成人特發(fā)性膜性腎病與分泌型磷脂酶A2-ⅠB及抗磷脂酶A2受體抗體的相關(guān)性研究

楊雪芬，潘陽(yáng)彬，丁國(guó)華，萬建新，馬屹煢，楊紅霞

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成人特發(fā)性膜性腎病與分泌型磷脂酶A2-ⅠB及抗磷脂酶A2受體抗體的相關(guān)性研究

楊雪芬，潘陽(yáng)彬，丁國(guó)華，萬建新，馬屹煢，楊紅霞

目的 探討成人特發(fā)性膜性腎病(IMN)與分泌型磷脂酶A2-ⅠB(sPLA2-ⅠB)、抗磷脂酶A2受體抗體(Anti-PLA2R AB)的相關(guān)性。方法 選取2013年7—12月武漢大學(xué)人民醫(yī)院、福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院經(jīng)腎活檢證實(shí)的成人IMN、繼發(fā)性膜性腎病(SMN)患者共30例，其中IMN 20例、SMN 10例，另選取同時(shí)期體檢健康的志愿者5例為對(duì)照組。根據(jù)24 h尿蛋白總量分為低蛋白尿組7例、中蛋白尿組11例、高蛋白尿組17例。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)血清sPLA2-ⅠB水平；免疫組化法檢測(cè)腎臟sPLA2-ⅠB表達(dá)；間接免疫熒光法檢測(cè)血清Anti-PLA2R AB表達(dá)。結(jié)果 IMN組和SMN組血清sPLA2-ⅠB水平高于對(duì)照組(P<0.05)；IMN組與SMN組血清sPLA2-ⅠB水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。IMN和SMN患者血清sPLA2-ⅠB水平與年齡、24 h尿蛋白總量呈正相關(guān)(r值分別為0.475和0.581，P值分別為0.008和0.002)，與血清總蛋白、清蛋白呈負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.487和-0.473，P值分別為0.009和0.011)；多元線性回歸分析結(jié)果顯示，年齡、24 h尿蛋白總量與血清sPLA2-ⅠB水平呈獨(dú)立正相關(guān)(P<0.05)。高蛋白尿組血清sPLA2-ⅠB水平、sPLA2-ⅠB陽(yáng)性區(qū)域面積占腎小球區(qū)域面積比例高于低蛋白尿組和中蛋白尿組，中蛋白尿組血清sPLA2-ⅠB水平、sPLA2-ⅠB陽(yáng)性區(qū)域面積占腎小球區(qū)域面積比例高于低蛋白尿組(P<0.05)。IMN組Anti-PLA2R AB表達(dá)陽(yáng)性率60%(12/20)高于SMN組的20%(2/10)(P=0.039)。結(jié)論 年齡、24 h尿蛋白總量與血清sPLA2-ⅠB水平呈獨(dú)立正相關(guān)，血清sPLA2-ⅠB水平可能與IMN病情有一定相關(guān)性；IMN患者血清Anti-PLA2R AB陽(yáng)性率高于SMN患者，提示Anti-PLA2R AB可能是IMN的特異性抗體,且有助于IMN與SMN的鑒別診斷。

腎小球腎炎,膜性；ⅠB型磷脂酶A2；受體,磷脂酶A2

楊雪芬，潘陽(yáng)彬，丁國(guó)華，等.成人特發(fā)性膜性腎病與分泌型磷脂酶A2-ⅠB及抗磷脂酶A2受體抗體的相關(guān)性研究[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2015，18(9)：1018-1022,1028.[www.chinagp.net]

Yang XF,Pan YB,Ding GH,et al.Correlation of secreted phospholipase A2-ⅠB,anti-phospholipase A2 receptor antibody with idiopathic membranous nephropathy among adult patients [J].Chinese General Practice，2015，18(9)：1018-1022,1028.

