浦城縣高致病性禽流感疫苗免疫效果監(jiān)測分析

浦城縣高致病性禽流感疫苗免疫效果監(jiān)測分析

呂國榮1，詹文輝2

(1.福建省浦城縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所353400;2.福建省南平市動物疫病預(yù)防控制中心353000)

根據(jù)禽流感病毒致病性和毒力的不同，可以將禽流感分為高致病性禽流感、低致病性禽流感和無致病性禽流感。高致病性禽流感其發(fā)病率和死亡率都很高。做好預(yù)防和控制很重要，現(xiàn)將我縣2014年高致病性禽流感免疫監(jiān)測情況報告如下。

1材料準(zhǔn)備

儀器：天平、普通離心機(jī)、微型振蕩器、微量移液器、滴頭、96孔V型血凝反應(yīng)板。試劑：禽流感病毒H5亞型標(biāo)準(zhǔn)抗原及標(biāo)準(zhǔn)陽性血清(哈爾濱獸醫(yī)研究所)。

2操作方法

2.1　血凝(HA)試驗(yàn)

①采用微量血凝試驗(yàn)，在微量凝集板上，從第1孔至第12孔，用加樣器每孔加入PBS0.025mL，第1孔加抗原(病毒懸液)0.025mL，混勻。從第1孔起，依次作倍比稀釋至第11孔，最后棄掉0.025mL。每孔再加入0.025mLPBS。② 每孔加入1%雞紅細(xì)胞懸液0.025mL(將紅細(xì)胞懸液充分搖勻后加入)，第12孔設(shè)不加病毒的紅細(xì)胞對照孔，立即在微量振蕩器上搖勻，置室溫(20~25℃)40分鐘，觀察結(jié)果(如果環(huán)境溫度太高，可置4℃環(huán)境下)。對照孔紅細(xì)胞將成明顯的鈕扣狀沉到孔底。③結(jié)果判定：將板傾斜，觀察紅細(xì)胞有無呈淚滴狀流淌。完全血凝(不流淌)的抗原或病毒最高稀釋倍數(shù)代表一個血凝單位(HAU)。

2.2　血凝抑制(HI)試驗(yàn)

①根據(jù)2.1試驗(yàn)結(jié)果配制4HAU的病毒抗原。以完全血凝的病毒最高稀釋倍數(shù)作為終點(diǎn)，終點(diǎn)稀釋倍數(shù)除以4即為含4HAU的抗原的稀釋倍數(shù)。例如，如果血凝的終點(diǎn)滴度為1∶256，則4HAU抗原的稀釋倍數(shù)應(yīng)是1∶64。②在微量反應(yīng)板的1-11孔加入0.025 mLPBS，第12孔加入0.05mLPBS。③吸取0.025 mL待檢血清加入第1孔內(nèi)，充分混勻后吸0.025mL于第2孔， 依次倍比稀釋至10孔， 從第10孔吸取0.025mL棄掉。④1-11孔均加入4HAU 混勻的病毒抗原液0.025mL，室溫(約20℃)靜置至少30min。⑤每孔加入0.025mL(V/V)的 1%紅細(xì)胞懸液混勻， 室溫靜置約40min。對照紅細(xì)胞呈明顯鈕扣狀沉于孔底。

3結(jié)果判定

以完全抑制4個HAU抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI滴度。只有陰性對照孔血清滴度不大于2log2，陽性對照孔血清誤差不超過1個滴度，試驗(yàn)結(jié)果才有效。HI價小于或等于3 log2判定HI試驗(yàn)陰性；HI價等于4 log2為可穎，需重復(fù)試驗(yàn)；HI價大于或等于5log2為陽性。

4監(jiān)測結(jié)果

全縣監(jiān)測結(jié)果為：種雞場100份血清，100份抗體陽性，免疫抗體合格率達(dá)100%；商品雞場253份血清，244份抗體陽性，免疫抗體合格率達(dá)96.44%；散養(yǎng)雞190份血清，185份抗體陽性，免疫抗體合格率達(dá)97.37%。商品鴨場180份血清，168份抗體陽性，免疫抗體合格率達(dá)93.33%；散養(yǎng)鴨95份血清，92份抗體陽性，免疫抗體合格率達(dá)96.84%。

5結(jié)果分析

監(jiān)測結(jié)果表明，浦城縣高致病性禽流感免疫抗體合格率較高，達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的免疫抗體合格率全年保持在70%以上的要求。

重視培訓(xùn)。我縣加強(qiáng)了村級動物防疫員培訓(xùn)工作。培訓(xùn)內(nèi)容包括動物防疫相關(guān)法律法規(guī)及規(guī)章制度、疫苗基礎(chǔ)知識、免疫接種及免疫反應(yīng)的預(yù)防與處理、消毒基礎(chǔ)知識、樣品的采集、保存與運(yùn)輸方法、病死動物無害化處理方法等。開展村級動物防疫員集中培訓(xùn)，主要是為了提高村級動物防疫人員的理論水平、操作技能和服務(wù)水平。

加強(qiáng)免疫。我縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)成立免疫專業(yè)隊，由鄉(xiāng)鎮(zhèn)領(lǐng)導(dǎo)，村干部、鄉(xiāng)鎮(zhèn)掛村人員、村動物防疫員及其他有關(guān)人員等組成，業(yè)務(wù)干部進(jìn)村入戶指導(dǎo)。逐村逐戶開展集中免疫，堅決杜絕“三漏免”和“三不免”現(xiàn)象。堅持集中免疫和每月補(bǔ)免日制度。

加大督查。在春秋季動物集中免疫期間，我縣組織督查組開展檢查指導(dǎo)，按照“領(lǐng)導(dǎo)到位、責(zé)任到人，冷鏈到底、疫苗到員，檔案到戶，標(biāo)識到畜”的要求，對各鄉(xiāng)鎮(zhèn)免疫情況開展專項檢查，重點(diǎn)檢查免疫工作進(jìn)展、免疫密度、人員到位等情況，結(jié)合省市下達(dá)的績效管理考核內(nèi)容，及時糾正免疫中存在的不足問題，促進(jìn)免疫進(jìn)度，督促落實(shí)各項防控措施，確保動物疫病防控工作取得良好成效。