• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    DC-CIK聯(lián)合化療在晚期腎癌患者中的綜合應(yīng)用價(jià)值

    2015-03-02 02:15:58蔡艷榮
    實(shí)用癌癥雜志 2015年4期
    關(guān)鍵詞:細(xì)胞因子化療

    蔡艷榮

    作者單位:610066 四川省成都新華醫(yī)院

    ?

    DC-CIK聯(lián)合化療在晚期腎癌患者中的綜合應(yīng)用價(jià)值

    蔡艷榮

    作者單位:610066 四川省成都新華醫(yī)院

    【摘要】目的探討DC-CIK聯(lián)合化療在治療晚期腎癌患者中的綜合應(yīng)用價(jià)值。方法回顧性分析接受化療的46例晚期腎癌病例,其中21例聯(lián)合DC-CIK治療(DC-CIK組),25例僅接受化療(化療組)。比較2組間腫瘤生長(zhǎng)情況、患者長(zhǎng)期生存情況、不良反應(yīng)發(fā)生情況等差異;并對(duì)外周血淋巴細(xì)胞亞群和細(xì)胞因子水平進(jìn)行檢測(cè),比較組間差異。結(jié)果DC-CIK組實(shí)體瘤近期緩解情況顯著優(yōu)于化療組;DC-CIK組中位總生存時(shí)間為20個(gè)月、1年生存率為90.48%,顯著高于化療組的17個(gè)月、84.00%,P<0.05。治療1、3個(gè)療程后DC-CIK組CD3+、CD4+、CD8+比例顯著高于化療組,IL-2、IL-12、IFN-γ含量顯著高于化療組,P<0.05。結(jié)論DC-CIK聯(lián)合化療能有效提高晚期腎癌患者的免疫能力,促進(jìn)IL-2、IL-12、IFN-γ等細(xì)胞因子的表達(dá),從而發(fā)揮殺死腫瘤細(xì)胞、緩解實(shí)體瘤、延長(zhǎng)患者生存期的功效。

    【關(guān)鍵詞】晚期腎癌;DC-CIK;化療;淋巴細(xì)胞亞群;細(xì)胞因子

    (ThePracticalJournalofCancer,2015,30:559~562)

    腎癌在泌尿系統(tǒng)腫瘤中的發(fā)病率僅次于膀胱癌,占全身惡性腫瘤的3%。局限性腎癌患者可以通過(guò)手術(shù)治療獲得痊愈,但是約有30%的腎癌患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)處于晚期。由于腎癌對(duì)放化療均不敏感,因此目前尚無(wú)有效的方法治療晚期腎癌[1]。近年來(lái)酪氨酸激酶抑制劑在晚期腎癌的治療中被逐漸推廣,其雖然能有效提高患者的生存率,但是效果仍不理想。最新研究表明細(xì)胞免疫CD8+T細(xì)胞(CTLs)在抑制腫瘤生長(zhǎng)中具有重要作用,樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC)則對(duì)CTLs的激活至關(guān)重要;細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokineinduced kill cell,CIK)在腎癌的治療中也表現(xiàn)出了很好的療效[2-3]。這幾年,不斷有研究發(fā)現(xiàn)DC-CIK能改善腎癌患者的免疫水平,延緩腫瘤的進(jìn)展,但是也有人持懷疑態(tài)度。為了證實(shí)DC-CIK在晚期腎癌治療中的綜合應(yīng)用價(jià)值,我們開(kāi)展了以下研究。

    1資料與方法

    1.1臨床資料

    回顧性分析2007年6月至2013年3月期間在我院接受化療的晚期腎癌病例46例,所有患者均經(jīng)組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查確診為腎細(xì)胞癌,TNM分期為Ⅲ~Ⅳ期,KPS 評(píng)分>60分,預(yù)計(jì)生存期大于6個(gè)月;排除非原發(fā)性腎癌患者,排除接受腎切除后復(fù)發(fā)的病例,排除合并有傳染性疾病或者近3個(gè)月接受大手術(shù)的病例。根據(jù)是否接受DC-CIK治療,分為2組,其中DC-CIK組21例,化療組25例。DC-CIK組,男性16例,女性5例;年齡34~69歲,中位年齡52歲;TNM分期為Ⅲ期9例,Ⅳ期12例?;熃M,男性18例,女性7例;年齡32~67歲,中位年齡53歲;TNM分期為Ⅲ期12例,Ⅳ期13例。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,2組患者間性別、年齡及腫瘤分期等基線資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,具有可比性。

