非造血組織中EPO/EPOR作用的研究進展

楊 陽，羅 萍

成都中醫(yī)藥大學 醫(yī)學技術學院（成都 611130）

促紅細胞生成素（erythropoietin，EPO）是促進紅系祖細胞增殖、分化和成熟必須的細胞因子，通過與促紅細胞生成素受體（EPOR）結(jié)合，發(fā)揮其生理功能。人類EPO于1977年被首次成功分離純化，并于1985年獲得了人類EPO的重組基因（rhEPO），近二十多年，rhEPO一直被廣泛應用于臨床相關疾病引發(fā)貧血的治療，包括慢性腎病、惡性腫瘤以及化療等。近年來EPO/EPOR在非造血組織中的作用引起了新的關注，已成研究熱點。

1 非造血組織中EPO的合成及EPOR的表達

1.1 EPO在非造血細胞中的合成

胎兒時期的EPO主要由肝臟產(chǎn)生，出生后則由腎皮質(zhì)間質(zhì)內(nèi)的成纖維細胞合成和分泌。1994年，Masuda等［1］研究發(fā)現(xiàn)，大鼠腦中的星形膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元均可產(chǎn)生EPO。Juul等［2］研究發(fā)現(xiàn)，EPO定位于嬰兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）以及早產(chǎn)兒和足月兒的脊髓液。Yasuda等［3］研究發(fā)現(xiàn)，在女性體內(nèi)，雌激素可刺激女性生殖道產(chǎn)生EPO，從而調(diào)節(jié)女性生殖道的周期性變化。上述非造血細胞也能產(chǎn)生EPO，為其生物功能的多效性提供了依據(jù)。

1.2 EPOR在非造血細胞中的表達

EPO發(fā)揮生理功能需要與EPOR結(jié)合。EPOR最早被發(fā)現(xiàn)表達于紅系祖細胞。1990年，Anagnostou等［4］發(fā)現(xiàn)，EPO能促進內(nèi)皮細胞有絲分裂，隨后該學者在內(nèi)皮細胞中檢測到EPOR mRNA，證實內(nèi)皮細胞表達EPOR，且其表達受低氧和EPO治療的誘導。Tsai等［5］研究發(fā)現(xiàn)，EPOR定位于裸鼠神經(jīng)上皮的神經(jīng)管包括增殖期的神經(jīng)前體，且隨著神經(jīng)前體的分化成熟，EPOR表達量逐漸下降。除了神經(jīng)元，EPOR還表達于星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞。在成人、靈長類動物和嚙齒類動物的大腦，EPOR定位于海馬、大腦皮層、中腦、基底節(jié)（內(nèi)囊、杏仁核）、胼胝體。隨后相繼在脂肪組織、骨骼肌、心肌、視網(wǎng)膜和部分腫瘤細胞中也發(fā)現(xiàn)EPOR的表達。

