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    不同來(lái)源白芍中芍藥苷含量比較※

    2015-02-23 11:15:34郭結(jié)曉林鈺文
    中醫(yī)藥通報(bào) 2015年4期
    關(guān)鍵詞:赤芍白芍飲片

    ● 郭結(jié)曉 林鈺文

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    不同來(lái)源白芍中芍藥苷含量比較※

    ● 郭結(jié)曉1林鈺文2

    目的:比較不同來(lái)源白芍中芍藥苷含量,為其藥材質(zhì)量控制提供一定的參考依據(jù)。方法:采用HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地、規(guī)格白芍藥材和飲片中芍藥苷含量,從化學(xué)成分上評(píng)價(jià)其質(zhì)量差異。結(jié)果:白芍藥材中野生品中芍藥苷含量明顯高于栽培品,以安徽亳州芍藥中芍藥苷含量最高,栽培品為3.82%,野生品為4.91%,經(jīng)炮制加工后,白芍飲片中芍藥苷流失較嚴(yán)重,其平均含量約為2.5%,但符合2010年《中國(guó)藥典》白芍含量測(cè)定項(xiàng)下大于1.2%要求。結(jié)論:生長(zhǎng)環(huán)境和炮制加工方法是影響白芍中芍藥苷含量的主要因素。

    白芍 芍藥苷 含量測(cè)定 HPLC

    芍藥為我國(guó)常用傳統(tǒng)中藥材,以其干燥根為主要來(lái)源的中藥飲片有赤芍與白芍二種[1]。從植物來(lái)源上,白芍和赤芍均來(lái)源于毛茛科芍藥屬植物,僅是加工方法有所差異,赤芍干燥即可,而白芍需要水煮去皮后才能入藥。白芍主產(chǎn)于安徽亳州、浙江杭州和山東菏澤,主要為栽培品,偶有野生品[2],屬于補(bǔ)虛藥,長(zhǎng)于補(bǔ)血平抑肝陽(yáng)[3]。現(xiàn)代研究表明,白芍含有芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷等單萜苷類和苯甲酸、沒(méi)食子酸等酸類成分[3,4]。除了前述安徽亳州、浙江杭州和山東菏澤三個(gè)主要產(chǎn)區(qū)外,白芍在其他地區(qū)分布也較為廣泛,產(chǎn)地眾多,研究表明不同產(chǎn)地白芍中芍藥苷含量有一定的差異[5],而栽培品和野生品含量是否有一定的差異,相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道較少,本文化學(xué)成分上探索藥材產(chǎn)地、生長(zhǎng)環(huán)境(野生與家種)對(duì)白芍有效成分的影響,為其藥材質(zhì)量控制提供一定的參考依據(jù)。

    1 材料

    Agilent-1100高效液相色譜儀,包括DAD檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器、在線脫氣、四元泵(美國(guó)安捷倫科技有限公司);BS210S型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。乙腈為色譜純,甲醇、磷酸等試劑均為分析純,水為超純水。芍藥苷對(duì)照品(批號(hào):0900-201109) 購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所(純度≥98.0%);白芍采集與浙江、安徽、四川、山東等地,經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室鑒定為毛茛科植物芍藥(Paeonia lactiflora Pall.)干燥根。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜條件 色譜柱:Agilent Extend C18 (250 mm × 4.6 mm 5 μm) ;流動(dòng)相:乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86);流速:1.0 mL·min-1;柱溫:25 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng):230 nm;進(jìn)樣量為10 μL。

    2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量,置于50 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,制得60μg·mL-1對(duì)照品溶液,過(guò)0.45 μm微孔濾膜,即得。

    2.3 供試品溶液制備[1]取樣品粉末0.1g,精密稱定,置500mL量瓶中,加稀乙醇35mL,超聲處理(功率240W,頻率45kHz)30分鐘,放冷,加稀乙醇至刻度,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

    2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取對(duì)照品溶液0.1、0.2、.0.4、0.6、0.8、1.0mL,分別置于10 mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,然后按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣10μL,測(cè)定芍藥苷的峰面積,以峰面積Y為縱坐標(biāo),進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程分別為:Y=864.474X-5.678(R2=0.9996)。

    2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液10 μL,按上述色譜條件重復(fù)進(jìn)樣5次,照上述色譜條件測(cè)定峰面積積分值。結(jié)果芍藥苷峰面積積分值的RSD=1.17%(n=5),表明儀器精密度良好。

