腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子參與炎癥免疫調(diào)節(jié)的研究進(jìn)展

李 影，陳鏡宇，張玲玲，魏 偉

（安徽醫(yī)科大學(xué)臨床藥理研究所，抗免疫藥物教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽合肥 230032）

腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子參與炎癥免疫調(diào)節(jié)的研究進(jìn)展

李 影，陳鏡宇，張玲玲，魏 偉

（安徽醫(yī)科大學(xué)臨床藥理研究所，抗免疫藥物教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽合肥 230032）

中國(guó)圖書分類號(hào)：R-05；R364.5；R392.11；R977.6

摘要：腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子（tumor necrosis factor re-ceptor-associated factors，TRAF）是一類重要的具有多功能的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子。TRAF參與多種受體家族的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，包括腫瘤壞死因子受體家族（tumor necrosis factor recep-tor，TNFR）和Toll樣-IL-1受體（Toll-like receptors-interleu-kin-1 receptors，TLR-IL-1R）家族等，在固有免疫和獲得性免疫中發(fā)揮重要作用。受體活化時(shí)，TRAF直接或間接募集下游受體的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，最終激活NF-κB和干擾素調(diào)節(jié)因子（interferon regulatory factor，IRF）等活化轉(zhuǎn)錄因子信號(hào)通路，從而誘導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)，參與炎癥免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展。

關(guān)鍵詞：TRAF；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)；TNFR；NF-κB；免疫；炎癥；疾病

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2015－8－10 14：37 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1086．R．20150810．1437．006．html

腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子（tumor necrosis factor recep-tor-associated factors，TRAF）是一類具有多功能的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)接頭分子。這類分子在細(xì)胞內(nèi)與下游分子相互作用，最終引起NF-κB活化誘導(dǎo)免疫與炎癥反應(yīng)。對(duì)于TRAF家族，目

前已發(fā)現(xiàn)人和鼠的TRAF分子各有7種（TRAF1-7），這些TRAF分子不僅有類似的結(jié)構(gòu)特征，而且作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上游的接頭分子在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路中起關(guān)鍵作用。本文將闡述TRAF蛋白在調(diào)控經(jīng)典NF-κB途徑與非經(jīng)典NF-κB途徑中的異同，TRAF蛋白調(diào)節(jié)Ⅰ型干擾素路徑及其在炎癥免疫性疾病中的作用。

1　TRAF家族成員功能結(jié)構(gòu)域

目前，在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)TRAFs家族成員共有7個(gè)（TRAF1-7），它們主要參與TNF受體家族信號(hào)通路［1］。大多數(shù)TRAFs成員都包含一個(gè)N-末端指環(huán)狀結(jié)構(gòu)域（1-86AA）和數(shù)量不等的鋅指，而C-末端TRAF結(jié)構(gòu)域（358-501AA）由卷曲螺旋TRAF-N（N-terminal coiled-coil region，TRAF-N）結(jié)構(gòu)域和保守的TRAF-C（C-terminal β-sandwich，TRAF-C）結(jié)構(gòu)域組成。在7種TRAFs家族中，TRAF1結(jié)構(gòu)最特殊，它不含TRAF結(jié)構(gòu)N-末端的指環(huán)結(jié)構(gòu)域和鋅指結(jié)構(gòu)［2］。研究表明，TRAF1在鼻咽癌的癌組織中表達(dá)高于癌旁組織，并且在霍奇金淋巴瘤中也高表達(dá)。TRAF2結(jié)構(gòu)域包含2個(gè)亞結(jié)構(gòu)域，即TRAF-N結(jié)構(gòu)域和TRAF-C結(jié)構(gòu)域［3］。TRAF-C的C末端序列與TNF-R2和腫瘤壞死因子受體相關(guān)死亡域蛋白（TNF receptor associated death domain pro-tein，TRADD）相互作用，而TRAF-C的N末端與受體相互作用蛋白（receptor inter-acting protein，RIP）相互作用。TRAF2主要激活2個(gè)獨(dú)立的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑：NF-κB誘導(dǎo)激酶（NF-κB inducing kinase，NIK）途徑和c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinases，JNK）途徑［4］。TRAF3是TRAF家族中功能最為多樣化的成員之一。最近研究表明，TRAF3不僅能夠負(fù)向調(diào)節(jié)NF-κB和MAPK信號(hào)通路，還能夠正向調(diào)節(jié)Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生［5］。TRAF4除具有TRAF家族成員共有的結(jié)構(gòu)特征外，還具有自己獨(dú)特的特征，如TRAF4是TRAF家族成員中唯一可以核定位的蛋白，在胚胎發(fā)育過(guò)程和乳腺癌中高表達(dá)［6］。TRAF5表達(dá)較廣泛，高表達(dá)于肺，中度表達(dá)于脾、胸腺、腎，在乳腺等其它組織中水平很低。研究表明，TRAF5在缺血性腦梗死和炎癥性腸疾病中發(fā)揮重要作用［7］。TRAF6是多功能的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，具有受體結(jié)合特異性，是TRAF家族中唯一可以與白介素-1受體（in-terleukin-1 receptor，IL-1R）相關(guān)激酶、核因子κB受體激動(dòng)劑（receptor activator of nuclear factor-κB，RANK）、CD40直接結(jié)合的信號(hào)分子，在RANK介導(dǎo)的破骨細(xì)胞激活途徑中起重要作用［8］。TRAF7于2004年被發(fā)現(xiàn)，有長(zhǎng)型和短型兩種形式，長(zhǎng)型是通常所說(shuō)的TRAF7，編碼670個(gè)氨基酸的蛋白。短型被定名為TRAF7s，較長(zhǎng)型缺少第1～66號(hào)氨基酸［9］。目前TRAF7相關(guān)的研究還不是很多。