    1.2治療方法

    1.2.1DC-CIK制備方法CIK細(xì)胞制備:①采用血細(xì)胞分離機(jī)采集患者外周血單個(gè)核細(xì)胞,PBS洗滌3次,用RPMI1640培養(yǎng)基調(diào)節(jié)細(xì)胞密度至3×106個(gè)/ml,接種于6孔板,置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。②收集非貼壁細(xì)胞,加入IFN-γ(1 000 U/ml),再次置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。③移入經(jīng)CD3MeAb包被過(guò)的25 ml培養(yǎng)瓶中,加入CIK培養(yǎng)液(RPMI1640培養(yǎng)基加入10%的人血清,IL-1β、IL-2,終濃度為100 U/ml、300 U/ml)繼續(xù)培養(yǎng)48 h;④每3天更換新鮮CIK培養(yǎng)液,誘導(dǎo)產(chǎn)生CIK細(xì)胞。

    DC體外培養(yǎng):①同CIK制備①;②收集貼壁細(xì)胞,加入DC培養(yǎng)液(RPMI1640培養(yǎng)基加入10%的人血清,rhGM-CSF、rhIL-5,終濃度為100 ng/ml、50 ng/ml)置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),于第3天更換新鮮DC培養(yǎng)液,第5天加入IL-1β、PGE2、TNF-α,終濃度分別為20 ng/ml、5 μg/ml、20 ng/ml,第7天即可收獲成熟的DC。

    DC-CIK制備:收集培養(yǎng)成熟的DC以及CIK細(xì)胞,去培養(yǎng)液,加入CIK培養(yǎng)液,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。以DC∶CIK=1∶4的比例進(jìn)行混合,繼續(xù)用CIK培養(yǎng)液培養(yǎng),即得DC-CIK。

    1.2.2化療方案所有患者均接受舒尼替尼口服治療,50 mg/次,頓服。每服藥4周后停藥2周。持續(xù)用藥至腫瘤進(jìn)展或者出現(xiàn)不可耐受的不良反應(yīng)。

    1.2.3DC-CIK治療方案收集培養(yǎng)成功的且經(jīng)檢測(cè)細(xì)胞存活率大于90%、無(wú)污染的DC-CIK細(xì)胞,5×108個(gè)左右,離心,生理鹽水洗滌3次后,加入含有10%患者自體血漿的生理鹽水重懸,經(jīng)靜脈回輸給患者,5次1個(gè)療程。

    1.3觀察指標(biāo)

    患者每8~12周接受CT檢查,由固定的影像診斷小組按照實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST1.1)進(jìn)行療效評(píng)價(jià),分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、疾病穩(wěn)定(SD)和疾病進(jìn)展(PD)4個(gè)等級(jí)[4],客觀反應(yīng)率(ORR)=CR+PR。根據(jù)用藥時(shí)間,記錄患者的總生存時(shí)間。

    于治療前及治療1、3個(gè)療程后,收集患者靜脈血,采用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)治療前后2組患者間外周血中淋巴細(xì)胞亞群百分比(CD3+、CD4+、CD8+、HLA-DR+T淋巴細(xì)胞)。采用ELISA試劑盒檢測(cè)血清中IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α的水平。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    2結(jié)果

    2.12組臨床療效比較

    DC-CIK組CR、PR、ORR分別為9.52%、38.10%和47.62%,顯著高于化療組的0.00%、16.00%和16.00%,P<0.05(見(jiàn)表1)。采用Kaplan-Meier法進(jìn)行生存分析,DC-CIK組中位總生存時(shí)間為20個(gè)月,1年生存率為90.48%;化療組中位總生存時(shí)間為17個(gè)月,1年生存率為84.00%。DC-CIK組總生存時(shí)間及1年生存率均顯著優(yōu)于化療組,P<0.05。

    表1 2組間臨床療效比較(例,%)

    注:*為與化療組比較,P<0.05。

    2.2治療前后2組外周血中淋巴細(xì)胞亞群百分比比較

    研究結(jié)果顯示治療前2組患者外周血中各項(xiàng)淋巴細(xì)胞亞群百分比無(wú)顯著差異,P>0.05。治療1、3個(gè)療程后DC-CIK組CD3+、CD4+、CD8+比例顯著高于化療組(P<0.05)。治療1、3個(gè)療程后,DC-CIK組CD3+、CD4+、CD8+比例較治療前顯著提高,化療組較化療前顯著降低,P<0.05。見(jiàn)表2。

    ±s,%)

