乳腺癌患者血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達水平的相關性

周愛清　陳志軍　孫正魁　黃傳生

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乳腺癌患者血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達水平的相關性

周愛清陳志軍孫正魁黃傳生

作者單位:330029 江西省腫瘤醫(yī)院

【摘要】目的探討化學發(fā)光法檢測可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD濃度與組織HER-2表達水平的相關性。方法采用西門子化學發(fā)光儀檢測2012年12月至2013年12月收治的84例可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平，并采用同期的58例乳腺良性病變患者及56例健康體檢女性作為對照；同時對84例可手術乳腺癌患者進行組織HER-2表達的檢測。結果可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平及陽性率分別為(15.56±6.79)ng/ml、19.05%，明顯高于乳腺良性病變患者的(6.21±3.21)ng/ml、0.00%，及健康體檢者的(5.13±2.25)ng/ml、0.00%，P均<0.05。34例組織HER-2表達陽性的可手術乳腺癌中有14例血清HER-2/neu陽性，陽性符合率為41.2%；50例組織HER-2表達陰性的可手術乳腺癌中有48例血清HER-2/neu陰性，陰性符合率為96.0%；血清HER-2/neu水平與組織HER-2表達狀態(tài)具有較好的一致性，(kappa=0.406，P<0.05)。結論化學發(fā)光法檢測可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達水平具有較好的一致性。因此，乳腺癌患者在系統治療期間，可通過化學發(fā)光法動態(tài)監(jiān)測患者血清HER-2/neu ECD水平，可彌補組織HER-2檢測的不足，在乳腺癌隨訪、療效監(jiān)測尤其是用Herceptin治療后的療效監(jiān)測中發(fā)揮其獨到作用。

【關鍵詞】乳腺癌；化學發(fā)光法；血清；HER-2/neu；免疫組化；熒光原位雜交

(ThePracticalJournalofCancer,2015,30:479～481)

人類表皮生長因子受體-2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)基因是一種原癌基因，由具有酪氨酸激酶活性的胞質區(qū)、跨膜區(qū)及胞外域(extracellular domain,ECD)組成。目前臨床多采用免疫組化(IHC)和熒光原位雜交(FISH)判斷組織HER-2表達水平，但這些方法有流程繁瑣復雜、靈敏度及特異性較差等缺點，且對于晚期無法取得實體瘤樣本的患者，IHC和FISH均無法檢測。有研究表明，HER-2/neu的細胞外區(qū)(ECD)可脫離進入血清，形成游離的HER-2/neu蛋白，稱血清HER-2/neu[1]。血清HER-2/neu檢測具有簡單、方便、定量及動態(tài)觀察等優(yōu)點，可以監(jiān)控治療效果、預測復發(fā)或提供乳腺癌轉移時HER-2狀態(tài)的實時評估[2]。本研究通過化學發(fā)光法檢測可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平，對其與組織HER-2表達水平的相關性進行探討，現報告如下。

1材料與方法

1.1一般資料

收集我院2012年12月至2013年12月可手術乳腺癌患者84例，所有病例均經病理檢查證實為浸潤性導管癌，均為女性；年齡26～71歲，平均年齡52歲。另外收集健康體檢女性56例作為正常對照組，年齡21～53歲，平均年齡37歲。手術證實為乳腺良性病變患者58例，其中乳腺纖維瘤31例，小葉增生27例，年齡31～65歲，平均年齡39歲。受檢者抽空腹血3～5 ml，不抗凝，待血液凝固后分離血清置于無菌有蓋試管中，置于-25 ℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2儀器與方法

測量儀為西門子centaur XP化學發(fā)光儀，HER-2/neu試劑由西門子公司提供。

1.3結果判斷

血清HER-2/neu>15.2 ng/ml為陽性。組織HER-2陽性的判斷標準：IHC計分3+或IHC計分2+再經熒光原位雜交(FISH)驗證陽性者視為陽性；組織HER-2陰性的判斷標準：IHC計分0+～1+或IHC計分2+再經熒光原位雜交(FISH)驗證陰性者視為陰性。

1.4統計學處理

兩樣本均數比較用t檢驗，陽性率的比較采用χ2檢驗，采用Kappa檢驗來判斷2種檢測方法結果是否具有一致性，Kappa值的判斷[3]:k>0.75一致性好，0.40≤k≤0.75一致性較好，k<0.4一致性差。

