3種腫瘤標記物聯(lián)合血清MMP-7及膽汁MMP-7檢測對膽管癌的臨床意義

任清河　楊　凌

1　內(nèi)蒙古邊防總隊醫(yī)院普外科，內(nèi)蒙古呼和浩特市　010010；　2　內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院臨床醫(yī)學研究中心

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3種腫瘤標記物聯(lián)合血清MMP-7及膽汁MMP-7檢測對膽管癌的臨床意義

任清河1楊凌2

1內(nèi)蒙古邊防總隊醫(yī)院普外科，內(nèi)蒙古呼和浩特市010010；2內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院臨床醫(yī)學研究中心

膽管癌是一種起源于膽管上皮的惡性腫瘤，占所有胃腸道腫瘤的 3%，是第二常見的肝膽腫瘤。最近流行病學研究顯示膽管癌的發(fā)病率和死亡率有逐年增加趨勢[1,2]。其在臨床上具有惡性程度高、發(fā)展緩慢、易于轉(zhuǎn)移、早期診斷率低等特點，往往確診時已錯過最佳治療時機，預后很差，患者平均存活時間很短，因此，早期診斷并積極進行有效的綜合治療是改善預后的關(guān)鍵問題[3]。相對于影像學手段而言，腫瘤標志物檢測是診斷膽管癌的重要手段之一，尤其是血清腫瘤標志物聯(lián)合檢測具有操作簡便、費用較低、特異性高等優(yōu)點，對于膽管癌的術(shù)前診斷以及隱匿性病灶的檢出大有裨益。為探討多種腫瘤標志物在早期膽管癌診斷中的臨床價值，本文采用酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)對 58例早期膽管癌患者血清腫瘤標志物糖類抗原(CA19-9)、糖類抗原CA125、癌胚抗原(Carcino embryonie antigen,CEA)、基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metallo preteinases 7,MMP-7)和膽汁MMP-7水平進行了檢測，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1臨床資料選取2012年3月—2013年5月內(nèi)蒙古邊防總隊醫(yī)院經(jīng)手術(shù)和病理證實膽管癌的患者58例作為膽管癌組，所有患者均經(jīng)病理學診斷確診，其中，男32 例，女26例，平均年齡(55.19±3.76)歲；膽管癌類型包括肝內(nèi)型25例，肝門周圍型18例，下段膽管型15例。另選同期該院收治的膽道良性疾病患者60例作為良性對照組，其中，男27 例，女33例，平均年齡(53.14±4.13)歲。兩組患者年齡、性別等一般臨床資料差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2檢測方法抽取患者空腹靜脈血 3.0ml，室溫下靜置 3～4h，離心(3 000rpm/min)，10min后吸留取上清，存儲于-80 ℃冰箱待測。在注射造影劑之前收集膽汁且所有膽汁都源于梗阻或狹窄段以上，離心(3 000rpm/min)，10min后吸留取上清，存儲于-80℃冰箱待測。采用ELISA法檢測血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7水平及膽汁MMP-7水平，具體操作步驟嚴格按照試劑說明書進行。血清中其他生化檢查包括總膽紅素、直接膽紅素、谷草轉(zhuǎn)氨酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、堿性磷酸酶。

2結(jié)果

2.1一般生化指標檢測與良性對照組的一般生化指標比較，膽管癌組患者的總膽紅素、直接膽紅素、谷草轉(zhuǎn)氨酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶及堿性磷酸酶水平增高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2兩組血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7水平及膽汁MMP-7水平比較兩組人群血清中MMP-7水平檢測的擬合曲線方程為y=0.016x2-0.238x+1.821，R2=0.996；膽汁中MMP-7水平檢測的擬合曲線方程為y=0.013x2-0.241x+1.864，R2=0.998。與良性對照組相比較，膽管癌組患者血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7及膽汁MMP-7水平增高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

分組n總膽紅素(mg/dl)直接膽紅素(mg/dl)谷草轉(zhuǎn)氨酶(U/L)γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(IU/L)堿性磷酸酶(IU/L)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(U/L)膽管癌組58212.34±20.31168.04±10.37107.21±15.32542.53±71.57512.34±61.2798.82±15.14良性對照組6040.56±10.1731.16±10.4665.45±16.81417.32±113.71218.19±45.43105.17±18.25t5.1796.9202.8152.1724.1210.371P0.0000.0000.0280.0310.0000.711