除了TRAF7外，所有TRAFs在C-末端都有高度保守的模序，稱為TRAF結(jié)構(gòu)域。TRAF結(jié)構(gòu)域的長(zhǎng)度約為200個(gè)氨基酸，并劃分為TRAF-N和TRAF-C兩部分［10］。TRAFs的三聚化，需要完整的TRAF結(jié)構(gòu)域。晶體結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)，在蘑菇形三聚體中，TRAF-C像蘑菇上的帽子，TRAF-N的α螺旋為莖。一個(gè)腫瘤壞死因子受體2（tumor necrosis factor re-ceptor 2，TNFR2）分子僅與TRAF2分子三聚體中一個(gè)TRAF-C區(qū)的淺表部位結(jié)合，而不與三聚體中另外兩個(gè)單體接觸。TRAFs這種三聚體化學(xué)結(jié)構(gòu)為信號(hào)由細(xì)胞外經(jīng)TN-FR向細(xì)胞內(nèi)傳遞奠定了重要的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。所有哺乳動(dòng)物的TRAF分子的N端，除了TRAF1以外都含有1個(gè)指環(huán)結(jié)構(gòu)域和5～7個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)域［11］。指環(huán)狀結(jié)構(gòu)被認(rèn)為可介導(dǎo)DNA－蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用，近來(lái)又發(fā)現(xiàn)指環(huán)狀結(jié)構(gòu)參與TRAFs的蛋白酶體依賴的降解過(guò)程［12］。

TRAFs作為銜接蛋白，一方面通過(guò)與受體胞內(nèi)段的TRAF同源結(jié)構(gòu)域接受外界刺激信號(hào)，另一方面又可通過(guò)其TRAF同源結(jié)構(gòu)域募集胞質(zhì)內(nèi)其它含有TRAF的蛋白分子，或通過(guò)其N-端指環(huán)／鋅指結(jié)構(gòu)與其它蛋白質(zhì)分子或DNA結(jié)合，形成復(fù)合物向下游傳遞信號(hào)。