    注:*為與化療組同期比較,P<0.05;△為與治療前比較,P<0.05。

    2.3治療前后2組間血清中炎癥因子水平比較

    研究結(jié)果顯示治療前2組患者血清中炎癥因子水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P>0.05。治療1、3個(gè)療程后DC-CIK組IL-2、IL-12、IFN-γ比例顯著高于化療組(P<0.05)。治療1、3個(gè)療程后,DC-CIK組IL-2、IL-12、IFN-γ比例較治療前顯著提高(P<0.05);化療組與治療前相比,無(wú)明顯變化(P>0.05)。見(jiàn)表3。

    ±s,pg/ml)

    注:*為與化療組同期比較,P<0.05;△為與治療前比較,P<0.05。

    3討論

    目前手術(shù)是治療原發(fā)性腎癌的首選有效方法,但其僅對(duì)局限性腎癌具有較好的作用。已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移的腎癌由于對(duì)放、化療均不敏感,因此臨床上缺乏有效的治療和預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)的治療方案[5]。腫瘤免疫學(xué)說(shuō)認(rèn)為腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移極有可能與腫瘤本身逃避免疫監(jiān)視的機(jī)能有關(guān),腫瘤患者體內(nèi)缺少足夠的抗原提呈細(xì)胞來(lái)激發(fā)腫瘤免疫反應(yīng)是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的重要原因[6]。因此醫(yī)學(xué)界一直在尋找通過(guò)提高機(jī)體對(duì)腎癌細(xì)胞的免疫應(yīng)答能力來(lái)抑制或殺死腎癌細(xì)胞的方法,免疫治療也被普遍接受為治療腎癌的有效方法[7-8],DC-CIK治療腎癌的療效也被越來(lái)越多的學(xué)者所關(guān)注[9-10]。

    已有研究證實(shí)DC的數(shù)量與腫瘤的臨床分期、周圍浸潤(rùn)程度以及腫瘤轉(zhuǎn)移、患者預(yù)后等息息相關(guān)[11],腫瘤細(xì)胞接觸DC細(xì)胞后會(huì)抑制DC細(xì)胞成熟,導(dǎo)致抗原無(wú)法呈遞給T細(xì)胞,最終導(dǎo)致免疫耐受和腫瘤的免疫逃逸。CIK則是一群異質(zhì)細(xì)胞,同時(shí)具備NK細(xì)胞的MHC限制性殺瘤功能和T細(xì)胞的強(qiáng)大抗瘤活性?;A(chǔ)研究證實(shí)DC細(xì)胞和CIK細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)能起到協(xié)同抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。本研究采用自體DC-CIK細(xì)胞回輸聯(lián)合化療的方法治療晚期腎癌,結(jié)果顯示DC-CIK治療組患者實(shí)體瘤緩解情況顯著優(yōu)于單純化療組,該組患者的中位總生存時(shí)間也有了明顯延長(zhǎng),證實(shí)DC-CIK治療在晚期腎癌中具有積極作用。

    另外我們關(guān)注了DC-CIK對(duì)外周血中淋巴細(xì)胞亞群的影響。外周血CD3+、CD4+、CD8+水平是反映機(jī)體免疫狀況的重要指標(biāo)。我們研究結(jié)果顯示化療組患者在接受化療后外周血CD3+、CD4+、CD8+百分比明顯下降;而DC-CIK組患者CD3+、CD4+、CD8+百分比則與治療前相比顯著提高,顯著高于同時(shí)期的化療組(P<0.05)。說(shuō)明DC-CIK治療能改善晚期腎癌患者的免疫功能,與張亮等的研究報(bào)道一致[12]。我們還觀察了DC-CIK對(duì)血清中炎癥因子水平的影響,結(jié)果顯示治療1、3個(gè)療程后DC-CIK組IL-2、IL-12、IFN-γ比例顯著高于化療組(P<0.05),與治療前相比也有顯著提高。DC的高表達(dá)能刺激細(xì)胞分泌IL-2、IL-12等Th1類細(xì)胞因子,Th1類細(xì)胞因子在機(jī)體的抗腫瘤免疫中具有重要作用,其通過(guò)誘導(dǎo)T 細(xì)胞和NK 細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ,激活NK 細(xì)胞的殺瘤活性來(lái)干擾腫瘤的正常生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[13-14]。已經(jīng)有研究證實(shí)腫瘤患者體內(nèi)IFN-γ與患者腫瘤進(jìn)展時(shí)間和總生存時(shí)間呈正相關(guān)[15]。本研究結(jié)果可以推測(cè)DC-CIK治療晚期腎癌的機(jī)制可能與調(diào)節(jié)Th1類細(xì)胞因子的生成與分泌有關(guān)。