2.3兩組血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7水平及膽汁MMP-7水平相關(guān)性分析對各項指標進行 Logistic 回歸分析，結(jié)果顯示，兩組人群 CA19-9、CA125、血清 MMP-7 與膽管癌診斷呈現(xiàn)正相關(guān)(P<0.05)；而膽汁 MMP-7、血清CEA水平與膽管癌無相關(guān)性(P>0.05)。對兩組人群的年齡、一般生化指標、血清 MMP-7 和膽汁 MMP-7 表達水平進行 Spearman 相關(guān)分析，結(jié)果表明血清 MMP-7及膽汁 MMP-7 表達水平與上述指標均無相關(guān)性(P>0.05)。

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3討論

腫瘤標志物(Tumor marker)是指在患者血清、尿液或組織細胞中表達水平升高的與腫瘤相關(guān)的物質(zhì)。同一種腫瘤標志物可表達不同的腫瘤，同一腫瘤也可存在多種腫瘤標志物陽性的情況，聯(lián)合2種或2種以上的腫瘤標志物能明顯提高腫瘤診斷的敏感性和特異性[4,5]。多項研究表明，血清中的腫瘤標記物CA19-9[6]、CA125[7]、CEA[8]、MMP-7[9]水平對膽管癌的診斷具有重要價值。

糖類抗原是目前臨床上應用較為廣泛的腫瘤標記物[10]。CA19-9是一種大分子糖蛋白，含有一定的黏液成分，結(jié)構(gòu)包括唾液酸化的Ⅰ型乳糖系巖藻五糖，能夠被包括腫瘤細胞在內(nèi)的多種蛋白表達出來。CA19-9的水平變化與膽道癌的大小呈現(xiàn)一定的相關(guān)性，并能夠隨疾病的發(fā)展逐漸升高，且存在遠處轉(zhuǎn)移者CA19-9水平升高更明顯[11,12]。已有研究表明，單獨檢測CA19-9并不能可靠的鑒別膽道良、惡性疾病，但血清CA19-9的測定可能是診斷膽管癌的有效腫瘤標志物。蔡珍華等研究結(jié)果表明，血清CA19-9在膽胰惡性腫瘤中可顯著升高，在消化道良性疾患特別是良性肝病或者膽管梗阻性黃疸中也可有不同程度的增高[13]。而CA125的相對分子質(zhì)量為2×106，是一種糖蛋白表面抗原廣譜的腫瘤標志物。研究表明，其在胚胎發(fā)育過程中由體腔上皮細胞表達，出生后消失。同時，報道稱血清CA125水平的增高與腫瘤負荷的增加有關(guān)[14]。國外學者Chen的研究表明， CA125的血清學水平變化較少受到炎癥和膽道結(jié)石病的影響，并具有相對較高的特異性[15]。本研究結(jié)果顯示，膽管癌組患者血清CA19-9水平較膽道良性疾病患者增高，與上述研究結(jié)果相符。

CEA 是一種分子量較小、僅為18 000的酸性糖蛋白，妊娠2 個月 CEA 存在于胎兒的消化道上皮組織、胰腺和肝臟中，胎兒出生后其濃度會顯著下降。成人消化道產(chǎn)生少量 CEA，但成人腫瘤組織中可表達，并分泌到體液如血液、膽汁中。正常 CEA 主要進入腸道，少量進入血液和淋巴液，癌細胞分泌的 CEA 可進入患者的多種細胞外液[16,17]。CEA是目前應用最廣泛的腫瘤標記物，在多種腫瘤中均呈升高趨勢[18]。本研究結(jié)果顯示，膽管癌組患者血清CA19-9水平、血清CEA水平較膽道良性疾病患者增高，與上述研究結(jié)果相符。