2 EPO/EPOR的作用機制

McGraw等［6］研究發(fā)現(xiàn)，EPOR介導的紅細胞生成是由兩個相同的EPOR單體在受到刺激后迅速聚集并相互靠近，其亞基自發(fā)二聚化形成EPOREPOR二聚體，該二聚體可與酪氨酸激酶2（JAK2）及其他信號通路分子組裝。隨后，當EPO結(jié)合并跨過EPOR亞基時，EPOR的構(gòu)像就會發(fā)生變化，使JAK2被激活，同時使EPOR胞質(zhì)域內(nèi)的酪氨酸殘基磷酸化。磷酸化的EPOR－EPOR能使幾種相關信號轉(zhuǎn)導蛋白活化，其中包括細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2（ERK1/2）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K/AKT）和信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄活化因子（STAT）。被活化的STAT－5進入細胞核后可刺激一些抗凋亡基因（如Bcl－2、Bcl－xl）的轉(zhuǎn)錄，形成相應的抗凋亡蛋白，上述抗凋亡蛋白可抑制線粒體釋放細胞色素C，從而抑制紅系祖細胞的凋亡。此外，Heinisch等［7］發(fā)現(xiàn)，EPOR－EPOR也可誘導血小板和內(nèi)皮細胞活化，包括上調(diào)E－選擇素，這有助于生理性血栓的形成，減少因血管創(chuàng)傷引起的血液流失，引發(fā)炎癥并導致炎癥的持續(xù)。Brines等［8］研究發(fā)現(xiàn)，EPO還能誘導EPOR與β－cR（CD131）形成低親和力的異源二聚體，激活EPOR相關信號通路，發(fā)揮其對非造血組織和細胞的保護作用。其中β－cR為Ⅰ型細胞因子受體超家族中IL－3、IL－5、GM－CSF等細胞因子的受體共享鏈，它能減弱炎癥和組織損傷，同時可誘導修復和愈合。經(jīng)β－cR誘發(fā)的自發(fā)免疫應答和自發(fā)組織保護與修復之間存在時間和空間上的密切關系。在靜止的細胞，EPOR和β－cR定位于細胞間而不是細胞表面；在低氧或者炎癥的誘導下，它們能迅速移動到細胞表面，聚集形成類似McGraw等［6］描述的EPOR－EPOR結(jié)構(gòu)二聚體，然后聚集到膜筏區(qū)域發(fā)揮作用。EPOR－EPOR復合物與組織保護EPOR－βcR復合物相比，對EPO具有更強的親和力，因此誘導局部組織保護需要比誘導紅細胞增殖更大的rhEPO循環(huán)劑量［9］。EPOR－βcR不應答時 EPO 循環(huán)濃度為1～7pmol/L，其需要更高劑量的EPO刺激，才能發(fā)揮作用。另外，EPOR－βcR異源二聚體的表達通常不是在組織損傷后，而僅僅是暴露于EPO前，就能發(fā)揮持續(xù)的生物活性。但是對于EPOREPOR二聚體來說，它通常表達于造血細胞表面，且需要持續(xù)的一定濃度EPO刺激才能完成促進紅細胞增生的功能。

3 EPO/EPOR在非造血組織中的作用

3.1 脂肪組織

Teng等［10］發(fā)現(xiàn)，EPOR高表達于白色脂肪組織。體外培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，EPOR蛋白還表達于3T3－L1細胞（裸鼠脂肪前體細胞），EPOR的表達有助于脂肪細胞分化且能顯著減弱3T3－L1細胞因地塞米松誘導的胰島素抵抗［11］。在脂肪細胞中，使用EPO會上調(diào)EPOR表達，并且激活PI3K/AKT和JAK/STAT3信號通路發(fā)揮相應作用。另外如果顯性肥胖裸鼠的脂肪組織EPOR表達丟失會引發(fā)白色脂肪聚集，體質(zhì)量增加；相反，EPO應用于野生型裸鼠，其骨骼肌會過表達EPO，導致裸鼠體質(zhì)量降低且抑制白色脂肪聚集［10，12］。這一結(jié)果提示脂肪細胞的內(nèi)源性EPO可能會防止肥胖發(fā)生，并調(diào)節(jié)機體能量平衡。

3.2 胰島B細胞

研究顯示，EPO與糖尿病發(fā)展密切相關，其與葡萄糖代謝和胰島素敏感性有關。胰島B細胞功能衰竭是糖尿病發(fā)病機制之一，促進胰島B細胞生長和成熟有助于糖尿病的預防和治療。Fenjves等［13］研究發(fā)現(xiàn)，EPOR在人和嚙齒類動物的胰島均有表達，應用重組EPO或者EPO過表達可保護胰島免受損傷。Bianchi等［14］在由鏈脲霉素（STZ）誘導的1型糖尿病裸鼠實驗中證實，EPO能逆轉(zhuǎn)STZ的誘導作用。EPO保護胰島B細胞所引發(fā)的信號通路與造血系統(tǒng)相同，均為激活EPO/EPOR的下游激酶JAK2［15］，EPO 還可通過激活 PI2K/AKT信號通路來抑制胰島B細胞凋亡。上述研究顯示，EPO可促進胰島B細胞增殖，抑制其凋亡，從而發(fā)揮保護作用，EPO的相關信號分子也可作為葡萄糖耐受和胰島素敏感性的監(jiān)管器。