膜性腎病是成人腎病綜合征常見病理類型，其中病因未明者稱為特發(fā)性膜性腎病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)，占原發(fā)性腎病綜合征的30%～40%[1]。目前，其診斷與鑒別診斷的金標(biāo)準(zhǔn)仍是病理組織學(xué)，屬于有創(chuàng)性檢查手段。膜性腎病臨床表現(xiàn)輕重不一，預(yù)后差別也較大，其中40%的患者10年內(nèi)會(huì)發(fā)展為腎衰竭[2]。為了研發(fā)更為有效的診斷、治療及監(jiān)測(cè)手段，其分子發(fā)病機(jī)制一直以來均是研究的熱點(diǎn)。1959年Heymann腎炎大鼠模型[3]的建立開啟了膜性腎病發(fā)病機(jī)制的研究。2009年，Beck等[4]在成人IMN患者血清中檢測(cè)到抗M型磷脂酶A2受體(M-type phospholipase A2 receptor，M-type PLA2R)的自身抗體，且其水平與臨床蛋白尿相關(guān)，提示PLA2R可能是IMN的靶抗原。分泌型磷脂酶A2-ⅠB (secreted phospholipase A2-ⅠB，sPLA2-ⅠB)是PLA2R的天然配體。有研究表明，sPLA2-ⅠB與PLA2R結(jié)合后能激活細(xì)胞內(nèi)絲裂原活化蛋白激(MAPK)系統(tǒng)、磷酸肌醇3激酶/堿性磷酸酶(PI3K/AKP)系統(tǒng)等引起細(xì)胞內(nèi)胞質(zhì)型磷脂酶A2(cPLA2)生成增加，后者增加會(huì)加重甘油磷脂的水解，產(chǎn)生花生四烯酸(AA)、前列腺素(PG)、白三烯(LTs)等，這些炎性遞質(zhì)會(huì)進(jìn)一步破壞細(xì)胞膜及細(xì)胞器，應(yīng)用PLA2R阻斷劑的細(xì)胞則損傷明顯減輕[5]。另有研究證實(shí)，經(jīng)sPLA2-ⅠB處理后的大鼠腎小球系膜細(xì)胞導(dǎo)致sPLA2-ⅡA和環(huán)氧合酶2(COX-2)表達(dá)增加，可能原因是sPLA2-ⅠB與其特異性M-ypte PLA2R結(jié)合所致[6]。M-ypte PLA2R是否為IMN的靶抗原，sPLA2-ⅠB是否參與IMN的發(fā)病機(jī)制，這些問題仍有待進(jìn)一步探討。為此，本研究選取IMN及繼發(fā)性膜性同行評(píng)議：

本研究探討了成人特發(fā)性膜性腎病(IMN)與抗磷脂酶A2受體抗體(Anti-PLA2R AB)、分泌型磷脂酶A2-ⅠB(sPLA2-ⅠB)的相關(guān)性，結(jié)果提示，Anti-PLA2R AB可能是IMN的特異性抗體，有助于IMN與繼發(fā)性膜性腎病(SMN)的鑒別診斷。選題較新，設(shè)計(jì)合理。

腎病(SMN)患者，探討中國(guó)成人IMN與sPLA2-ⅠB及抗磷脂酶A2受體抗體(Anti-PLA2R AB)的相關(guān)性，并進(jìn)一步探討sPLA2-ⅠB 與各臨床指標(biāo)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2013年7—12月武漢大學(xué)人民醫(yī)院、福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院經(jīng)腎活檢證實(shí)的成人IMN、SMN患者共30例為研究對(duì)象，其中男18例，女12例；年齡22～78歲，平均(49.7±16.5)歲；IMN 20例，SMN 10例；除1例IMN患者外均為首次腎活檢確診患者，IMN組中合并高血壓5例(病程2～20年)，SMN組中合并高血壓3例(病程1～3年)?；颊呔鶡o糖尿病、冠心病等其他慢性疾病史；患者均無腎毒性藥物、激素及免疫抑制劑應(yīng)用史；近期無尿路感染病史，無嚴(yán)重心、腦、肺、血液系統(tǒng)疾病等。另選取同時(shí)期體檢健康的志愿者5例為對(duì)照組。本研究遵循倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，均簽署知情同意書。

