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    3′-U3區(qū)堿基突變不影響禽白血病病毒的體外復(fù)制能力

    2015-03-07 08:05:06高雁怩李曉菲贠炳嶺祁小樂(lè)王永強(qiáng)劉長(zhǎng)軍崔紅玉張艷萍高宏雷王笑梅高玉龍
    畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào) 2015年4期
    關(guān)鍵詞:增強(qiáng)子毒株白血病

    高雁怩,高 奇,李曉菲,贠炳嶺,祁小樂(lè),王永強(qiáng),劉長(zhǎng)軍,崔紅玉,張艷萍,高宏雷,王笑梅,高玉龍

    (中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室禽免疫抑制病創(chuàng)新團(tuán)隊(duì),哈爾濱150001)

    禽白血病病毒屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科,禽C型反轉(zhuǎn)錄病毒屬,俗稱禽C型腫瘤病毒。根據(jù)病毒的宿主范圍、囊膜特性、交叉中和試驗(yàn)及其他特性,可將禽白血病病毒分為6個(gè)亞群,即A、B、C、D、E和J亞群禽白血病病毒。同時(shí),根據(jù)傳播方式的不同,禽白血病病毒也可分為外源性白血病病毒(A、B、C、D和J亞群)和內(nèi)源性白血病病毒(E亞群)。J亞群禽白血病病毒(J subgroup avian leukosis virus,ALV-J)是在1988年由英國(guó)科學(xué)家L.N.Payne于肉用型雞群中首次分離得到[1],此后ALV-J在世界范圍內(nèi)流行,給世界養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。中國(guó)于1999年首先在肉雞中分離出ALV-J,隨后在2004年首次報(bào)道蛋雞自然感染ALV-J[2-3]。

    在2004年以前,中國(guó)的ALV-J感染主要在肉雞中流行,但自2004年后,在蛋雞以及多種地方品系雞中也發(fā)現(xiàn)了ALV-J的自然感染病例并分離得到病毒[4-5],特別是2009年后,該病在蛋雞群中的影響進(jìn)一步擴(kuò)大。有報(bào)道稱ALV-J感染蛋種雞群后可引起高達(dá)60%的發(fā)病率和最多超過(guò)20%的死亡率。同時(shí),ALV-J的感染還引起了多種腫瘤的發(fā)生,并在全國(guó)范圍內(nèi)引起商品化蛋雞和地方種雞的生產(chǎn)下降等問(wèn)題[2,6-7]。

    ALV-J具有典型慢轉(zhuǎn)化復(fù)制完全型白血病病毒的整體結(jié)構(gòu),即5′-LTR-gag-pol-env-3′LTR[8]。其LTR區(qū)域是病毒復(fù)制過(guò)程的重要調(diào)節(jié)區(qū)域,在病毒的翻譯和RNA的復(fù)制過(guò)程中起著重要的作用。LTR由U3-R-U5三部分組成,其中U3的作用最為重要。U3區(qū)含有多種順勢(shì)作用元件,如CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合元件等,可與細(xì)胞內(nèi)反式作用因子結(jié)合,進(jìn)而調(diào)控病毒的復(fù)制,轉(zhuǎn)錄等重要生命過(guò)程。gag、pol和env基因則分別編碼ALV-J的衣殼蛋白、反轉(zhuǎn)錄酶及囊膜蛋白。

    近幾年,ALV-J的流行毒株與其原型毒株HPRS-103的基因組序列比較顯示,ALV-J的流行毒株的基因組序列出現(xiàn)一些與其致病性密切相關(guān)的特征性突變。例如,其r TM缺失205個(gè)堿基,E元件序列的缺失都是ALV-J在其進(jìn)化過(guò)程中自然發(fā)生的序列突變,并且某些這類突變能夠增強(qiáng)病毒本身的致病力[10-11]。最近,本實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)分析ALV-J蛋雞分離株的序列特點(diǎn),在其U3區(qū)域發(fā)現(xiàn)了很多特異性且有規(guī)律的突變[7,11]。為了驗(yàn)證這些特異性的突變是否能夠?qū)Σ《镜纳飳W(xué)特性造成影響,我們構(gòu)建了ALV-J的原型毒株HPRS-103的感染性克隆,同時(shí)構(gòu)建了以HPRS-103原型毒株為骨架,替換上具有特征性突變的蛋雞分離株SD09DP04的U3區(qū)嵌合病毒的感染性克隆,拯救出2株病毒,并對(duì)拯救出的嵌合病毒的生物學(xué)特性進(jìn)行了分析。