2　調(diào)控NF-κB途徑

2．1TRAF參與TNFRs超家族誘導(dǎo)經(jīng)典的NF-κB途徑

TNFR1和TNFR2是TNF兩個(gè)受體，屬于TRAF家族成員，在細(xì)胞增殖、分化、凋亡、免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)等生理和病理過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。TNFR1在人體所有組織中表達(dá)，是介導(dǎo)TNF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要受體；TNFR2主要是存在于免疫細(xì)胞，參與免疫細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)和炎癥過(guò)程。TNF-α通過(guò)其特異性受體而募集TRADD、細(xì)胞凋亡蛋白抑制劑1／2（cellular inhibitor of apoptosis protein，cIAP1／2）、TRAF2／5和RIP1等組成的復(fù)合物到TNFR1上，接頭蛋白R(shí)IP1被泛素化酶cIAP 和TRAF泛素化，通過(guò)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子激活激酶1（transforming growth factor-p-activated kinase 1，TAK1）激活I(lǐng)KK激酶。RIP1通過(guò)多聚泛素鏈和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子活化蛋白激酶1結(jié)合蛋白（transforming growth factor-activated kinase 1-binding pro-tein 2／3，TAB2／TAB3）之間的結(jié)合來(lái)募集TAK1激酶復(fù)合物，而RIP1募集IKK復(fù)合物是通過(guò)多聚泛素鏈和IKKγ之間的結(jié)合［13］?；罨腎KK復(fù)合物，在Ser32和Ser36上磷酸化IκBα，通過(guò)Lys19上SKP1，Cdc53／Cullin1和F-box蛋白β轉(zhuǎn)導(dǎo)含有重復(fù)序列的蛋白（βTRCP）SCFIκB的E3泛素連接酶復(fù)合物導(dǎo)致IκBα多泛素化。多聚泛素化的IκBα通過(guò)26S蛋白酶體降解后，釋放RelA和形成RelA／p50異源二聚體進(jìn)入細(xì)胞核，從而誘導(dǎo)基因表達(dá)。

研究表明，cIAP1和cIAP2可以催化RIP1的泛素化和TNF介導(dǎo)的IKK活化。TRAF2和cIAP1／2之間的相互作用對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的RIP1多泛素化和NF-κB活化起促進(jìn)作用［14］，這表明TRAF2，雖然不是直接的RIP1 E3連接酶，但在RIP泛素化的過(guò)程中起關(guān)鍵作用。TRAF2和TRAF5可能在TNF-α誘導(dǎo)的典型的NF-κB活化中并非必不可少，因?yàn)樵赥RAF2－／－成纖維細(xì)胞中，NF-κB的活化僅部分降低［15］；而缺失TRAF2和TRAF5的細(xì)胞基本上沒(méi)有TNF依賴性激酶活性。

2．2TRAF參與調(diào)控非經(jīng)典的NF-κB途徑 在哺乳動(dòng)物中，NF-κB家族包括RelA、RelB、p50／NF-κB1、p52／NF-κB2 和c-Rel。由p52／RelB基因形成的異二聚體介導(dǎo)的非經(jīng)典NF-κB途徑，在次級(jí)淋巴組織發(fā)育和適應(yīng)性免疫應(yīng)答中尤為重要。TRAF3蛋白可以與NIK相互作用，該作用觸發(fā)了NIK蛋白的泛素化-蛋白酶體降解途徑。NIK在非經(jīng)典NF-κB途徑中起關(guān)鍵作用。TRAF3蛋白水平降低，能夠促進(jìn)NIK蛋白在細(xì)胞內(nèi)積聚，而NIK能夠通過(guò)與IKKα發(fā)生相互

作用，并且直接磷酸化IKKα，使之二聚化，誘導(dǎo)無(wú)活性NF-κB前體蛋白p100活化為有活性p52，激活非經(jīng)典NF-κB通路（Fig 1）。研究發(fā)現(xiàn)，在人多發(fā)性骨髓瘤（multiple myelo-ma，MM）細(xì)胞中存在NIK蛋白積累和非經(jīng)典NF-κB途徑活化，以及TRAF2、TRAF3、cIAP1和cIAP2基因缺失和（或）突變，提示TRAF2、TRAF3、cIAP1和cIAP2都負(fù)性調(diào)控非經(jīng)典NF-κB信號(hào)通路［16］。在休眠細(xì)胞中，NIK與TRAF2／TRAF3以及cIAP1／cIAP2形成一個(gè)復(fù)合體，并且該復(fù)合體促進(jìn)NIK發(fā)生K48位泛素化降解，當(dāng)通路被激活，NIK發(fā)生蓄積，并磷酸化下游的IKKα，后者促進(jìn)無(wú)活性NF-κB前體蛋白p100被蛋白酶體剪切，成為有活性p52。p52與RelB形成異二聚體并入核，啟動(dòng)下游靶基因轉(zhuǎn)錄。從抑制的NIK／TRAF／cIAP復(fù)合物中釋放NIK，導(dǎo)致NIK在B細(xì)胞中積累［17］。在多發(fā)性骨髓瘤病人細(xì)胞系中，都存在NF-κB通路相關(guān)基因表達(dá)異常，并且多數(shù)有NIK蛋白蓄積，進(jìn)而造成NF-κB通路持續(xù)活化，從而促進(jìn)骨髓瘤細(xì)胞增殖、抑制骨髓瘤細(xì)胞凋亡促進(jìn)新生血管形成、最終導(dǎo)致溶骨病變。