3.3 骨骼肌

EPO可刺激成肌細胞增殖、延遲其分化并有助于損傷后肌肉的修復。Jia等［16］研究顯示，EPOR在成肌細胞中是隨著生肌決定因子（Myf5：成肌細胞特有的堿性螺旋－環(huán)－螺旋結(jié)構(gòu)）的表達而表達。在成肌細胞中，EPO的刺激能上調(diào)GATA因子（包括GATA3和GATA4）以及另一個具有螺旋－環(huán)－螺旋結(jié)構(gòu)的因子TAL1的表達，但這些因子的表達會隨著成肌細胞的分化而下調(diào)。值得注意的是，EPOR僅表達于成肌細胞且隨著骨骼肌的分化其表達量也逐漸減少，所以能應答EPO的只有成肌細胞，不包括成熟的肌管，在成熟的肌纖維中不存在EPO的應答反應［17］，成熟肌纖維中EPOR的缺失表明EPO對肌纖維的作用是間接的，可能與該組織中氧運輸?shù)脑黾佑嘘P。EPO對增加運動耐力也有明顯效果，但是沒有任何一種氧運輸方式能夠解釋這一現(xiàn)象，這表明EPO可能通過其他方式刺激肌肉的相關代謝。此外，過表達的EPO可作用于肌肉發(fā)展期，改變其代謝活動，從而塑造肌肉類型。

3.4 神經(jīng)系統(tǒng)

下丘腦是神經(jīng)系統(tǒng)中負責調(diào)節(jié)能量代謝的器官，在此處檢測到有高水平的EPOR表達。EPO作用于體外培養(yǎng)的下丘腦神經(jīng)元，能促進阿黑皮素原（POMC）表達，野生型裸鼠體內(nèi)實驗也證實，EPO可使POMC mRNA表達量增加3倍，從而調(diào)節(jié)裸鼠能量平衡。此外，研究發(fā)現(xiàn)，EPO對神經(jīng)細胞的保護作用是通過阻斷神經(jīng)細胞凋亡、促進細胞存活和神經(jīng)形成、調(diào)節(jié)血管生成來實現(xiàn)的。紅系EPOR表達受限的裸鼠（Tg裸鼠），其神經(jīng)細胞增殖較慢，并且不能耐受缺氧［18］。大腦發(fā)育中的Tg裸鼠可表現(xiàn)出細胞凋亡增多，大腦成熟的Tg裸鼠可表現(xiàn)出神經(jīng)細胞對缺氧和谷氨酸毒性的敏感性增加及增殖減少。此外，大腦特異性EPOR缺失的缺血性腦卒中裸鼠表現(xiàn)出有缺陷的神經(jīng)祖細胞向皮質(zhì)梗死灶遷移［5］。另有研究［19］發(fā)現(xiàn)，EPO 可以管理嚙齒類動物的大腦，減少其在Morris水迷宮測試中所受傷害并且提高表現(xiàn)能力。EPO的神經(jīng)保護作用也可能是通過影響其他細胞而間接產(chǎn)生的（例如內(nèi)皮細胞），研究［20］發(fā)現(xiàn) EPO 可以促使 VEGF增加，誘導VEGF受體產(chǎn)生，從而增強血管的生成；EPO還可以增強內(nèi)皮細胞一氧化氮合酶（eNOS）的活性，從而使一氧化氮（NO）生成增加，在低波時特異性提供神經(jīng)保護作用［21］。Punnonen等［22］將 EPO 應用于帕金森?。≒D）動物模型發(fā)現(xiàn)，EPO能保護多巴胺能神經(jīng)元。組織保護的EPOR/CD131可能成為用于該疾病修飾治療的靶點。另有研究通過體內(nèi)外的PD模型發(fā)現(xiàn)，EPO能抑制6－羥基多巴胺（6－OHDA）誘導的神經(jīng)元死亡，減弱6－OHDA 的細胞毒性。EPO應用于PC12細胞，可明顯抑制6－OHDA誘導的毒性反應，此過程存在時間和劑量的依賴性。EPO在大鼠PD模型中能有效降低紋狀體神經(jīng)元細胞凋亡，并顯著改善大鼠神經(jīng)功能評分。此外，EPO能增加PC12細胞和紋狀體神經(jīng)元的Akt和FoxO3a磷酸化［23］。