    1 材料與方法

    1.1 病毒株、細(xì)胞、載體和菌種

    ALV-J病毒株SD09DP04由本實(shí)驗(yàn)室分離保存[12];ALV-J原型毒株HPRS-103基因組全長(zhǎng)已經(jīng)克隆到p UC19載體上,該質(zhì)粒命名為p UC19-HPRS-103,由英國(guó)Pirbright研究所病毒性腫瘤病實(shí)驗(yàn)室惠贈(zèng);DF-1細(xì)胞由筆者所在實(shí)驗(yàn)室保存,用于病毒的拯救和增殖;pBlueScript II KS(+)載體和DH5α菌種由筆者所在課題組保存。

    1.2 主要試劑

    各種限制性內(nèi)切酶、PrimeSTARTMHS DNA Polymerase、DNA Marker、d NTP、T4DNA連接酶、PUC19空載體等購(gòu)自大連寶生物工程有限公司;FITC標(biāo)記的抗鼠IgG熒光抗體、pGL3 Luciferase Reporter Vectors檢測(cè)試劑盒購(gòu)自Sigma公司;脂質(zhì)體(LipfectamineTM2000)購(gòu)于GiBcoBRL公司;質(zhì)粒提取試劑盒、核酸凝膠回收試劑盒購(gòu)自Axygen公司;Plasmid Mini Kits為QIAGEN公司產(chǎn)品;反轉(zhuǎn)錄酶活性檢測(cè)試劑盒為Roche公司產(chǎn)品;ALV-J的p27蛋白單克隆抗體為本實(shí)驗(yàn)室保存[13]。

    1.3 引物設(shè)計(jì)

    根據(jù)ALV-J原型株HPRS-103在GenBank中的序列設(shè)計(jì)3對(duì)特異引物,用以擴(kuò)增病毒的前病毒基因組。同時(shí),根據(jù)構(gòu)建3′-U3區(qū)嵌合病毒的需要設(shè)計(jì)融合PCR所需引物。引物序列見(jiàn)表1。

    1.4 融合PCR

    用DNA凝膠回收試劑盒回收以質(zhì)粒HPRS-103為模板,R1-F、R1-R這對(duì)引物擴(kuò)增的特異片段R1(2 333 bp),R2-F、R2-R這對(duì)引物擴(kuò)增的特異片段R2(99 bp)。膠回收以質(zhì)粒SD09DP04為模板,R3-F、R3-R這對(duì)引物擴(kuò)增的特異片段R3(226 bp)。將R1、R2、R3做融合PCR,得到2 658 bp的片段,命名為A-DPU3備用。

    1.5 嵌合病毒HPRS-103ΔDPU3株感染性克隆構(gòu)建

    以KpnⅠ和SacⅠ雙酶切凝膠回收的融合PCR產(chǎn)物A-DPU3及空載體p UC19,經(jīng)連接和轉(zhuǎn)化后,挑取單克隆白色菌落進(jìn)行鑒定,陽(yáng)性重組質(zhì)粒命名為p UC19-A-DPU3;以BF、BR為引物,質(zhì)粒p UC19-HPRS-103為模板PCR擴(kuò)增B片段。以Hin dⅢ和HpaⅠ雙酶切凝膠回收的PCR產(chǎn)物和p UC19-A-DPU3,經(jīng)連接轉(zhuǎn)化后,挑取單克隆白色菌落進(jìn)行鑒定,陽(yáng)性重組質(zhì)粒命名為p UC19-ADPU3-B。以CF、CR為引物,質(zhì)粒p UC19-HPRS- 103為模板PCR擴(kuò)增C片段,以HpaⅠ和KpnⅠ雙酶切凝膠回收PCR產(chǎn)物及p UC19-A-DPU3-B,經(jīng)連接和轉(zhuǎn)化后,挑取單克隆白色菌落進(jìn)行鑒定,陽(yáng)性重組質(zhì)粒命名為p UC19-A-DPU3-B-C,即嵌合病毒HPRS-103ΔDPU3株感染性克隆。構(gòu)建策略如圖1。