2結果

2.1血清HER-2/neu ECD的水平和陽性率

可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平均高于乳腺良性病變患者及健康體檢者(P均<0.05)，乳腺良性病變患者血清HER-2/neu ECD水平高于健康體檢者(P<0.05)；可手術乳腺癌血清HER-2/neu ECD陽性率均高于乳腺良性病變患者及健康體檢者(P均<0.05)，乳腺良性病變患者血清HER-2/neu ECD陽性率與正常對照組相比無統計學意義(P>0.05)；見表1。

表1　不同組別血清HER-2/neu水平及陽性率

注：△為乳腺癌患者血清HER-2/neu水平與乳腺良性病變及正常對照組相比，P均<0.05;▲為乳腺良性病變患者血清HER-2/neu水平與正常對照組相比，P<0.05。☆為乳腺癌患者血清HER-2/neu陽性率與乳腺良性病變及正常對照組相比，P均<0.05;★為乳腺良性病變患者血清HER-2/neu陽性率與正常對照組相比，P>0.05。

2.2血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達水平的關系

34例組織HER-2表達陽性的可手術乳腺癌中有14例血清HER-2/neu陽性，陽性符合率為41.2%；50例組織HER-2表達陰性的可手術乳腺癌中有48例血清HER-2/neu陰性，陰性符合率為96.0%?；瘜W發(fā)光法檢測結果顯示血清HER-2/neu水平與組織HER-2表達水平差異無統計學意義，2種檢查方法具有較好的一致性，(kappa=0.406，P<0.05)；見表2。

表2　乳腺癌患者HER-2/neu水平與組織HER-2

3討論

乳腺癌是女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，且發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。20%～30%的乳腺癌患者呈HER-2過度表達或基因擴增，HER-2基因的擴增和蛋白的過度表達預示腫瘤的生物學行為惡性程度高，侵襲力強，無病生存期短，預后差[4]。組織HER-2和激素受體的表達是乳腺癌的內分泌治療和靶向治療的唯一選擇依據，目前大多數乳腺癌患者的臨床治療仍然是根據初始評估，但HER-2的表達狀態(tài)隨疾病的進展會發(fā)生改變[5]。

目前國際上認可的篩選HER-2表達陽性乳腺癌的方法有免疫組化(immunohistochem istry，IHC)法和熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization，FISH)法。IHC法由于蛋白在標本固定和處理過程中容易變形破壞，以及抗體不同批號產生的差異和結果判斷的主觀差異等，使假陽性和假陰性無法避免[6]；FISH技術是一種基因技術，具有敏感性高、穩(wěn)定性和重復性好等優(yōu)點，但檢測費用高，且兩者均需要實體瘤樣本；對于晚期乳腺癌或治療過程中出現肝、骨等轉移不能取得實體標本的患者，均不能做IHC和FISH檢測。因此，僅僅根據以往組織學檢測結果來判斷HER-2狀態(tài)并不科學，需要及時監(jiān)測HER-2表達狀態(tài)，否則可能會使部分組織HER-2假陰性的患者失去靶向治療和臨床獲益的機會。國家綜合癌癥網(NCCN)建議盡可能進行轉移灶的活檢，但很少得到關注，尤其當轉移灶難以活檢時。

在這種情況下，血清HER-2/neu胞外段(extracellular domain,ECD)可能可以作為乳腺癌患者治療的一個重要的依據。袁芃等[7]采用ELISA方法檢測可手術乳腺癌血清HER-2/neu ECD陽性率為19%，組織HER-2/neu陽性率為47%。而采用化學發(fā)光法檢測乳腺癌患者血清HER-2/neu水平的文獻至今還未見報道，本研究采用化學發(fā)光法檢測可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD陽性率為19.05%(16/84)，組織HER-2/neu陽性率為40.5%(34/84)；可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平和陽性率均高于乳腺良性病變患者及健康體檢者(P均<0.05)，與袁芃等報道一致。