MMP-7 相對分子質(zhì)量最小，為一種鋅依賴肽鏈內(nèi)切酶類，具有消化特定細胞外基質(zhì)的作用，參與腫瘤周圍浸潤、遠處轉(zhuǎn)移和腫瘤新生血管的形成等過程[19]。尹文琤等報道血清 MMP-7 對區(qū)分膽管癌和膽管良性疾病有價值[20]。最近研究表明膽汁不僅參與腸內(nèi)脂質(zhì)的吸收，而且膽汁酸是一種重要的信號分子參與機體新陳代謝，并且具有細胞保護和抗癌作用。膽汁作為膽管上皮細胞的微環(huán)境，必然受膽管上皮細胞的影響，現(xiàn)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的與膽管癌有關(guān)的膽汁中蛋白有黏蛋白、IGF1 等[21]。本研究中，與膽道良性疾病組患者相比，膽管癌組患者的血清MMP-7水平及膽汁MMP-7水平增高，與上述研究結(jié)果相符。此外，本研究的Logistic 回歸分析結(jié)果顯示，兩組人群 CA19-9、CA125、血清 MMP-7 與膽管癌診斷呈現(xiàn)正相關(guān)，而膽汁 MMP-7、血清CEA水平無相關(guān)性，血清 MMP-7及膽汁 MMP-7 表達水平與一般生化指標均無相關(guān)性。究其原因可能為研究所涉及樣本量偏少所致，后續(xù)將進一步擴大樣本量展開研究。

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(本文通訊作者：楊凌)

(編輯雅文)

摘要目的：探討膽管癌患者血清中糖類抗原19-9(CA19-9)、糖類抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-7)和膽汁MMP-7水平的變化及其臨床意義。方法：選取2012年3月—2013年5月，內(nèi)蒙古邊防總隊醫(yī)院經(jīng)手術(shù)和病理證實膽管癌的患者58例作為膽管癌組，另選同期該院收治的膽道良性疾病患者60例作為良性對照組。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測研究人群的血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7及膽汁MMP-7水平變化情況，并進行各指標間的相關(guān)性分析。結(jié)果：與良性對照組患者相比，膽管癌組患者的總膽紅素、直接膽紅素、谷草轉(zhuǎn)氨酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、堿性磷酸酶水平增高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；膽管癌組患者血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7及膽汁MMP-7水平較良性對照組增高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；Logistic 回歸分析，結(jié)果顯示，兩組人群 CA19-9、CA125、血清 MMP-7 與膽管癌診斷呈現(xiàn)正相關(guān)(P<0.05)；而膽汁 MMP-7與血清CEA水平無相關(guān)性(P>0.05)；血清 MMP-7及膽汁 MMP-7 表達水平與上述生化指標均無相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論：聯(lián)合檢測血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7及膽汁MMP-7水平能提高膽管癌診斷的效能，有較高的臨床參考價值。

關(guān)鍵詞膽管癌CA19-9CA125CEAMMP-7 R735.8

文獻標識碼：A

文章編號：1001-7585(2015)15-1980-03

Clinical Significance of Combined Detection of Serum CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and Bile MMP-7 in Patients with Cholangiocarcinoma

REN Qinghe*,YANG Ling.*TheGeneralSurgeryDepartmentoftheArmedPoliceBorderDefenseCorpsHospitalofInnerMongol,InnerMongolhohhot010010

ABSTRACTObjective：To evaluate the clinical significance of combined detection of serum CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and bile MMP-7 in patients with cholangiocarcinoma. Methods:The serum level of CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and bile level of MMP-7 in 58 patients with cholangiocarcinoma (experimental group)and 60 patients with bile duct benign disease(control group) were detected by enzyme linked immunosorbent assay and correlation analysis in the general surgery department of the armed police Border Defense Corps Hospital of Inner Mongol from March 2012 to May 2013. Results:Compared to control group,the levels of total bilirubin,direct bilirubin,glutamic oxalacetic transaminase,γ-glutamyl transpeptidase,alkaline phosphatase increased and there was statistically significant difference (P<0.05). However,there was no statistically significant difference (P>0.05) of the level of glutamic-pyruvic transaminase between the two group. Then the levels of CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and bile MMP-7 in patients with cholangiocarcinoma higher than patients with bile duct benign disease and there was statistically significant difference (P<0.05). The logistic regression analysis showed that the levels of serum CA19-9,CA125 and MMP-7 of the two groups positively related with bile duct carcinoma diagnosis (P<0.05),but bile MMP-7 level has no related with serum CEA level (P>0.05). The level of MMP-7 of serum and bile have no related with biochemical criterion (P>0.05). Conclusion:The combined detection of serum CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and bile MMP-7 were helpful to the efficiency of cholangiocarcinoma diagnosis and have the higher clinical reference value.

KEY WORDSCholangiocarcinoma,CA19-9,CA125,CEA,MMP-7

收稿日期2015-04-20