    表1 擴(kuò)增PBW-ALV-J前病毒基因組的引物Table 1 Primers used for amplification of PBW-ALV-J pri-DNA

    圖1 嵌合病毒重組質(zhì)粒PUC19-A-DPU3-B-C構(gòu)建策略Fig.1 The diagram of the construction strategy about the recombinant plasmid PUC19-A-DPU3-B-C

    1.6 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及病毒拯救

    用QIAGEN公司的產(chǎn)品Plasmid Mini Kit分別純化p UC19-HPRS-103和p UC19-A-DPU3-B-C,由LipfectamineTM2000分別介導(dǎo)轉(zhuǎn)染約80%的單層DF-1細(xì)胞,同時(shí)以正常的DF-1為對(duì)照,轉(zhuǎn)染后6 h棄細(xì)胞上清,用只加雙抗的DMEM清洗兩遍,每孔加入2 m L含10%胎牛血清的加入雙抗的DMEM,在37℃溫箱中繼續(xù)培養(yǎng),轉(zhuǎn)染72 h后收毒,凍存于-80℃冰箱。反復(fù)凍融三次后連續(xù)在DF-1上傳代,經(jīng)鑒定后將拯救的病毒命名為r H-PRS-103和r HPRS-103ΔDPU3。

    1.7 病毒粒子的鑒定

    1.7.1 間接免疫熒光試驗(yàn) 將拯救的2株病毒按照常規(guī)方法接種于約70%單層DF-1的48孔板中,7 d后按常規(guī)方法進(jìn)行間接免疫熒光檢測(cè),檢測(cè)所用一抗為抗ALV-J p27蛋白的單克隆抗體,二抗為FITC標(biāo)記的兔抗鼠IgG抗體,同時(shí)設(shè)不接毒的DF-1細(xì)胞作為對(duì)照。

    1.7.2 群特異性禽白血病病毒抗原檢測(cè) 使用禽白血病病毒抗原檢測(cè)試劑盒[13],參照其試劑盒說(shuō)明書的具體步驟,對(duì)拯救的兩株病毒進(jìn)行檢測(cè)。

    1.7.3 反轉(zhuǎn)錄酶檢驗(yàn) 用reverse transcriptase assay檢測(cè)病毒的反轉(zhuǎn)錄酶的活性,首先用PEG法處理接毒的細(xì)胞液,按照試劑盒說(shuō)明要求,對(duì)拯救的兩株病毒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄酶活性的檢測(cè)。

    1.8 r HPRS-103和r HPRS-103ΔDPU3的U3區(qū)啟動(dòng)子活性、增強(qiáng)子活性差異檢測(cè)

    將ALV-J實(shí)驗(yàn)室分離株SD09DP04和原型株HPRS-103的U3區(qū)分別克隆至p GL-Enhancer Vector或p GL-Promoter Vector(引物序列如下,DPU3F:AGCGGTACCAATGTAGTCTTATGCAATACTCT;DPU3R:AGCAAGCTTGTTTATTGTATCAAGCTAGG;103U3F:GCGGTACCAATGTAGTGTTATGCAATACTCT;103U3R:CGAAAGCTTGTTTATTGTGTCGGGCTA)。轉(zhuǎn)化DH5α大腸桿菌感受態(tài)。挑取單克隆,用Axygen質(zhì)粒提取試劑盒提取質(zhì)粒后測(cè)序鑒定正確,將質(zhì)粒命名為E-DPU3、E-103U3和P-DPU3、P-103U3,分別用于檢測(cè)比較U3區(qū)的啟動(dòng)子活性和增強(qiáng)子活性。用QIAGEN的Plasmid Mini Kits純化構(gòu)建好的4種質(zhì)粒,用LipfectamineTM2000分別介導(dǎo)轉(zhuǎn)染約80%的單層DF-1細(xì)胞的6孔板中,同時(shí)轉(zhuǎn)染p GL-Enhancer Vector或p GL-Promoter Vector作為陰性對(duì)照。轉(zhuǎn)染后48 h按照p GL Luciferase Reporter Vectors試劑盒檢測(cè)說(shuō)明書進(jìn)行熒光檢測(cè),統(tǒng)計(jì)并分析數(shù)據(jù)。