    綜上所述,DC-CIK聯(lián)合化療能有效提高晚期腎癌患者的免疫能力,促進(jìn)IL-2、IL-12、IFN-γ等細(xì)胞因子的表達(dá),從而發(fā)揮殺死腫瘤細(xì)胞、緩解實(shí)體瘤、延長(zhǎng)患者生存期的功效,DC-CIK聯(lián)合化療是治療晚期腎癌較為理想的方案。

    參考文獻(xiàn)

    [1]Jemal A,Bray F,Center MM,et al.Global cancer statistics 〔J〕.Ca Cancer J Clin,2011,61(2):69-90.

    [2]鄭瑋,壽建忠,馬建輝,等.索拉非尼治療腎癌的研究現(xiàn)狀〔J〕.臨床藥物治療雜志,2012,10(3):19-23.

    [3]鮮鵬,李元,周宏,等.舒尼替尼在晚期腎細(xì)胞癌治療中的運(yùn)用〔J〕.臨床泌尿外科雜志,2013,28(7):495-497.

    [4]Eisenhauer EA,Therasse P,Bogaerts J,et al.New response evaluation criteria in solid tumours:Revised RECIST guideline(version 1.1)〔J〕.Eur J Cancer,2009,45(2):228-247.

    [5]吳階平主編.吳階平泌尿外科學(xué)〔M〕.濟(jì)南:山東科學(xué)技術(shù)出版社,2004:889-917.

    [6]Goldberger O,Volovitz I,Maehlenkin A,et al.Exuberated numbers of tumor-specific T cells result in tumor escape〔J〕.Cancer Research,2008,68(9):3450-3457.

    [7]Jakel CE,Hauser S,Rogenhofer S,et al.Clinical studies applying cytokine-induced killer cells for the treatment of renal cell carcinoma〔J〕.Clin Dev Immunol,2012,4(7):32-45.

    [8]Wang J,Liao L,Tan J.Dendritic cell-based vaccination for renal cell carcinoma:Challenges in clinical trials〔J〕.Immunotherapy,2012,4(10):1031-1042.

    [9]譚潔,王彬,何志潔,等.自體DC-CIK 細(xì)胞治療晚期腎細(xì)胞癌的療效〔J〕.中國(guó)腫瘤生物治療雜志,2013,20(6):711-716.

    [10]王賽男,高海燕,潘欣,等.DC-CIK 治療對(duì)腎癌患者淋巴細(xì)胞亞群的影響〔J〕.中國(guó)腫瘤生物治療雜志,2012,19(3):209-212.

    [11]Yilmaz T,Gedikoglu G,Celik A,et al.Prognostic significa-

    nce of Langerhans cell infiltration in cancer of the laryax〔J〕.Otolaryngol Head Neck Surg,2005,132(2):309-316.

    [12]張亮,陳立軍,王亞林,等.舒尼替尼聯(lián)合自體DC及CIK細(xì)胞治療轉(zhuǎn)移性腎癌的臨床療效觀察〔J〕.解放軍醫(yī)學(xué)雜志,2013,38(12):980-983.

    [13]Inoda S,Hirohashi Y,Torigoe T,et al.Cytotoxic T lymphocytes efficiently recognize human colon cancer stem-like cells〔J〕.Am J Pathol,2011,178(4):1805-1813.

    [14]方艷秋,齊亞靈,嚴(yán)莉,等.IL-12與IL-18在體外培養(yǎng)系統(tǒng)中誘導(dǎo)腫瘤特異性CTL殺傷活性的比較〔J〕.吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2007,33(6):1033-1037.

    [15]Chen YL,Cheng WF,Chang MC,et al.Interferon-gamma in ascites could be a predictive biomarker of outcome in ovarian carcinoma〔J〕.Gynecol Oncol,2013,131(1):63-68.