3.5 心臟

目前研究表明，在心內(nèi)膜、心外膜和心包膜均檢測到EPO的表達。心臟保護的重要因子GATA4被用于調(diào)控EPO的表達，但是EPOR在心肌細胞的表達調(diào)控機制還不完全清楚。一些研究表明，盡管EPO可能不是心臟構(gòu)建至關重要的因素，但其對心臟發(fā)育仍有影響。在成年動物模型中，EPO可以通過阻止心肌細胞凋亡和梗死后惡化來緩解因紅細胞壓積增高引起的心肌缺血和心肌梗死。EPO還通過調(diào)節(jié)ATP水平為因心肌缺血再灌注而受損的心肌細胞提供保護。此外，EPO還能刺激內(nèi)皮eNOS活性，促進NO產(chǎn)生，尤其缺氧時，低氧張力刺激內(nèi)皮細胞應答EPO增加，從而使NO產(chǎn)生增加，直接保護心臟功能［24］。Carraway等［25］研究發(fā)現(xiàn)，EPO促進eNOS的活化與PI3K－AKT信號相關，其通過增強能量感受器（PGC－1α）的作用來增加心肌線粒體生物合成。還有研究［26］用EPO預處理嚙齒類動物心肌缺血再灌注損傷模型和慢性心肌梗死后相關心臟衰竭模型發(fā)現(xiàn)，EPO能降低炎性細胞浸潤和心肌纖維化，抑制室性心律失常的發(fā)生，并降低促炎性細胞因子的血清水平。

3.6 視網(wǎng)膜

研究表明，EPO可激活在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞（RGC）中充當生存信號的分子NF－κB，與TNF－α誘導的損傷形成拮抗作用，還可降低TNF－α、IL－6和IL－1β的表達，因此EPO有利于RGC損傷的恢復。有研究在大鼠視網(wǎng)膜脫落模型玻璃體中注射EPO，結(jié)果檢測到JAK/STAT磷酸化增加，因此上述促炎性細胞因子的表達下調(diào)可能是通過JAK/STAT通路的激活來實現(xiàn)的［27］。目前普遍認為，炎癥是糖尿病性視網(wǎng)膜病變（DR）的基礎病理改變。García等［28］研究發(fā)現(xiàn)，DR患者視網(wǎng)膜色素內(nèi)皮細胞（RPE）和視網(wǎng)膜神經(jīng)元的EPO表達均上調(diào)，暗示EPO的保護機制可能與對抗促炎性細胞因子有關。EPO也有助于緩解因慢性視網(wǎng)膜病變（例如青光眼、DR、年齡相關性黃斑變性和視網(wǎng)膜色素變性等）所引起的視網(wǎng)膜變性［29－30］。Guan等［31］在由碘酸鈉引起的視網(wǎng)膜變性動物模型中發(fā)現(xiàn)，與單純移植骨髓間充質(zhì)干細胞相比，移植視網(wǎng)膜下EPO基因修飾的間質(zhì)干細胞可顯著提升視網(wǎng)膜細胞的存活與分化。此外，在玻璃體內(nèi)注射水溶性EPOR以中和內(nèi)源性EPO，將加劇視網(wǎng)膜脫離大鼠光感受器細胞凋亡。Sullivan等［32］研究發(fā)現(xiàn)，EPO可通過抗凋亡來延緩視網(wǎng)膜病變，其機制為經(jīng)PI3K/Akt通路下調(diào)caspase－3，并上調(diào)Bcl－xL。Hu等［33］使用EPO刺激Müller細胞發(fā)現(xiàn)，EPO經(jīng)由ERK－1/2和 Akt通路上調(diào)睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子（CNTF）和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）的表達，為RGC和光感受器提供保護作用。此外EPO可減少神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白的表達，緩解退化性疾病的反應性膠質(zhì)增生。EPO保護RGC和光感受器還存在其他方式，EPOR主要表達于RGC，且允許EPO相互作用于RCG的胞體和軸突，從而維持其代謝活性［34］。King等［35］研究發(fā)現(xiàn)，EPO能使RGC軸突再生，這體現(xiàn)了EPO促神經(jīng)再生的功能，此功能在乙琥胺（T型鈣通道阻斷劑）存在時會被抑制。