    1.9 r HPRS-103和r HPRS-103ΔDPU3復(fù)制動(dòng)力學(xué)的比較

    將兩株拯救的病毒以1×102TCID50的病毒量接種鋪有單層的DF-1細(xì)胞的6孔板中(約1×106個(gè)細(xì)胞),感染后1、2、3、4、5、6、7 d分別取細(xì)胞上清,用禽白血病病毒抗原檢測(cè)試劑盒檢測(cè)p27,用于其復(fù)制動(dòng)力學(xué)比較,重復(fù)測(cè)定3次,取其平均值,繪制病毒的復(fù)制動(dòng)力學(xué)曲線。

    2 結(jié) 果

    2.1 ALV-J嵌合病毒重組質(zhì)粒的鑒定

    用KpnⅠ、SacⅠ單酶切;Hin dⅢ和HpaⅠ雙酶切,鑒定重組質(zhì)粒p UC19-A-DPU3-B-C。酶切結(jié)果顯示,重組質(zhì)粒p UC19-A-DPU3-B-C經(jīng)KpnⅠ、SacⅠ單酶切后,均為大小為10 695 bp的單一清晰條帶,而經(jīng)Hin dⅢ和HpaⅠ雙酶切后,則得到大小分別為2 957和7 738 bp的2條條帶(圖2)。同時(shí)將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒全長(zhǎng)測(cè)序,測(cè)序結(jié)果顯示構(gòu)建成功。

    圖2 感染性克隆p UC19-A-DPU3-B-C的酶切鑒定Fig.2 Enzyme identification of the infectious clone pUC19-A-DPU3-B-C

    2.2 病毒粒子的鑒定

    2.2.1 間接免疫熒光鑒定 r HPRS-103、r HPRS-103ΔDPU3的第5代病毒與抗ALV-J的p27蛋白的單克隆抗體均呈陽(yáng)性反應(yīng)。感染組DF-1細(xì)胞表面以及細(xì)胞質(zhì)有明顯的綠色熒光(圖3)。對(duì)照組DF-1細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有綠色熒光。該結(jié)果表明,2株病毒均得到成功拯救。

    2.2.2 群特異性抗原檢測(cè) 用禽白血病病毒抗原檢測(cè)試劑盒檢測(cè)這2株拯救病毒的第5代病毒,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。陽(yáng)性對(duì)照孔在OD650nm吸光度平均值為0.368,陰性對(duì)照孔在OD650nm吸光度平均值為0.078。由公式得臨界值=0.2×(陽(yáng)性對(duì)照平均值—陰性對(duì)照平均值),計(jì)算得臨界值為0.136。r HPRS-103株在OD650nm吸光度檢測(cè)的平均值為0.795,r HPRS-103ΔDPU3株在OD650nm吸光度檢測(cè)的平均值為0.967??乖瓩z測(cè)結(jié)果表明,2株病毒均得到成功拯救。

    圖3 r HPRS-103、r HPRS-103ΔDPU3株的間接免疫熒光鑒定結(jié)果Fig.3 Identification of r HPRS-103,r HPRS-103ΔDPU3 by IFA

    2.2.3 反轉(zhuǎn)錄酶檢驗(yàn) 采用Roche的反轉(zhuǎn)錄酶檢測(cè)試劑盒,利用HIV反轉(zhuǎn)錄酶標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,再通過(guò)吸光度確定第5代拯救病毒的反轉(zhuǎn)錄酶活性,通過(guò)ELISA檢測(cè),取3次檢測(cè)結(jié)果的平均數(shù)。2株病毒ELISA在OD450nm處吸光值分別如下:r HPRS-103為3.128,r HPRS-103ΔDPU3為2.985。所對(duì)應(yīng)的反轉(zhuǎn)錄酶活性分別為1.528 1和1.324。結(jié)果表明,2株病毒均得到成功拯救。