1.2 臨床資料收集 包括性別、年齡、血清總蛋白、清蛋白、尿素氮、肌酐、總膽固醇、三酰甘油、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、24 h尿蛋白總量等。

1.3 標(biāo)本采集 收集患者晨起空腹靜脈血3 ml，離心機(jī)3 000 r/min(離心半徑13.5 cm)，低溫離心5 min，分離血清，置于-70 ℃冰箱待用，避免反復(fù)凍融。收集患者腎活檢標(biāo)本，制成石蠟切片后于4 ℃冰箱保存。

1.4 雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清sPLA2-ⅠB水平 采用Elabscience公司生產(chǎn)的試劑盒，根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作。準(zhǔn)備試劑、樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，加入生物素化抗體工作液，37 ℃孵育60 min。洗滌3次，加入酶結(jié)合物工作液，37 ℃孵育30 min。洗滌5次，加入底物溶液，37 ℃孵育15 min，加入終止液，10 min內(nèi)讀取吸光度值(OD值)，根據(jù)曲線回歸方程，計(jì)算血清sPLA2-ⅠB水平。

1.5 免疫組化法檢測(cè)腎臟sPLA2-ⅠB表達(dá) 腎組織以10%甲醛溶液固定，石蠟包埋，3 μm切片后常規(guī)脫蠟、梯度乙醇水化，磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗后加入枸櫞酸抗原修復(fù)液室溫孵育10 min，PBS清洗3次，過氧化氫封閉內(nèi)源性過氧化物酶，PBS清洗3次后正常血清封閉，滴加適當(dāng)比例稀釋的抗sPLA2-ⅠB抗體(1∶100)，4 ℃冰箱過夜，37 ℃復(fù)溫30 min，PBS清洗3次，加入相應(yīng)的二抗，37 ℃孵育20 min，PBS清洗3次。DBA顯色，蘇木素復(fù)染，樹脂封片后顯微鏡下觀察。光鏡下每張切片隨機(jī)選擇5個(gè)視野，采用Image-ProPlus 6.0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。

1.6 間接免疫熒光法(IIF)檢測(cè)Anti-PLA2R AB水平 采用北京歐蒙生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的抗磷脂酶A2受體抗體檢測(cè)試劑盒(Anti-phospholipase A2 receptor IIFT)，試劑批號(hào)：FA1254-50、F130409DL、F131130DB、F131121VA。采用轉(zhuǎn)染了PLA2R的HK293細(xì)胞，IIF檢測(cè)患者血清抗PLA2R抗體。血清稀釋后與抗原基質(zhì)片室溫孵育30 min (同時(shí)設(shè)陽(yáng)性和陰性對(duì)照)，清洗5 min，再加入異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的羊抗人IgG，室溫避光孵育30 min，清洗5 min，加甘油封片后熒光顯微鏡下判讀結(jié)果，以抗體滴度≥1∶10為弱陽(yáng)性，抗體滴度≥1∶320為強(qiáng)陽(yáng)性，介于兩者之間者為陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 3組臨床指標(biāo)比較 3組性別、年齡及血清尿素氮、肌酐、三酰甘油、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3組血清總蛋白、清蛋白、24 h尿蛋白總量、總膽固醇水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中IMN組及SMN組患者血清總蛋白、清蛋白水平低于對(duì)照組，24 h尿蛋白總量、總膽固醇水平高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；IMN組與SMN組患者血清總蛋白、清蛋白、24 h尿蛋白總量、總膽固醇水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表1)。

2.2 3組血清sPLA2-ⅠB水平比較 3組血清sPLA2-ⅠB水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中IMN組和SMN組高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；IMN組與SMN組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表2)。