另外，NIK基因缺失可使致死表型的TRAF2－／－和TRAF3－／－小鼠獲救，即缺失的NF-κB2基因也可使致死表型的TRAF3－／－小鼠獲救。而缺失的NF-κB1基因不能使致死表型的TRAF3－／－小鼠獲救，這表明NIK是持續(xù)活化非經(jīng)典NF-κB途徑的關(guān)鍵分子。與TRAF3－／－小鼠比較，TRAF3－／－NF-κB2＋／－小鼠只能存活幾天，而TRAF3－／－NIK＋／－小鼠出生后可存活幾個(gè)月［18］。這可能是由于在TRAF3－／－NIK＋／－小鼠中NIK水平不足從而誘導(dǎo)非經(jīng)典NF-κB信號(hào)通路。

3　TRAF參與調(diào)控Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生

Ⅰ型干擾素（interferons，IFNs）在控制病毒感染起到了至關(guān)重要的作用。最近在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)兩大信號(hào)通路負(fù)責(zé)干擾素的產(chǎn)生。一個(gè)是由另一個(gè)TRAF家族成員Toll樣受體（toll-like receptors，TLRs）誘導(dǎo)的，尤其是TLR7和TLR9，可在漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞（plasmacytoid dendritic cells，pDC）的核內(nèi)中識(shí)別病毒核酸［19］。另一種是由RIG-I樣受體（RIG-I like receptors，RLRs）誘導(dǎo)，包括視黃酸，可誘導(dǎo)基因-I（retinoic acid-induced gene I，RIG-I）和黑色素瘤分化相關(guān)基因5（mela- noma differentiation associated gene 5，MDA5），其可在許多其他類型的細(xì)胞中識(shí)別細(xì)胞質(zhì)病毒RNA。

在pDC中，TLR7和TLR9從病毒中分別識(shí)別單鏈RNA和非甲基化DNA，并且通過(guò)MyD88觸發(fā)下游信號(hào)，而TLR3在常規(guī)樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中識(shí)別雙鏈RNA并通過(guò)Toll ／IL-1受體結(jié)構(gòu)域接頭分子（Toll／IL-1 receptor domain contai-ning adaptor inducing IFN-β，TRIF）激活下游信號(hào)。MyD88與白介素-1受體相關(guān)激酶1（interleukin-1 receptor-associated kinase 1；IRAK-1）、IRAK4和干擾素調(diào)節(jié)因子-7（interferon regulatory factor-7，IRF7）形成一個(gè)復(fù)合物，直接激活I(lǐng)RF7。IRAK1和IKKα已被認(rèn)為是潛在的IRF7激酶。磷酸的IRF7進(jìn)入細(xì)胞核誘導(dǎo)I型干擾素表達(dá)（Fig 2）。IRF7的激活需要泛素結(jié)合酶13（ubiquitin conjugating enzyme 13，UBC13）和TRAF6完整的指環(huán)結(jié)構(gòu)域，這表明多泛素化在活化IRF家族的轉(zhuǎn)錄因子上也是非常重要的。TRIF與TRAF3和TRAF6共同誘導(dǎo)TBK1和IKKε活化，從而使IRF3和IRF7磷酸化［20］。IRF3／7通過(guò)TBK1／IKKε磷酸化，誘導(dǎo)形成IRF同二聚體和／或異二聚體，然后易位到細(xì)胞核并結(jié)合到IFN-敏感反應(yīng)元件（interferon stimulate response elements，ISREs），導(dǎo)致I型干擾素和IFN誘導(dǎo)性基因表達(dá)。MyD88依賴性和TRIF依賴性抗病毒途徑都需要TRAF3，因?yàn)門RAF3－／－骨髓誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞和TRAF3－／－pDC不能在TLR3和TLR4配體刺激后產(chǎn)生Ⅰ型干擾素。