3.7 腫瘤

在多數(shù)腫瘤細胞中均檢測到EPOR的表達。研究顯示，外源性EPO能促進腎細胞癌（RCC）、乳腺癌、前列腺癌、頭頸部鱗癌等細胞株的增殖。但另一些研究發(fā)現(xiàn)，EPO并不引起結(jié)直腸癌、卵巢癌、非小細胞肺癌、神經(jīng)母細胞瘤等細胞株的增殖。上述EPO的功能差異不僅存在于不同器官來源的細胞株，還存在于同一器官來源的不同細胞株，例如來源于 RCC的四株細胞，EPO 可刺激 Caki－2、789－0的增殖，而對 Caki－1、ACHN 則無作用［36－37］。甚至對于相同的細胞株，研究結(jié)果也不一致，例如Acs等［38］研究報道，EPO能刺激 MCF－7細胞增殖，而另一些研究［39－40］并沒有得到類似的結(jié)論。EPO對抗癌藥物敏感性有一定影響，EPO作用于Hela（宮頸癌）、HT100（宮頸癌）、OVCAR（卵巢癌）、SNRK1（腎細胞癌）、ACHN（腎細胞癌），可增加腫瘤細胞對順鉑的抵抗作用［41］。對于黑色素瘤細胞 WM35（RPG）、WM793（VGP）和 1205lu，EPO 可增加EPOR、Raf、MEK蛋白的磷酸化從而增加黑色素瘤對達卡巴嗪治療的抵抗作用［42］。EPO還可增加A2780（卵巢癌）細胞中ERK1/2蛋白的磷酸化來減弱紫杉醇的治療敏感性［43］。但是對RCC細胞，EPO通過磷酸化P53蛋白可增加柔紅霉素和長春花堿對該細胞的殺傷作用［44］。而 Gewirtz等［45］的研究顯示，EPO對抗癌藥物敏感性無明顯影響。在臨床上，rhEPO及其他促紅細胞生成素制劑（ESAs）被廣泛應用于腫瘤患者，除了其本身治療貧血的作用外，臨床研究顯示，ESAs可以增加腫瘤的控制效率或者增加腫瘤患者的總體生存率［46］。2002年，一項2 805名患者參與的臨床研究顯示，ESAs有益于腫瘤患者的生存［47］。但是，2003年的兩個大型隨機對照試驗顯示，患者接受ESAs治療會引起腫瘤進展，甚至還會增加患者的死亡率［48－49］，Bennett等［50］研究還發(fā)現(xiàn)，ESAs會增加靜脈血栓發(fā)生的概率和心血管事件的發(fā)生。上述研究表明，目前對EPO應用于腫瘤患者是否會引發(fā)腫瘤進展還存在爭議。

4 小結(jié)