2.3 IMN、SMN患者血清sPLA2-ⅠB水平與各臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，血清sPLA2-ⅠB水平與年齡、24 h尿蛋白總量呈正相關(guān)(r值分別為0.475和0.581，P值分別為0.008和0.002)，與血清總蛋白、清蛋白呈負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.487和-0.473，P值分別為0.009和0.011)，與尿素氮、肌酐、總膽固醇、三酰甘油、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4無直線相關(guān)關(guān)系(r值分別為-0.027、-0.190、0.273、-0.186、-0.055和-0.012，P值分別為0.893、0.332、0.177、0.362、0.793和0.954)。多元線性回歸分析結(jié)果顯示，年齡、24 h尿蛋白總量與血清sPLA2-ⅠB水平呈獨(dú)立正相關(guān)(P<0.05，見表3)。

表1 3組臨床指標(biāo)比較

注：IMN=特發(fā)性膜性腎病，SMN=繼發(fā)性膜性腎??；-采用Fisher確切概率法；與對(duì)照組比較，*P<0.05

2.4 血清sPLA2-ⅠB水平與24 h尿蛋白總量的關(guān)系 將IMN、SMN患者及對(duì)照組按照24 h尿蛋白總量分為3組，低蛋白尿組24 h尿蛋白總量<1.00 g,高蛋白尿組24 h尿蛋白總量≥3.50 g,中蛋白尿組24 h尿蛋白總量介于兩者之間。3組血清sPLA2-ⅠB水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中，高蛋白尿組血清sPLA2-ⅠB水平高于低蛋白尿組和中蛋白尿組，中蛋白尿組血清sPLA2-ⅠB水平高于低蛋白尿組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表4)。

Table 2 Comparison of serum sPLA2-ⅠB among the three groups

組別例數(shù)sPLA2-ⅠB對(duì)照組 5 3.19±0.25IMN組209.68±3.39*SMN組107.81±3.70*F值8.019P值0.002

注：sPLA2-ⅠB=分泌型磷脂酶A2-ⅠB；與對(duì)照組比較，*P<0.05

表3 IMN和SMN患者血清sPLA2-ⅠB水平與各臨床指標(biāo)關(guān)系的多元線性回歸分析

Table 3 Correlation of serum sPLA2-ⅠB level with various clinical indicators in IMN and SMN patients:a multivariate linear regression analysis

指標(biāo)βt值P值年齡0.1283.2520.00424h尿蛋白總量0.5943.0640.006總蛋白-0.179-1.3180.202清蛋白0.2721.3040.207

Table 4 Comparison of serum sPLA2-ⅠB among low proteinuria group,middle proteinuria group and high proteinuria group

組別例數(shù)sPLA2-ⅠB低蛋白尿組73.62±0.87中蛋白尿組116.64±1.58*高蛋白尿組1711.14±3.19*△F值26.633P值<0.001

注：與低蛋白尿組比較，*P<0.05；與中蛋白尿組比較，△P<0.05

2.5 低蛋白尿組、中蛋白尿組、高蛋白尿組腎臟sPLA2-ⅠB表達(dá)情況 低蛋白尿組腎臟免疫組化染色淡黃色(見圖1a)，高蛋白尿組染色為棕褐色(見圖1c)，中蛋白尿組染色深度介于低蛋白尿組、高蛋白尿組之間(見圖1b)。Image-ProPlus 6.0分析計(jì)算sPLA2-ⅠB陽(yáng)性區(qū)域面積占腎小球區(qū)域面積比例，結(jié)果顯示，3組sPLA2-ⅠB陽(yáng)性區(qū)域面積占腎小球區(qū)域面積比例比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中，高蛋白尿組高于低蛋白尿組和中蛋白尿組，中蛋白尿組高于低蛋白尿組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表5)。

Table 5 Comparison of the proportion of sPLA2-ⅠB positive area to total glomerulus area among low proteinuria group,middle proteinuria group and high proteinuria group

