Fascin在乳腺癌中的表達(dá)與臨床特征及預(yù)后的相關(guān)性研究

王鑫，徐巖，譚繼超，孫丁，徐惠綿

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院胃腸腫瘤外科，沈陽 110001）

·論著·

Fascin在乳腺癌中的表達(dá)與臨床特征及預(yù)后的相關(guān)性研究

王鑫，徐巖，譚繼超，孫丁，徐惠綿

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院胃腸腫瘤外科，沈陽 110001）

目的通過免疫組化的方法檢測Fascin在乳腺癌中的表達(dá)情況并分析其與乳腺癌患者預(yù)后的關(guān)系。方法收集中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤外科2007年1月至10月乳腺癌患者110例，采用免疫組化方法檢測Fascin的表達(dá)情況，并且通過kaplan-meier曲線及cox模型分析Fascin的表達(dá)在乳腺癌預(yù)后中的意義。結(jié)果乳腺癌組織中Fascin蛋白的表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小、TNM分期及HER2表達(dá)情況無相關(guān)性（P＞0.05）。而與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及ER（-）、PR（-）有明顯的相關(guān)性（P＜0.05）。Fascin陽性的乳腺癌患者無瘤生存時間短于Fascin陰性患者，是影響乳腺癌患者無瘤生存時間的獨立危險因素。而與乳腺癌患者的總生存時間無明顯關(guān)系。結(jié)論Fascin在乳腺癌中高表達(dá)與不良預(yù)后相關(guān)，是影響乳腺癌患者無瘤生存時間的獨立危險因素。

Fascin；乳腺癌；預(yù)后

乳腺癌的發(fā)病率逐年升高，是危害女性身心健康的惡性腫瘤，盡管針對乳腺癌的綜合治療取得了很大進(jìn)展，但遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移仍是乳腺癌最終致死的主要原因。細(xì)胞形態(tài)的改變是腫瘤細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。在正常機(jī)體中，機(jī)動蛋白結(jié)合蛋白在維持細(xì)胞形態(tài)，調(diào)節(jié)細(xì)胞運動方面起著重要的作用，本研究的目的蛋白Fascin是機(jī)動蛋白結(jié)合蛋白的一種［1］，是進(jìn)化上高度保守的細(xì)胞骨架蛋白，分子量55 kDa，有兩個actin結(jié)合位點，能使actin纖維聚集成緊密而穩(wěn)定的束。Fascin位于遷移細(xì)胞前緣的突起和偽足中actin的中心，這些結(jié)構(gòu)與細(xì)胞的運動有關(guān)［2］。Fascin在多種有膜突起的細(xì)胞中表達(dá)，如神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞；也在活躍遷移的細(xì)胞中表達(dá)，如血管內(nèi)皮細(xì)胞。Fascin在多種正常上皮組織不表達(dá)或低表達(dá)，但研究表明［3～8］Fascin在多種上皮來源的腫瘤中存在異常表達(dá)。在正常乳腺組織中Fascin不表達(dá)。然而在侵襲性較強(qiáng)的雌激素/孕激素受體陰性的乳腺癌中，F(xiàn)ascin的表達(dá)升高，在非二倍體腫瘤中，F(xiàn)ascin優(yōu)勢表達(dá)。然而Fascin表達(dá)水平與HER2的表達(dá)水平無明顯相關(guān)性［9］。在具有侵襲性和內(nèi)臟轉(zhuǎn)移傾向的BRCA1生殖細(xì)胞突變的乳腺癌中，F(xiàn)ascin的表達(dá)增高［10］，但具有什么樣的臨床意義尚不明確。為進(jìn)一步明確Fascin在乳腺癌轉(zhuǎn)移和增殖中的作用，我們收集了臨床乳腺癌病列的組織標(biāo)本，采用免疫組化的方法，檢測Fascin在乳腺癌組織中的表達(dá)情況，并研究Fascin的表達(dá)情況與年齡、腫瘤大小、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、ER、PR、HER2表達(dá)情況等臨床病理特征及預(yù)后（無瘤生存期）的相關(guān)性，為進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