    2.3 rHPRS-103、rHPRS-103ΔDPU3復(fù)制動(dòng)力學(xué)的比較

    繪制的病毒復(fù)制動(dòng)力學(xué)曲線見(jiàn)圖4。結(jié)果表明,r HPRS-103、r HPRS-103ΔDPU3兩株病毒體外復(fù)制無(wú)明顯差異。

    圖4 拯救病毒的復(fù)制動(dòng)力學(xué)曲線Fig.4 Proliferation kinetics curve of the rescued viruses

    2.4 U3區(qū)啟動(dòng)子及增強(qiáng)子活性差異比較

    按p GL3 Luciferase Reporter Vectors試劑盒檢測(cè)說(shuō)明書對(duì)轉(zhuǎn)染后48 h的細(xì)胞進(jìn)行熒光檢測(cè)。結(jié)果如圖5。檢測(cè)結(jié)果表明,r HPRS-103、r HPRS-103ΔDPU3的U3區(qū)啟動(dòng)子活性和增強(qiáng)子活性均無(wú)明顯差異。

    圖5 ALV-J實(shí)驗(yàn)室分離株SD09DP04與原型株HPRS-103 U3區(qū)啟動(dòng)子活性(A)、增強(qiáng)子活性(B)結(jié)果Fig.5 The results of the promoter(A)/enhancer(B)activity between laboratories isolated virus SD09DP04 and classical virus HPRS-103

    3 討 論

    自2008年以來(lái),ALV-J的感染在中國(guó)出現(xiàn)大范圍的流行[7,12]。而與此同時(shí),ALV-J的流行毒株的基因組序列與原型毒株HPRS-103相比也出現(xiàn)了一些特異有規(guī)律的變化。通過(guò)筆者實(shí)驗(yàn)室所進(jìn)行的流行病學(xué)調(diào)查以及對(duì)ALV-J流行毒株U3區(qū)的基因序列分析,發(fā)現(xiàn)87.5%(14/16)的流行毒株具有14個(gè)堿基的規(guī)律性突變。而且,流行毒株的U3區(qū)與原型毒株及多株肉雞分離株的U3區(qū)的進(jìn)化樹分析顯示,此流行毒株的U3區(qū)處于一個(gè)新的分支上[12]。由于U3區(qū)在病毒的復(fù)制增殖過(guò)程中有著重要的調(diào)控作用,含有多種與病毒復(fù)制密切相關(guān)的啟動(dòng)子和增強(qiáng)子元件[14]。且最近的一些研究表明,ALV-J傾向于出現(xiàn)有利于其迅速進(jìn)化的突變[10]。而上述流行毒株中出現(xiàn)的U3區(qū)的規(guī)律性突變正是ALV-J在其進(jìn)化過(guò)程中自然發(fā)生的,這就表明其很有可能是ALV-J本身適應(yīng)自然界,增強(qiáng)其增殖能力的一個(gè)有利進(jìn)化。因此,對(duì)此具有特異性規(guī)律突變的U3區(qū)的功能及其對(duì)病毒復(fù)制的影響的研究,成為本研究的主題。本研究所拯救的ALV-J嵌合病毒中的U3區(qū),即為近年來(lái)流行毒株SD09DP04的U3區(qū)序列,并且具有上述U3區(qū)的特異性規(guī)律特征。

    本研究構(gòu)建了1株3′-U3區(qū)嵌合禽白血病病毒感染性克隆(p UC19-A-DPU3-B-C),與p UCHPRS-103分別轉(zhuǎn)染DF-1細(xì)胞獲得2株拯救病毒。ALV屬于反轉(zhuǎn)錄病毒,前病毒全基因組克隆被轉(zhuǎn)染于DF-1后,即可利用宿主細(xì)胞的RNA聚合酶II,啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄、翻譯過(guò)程,并最終完成病毒的包裝和釋放,所以在設(shè)計(jì)ALV感染性克隆時(shí),不需要考慮啟動(dòng)子和核酶序列等修飾因子[15]。