Fig 2 TRAF mediated type 1 interferon production pathway

一旦檢測(cè)到細(xì)胞質(zhì)中的病毒RNA，RIG-I和MDA5募集胱冬肽酶結(jié)構(gòu)域（caspase recruitment domain，CARD）配體去誘導(dǎo)IFN-β（也被稱為線粒體抗病毒信號(hào)）、IFN-β啟動(dòng)子刺激-1（interferon beta promoter stimulator1，IPS-1）或病毒誘導(dǎo)的信號(hào)適配器。該信號(hào)復(fù)合物再與TRAF3一起激活TBK1／IKKε，進(jìn)一步磷酸化和激活I(lǐng)RF3／7。IFN-β和TRAF3之間的相互作用對(duì)于Y440A／Q442A突變體IFN的產(chǎn)生非常關(guān)鍵［21］。此外，TRAF3基因敲除細(xì)胞顯示病毒誘導(dǎo)的IFN-α產(chǎn)生明顯減少，說(shuō)明TRAF3在RLR介導(dǎo)的干擾素生產(chǎn)起關(guān)鍵作用。

4　TRAF在免疫細(xì)胞中的作用

TRAF2、3、5和6對(duì)B細(xì)胞的生存、發(fā)展和活化起重要作

用。在缺少TRAF2或TRAF3的條件下，由于p52的激活，不依賴BAFF的B細(xì)胞生存期表現(xiàn)明顯的延長(zhǎng)。在BAFF-R－／－小鼠中的B細(xì)胞成熟過(guò)程中，B細(xì)胞不表達(dá)TARF2、TARF3和cIAP1／2。因此，B細(xì)胞的生存、成熟通常由BAFF結(jié)合BAFF-R后，BAFF-R與TARF2、TARF3或cIAP1／2解離，從而激活下游非經(jīng)典NF-κB途徑［22］。B細(xì)胞缺失TARF2、TARF3或cIAP1／2，對(duì)CD40信號(hào)表現(xiàn)出不同的影響。TRAF3－／－B細(xì)胞在CD40信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中可加速JNK、ERK 和p38的磷酸化。然而，TRAF2－／－B細(xì)胞則減少和減慢CD40的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)［23］。在TRAF2－／－和cIAP1－／－cIAP2－／－小鼠的B細(xì)胞中，用綿羊紅血細(xì)胞免疫后可明顯降低生發(fā)中心的形成。

除了TARF4以外，TRAF的其他亞型在調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫中發(fā)揮關(guān)鍵的作用。TRAF1－／－T細(xì)胞在T細(xì)胞受體信號(hào)中表現(xiàn)為T細(xì)胞增殖和促進(jìn)Th2細(xì)胞因子（IL-4、IL-5、IL-13）的產(chǎn)生。TRAF1－／－T細(xì)胞的增殖是由于激活p52通路。在TRAF2－／－或TRAF3－／－T細(xì)胞中，盡管它們激活p52，但既不可使T細(xì)胞生存期延長(zhǎng)也不可使T細(xì)胞增殖。例如，在TRAF2－／－小鼠中，TRAF2-NIK-p52信號(hào)可導(dǎo)致自身免疫炎癥反應(yīng)失調(diào)。TRAF3－／－T細(xì)胞小鼠可增加調(diào)節(jié)性T細(xì)胞產(chǎn)生。在TRAF5－／－T細(xì)胞中，CD27介導(dǎo)的共刺激信號(hào)減少。在TRAF6－／－小鼠的胸腺中，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的形成表現(xiàn)出嚴(yán)重缺陷［24］。TRAF6－／－T細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致多器官炎癥疾病發(fā)生。TRAF6－／－T細(xì)胞在應(yīng)對(duì)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的抑制作用，通過(guò)PI3K-Akt途徑表現(xiàn)出超活化作用。TRAF6－／－CD4 T細(xì)胞通過(guò)增加TGF-β誘導(dǎo)的Smad2／3活化和下調(diào)IL-12來(lái)調(diào)節(jié)Th17的分化?；罨腡RAF6－／－CD8 T細(xì)胞在應(yīng)對(duì)生長(zhǎng)因子缺失時(shí)，表現(xiàn)出磷酸腺苷（adenosine monophosphate，AMP）激酶活化的缺陷，導(dǎo)致感染后記憶性CD8 T細(xì)胞形成嚴(yán)重缺陷。

樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DCs）是體內(nèi)最強(qiáng)大的專職抗原呈遞細(xì)胞，具有免疫原性和耐受性雙重作用。DCs通過(guò)呈遞抗原活化T細(xì)胞、產(chǎn)生炎癥細(xì)胞因子和趨化因子，參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）病理過(guò)程。TRAF1、2、3、4和6參與調(diào)節(jié)DCs功能，其中TRAF1和2具有協(xié)同作用。TRAF3－／－DCs在TLR7和TLR9信號(hào)通路中可增加IL-12產(chǎn)生但減少IL-10和I型干擾素的產(chǎn)生［25］。TRAF6是DCs成熟和活化所需。在CD40L反應(yīng)中，TRAF6－／－DCs不能上調(diào)MHCII和CD86的表達(dá)及炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生。

5　TRAF在炎癥免疫疾病及腫瘤中的作用

在RA發(fā)生發(fā)展中，大量炎癥相關(guān)細(xì)胞，如DCs入侵到關(guān)節(jié)滑膜組織。而且，滑膜細(xì)胞本身也大量增殖并侵入到關(guān)節(jié)軟骨。這些細(xì)胞大量分泌促炎癥細(xì)胞因子和基質(zhì)金屬蛋白酶，介導(dǎo)關(guān)節(jié)滑膜炎癥的加劇，并最終導(dǎo)致對(duì)滑膜、軟骨和骨組織的侵蝕與破壞，其中NF-κB發(fā)揮重要作用，尤其在滑膜細(xì)胞增殖和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)中起主導(dǎo)作用?；そM織中過(guò)表達(dá)的TNF-α可以上調(diào)滑膜細(xì)胞中TRAF2的表達(dá)量和激活NF-κB信號(hào)通路，進(jìn)而介導(dǎo)滑膜細(xì)胞增殖。有研究發(fā)現(xiàn)，TRAFs介導(dǎo)NF-κB信號(hào)通路在RA的形成和進(jìn)展中起關(guān)鍵作用。在RA病理過(guò)程中，TRAFs參與介導(dǎo)了NF-κB的經(jīng)典途徑。NF-κB的活化是通過(guò)結(jié)合TNFR1引起下游級(jí)聯(lián)反應(yīng)的。TNFR1參與的信號(hào)是TNF-α通過(guò)三聚體和TRADD、TRAF2、RIP和cIAP1／2形成的受體復(fù)合物介導(dǎo)參與的［26］。在B細(xì)胞中，敲除TRAF1和TRAF2后，在CD40的刺激下，兩者表現(xiàn)出協(xié)同激活NF-κB活性。然而TRAF1在RA中的作用，在不同的組織中表現(xiàn)出不同的作用。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種典型的自身免疫病，以T、B淋巴細(xì)胞異常活化，產(chǎn)生致病性自身抗體為特征，其中B淋巴細(xì)胞功能改變具有重要意義。CD40是TNFR家族成員中的代表性受體，并在抗原特異性獲得性免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用［27］。淋巴細(xì)胞中NF-κB和AP-1通路的活化是SLE的重要發(fā)病機(jī)制之一。CD40能與TRAF1，2，3，6直接結(jié)合形成復(fù)合體，在介導(dǎo)NF-κB和AP-1信號(hào)活化中起重要作用。其中TRAF6介導(dǎo)CD40下游的NF-κB活化作用強(qiáng)，且TRAF6-缺陷的脾細(xì)胞CD40介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路不能活化［28］。對(duì)于B細(xì)胞中的AP-1信號(hào)通路，TRAF6可選擇性地介導(dǎo)JNK磷酸化，再促進(jìn)C-Fos和C-Jun向核內(nèi)轉(zhuǎn)移，啟動(dòng)炎癥相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄；而TRAF2可選擇性活化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal-regulated ki-nase，ERK）和p38，并誘導(dǎo)C-Fos向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移［29］。由此可知，TRAF家族在SLE的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。