    (編輯:甘艷)

    Comprehensive Application Value of DC-CIK Combined with Chemotherapy for

    Advanced Renal Cell Carcinoma

    CAIYanrong.ChengduXinhuaHospital,Chengdu,610066

    【Abstract】ObjectiveTo study the comprehensive application value of DC-CIK combined with chemotherapy for advanced renal cell carcinoma.MethodsRetrospective analysis of 46 cases of patients with advanced renal cell carcinoma was conducted,21 cases received DC-CIK therapy (DC-CIK group),25 cases received chemotherapy (chemotherapy group).Tumor growth,long-term survival and adverse reactions of the 2 groups were compared;and the levels of peripheral blood lymphocyte subsets and cytokine of the 2 groups were detected and compared.ResultsThe solid tumor remission in the DC-CIK group was better than that of the chemotherapy group,and the median overall survival time and the 1-year survival rate of the DC-CIK group were respectively 20 months and 90.48%,which were higher than those of the chemotherapy group 17 months,84.00%,P<0.05.After 1,3 courses of treatment,the percentages of CD3+,CD4+,CD8+ of the DC-CIK group were higher than that of the chemotherapy group;and the serum levels of IL-2,IL-12,IFN-γ of the DC-CIK group were higher than that of the chemotherapy group,allP<0.05.ConclusionDC-CIK combined with chemotherapy can effectively improve the immunity of patients with advanced renal cell carcinoma,promote the expression of cytokines such as IL-2,IL-12,IFN-γ and so on,so as to kill tumor cells,relieve solid tumor and improve survival of patients.

    【Key words】Advanced renal cell carcinoma;DC-CIK;Chemotherapy;Lymphocyte subsets;Cytokines

    (收稿日期2014-12-09修回日期 2015-03-10)

