%,主要菌種有黃曲霉菌(49.2%)和煙曲霉菌(35.6%)。黎黎等[13]總結(jié)北京市眼科研究所2005~2006 年眼部真菌培養(yǎng)結(jié)果,其中鐮刀菌屬為64.55%,曲霉菌屬為13.03%。宋書(shū)華等[14]發(fā)現(xiàn)廣東地區(qū)培養(yǎng)陽(yáng)性真菌菌株中,鐮孢菌屬占34%,主要致病菌株為茄病鐮孢菌;曲霉菌屬占26%,主要為煙曲霉菌。筆者本次對(duì)上饒地區(qū)88 例真菌性角膜炎進(jìn)行患者病原學(xué)分析,將真菌培養(yǎng)為陽(yáng)性的72 份病菌進(jìn)行鑒別分類(lèi),得出菌屬種類(lèi)有多至少依次為鐮刀菌屬(61.1%)、曲霉菌屬(15.3%)、彎孢霉屬(11.1%),其中鐮刀菌屬中占比最高的為茄病鐮刀菌和膠孢鐮刀菌,分別占總菌株的27.8%和12.5%。曲霉菌屬中黃曲霉占比最高,占總菌株的8.3%。彎孢霉屬中僅有新月彎孢霉,占總菌株的11.1%。得出上饒地區(qū)真菌性角膜炎主要感染病菌為茄病鐮刀菌、膠孢鐮刀菌、黃曲霉及新月彎孢霉。

    綜上所述,江西上饒地區(qū)真菌性角膜炎感染真菌主要為鐮刀菌屬、曲霉菌屬和彎孢霉屬,通過(guò)真菌涂片和真菌培養(yǎng)可有效檢測(cè)和鑒定[15-18],臨床中未明確病菌前可根據(jù)研究數(shù)據(jù)經(jīng)驗(yàn)性用藥治療,以改善疾病預(yù)后。

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