總之，目前被廣泛采用的HIC和FISH存在諸多問題：由于活檢的創(chuàng)傷性和標本的局限性，HER-2的檢測無法動態(tài)隨訪，實時監(jiān)測；而且部分患者無法提供檢測所需的組織切片；腫瘤異質性會導致假陰性結果，有些患者的HER-2表達水平在疾病的發(fā)展過程中可能發(fā)生轉變，有些可由陰性表達轉為陽性表達。因此，臨床需要持續(xù)了解患者機體HER-2的表達水平，而血清HER-2/neu ECD檢測作為“液體活檢”可隨時進行，做到量化、實時、動態(tài)監(jiān)測，從而有助于臨床醫(yī)生根據HER-2表達情況制定治療方案，以實現個體化治療。本研究顯示化學發(fā)光法檢測可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達水平具有較好的一致性(kappa=0.406，P<0.05)；化學發(fā)光法檢測可手術乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD的敏感性不高(41.2%)，但特異性很好(96.0%)。因此，乳腺癌患者在系統治療期間，可通過化學發(fā)光法動態(tài)監(jiān)測患者血清HER-2/neu ECD水平，彌補組織HER-2檢測的不足，在乳腺癌隨訪、療效監(jiān)測尤其是用Herceptin治療后的療效監(jiān)測中發(fā)揮其獨到作用。

參考文獻

[1]Cook GB,Neaman IE,Goldblatt JL,et al.Clinical utility of serum HER-2/neu testing on the Bayer Immuno 1 automated system in breast cancer〔J〕.Anticancer Res,2001,21(2B):1465-1470.

[2]Leary AF,Hanna WM,van de Vijver MJ,et al.Value and limitations of measuring HER-2 extracellular domain in the serum of breast cancer patienta〔J〕.J Clin Oncol,2009,27(10):1694-1705.

[3]孫振球主編.醫(yī)學統計學(第三版)〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：662-663.

[4]步宏，陳杰，丁華野，等.乳腺癌HER2檢測指南〔J〕.中華病理學雜志，2006,35(10):631.

[5]臧愛華,冉鳳鳴,張菁，等.乳腺癌生物標志物表達狀態(tài)的時間變異性〔J〕.腫瘤防治研究,2010,37(9):1031-1034,1039.

[6]萬美珍,凌揚,徐志毅，等.熒光原位雜交與免疫組化檢測乳腺癌組織HER-2基因擴增或蛋白表達情況的比較分析〔J〕.腫瘤基礎與臨床,2010,23(1):16-18.

[7]袁芃,徐兵河,齊軍.乳腺癌患者血清與腫瘤組織中Her-2/neu表達的相關性研究〔J〕.臨床腫瘤學雜志，2004,9(5):449-451.

(編輯：甘艷)

Correlation between Serum HER-2/neu Concentration of Breast Cancer Patients and HER-2 Expression Level

ZHOUAiqing,CHENZhijun,SUNZhengkui,etal.JiangxiCancerHospital,Nanchang,330029

【Abstract】ObjectiveTo explore the correlation between concentration of HER-2/neu ECD and HER-2 expression level in tissues by chemiluminescence.MethodsSiemens chemiluminescence apparatus was used to detect the serum HER-2/neu ECD level in 84 operable breast cancer patients.58 patients with breast benign lesions over the same period and 56 cases of healthy patients were selected as contrast.HER-2 expression level in tissues of 84 cases of breast cancer patients were detected.ResultsHER-2/neu ECD levels and serum positive rate of the breast cancer patients were 15.56±6.79 ng/ml and 19.05%,which were significantly higher than patients with breast benign lesions (6.21±3.21 ng/ml,0.00%) and healthy patients (5.13±2.25 ng/ml，0.00%)，P<0.05.There were 14 cases of positive serum HER-2/neu in 34 operable breast cancer patients with positive expression of HER-2,positive coincidence rate was 41.2%.There were 48 cases of negative serum HER-2/neu in 50 operable breast cancer patients with negative expression of HER-2,negative coincidence rate was 96%.The serum HER-2/neu level had good consistency with expression of HER-2(kappa=0.406，P<0.05).ConclusionSerum Her-2/neu concentration in operable breast cancer patients has good consistency with expression of HER-2 by chemiluminescence.During the system treatment for breast cancer patients,dynamic monitoring of serum HER-2/neu ECD level by chemiluminescence can make up for the insufficiency of HER-2 detection.It plays an unique role in the follow-up of breast cancer patients and monitoring of efficacy,especially monitoring of efficacy after treatment with Herceptin.

【Key words】Breast cancer;Chemiluminescence method;Serum;HER-2/neu;Lmmunohistochemical;Fluorescence in situ hybridization(FISH)

(收稿日期2014-12-04修回日期 2015-01-14)

中圖分類號：R737.9

文獻標識碼：A

文章編號：1001-5930(2015)04-0479-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2015.04.002

基金項目：江西省衛(wèi)生廳科技計劃(編號：20123106)