組別例數(shù)sPLA2-ⅠB陽(yáng)性區(qū)域面積占腎小球區(qū)域面積比例低蛋白尿組79.32±1.60中蛋白尿組1131.76±6.03*高蛋白尿組1758.27±6.52*△F值110.63P值<0.001

注：與低蛋白尿組比較，*P<0.05；與中蛋白尿組比較，△P<0.05

注：a為低蛋白尿組,b為中蛋白尿組,c為高蛋白尿組

圖1 低蛋白尿組、中蛋白尿組、高蛋白尿組腎臟sPLA2-ⅠB表達(dá)情況(免疫組化染色，×400)

Figure 1 The expression of sPLA2-ⅠB in kidney among low proteinuria group,middle proteinuria group and high proteinuria group

2.6 IIF檢測(cè)血清Anti-PLA2R AB表達(dá) IMN組Anti-PLA2R AB表達(dá)陽(yáng)性者12例(60%)，其中強(qiáng)陽(yáng)性4例，陽(yáng)性6例，弱陽(yáng)性2例；SMN組Anti-PLA2R AB表達(dá)陽(yáng)性者2例(20%)，其中陽(yáng)性1例，弱陽(yáng)性1例。IMN組Anti-PLA2R AB表達(dá)陽(yáng)性率高于SMN組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.039)。

3 討論

成人IMN的發(fā)病機(jī)制一直以來均是全球研究熱點(diǎn)，人類腎小球足細(xì)胞M-type PLA2R及其抗體的發(fā)現(xiàn)將人們對(duì)IMN發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)帶入了一個(gè)嶄新的領(lǐng)域。PLA2表達(dá)于所有有核細(xì)胞，是一個(gè)脂溶性水解酶超家族，分為分泌型磷脂酶A2(secreted PLA2,sPLA2)、cPLA2及非鈣依賴型磷脂酶A2(Ca2+-independent PLA2,iPLA2)3大類，每一類又包括多種亞型，其中sPLA2有11種亞型(ⅠB、ⅡA、ⅡC、ⅡD、ⅡE、ⅡF、Ⅲ、Ⅴ、Ⅹ、ⅫA及ⅫB)[5]。血漿或組織中的sPLA2可通過水解膜磷脂參與炎性反應(yīng)，每種亞型對(duì)應(yīng)不同的靶目標(biāo)膜，sPLA2-ⅠB是研究較為成熟的一種。有研究證實(shí)經(jīng)sPLA2-ⅠB處理后的大鼠腎小球系膜細(xì)胞導(dǎo)致sPLA2-ⅡA和COX-2表達(dá)增加，可能原因是sPLA2-ⅠB與其特異性M-tyype PLA2R結(jié)合所致[6]。那么，sPLA2-ⅠB是否是成人IMN發(fā)病機(jī)制中的重要成分呢？本研究結(jié)果顯示，IMN組、SMN組血清sPLA2-ⅠB水平高于對(duì)照組，IMN組與SMN組無差異。sPLA2-ⅠB在IMN中沒有明顯特異性，在IMN與SMN的鑒別診斷中可能意義不大。本研究對(duì)sPLA2-ⅠB與臨床指標(biāo)相關(guān)性進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，sPLA2-ⅠB與患者年齡、24 h尿蛋白總量呈正相關(guān)，與患者血清總蛋白、清蛋白呈負(fù)相關(guān)。進(jìn)一步行多元線性回歸分析結(jié)果顯示，年齡、24 h尿蛋白總量與血清sPLA2-ⅠB水平呈獨(dú)立正相關(guān)關(guān)系，可見血清sPLA2-ⅠB水平與24 h尿蛋白總量之間存在密切相關(guān)性，提示其可能與膜性腎病病情發(fā)展有一定相關(guān)性。由于缺乏特異性臨床指標(biāo)，目前治療膜性腎病采用何種治療方案及治療時(shí)間長(zhǎng)短，臨床多依據(jù)患者24 h尿蛋白總量變化來進(jìn)行調(diào)整，如果血清sPLA2-ⅠB水平與患者病情發(fā)展有一定相關(guān)性，那么將對(duì)膜性腎病的診治意義重大。但由于本研究納入病例數(shù)有限，且沒有進(jìn)行臨床隨訪研究，血清sPLA2-ⅠB水平是否與患者病情發(fā)展存在密切關(guān)系目前仍不能確定。