    中圖分類號(hào):R737.11

    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

    文章編號(hào):1001-5930(2015)04-0559-04

    DOI:10.3969/j.issn.1001-5930.2015.04.028

    猜你喜歡
    細(xì)胞因子化療
    成人HPS臨床特征及多種細(xì)胞因子水平與預(yù)后的相關(guān)性
    抗GD2抗體聯(lián)合細(xì)胞因子在高危NB治療中的研究進(jìn)展
    骨肉瘤的放療和化療
    跟蹤導(dǎo)練(二)(3)
    急性心肌梗死病人細(xì)胞因子表達(dá)及臨床意義
    細(xì)胞因子在慢性腎缺血與腎小管-間質(zhì)纖維化過(guò)程中的作用
    化療相關(guān)不良反應(yīng)的處理
    PICC個(gè)性化護(hù)理在惡性腫瘤化療中的應(yīng)用
    中醫(yī)辨證結(jié)合化療治療中晚期胃癌50例
    新癀片糊劑治療化療致組織損傷40例
    国产在视频线精品| 人妻人人澡人人爽人人| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品久久久久成人av| av电影中文网址| av国产久精品久网站免费入址| 精品国产国语对白av| 国产免费视频播放在线视频| 各种免费的搞黄视频| 国产黄色免费在线视频| 男女边摸边吃奶| 国产成人精品福利久久| 90打野战视频偷拍视频| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 91国产中文字幕| 中文字幕人妻熟女乱码| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产片内射在线| 午夜福利影视在线免费观看| 国产又爽黄色视频| 美女大奶头黄色视频| 大码成人一级视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 一区二区日韩欧美中文字幕| 1024视频免费在线观看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲男人天堂网一区| 久久免费观看电影| 久久久久人妻精品一区果冻| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产又色又爽无遮挡免| 街头女战士在线观看网站| 搡老乐熟女国产| 九色亚洲精品在线播放| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产人伦9x9x在线观看 | 午夜福利在线免费观看网站| 国产麻豆69| 国产1区2区3区精品| 亚洲av综合色区一区| 亚洲国产精品999| 午夜日本视频在线| 黄色怎么调成土黄色| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产精品无大码| 久久综合国产亚洲精品| 国产爽快片一区二区三区| 岛国毛片在线播放| 色吧在线观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 熟女电影av网| 久久久久国产一级毛片高清牌| 又黄又粗又硬又大视频| 久久狼人影院| 交换朋友夫妻互换小说| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 少妇人妻精品综合一区二区| 久久av网站| 久久99蜜桃精品久久| 青春草亚洲视频在线观看| 青春草国产在线视频| 1024香蕉在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 日韩免费高清中文字幕av| 91成人精品电影| 香蕉丝袜av| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 国产在视频线精品| 欧美变态另类bdsm刘玥| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲综合精品二区| 精品人妻在线不人妻| 国产黄色免费在线视频| 高清不卡的av网站| 久久久国产欧美日韩av| 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲精品,欧美精品| 国产激情久久老熟女| 日日爽夜夜爽网站| 超碰97精品在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 久久久久久伊人网av| 午夜福利影视在线免费观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久精品国产自在天天线| 久久久久久久精品精品| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲av欧美aⅴ国产| 黑人猛操日本美女一级片| www日本在线高清视频| 国产xxxxx性猛交| 国产成人精品久久二区二区91 | 两个人看的免费小视频| 久久精品国产a三级三级三级| 久久女婷五月综合色啪小说| 欧美精品国产亚洲| 日韩一区二区三区影片| videosex国产| 一边亲一边摸免费视频| 久热久热在线精品观看| 最近中文字幕2019免费版| 各种免费的搞黄视频| a 毛片基地| 久久毛片免费看一区二区三区| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产综合精华液| 国产精品蜜桃在线观看| 永久网站在线| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 国产乱人偷精品视频| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲欧洲日产国产| 韩国高清视频一区二区三区| 大陆偷拍与自拍| 精品久久蜜臀av无| 一区二区三区激情视频| 丝袜美腿诱惑在线| 国产激情久久老熟女| 亚洲三区欧美一区| 大陆偷拍与自拍| av网站在线播放免费| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产成人精品在线电影| 黑人猛操日本美女一级片| 热re99久久精品国产66热6| 国产成人精品福利久久| 成人国产av品久久久| 亚洲成人一二三区av| 波多野结衣一区麻豆| 男女边吃奶边做爰视频| 久久人人97超碰香蕉20202| 精品国产露脸久久av麻豆| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 少妇熟女欧美另类| 亚洲国产日韩一区二区| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产黄色免费在线视频| 美女福利国产在线| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 欧美日韩一级在线毛片| a级毛片黄视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 99香蕉大伊视频| 亚洲欧美清纯卡通| 国产毛片在线视频| 中文字幕色久视频| 国产精品久久久久久久久免| 欧美精品一区二区大全| 91精品国产国语对白视频| 少妇精品久久久久久久| 男人操女人黄网站| 2021少妇久久久久久久久久久| 在线观看免费视频网站a站| 免费高清在线观看视频在线观看| 嫩草影院入口| 两个人免费观看高清视频| 午夜av观看不卡| 午夜日韩欧美国产| 午夜免费观看性视频| 中文欧美无线码| 9191精品国产免费久久| 蜜桃在线观看..| 日韩伦理黄色片| 国产精品久久久久成人av| 18+在线观看网站| 看非洲黑人一级黄片| 我要看黄色一级片免费的| 国产精品国产av在线观看| 欧美bdsm另类| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 免费大片黄手机在线观看| 最近最新中文字幕免费大全7| 午夜激情av网站| 亚洲国产日韩一区二区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产亚洲一区二区精品| 在线看a的网站| 久久久久久久久免费视频了| 十八禁高潮呻吟视频| 久久免费观看电影| 春色校园在线视频观看| 岛国毛片在线播放| 久久ye,这里只有精品| 国产深夜福利视频在线观看| a级毛片在线看网站| 国产成人免费无遮挡视频| 国产xxxxx性猛交| 91aial.com中文字幕在线观看| 99九九在线精品视频| 午夜福利一区二区在线看| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲精品第二区| 国产精品.