收集中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤外科2007年1月至2007年10月女性浸潤性乳腺癌標(biāo)本110例，所有標(biāo)本采用4%多聚甲醛固定后，常規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色，經(jīng)本院病理科按世界衛(wèi)生組織（WHO）《乳腺病理組織學(xué)分類》（2003新版）標(biāo)準(zhǔn)讀片確認(rèn)其病理類型。排除標(biāo)準(zhǔn)：除外所有術(shù)前行新輔助化療以及放療患者的標(biāo)本。最終共收集浸潤性乳腺癌110例，年齡30～76歲，中位年齡44歲。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學(xué)染色：對所收集的110例浸潤性乳腺癌標(biāo)本取材后常規(guī)固定、脫水后石蠟包埋，4 μm切片，撈片于多聚賴氨酸粘附玻片上。以PBS代替一抗作陰性對照，已知高表達(dá)Fascin的Hela細(xì)胞爬片切片作為陽性對照。采用雙盲評分法，陽性染色按照其強(qiáng)度分為+、++、+++。所有標(biāo)本均由2名對患者臨床狀況未知的研究者進(jìn)行觀察。分析結(jié)果時陽性定義為至少≥10%的腫瘤細(xì)胞呈+～+++染色。

1.2.2 臨床病理資料及隨訪資料收集：臨床資料由患者病志收集，包括患者年齡、身高、體質(zhì)量、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)、淋巴結(jié)切除總數(shù)和腫瘤病理特征（ER、PR、HER2）等。腫瘤外科具有完善的隨訪數(shù)據(jù)庫，通過電話隨訪及門診隨訪，隨訪截止日期為2012年1月1日。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 16.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗或Fisher確切概率法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。生存分析采用Kaplan-Meier生存曲線進(jìn)行單因素分析，Cox模型進(jìn)行多因素分析。

2 結(jié)果

2.1 Fascin蛋白在乳腺癌中的表達(dá)情況

Fascin蛋白主要定位于胞質(zhì)中，呈黃色或棕黃色顆粒狀。在110例浸潤性乳腺癌組織的胞質(zhì)中有22例陽性表達(dá)，陽性率為20%（圖1）。Fascin的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系見表1。可以看出乳腺癌組織中Fascin蛋白的表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小、TNM分期及HER2表達(dá)情況無明顯相關(guān)性（P＞0.05）。而Fascin蛋白的表達(dá)與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及ER（-）、PR（-）有明顯的相關(guān)性（P＜0.05）。

圖1 Fascin在乳腺癌組織中的表達(dá)情況Fig.1 Fascin expression status in breast cancer

2.2 Fascin的表達(dá)與乳腺癌患者無瘤生存時間的關(guān)系

110例浸潤性乳腺癌患者中，22例患者Fascin呈陽性表達(dá)，經(jīng)Kaplan-meirer繪制生存曲線（圖2），通過隨訪資料發(fā)現(xiàn)，22例Fascin陽性表達(dá)組術(shù)后中位無瘤生存時間51月，88例Fascin陰性表達(dá)組中位無瘤生存時間59個月。Fascin陽性表達(dá)組術(shù)后無瘤生存時間明顯低于陰性表達(dá)組，經(jīng)Log-rank檢驗差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。

2.3 影響乳腺癌預(yù)后的Cox回歸模型多因素分析

將單因素分析得到的及臨床考慮對乳腺癌患者無瘤生存有影響的因素：年齡、腫瘤大小、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、HER2表達(dá)情況及Fascin的表達(dá)等指標(biāo)納入Cox多因素分析，發(fā)現(xiàn)年齡、腫瘤大小、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與乳腺癌患者的無瘤生存無明顯相關(guān)性，而HER2表達(dá)情況及Fascin的表達(dá)是影響乳腺癌患者無瘤生存的有意義的風(fēng)險因素，對預(yù)后的相對危險度為Fascin：7.79；HER2：6.58，見表2。但在對乳腺癌患者總生存時間的危險因素中Fascin則失去了統(tǒng)計學(xué)意義，見表3。