M-type PLA2R是甘露醇受體家族中的一種，屬于Ⅰ型跨膜糖蛋白，相對(duì)分子質(zhì)量為180 000。其結(jié)構(gòu)包括：(1)細(xì)胞外部分，由富含半胱氨酸的N末端、Ⅱ型纖維連接蛋白域、八個(gè)串聯(lián)的C型外源性凝集素樣部分(CRD)組成；(2)1個(gè)跨膜域；(3)細(xì)胞內(nèi)C末端[7]。PLA2R 細(xì)胞外結(jié)構(gòu)中結(jié)合sPLA2的關(guān)鍵部位是CRD[8]。既往研究顯示，52%～82%的IMN患者血清中可檢出Anti-PLA2R AB[9-13]。本研究結(jié)果顯示，IMN組Anti-PLA2R AB表達(dá)陽(yáng)性率為60%，高于SMN組Anti-PLA2R AB表達(dá)陽(yáng)性率(20%)，Anti-PLA2R AB可能為IMN特異性致病抗體，且有助于成人IMN的診斷及鑒別診斷。此外，既往研究通過檢測(cè)血清Anti-PLA2R AB及腎組織PLA2R分布情況，發(fā)現(xiàn)血清與腎組織的敏感性并不完全一致[14-15]，因此血清Anti-PLA2R AB檢測(cè)陰性者也不能排除IMN的可能。近期1項(xiàng)納入9篇文獻(xiàn)，2 212例患者的Meta分析從另一方面證實(shí)了該結(jié)論，該系統(tǒng)分析結(jié)果顯示，血清檢測(cè)Anti-PLA2R AB的靈敏度為78%，特異度為99%[16]。Hoxha等[17]對(duì)133例腎活檢為膜性腎病且血清檢測(cè)Anti-PLA2R AB陽(yáng)性的患者進(jìn)行長(zhǎng)達(dá)2年的隨訪，結(jié)果顯示，初始檢測(cè)血清Anti-PLA2R AB水平較低，患者達(dá)到臨床蛋白尿緩解期所需時(shí)間較短，所有達(dá)到臨床蛋白尿緩解期患者其血清Anti-PLA2R AB水平均有顯著降低，而Anti-PLA2R AB水平的降低在治療前3個(gè)月下降最明顯，且其水平下降早于臨床蛋白尿水平下降。Segarra-Medrano等[18]對(duì)以他克莫司治療的36例膜性腎病患者進(jìn)行了1年隨訪，得到了與Hoxha等[17]相同的結(jié)論。因此，認(rèn)為檢測(cè)血清Anti-PLA2R AB水平對(duì)IMN病情監(jiān)測(cè)及預(yù)測(cè)IMN臨床緩解率及緩解時(shí)間有幫助。

綜上所述，本研究探討成人IMN與sPLA2-ⅠB的相互關(guān)系，且發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比，IMN與SMN患者血清sPLA2-ⅠB水平升高。相關(guān)及多元線性回歸分析顯示，年齡、24 h尿蛋白總量與血清sPLA2-ⅠB水平呈獨(dú)立正相關(guān)關(guān)系。進(jìn)一步研究顯示，大量蛋白尿患者腎臟足細(xì)胞sPLA2-ⅠB表達(dá)明顯增多，因此認(rèn)為血清sPLA2-ⅠB水平可能與IMN病情有一定相關(guān)性。此外，進(jìn)一步驗(yàn)證了成人IMN患者血清Anti-PLA2R AB陽(yáng)性率明顯高于SMN組，表明Anti-PLA2R AB可能是成人IMN的特異性抗體,且有助于IMN與SMN的鑒別診斷。但由于本研究樣本量有限，且未對(duì)納入患者進(jìn)行臨床隨訪研究，血清sPLA2-ⅠB及Anti-PLA2R AB水平是否與成人IMN患者病情發(fā)展存在密切關(guān)系目前仍不能確定。