久久久| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲av综合色区一区| 黄频高清免费视频| 国产免费视频播放在线视频| 尾随美女入室| 2018国产大陆天天弄谢| 十八禁高潮呻吟视频| freevideosex欧美| av国产久精品久网站免费入址| 国产精品国产av在线观看| 国产麻豆69| 一二三四在线观看免费中文在| 国产在线免费精品| 制服人妻中文乱码| 国产淫语在线视频| 亚洲av.av天堂| 国产精品一二三区在线看| 丝袜美腿诱惑在线| 啦啦啦在线免费观看视频4| 在线观看一区二区三区激情| 成人国产麻豆网| 久久久久国产精品人妻一区二区| 熟女电影av网| av卡一久久| 少妇的逼水好多| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 久久国产精品大桥未久av| 久久午夜综合久久蜜桃| 精品人妻一区二区三区麻豆| 69精品国产乱码久久久| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产av精品麻豆| 精品第一国产精品| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 精品国产一区二区久久| 999精品在线视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产在视频线精品| 久久女婷五月综合色啪小说| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 最新中文字幕久久久久| 少妇 在线观看| 国产av码专区亚洲av| 人人澡人人妻人| 国产xxxxx性猛交| 精品国产乱码久久久久久小说| 九色亚洲精品在线播放| 满18在线观看网站| 一级毛片我不卡| 国产精品二区激情视频| 搡老乐熟女国产| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲av男天堂| 亚洲国产成人一精品久久久| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 最近中文字幕2019免费版| 日韩成人av中文字幕在线观看| 成年动漫av网址| 国产成人91sexporn| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲av欧美aⅴ国产| 咕卡用的链子| 成人免费观看视频高清| 亚洲 欧美一区二区三区| 赤兔流量卡办理| 99久久中文字幕三级久久日本| 欧美亚洲日本最大视频资源| 一区二区三区精品91| 在现免费观看毛片| 在线天堂最新版资源| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲人成网站在线观看播放| 一边亲一边摸免费视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 搡女人真爽免费视频火全软件| 一区二区三区激情视频| 男女边摸边吃奶| 99久国产av精品国产电影| 久久久国产精品麻豆| 黄片播放在线免费| 18禁国产床啪视频网站| 精品一区在线观看国产| 国产日韩欧美在线精品| 中文字幕色久视频| 一个人免费看片子| 日韩大片免费观看网站| 涩涩av久久男人的天堂| 国产麻豆69| 婷婷成人精品国产| 超色免费av| 国产 精品1| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| av国产久精品久网站免费入址| 老汉色av国产亚洲站长工具| 日韩成人av中文字幕在线观看| av视频免费观看在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 乱人伦中国视频| 国产精品一国产av| 亚洲精品中文字幕在线视频| 中文欧美无线码| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲精品自拍成人| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 久久97久久精品| 久久亚洲国产成人精品v| 啦啦啦在线观看免费高清www| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 多毛熟女@视频| 少妇精品久久久久久久| 爱豆传媒免费全集在线观看| 少妇精品久久久久久久| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 国产乱来视频区| 美女大奶头黄色视频| 不卡av一区二区三区| 国产一区二区激情短视频 | 免费观看在线日韩| 免费观看性生交大片5| 国产伦理片在线播放av一区| 9色porny在线观看| 欧美人与善性xxx| 精品一区在线观看国产| 1024香蕉在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲第一青青草原| 久久影院123| 国产av一区二区精品久久| 亚洲av福利一区| 国产亚洲精品第一综合不卡| av片东京热男人的天堂| 99久久人妻综合| av福利片在线| 欧美 日韩 精品 国产| 免费人妻精品一区二区三区视频| 少妇熟女欧美另类| 国产精品偷伦视频观看了| 水蜜桃什么品种好| 日韩av在线免费看完整版不卡| 亚洲精品日本国产第一区| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产1区2区3区精品| 在线天堂中文资源库| 校园人妻丝袜中文字幕| 日本黄色日本黄色录像| 啦啦啦在线免费观看视频4| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 一级毛片电影观看| 国产又色又爽无遮挡免| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产探花极品一区二区| 亚洲 欧美一区二区三区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久久久久久久免费视频了| 久久久久精品人妻al黑| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 免费看不卡的av| 亚洲综合色网址| 久久精品国产a三级三级三级| 69精品国产乱码久久久| 少妇 在线观看| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲欧美色中文字幕在线| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲欧美精品自产自拍| 久久韩国三级中文字幕| 18禁国产床啪视频网站| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 精品第一国产精品| 日本欧美视频一区| 国产熟女午夜一区二区三区| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产精品.