有研究報(bào)道稱，在人類腫瘤中TRAF4和TRAF6過(guò)表達(dá)和基因擴(kuò)增，如在乳腺癌和肺癌中TRAF4過(guò)表達(dá)。TRAF4蛋白過(guò)度表達(dá)僅限于癌癥細(xì)胞和亞細(xì)胞定位一致的細(xì)胞質(zhì)中。TRAF4蛋白過(guò)度表達(dá)的機(jī)制是TRAF4基因拷貝數(shù)增加。肺癌和骨肉瘤細(xì)胞中表現(xiàn)為TRAF6過(guò)表達(dá)和基因擴(kuò)增。然而，下調(diào)TRAF6可抑制NF-κB活化、細(xì)胞生存和增殖以及腫瘤形成和入侵［30］。這些研究結(jié)果表明，在人類肺癌和骨肉瘤細(xì)胞中TRAF6過(guò)表達(dá)可促進(jìn)腫瘤形成和侵襲。

6　結(jié)語(yǔ)與展望

總之，TRAFs是一種重要的具有多功能的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子。在受體活化時(shí)，TRAFs直接或間接募集受體的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，通過(guò)調(diào)控經(jīng)典和非經(jīng)典的NF-κB信號(hào)通路，不僅在維持免疫系統(tǒng)平衡，而且在自身免疫病的病理機(jī)制調(diào)控中起著十分重要作用。盡管對(duì)TRAFs的研究已經(jīng)取得了巨大的進(jìn)展，但是TRAFs的活性和表達(dá)水平的調(diào)節(jié)機(jī)制呈現(xiàn)出復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)體系。例如，TRAF6的K63多泛素化是怎樣介導(dǎo)TAK1和IKK的活化？盡管NIK穩(wěn)定性是通過(guò)TRAF2、TRAF3、cIAP1和cIAP2調(diào)控，且是通過(guò)非經(jīng)典的NF-κB信號(hào)，但需要進(jìn)一步探索cIAP1／2是如何以TRAF2／3為靶點(diǎn)連接受體來(lái)降解蛋白質(zhì)。設(shè)計(jì)特異性控制TRAFs的下游信號(hào)傳導(dǎo)途徑的治療策略具有重要意義，如cIAP1／2藥理抑制劑目前用于癌癥臨床試驗(yàn)的不同階段及其他TARFs介導(dǎo)的疾病中。因此，深入探討TRAFs家族成員的結(jié)構(gòu)功能及在炎癥免疫調(diào)節(jié)中的作用，對(duì)進(jìn)一步揭示炎癥免疫性疾病的病理機(jī)制，制定靶向TRAFs的治療藥物具有重要的意義。

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Research advance of tumor necrosis factor receptor-associated factors in inflammatory immune regulation

LI Ying，CHEN Jing-yu，ZHANG Ling-ling，WEI Wei
（Institute of Clinical Pharmacology，Anhui Medical University，Key Laboratory of Anti-inflammatory and Immune Medicine，Anhui Medical University，Ministry of Education，Hefei 230032，China）

Abstract：The tumor necrosis factor receptor（TNF-R）-associatedfactor（TRAF）is an important of multifunctional intracellular

signal transduction factors．TRAFs involve in signal transduction of many receptor families，including TNF receptor family（TN-FR），Toll-like receptors interleukin-1 receptors（TLR-IL-1R）family and so on．TRAFs play important roles in innate immunity and acquired immunity．TRAFs could directly or indirectly re-cruit the intracellular domains of receptors in the condition of ac-tivated receptor，which leads to the activation of transcription factors，such as NF-κB and interferon-regulatory factor（IRF），through signaling pathway．And TRAFs ultimately induce im-mune and inflammatory responses and involve in the development of inflammatory autoimmune diseases．

Key words：TRAF；signal transduction；TNFR；NF-κB；immuni-ty；inflammation；diseases

作者簡(jiǎn)介：李 影（1989－），女，碩士生，研究方向：抗炎免疫藥理學(xué)，E-mail：liying09ahmu＠163．com；張玲玲（1972－），女，博士，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：抗炎免疫藥理學(xué)，通訊作者，E-mail：llzhang＠ahmu．edu．cn；魏 偉（1960－），男，博士，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：抗炎免疫藥理學(xué)，通訊作者，E-mail：wwei＠ahmu．edu．cn

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No 81173075，31100640，81330081，81473223）；中國(guó)博士后科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No 2013M540509）

收稿日期：2015－04－10，修回日期：2015－05－16

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001－1978（2015）09－1206－06

doi：10．3969／j．issn．1001－1978．2015．09．006