    構(gòu)建感染性克隆并拯救相應(yīng)病毒,對(duì)于研究病毒基因組某一部分的作用,例如其對(duì)于整個(gè)病毒復(fù)制過(guò)程的影響,具有十分重要的意義。為了排除質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染蛋白質(zhì)的可能性,本研究將轉(zhuǎn)染后的病毒經(jīng)過(guò)連續(xù)傳代后,再進(jìn)行一系列病毒活性的檢測(cè),并且同時(shí)采用多種檢測(cè)方法,最終確定成功拯救出病毒,為后續(xù)的試驗(yàn)研究奠定了基礎(chǔ)。

    在本研究之中,對(duì)拯救的原型毒株r HPRS-103和嵌合病毒r HPRS-103ΔDPU3的復(fù)制動(dòng)力學(xué)曲線的測(cè)定結(jié)果表明這兩株拯救病毒的體外復(fù)制能力無(wú)明顯差異。為進(jìn)一步探索U3區(qū)堿基的突變對(duì)于病毒的復(fù)制能力無(wú)影響的機(jī)制,鑒于U3區(qū)含有多種順式作用元件,起重要的增強(qiáng)子和啟動(dòng)子活性功能,我們對(duì)流行毒株的U3區(qū)與原型毒株U3區(qū)的啟動(dòng)子活性及增強(qiáng)子活性進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果表明,流行毒株的U3區(qū)其啟動(dòng)子活性和增強(qiáng)子活性均與原型毒株的U3區(qū)無(wú)明顯差異。這些數(shù)據(jù)都表明,流行毒株的U3區(qū)的規(guī)律性突變,沒(méi)有增強(qiáng)其U3區(qū)的增強(qiáng)子或啟動(dòng)子活性,進(jìn)而對(duì)ALV-J的復(fù)制能力未造成影響。

    但是,ALV-J是反轉(zhuǎn)錄病毒,其在宿主體內(nèi)復(fù)制過(guò)程中,首先要整合至宿主基因組內(nèi),而后再進(jìn)行一系列復(fù)制過(guò)程。U3區(qū)是決定ALV-J整合入宿主基因組的整合位點(diǎn)的重要區(qū)域。而且,在2008年以前,ALV-J主要感染肉雞群并引起骨髓瘤,但是在2008年后ALV-J的廣泛流行過(guò)程中,出現(xiàn)了ALVJ感染蛋雞的病例,同時(shí)還引起感染雞發(fā)生血管瘤。由于U3區(qū)在ALV-J整合入宿主基因組過(guò)程中所起的重要作用,我們猜想流行毒株U3區(qū)的規(guī)律性突變可能與宿主的改變或者引起腫瘤類型的改變有關(guān),但這還有待于進(jìn)一步研究。

    4 結(jié) 論

    利用融合PCR技術(shù),以ALV-J HPRS-103株為骨架構(gòu)建含SD09DP04株3′-U3區(qū)的嵌合病毒的cDNA克隆。嵌合病毒與HPRS-103的感染性克隆轉(zhuǎn)染DF-1細(xì)胞,成功拯救到2株病毒,3′-U3區(qū)啟動(dòng)子活性和增強(qiáng)子活性的檢測(cè)以及復(fù)制動(dòng)力學(xué)分析結(jié)果顯示,出現(xiàn)特異性規(guī)律性突變的U3區(qū)對(duì)于原毒株的體外復(fù)制能力無(wú)顯著影響。

    ):

    [1] PAYNE L N,BROWN S R,BUMSTEAD N,et al.A novel subgroup of exogenous avian leukosis virus in chickens[J].J Gen Virol,1991,72(4):801-807.