    2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一份供試品溶液,按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,照上述色譜條件,在0、12、24、36、48 h進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果芍藥苷峰面積的RSD=1.66%(n=5),表明供試品溶液在48 h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批白芍樣品5份,按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,照上述色譜條件分別進(jìn)樣10 μL。結(jié)果芍藥苷峰面積的RSD=2.37%(n=5),表明方法重復(fù)性良好。

    2.8 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取白芍樣品0.05 g,加入適量芍藥苷的對(duì)照品,按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,照上述色譜條件測(cè)定,計(jì)算加樣回收率。結(jié)果芍藥苷的平均回收率為98.4%,RSD=2.33%(n=5)。

    2.9 含量測(cè)定 按照上述含量測(cè)定方法,測(cè)定不同白芍樣品中芍藥苷的含量。結(jié)果表明,白芍藥材中野生品中芍藥苷含量明顯高于栽培品,按產(chǎn)地比較,安徽亳州芍藥中芍藥苷含量最高,栽培品為3.82%,野生品為4.91%,藥材經(jīng)炮制加工后,飲片中芍藥苷含量明顯降低,白芍飲片中芍藥苷流失較嚴(yán)重,其平均含量為2.5%,但符合2010年《中國(guó)藥典》白芍含量測(cè)定項(xiàng)下大于1.2%要求。見(jiàn)圖1、表1、表2。

    A.對(duì)照品;B.白芍藥材;1. 芍藥苷

    名稱編碼來(lái)源產(chǎn)地芍藥苷/%RSD/%平均值/%栽培品野生品1PaeonialactifloraPall.浙江杭州3.201.122PaeonialactifloraPall.浙江磐安3.441.143PaeonialactifloraPall.浙江縉云3.341.094PaeonialactifloraPall.安徽亳州3.820.965PaeonialactifloraPall.安徽阜陽(yáng)3.700.836PaeonialactifloraPall.四川中江3.711.327PaeonialactifloraPall.四川巴中3.551.358PaeonialactifloraPall.山東菏澤2.861.471PaeonialactifloraPall.浙江杭州4.070.742PaeonialactifloraPall.浙江麗水4.120.863PaeonialactifloraPall.安徽亳州4.911.024PaeonialactifloraPall.安徽阜陽(yáng)4.840.885PaeonialactifloraPall.四川羅江4.771.076PaeonialactifloraPall.四川中江4.880.917PaeonialactifloraPall.內(nèi)蒙古4.240.848PaeonialactifloraPall.黑龍江4.271.279PaeonialactifloraPall.吉林3.861.383.454.44

    表2 不同產(chǎn)地白芍飲片中芍藥苷含量的比較(n=5)

    3 討論

    白芍來(lái)源于芍藥,一般以栽培品入藥,野生品經(jīng)加工炮制后可做赤芍入藥。本研究表明,由于生長(zhǎng)環(huán)境不同,栽培品和野生品中芍藥苷含量差異較大,野生品含量明顯偏高。白芍經(jīng)過(guò)水煮去皮等環(huán)節(jié)處理后,芍藥苷流失嚴(yán)重,而赤芍省去了水煮和去皮等環(huán)節(jié),其含量必定高于白芍。因此,如果白芍中以芍藥苷為質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo),白芍加工炮制中水煮和去皮等環(huán)節(jié)是否有必要?而且赤芍與白芍同時(shí)來(lái)源芍藥,因加工不同,而產(chǎn)生兩種不同的藥材飲片,雖然兩種飲片中成分大致一致,而其臨床應(yīng)用卻有所區(qū)別,因此白芍和赤芍化學(xué)成分的區(qū)別與其臨床療效的是否有一定相關(guān)性,有必要進(jìn)一步進(jìn)行研究。

    [1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版(一部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:96-97,147-147.

    [2]馮耀南.中藥材商品規(guī)格質(zhì)量鑒別[M].廣東廣州:暨南大學(xué)出版社,1995:96.

    [3]周紅濤,駱亦奇,胡世林,等.赤芍與白芍的化學(xué)成分含量比較研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志,2003,38(9):654-657.

    [4]楊 柳,許舜軍,吳金雄,等.白芍、赤芍的比較研究概況[J].中藥新藥與臨床藥理,2011,22(5):577-580.

    [5]李 軍,孟祥松,李 飛,等.不同產(chǎn)地白芍中芍藥苷含量的比較研究[J].醫(yī)藥前沿,2013,9:104-105.

    廣東省中醫(yī)院朝陽(yáng)人才專項(xiàng)項(xiàng)目:《廣東省中醫(yī)院中藥飲片驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)》的編制

    1.廣東省中醫(yī)院藥學(xué)部(510120);2.廣州市醫(yī)藥職業(yè)學(xué)校(510430)

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