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(本文編輯：陳素芳)

Correlation of Secreted Phospholipase A2-ⅠB,Anti-phospholipase A2 Receptor Antibody with Idiopathic Membranous Nephropathy among Adult Patients

YANGXue-fen,PANYang-bin,DINGGuo-hua,etal.

DepartmentofNephrology,thePeople′sHospitalofWuhanUniversity,Wuhan430060,China

Objective To investigate the correlation of secreted phospholipase A2-ⅠB (sPLA2-ⅠB) and anti-phospholipase A2 receptor antibody (Anti-PLA2R AB) with idiopathic membranous nephropathy(IMN) in adult patients.Methods 20 adult patients with IMN,and 10 adult patients with secondary membranous nephropathy (SMN) who were admitted to the People′s Hospital of Wuhan University and the First Affiliated Hospital of Fujian Medical University from July to December in 2013,were selected as study subjects,the diseases of cases were confirmed by renal biopsy,5 healthy volunteers were included in control group at the same time.The enrolled cases were divided into low proteinuria group (7 cases),middle proteinuria group (11 cases)and high proteinuria group (17 cases) according to 24-hour proteinuria.Serum sPLA2-ⅠB level was assessed by ELISA,the expression of sPLA2-ⅠB in kidney was detected by immunohistochemistry.Serum Anti-PLA2R AB level was detected by the indirect immunofluorescence test.Results Serum sPLA2-ⅠB level in IMN group and in SMN group was significantly higher than that in control group,respectively (P<0.05).There was no significant difference in serum sPLA2-ⅠB level between IMN group and SMN group (P>0.05).For IMN patients and SMN patients,the concentration of serum sPLA2-ⅠB was positively correlated with age and 24-hour proteinuria,respectively (r=0.475,P=0.008;r=0.581,P=0.002),and was negatively correlated with serum total protein and serum albumin,respectively (r=-0.487,P=0.009;r=-0.473，P=0.011).According to the results of multivariate linear regression analysis,age and 24-hour proteinuria was independently correlated with serum sPLA2-ⅠB level,respectively (P<0.05).The concentration of serum sPLA2-ⅠB and the proportion of sPLA2-ⅠB positive area to total glomerulus area in high proteinuria group were significantly higher than those in middle proteinuria group and in low proteinuria group,respectively(P<0.05),and the above two indicators in middle proteinuria group were significantly higher than those in low proteinuria group,respectively (P<0.05).The expression rate of Anti-PLA2R AB in IMN group was 60% (12/20),which was significantly higher than that (20%,2/10) in SMN group (P=0.039).Conclusion Age and 24-hour proteinuria were independent influence factors for concentration of serum sPLA2-ⅠB.The level of serum sPLA2-ⅠB is possibly correlated with the progress of IMN.The expression rate of Anti-PLA2R AB among IMN patients is significantly higher than that among SMN patients,which indicates that Anti-PLA2R AB maybe the specific antibody of IMN,and Anti-PLA2R AB may contribute to the differential diagnosis of IMN and SMN.

Glomerulonephritis,membranous；Group ⅠB phospholipases A2；Receptors,phospholipase A2

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81270762)

430060 湖北省武漢市，武漢大學(xué)人民醫(yī)院腎內(nèi)科(楊雪芬，潘陽(yáng)彬，丁國(guó)華，馬屹煢，楊紅霞)；福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腎內(nèi)科(萬建新)

丁國(guó)華，430060 湖北省武漢市，武漢大學(xué)人民醫(yī)院腎內(nèi)科；E-mail:ghxding@gmail.com

R 692

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.09.009

2014-09-24；

2015-01-06)