隨著研究不斷深入，技術不斷更新，研究者在越來越多的非造血細胞中發(fā)現(xiàn)了功能性的EPO/EPOR軸，這一發(fā)現(xiàn)為EPO的多效性提供了依據(jù)，同時也為EPO在非造血系統(tǒng)疾病中的應用研究提供了方向。但是EPO對非造血系統(tǒng)的作用機制還不完全清楚，尤其是目前對EPO應用于腫瘤患者是否會引發(fā)腫瘤進展還存在爭議，需要進一步研究確定其對腫瘤細胞作用的相關信號通路及機制。未來需要更多大型隨機對照試驗和先進的實驗技術來全面檢測和分析EPO/EPOR在非造血組織中的作用及其機制，以幫助臨床更安全、有效、全面地使用EPO。

［1］Masuda S，Okano M，Yamagishi K，et al.A novel site of erythropoietin production.Oxygen－dependent production in cultured rat astrocytes［J］.Journal of Biological Chemistry，1994，269（30）：19488－19493.

［2］Juul SE，Yachnis AT，Christensen RD.Tissue distribution of erythropoietin and erythropoietin receptor in the developing human fetus［J］.Early Human Development，1998，52（3）：235－249.

［3］Yasuda Y，F(xiàn)ujita Y，Musha T，et al.Expression of erythropoietin in human female reproductive organs［J］.Ital J Anat Embryol，2000，106（2）：215－222.

［4］Anagnostou A，Liu Z，Steiner M，et al.Erythropoietin receptor mRNA expression in human endothelial cells［J］.Proceedings of the National Academy of Sciences，1994，91（9）：3974－3978.

［5］Tsai PT，Ohab JJ，Kertesz N，et al.A critical role of erythropoietin receptor in neurogenesis and post－stroke recovery［J］.The Journal of Neuroscience，2006，26（4）：1269－1274.

［6］McGraw KL，F(xiàn)uhler GM，Johnson JO，et al.Erythropoietin receptor signaling is membrane raft dependent［J］.PloS One，2012，7（4）：34477.

［7］Heinisch BB，Vcelar B，Kapiotis S，et al.The effect of erythropoietin on platelet and endothelial activation markers：A prospective trial in healthy volunteers［J］.Platelets，2012，23（5）：352－358.

［8］Brines M，Grasso G，F(xiàn)iordaliso F，et al.Erythropoietin mediates tissue protection through an erythropoietin and commonβ－subunit heteroreceptor［J］.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2004，101（41）：14907－14912.

［9］Brines M， Cerami A. Erythropoietin－mediated tissue protection：reducing collateral damage from the primary injury response［J］.Journal of Internal Medicine，2008，264（5）：405－432.

［10］Teng R，Gavrilova O，Suzuki N，et al.Disrupted erythropoietin signalling promotes obesity and alters hypothalamus proopiomelanocortin production［J］.Nature Communications，2011，2：520.

［11］Pan Y，Shu JL，Gu HF，et al.Erythropoietin improves insulin resistance via the regulation of its receptor－mediated signaling pathways in 3T3L1adipocytes［J］.Molecular and Cellular Endocrinology，2013，367（1）：116－123.

［12］Hojman P，Brolin C，Gissel H，et al.Erythropoietin overexpression protects against diet－induced obesity in mice through increased fat oxidation in muscles［J］.PloS One，2009，4（6）：5894.

［13］Fenjves ES，Ochoa MS，Cabrera O，et al.Human，nonhuman primate，and rat pancreatic islets express erythropoietin receptors［J］.Transplantation，2003，75（8）：1356－1360.

［14］Bianchi R，Buyukakilli B，Brines M，et al.Erythropoietin both protects from and reverses experimental diabetic neuropathy［J］.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2004，101（3）：823－828.

［15］Choi D，Schroer SA，Lu SY，et al.Erythropoietin protects against diabetes through direct effects on pancreaticβcells［J］.The Journal of Experimental Medicine，2010，207（13）：2831－2842.

［16］Jia Y，Suzuki N，Yamamoto M，et al.Endogenous erythropoietin signaling facilitates skeletal muscle repair and recovery following pharmacologically induced damage［J］.The FASEB Journal，2012，26（7）：2847－2858.