    [2] 成子強(qiáng),張 利,劉思當(dāng),等.中國(guó)麻雞中發(fā)現(xiàn)禽J亞群白血?。跩].微生物學(xué)報(bào),2005,45(4):584-587.CHENG Z Q,ZHANG L,LIU S D,et al.Emerging of Avian leukosis virus subgroup J in a flock of Chinese local breed[J].Acta Microbiologica Sinica,2005,45(4):584-587.(in Chinese)

    [3] 趙振華,顧玉芳,王鳳龍,等.禽骨髓細(xì)胞瘤病的病理學(xué)研究(初報(bào))[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,1999,20(3):85-86.ZHAO Z H,GU Y F,WANG F L,et al.Pathological study on myelocytomatosis(preliminary study)[J].Progress in Veterinary Medicine,1999,20(3):85-86.(in Chinese)

    [4] 徐鑌蕊,董衛(wèi)星,余春明,等.用ALV-J gp85單克隆抗體證明蛋雞存在J亞群禽白血?。跩].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2005,36(3):269-271.XU B R,DONG W X,YU C M,et al.Occurrence of ALV-J in egg type chickens certified by monoclonal antibody against ALV-J gp85[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2005,36(3):269-271.(in Chinese)

    [5] 李 艷,崔治中,孫淑紅.黃羽肉雞J亞群禽白血病病毒的分子生物學(xué)特性和致病性[J].病毒學(xué)報(bào),2007,23(3):207-211.LI Y,CUI Z Z,SUN S H.Molecular biology and pathogenicity of Subgroup J avian leukosis virus isolated from yellow chickens[J].Chinese Journal of Virology,2007,23(3):207-211.(in Chinese)

    [6] CHENG Z,LIU J,CUI Z,et al.Tumors associated with avian leukosis virus subgroup J in layer hens during 2007 to 2009 in China[J].J Vet Med Sci,2010,72(8):1027-1033.

    [7] GAO Y L,QIN L T,PAN W,et al.Avian leukosis virus subgroup J in layer chickens,China[J].Emerg Infec Dis,2010,16(10):1637-1638.

    [8] BAI J,HOWES K,PAYNE L N,et al.Sequence of host-range determinants in the env gene of a fulllength,infectious proviral clone of exogenous avian leukosis virus HPRS-103 confirms that it represents a ne subgroup(designated J)[J].J Gen Virol,1995,76(Pt 1):181-187.

    [9] CHESTERS P M,SMITH L P,NAIR V.E(XSR)element contributes to the oncogenicity of Avian leukosis virus(subgroup J)[J].J Gen Virol,2006,87(Pt 9):2685-2692.

    [10] WANG Q,GAO Y,WANG Y,et al.A 205-nucleotide deletion in the 3’untranslated region of avian leukosis virus subgroup J,currently emergent in China,contributes to its pathogenicity[J].J Virol,2012,86(23):12849-12860.

    [11] GAO Y,YUN B,QIN L,et al.Molecular epidemiology of avian leukosis virus subgroup J in layer flocks in China[J].J Clin Microbiol,2012,50(3):953-960.

    [12] PAN W,GAO Y,SUN F,et al.Novel sequences of subgroup J avian leukosis viruses associated with hemangioma in Chinese layer hens[J/OL].Virol J,2011,8:552.[2015-1-10].http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3310751/.

    [13] YUN B,LI D,ZHU H,et al.Development of an antigen-capture ELISA for the detection of avian leukosis virus p27 antigen[J].J Virol Methods,2013,187(2):278-283.

    [14] 張偉偉,王 超,楊宗偉,等.J亞群禽白血病病毒的LTR體外啟動(dòng)活性分析[J].中國(guó)獸醫(yī)科學(xué),2011,41(2):121-125.ZHANG W W,WANG C,YANG Z W,et al.In vitro promoter activity analysis of long terminal repeat from avian leukosis virus subgroup J[J].Chinese Veterinary Science,2011,41(2):121-125.(in Chinese)

    [15] 張紀(jì)元,崔治中,丁家波,等.J亞群白血病病毒NX0101株感染性克隆化病毒的構(gòu)建及其致病性[J].微生物學(xué)報(bào),2005,45(3):437-440.ZHANG J Y,CUI Z Z,DING J B,et al.Construction of infectious clone of subgroup J Avian leukosis virus strain NX0101 and its pathogenicity[J].Acta Microbiologica Sinica,2005,45(3):437-440.(in Chinese)

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