久久久| 国产成人av激情在线播放| 国产精品国产av在线观看| 777米奇影视久久| av线在线观看网站| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 一区二区三区四区激情视频| 伦精品一区二区三区| 国产精品欧美亚洲77777| 免费黄频网站在线观看国产| 成人国产麻豆网| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 少妇的逼水好多| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲国产日韩一区二区| 男女国产视频网站| 涩涩av久久男人的天堂| 婷婷色综合大香蕉| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产成人精品无人区| 一区二区三区乱码不卡18| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 久久午夜福利片| 国产午夜精品一二区理论片| 极品人妻少妇av视频| 亚洲三区欧美一区| 亚洲欧美精品自产自拍| 中文字幕av电影在线播放| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 日韩av在线免费看完整版不卡| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲精品美女久久av网站| 国产视频首页在线观看| 欧美av亚洲av综合av国产av | 日韩中文字幕视频在线看片| 老汉色∧v一级毛片| a级毛片在线看网站| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 老汉色av国产亚洲站长工具| 在线观看免费高清a一片| 大陆偷拍与自拍| av不卡在线播放| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲精品在线美女| 日本wwww免费看| 欧美av亚洲av综合av国产av | 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 飞空精品影院首页| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产视频首页在线观看| www.av在线官网国产| 久久精品国产综合久久久| 亚洲第一区二区三区不卡| 黄色视频在线播放观看不卡| 日本av免费视频播放| 自线自在国产av| 各种免费的搞黄视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 成年女人在线观看亚洲视频| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲成色77777| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 欧美日韩亚洲高清精品| 成人国语在线视频| 精品人妻在线不人妻| 黄片播放在线免费| 久久国产精品大桥未久av| www日本在线高清视频| 亚洲av中文av极速乱| 成人二区视频| 国产97色在线日韩免费| 赤兔流量卡办理| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美最新免费一区二区三区| 香蕉丝袜av| 一区二区三区乱码不卡18| 精品福利永久在线观看| 999精品在线视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 欧美97在线视频| 伦理电影免费视频| av有码第一页| 老司机亚洲免费影院| 18在线观看网站| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产av码专区亚洲av| 国产精品99久久99久久久不卡 | av在线播放精品| 香蕉丝袜av| 97精品久久久久久久久久精品| 成人黄色视频免费在线看| 国产在线一区二区三区精| 亚洲精品国产一区二区精华液| 午夜福利,免费看| 99久久综合免费| 中文字幕人妻丝袜制服| 秋霞在线观看毛片| 亚洲国产av新网站| 在线观看免费视频网站a站| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 欧美最新免费一区二区三区| 国产成人aa在线观看| 日本色播在线视频| 少妇精品久久久久久久| 9色porny在线观看| 99国产综合亚洲精品| 免费日韩欧美在线观看| 欧美xxⅹ黑人| 我要看黄色一级片免费的| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 久久精品久久精品一区二区三区| 老司机亚洲免费影院| 亚洲av电影在线进入| 久久国内精品自在自线图片| 高清黄色对白视频在线免费看| 丰满乱子伦码专区| 国产精品国产av在线观看| 亚洲情色 制服丝袜| 欧美人与善性xxx| 国产一区二区 视频在线| 国产毛片在线视频| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 一级毛片电影观看| 亚洲,欧美精品.| 高清不卡的av网站| 国产男女超爽视频在线观看| 两个人看的免费小视频| 欧美日本中文国产一区发布| 国产综合精华液| 日本91视频免费播放| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 久久久久视频综合| 欧美av亚洲av综合av国产av | 夫妻午夜视频| 国产午夜精品一二区理论片| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲,欧美精品.| 天美传媒精品一区二区| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产一区二区激情短视频 | 久久精品国产鲁丝片午夜精品| av片东京热男人的天堂| 久久久国产欧美日韩av| xxx大片免费视频| 欧美在线黄色| 高清av免费在线| 午夜福利乱码中文字幕| www.熟女人妻精品国产| 免费高清在线观看日韩| 日韩一区二区三区影片| 成人国产av品久久久| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 九草在线视频观看| 人妻少妇偷人精品九色| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产成人午夜福利电影在线观看| 精品久久久精品久久久| 欧美精品一区二区免费开放| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 美女视频免费永久观看网站| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 超碰成人久久| 日本午夜av视频| 美女中出高潮动态图| 久久国产亚洲av麻豆专区| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产精品一区二区在线不卡| av.在线天堂| 国产成人欧美| 久久久国产一区二区| 性高湖久久久久久久久免费观看| 人妻少妇偷人精品九色| 精品久久久久久电影网| 尾随美女入室| 五月天丁香电影| 视频区图区小说| 午夜福利一区二区在线看| 精品国产国语对白av| 超色免费av| 免费少妇av软件| 久久国产亚洲av麻豆专区| 视频在线观看一区二区三区| 免费黄频网站在线观看国产| 91在线精品国自产拍蜜月| 精品福利永久在线观看| 99久久人妻综合| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久精品国产亚洲av高清一级| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产精品 欧美亚洲| 老司机影院毛片| 青春草国产在线视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| av有码第一页| 国产乱来视频区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 久久久久久久久久久免费av| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 女人精品久久久久毛片| 十八禁网站网址无遮挡| 狂野欧美激情性bbbbbb| 一本色道久久久久久精品综合| 免费大片黄手机在线观看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 日韩大片免费观看网站| 国产探花极品一区二区| 国产成人aa在线观看| 日韩大片免费观看网站| 大香蕉久久网| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲成色77777| 免费看av在线观看网站| 男女边吃奶边做爰视频| 国产有黄有色有爽视频| 久久久久久久国产电影| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产成人精品久久久久久| 久久人人97超碰香蕉20202| 久久热在线av| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 高清在线视频一区二区三区| 精品少妇久久久久久888优播| 麻豆av在线久日| 免费少妇av软件|