［17］Wang L，Jia Y，Rogers H，et al.Erythropoietin contributes to slow oxidative muscle fiber specification via PGC－1alpha and AMPK activation［J］.The International Journal of Biochemistry ＆ Cell Biology，2013，45（7）：1155－1164.

［18］Suzuki N，Ohneda O，Takahashi S，et al.Erythroid－specific expression of the erythropoietin receptor rescued its null mutant mice from lethality［J］.Blood，2002，100（7）：2279－2288.

［19］Sadamoto Y，Igase K，Sakanaka M，et al.Erythropoietin prevents place navigation disability and cortical infarction in rats with permanent occlusion of the middle cerebral artery［J］.Biochemical and Biophysical Research Communications，1998，253（1）：26－32.

［20］Wang L，Chopp M，Gregg SR，et al.Neural progenitor cells treated with EPO induce angiogenesis through the production of VEGF［J］.Journal of Cerebral Blood Flow ＆ Metabolism，2008，28（7）：1361－1368.

［21］Chen ZY，Wang L，Asavaritkrai P，et al.Up－regulation of erythropoietin receptor by nitric oxide mediates hypoxia preconditioning［J］.Journal of Neuroscience Research，2010，88（14）：3180－3188.

［22］Punnonen J，L Miller J，J Collier T，et al.Agonists of the Tissue－Protective Erythropoietin Receptor in the Treatment of Parkinson′s Disease［J］.Current Topics in Medicinal Chemistry，2015，15（10）：955－969.

［23］Jia Y，Mo SJ，F(xiàn)eng QQ，et al.EPO－dependent activation of PI3K/Akt/FoxO3asignalling mediates neuroprotection in in vitro and in vivo models of Parkinson′s disease［J］.Journal of Molecular Neuroscience，2014，53（1）：117－124.

［24］Burger D，Lei M，Geoghegan MN，et al.Erythropoietin protects cardiomyocytes from apoptosis via up－regulation of endothelial nitric oxide synthase ［J］.Cardiovascular Research，2006，72（1）：51－59.

［25］Carraway MS，Suliman HB，Jones WS，et al.Erythropoietin activates mitochondrial biogenesis and couples red cell mass to mitochondrial mass in the heart［J］.Circulation Research，2010，106（11）：1722－1730.

［26］Shen Y，Wang Y，Li D，et al.Recombinant human erythropoietin pretreatment attenuates heart ischemiareperfusion injury in rats by suppressing the systemic inflammatory response［J］.Transplantation Proceedings，2010，42（5）：1595－1597.

［27］Xie Z，Chen F，Wu X，et al.Effects of supplemental erythropoietin on its receptor expression and signal transduction pathways in rat model of retinal detachment［J］.Curr Eye Res，2012，37（2）：138－144.

［28］García RM， Hernández C，Simó R. Expression of Erythropoietin and Its Receptor in the Human Retina A comparative study of diabetic and nondiabetic subjects［J］.Diabetes Care，2008，31（6）：1189－1194.

［29］He S，Li X，Chan N，et al.Review：epigenetic mechanisms in ocular disease［J］.Mol Vis，2013，19：665－674.

［30］Athanasiou D，Aguilà M，Bevilacqua D，et al.The cell stress machinery and retinal degeneration［J］.FEBS Letters，2013，587（13）：2008－2017.

［31］Guan Y，Cui L，Qu Z，et al.Subretinal transplantation of rat MSCs and erythropoietin gene modified rat MSCs for protecting and rescuing degenerative retina in rats［J］.Current Molecular Medicine，2013，13（9）：1419－1431.

［32］Sullivan TA，Geisert EE，Templeton JP，et al.Dose－dependent treatment of optic nerve crush by exogenous systemic mutant erythropoietin［J］.Exp Eye Res，2012，96（1）：36－41.

［33］Hu LM，Luo Y，Zhang J，et al.EPO reduces reactive gliosis and stimulates neurotrophin expression in Muller cells［J］.Front Biosci（Elite Ed），2011，3：1541－1555.

［34］Sullivan TA，Geisert EE，Hines BJ，et al.Systemic adenoassociated virus－mediated gene therapy preserves retinal ganglion cells and visual function in DBA/2J glaucomatousmice［J］.Hum Gene Ther，2011，22（10）：1191－1200.

［35］King CE，Rodger J，Bartlett C，et al.Erythropoietin is both neuroprotective and neuroregenerative following optic nerve transection［J］.Experimental Neurology，2007，205（1）：48－55.

［36］Westenfelder C，Baranowski RL.Erythropoietin stimulates proliferation of human renal carcinoma cells［J］.Kidney International，2000，58（2）：647－657.

［37］Liu WM，Powles T，Shamash J，et al.Effect of haemopoietic growth factors on cancer cell lines and their role in chemosensitivity［J］.Oncogene，2004，23（4）：981－990.

［38］Acs GP，AcsP，Beckwith SM，et al.Pitts，et al.Verma，Erythropoietin and erythropoietin receptor expression in human cancer［J］.Cancer Res，2001，61（9）：3561－3565.

［39］Laugsch M，Metzen E，Svensson T，et al.Lack of functional erythropoietin receptors of cancer cell lines［J］.International Journal of Cancer，2008，122（5）：1005－1011.

［40］LaMontagne KR，Butler J，Marshall DJ，et al.Recombinant epoetins do not stimulate tumor growth in erythropoietin receptor－positive breast carcinoma models［J］.Molecular Cancer Therapeutics，2006，5（2）：347－355.

［41］Li J，Vesey DA，Johnson DW，et al.Erythropoietin reduces cisplatin－induced apoptosis in renal carcinoma cells via a PKC dependent pathway［J］.Cancer Biology ＆ Therapy，2007，6（12）：1944－1950.

［42］Cherbonnier C，Lefaucheur C，Carvalho G，et al.Chemosensitization by erythropoietin through inhibition of the NF－kappaB rescue pathway［J］.Oncogene，2005，24（5）：737－745

［43］Solar P，F(xiàn)eldman L，Jeong JY，et al.Erythropoietin treatment of human ovarian cancer cells results in enhanced signaling and a paclitaxel－resistant phenotype［J］.International Journal of Cancer，2008，122（2）：281－288.

［44］Um M，Gross AW，Lodish HF.A “classical”homodimeric erythropoietin receptor is essential for the antiapoptotic effects of erythropoietin on differentiated neuroblastoma SHSY5Yand pheochromocytoma PC－12cells［J］.Cellular Signalling，2007，19（3）：634－645.

［45］Gewirtz DA，Di X，Walker TD，et al.Erythropoietin fails to interfere with the antiproliferative and cytotoxic effects of antitumor drugs［J］.Clinical Cancer Research，2006，12（7）：2232－2238.

［46］Blohmer JU，Wurschmidt F，Petry U，et al.Results with sequential adjuvant chemo－radiotherapy with vs without epoetin alfa for patients with high－risk cervical cancer：Results of a prospective，randomized，open and controlled AGO－and NOGGO－intergroup study［J］.Ann Oncol，2004，15（3）：128.

［47］Bohlius J，Langensiepen S，Schwarzer G，et al.Recombinant human erythropoietin and overall survival in cancer patients：results of a comprehensive meta－analysis［J］.Journal of the National Cancer Institute，2005，97（7）：489－498.

［48］Henke M，Laszig R，Rübe C，et al.Erythropoietin to treat head and neck cancer patients with anaemia undergoing radiotherapy：randomised，double－blind，placebo－controlled trial［J］.The Lancet，2003，362（9392）：1255－1260.

［49］Leyland JB.Breast cancer trial with erythropoietin terminated unexpectedly［J］.The Lancet Oncology，2003，4（8）：459－460.

［50］Bennett CL，Silver SM，Djulbegovic B，et al.Venous thromboembolism and mortality associated with recombinant erythropoietin and darbepoetin administration for the treatment of cancer－associated anemia［J］.Jama，2008，299（8）：914－924.