表1 Fascin蛋白的表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系Tab.1 The relationship between Fascin expression and patient′s pathology data

3 討論

乳腺癌是目前女性最常見的惡性腫瘤之一，近年來隨著手術(shù)、化療、放療、內(nèi)分泌治療及分子靶向治療等綜合治療手段的發(fā)展，乳腺癌的治療得到了很大的發(fā)展。發(fā)生轉(zhuǎn)移一直是導(dǎo)致乳腺癌治療失敗，患者死亡的主要原因。尋找、研究乳腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因?qū)τ谌橄侔┑姆乐尉哂兄匾囊饬x。有研究顯示：Fascin在多種上皮來源腫瘤細(xì)胞中異常高表達(dá)，并且其表達(dá)同腫瘤的轉(zhuǎn)移及侵襲密切相關(guān)。但是，目前對于Fascin在乳腺癌中表達(dá)的研究卻較少。Yoder等［17］研究了210例浸潤性乳腺癌的患者同時進(jìn)行了5A的臨床隨訪觀察。發(fā)現(xiàn)在210例病例中Fascin（+）的表達(dá)為33例（16%），同時在這33例中ER（-）22例，PR（-）21例，但Fascin的表達(dá)與HER2的性質(zhì)無明顯聯(lián)系。乳腺癌Bloom-Richardson分級為3級的29例中有Fascin表達(dá)的19例。乳腺癌組織中Fascin表達(dá)陽性的患者對比Fascin表達(dá)陰性的患者，無瘤生存率（74.44個月∶100.52個月）和平均總生存時間（77.58個月∶98.98個月）都有下降，他們的研究還發(fā)現(xiàn)Fascin的表達(dá)與腫瘤組織的大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的情況、轉(zhuǎn)移灶的部位及轉(zhuǎn)移的途徑無明確的聯(lián)系。而國內(nèi)馬力等報道：Fascin的表達(dá)與腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織學(xué)分級和TNM分期呈正相關(guān)，并與ER/PR（-），HER2（+）顯著相關(guān)，F(xiàn)ascin表達(dá)的患者術(shù)后生存時間明顯短于不表達(dá)患者。

表2 影響乳腺癌患者無瘤生存預(yù)后的Cox回歸模型多因素分析Tab.2 Multivariate analysis of determinants of disease-free survival

圖2 Fascin表達(dá)與乳腺癌患者預(yù)后Fig.2 The relationship between Fascin expression and patients′prognosis

表3 影響乳腺癌患者總生存預(yù)后的Cox回歸模型多因素分析Tab.3 Multivariate analysis of determinants of overall survival

我們采用免疫組化的方法觀察了110例浸潤性乳腺癌臨床標(biāo)本中Fascin的表達(dá)，結(jié)果顯示：Fascin主要定位于乳腺癌細(xì)胞胞質(zhì)中，呈灶性或彌漫性黃色顆粒狀。陽性表達(dá)率為20%。Fascin的表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小、TNM分期及HER2表達(dá)情況無相關(guān)性（P＞0.05）。而與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及ER（-）、PR（-）有明顯的相關(guān)性（P＜0.05）。并且生存分析的結(jié)果顯示，F(xiàn)ascin的表達(dá)與乳腺癌患者的無瘤生存時間密切相關(guān)，是影響乳腺癌患者預(yù)后的獨立危險因素。通過以上結(jié)果我們發(fā)現(xiàn)，乳腺癌中的Fascin的表達(dá)與侵襲轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)，而侵襲轉(zhuǎn)移能力無疑是影響患者生存的最重要因素之一，因此，我們將對Fascin在乳腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移過程中的作用進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

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（編輯 裘孝琦）

Correlation Study ofthe Fascin Expression and Prognosisin BreastCancer

WANGXin，XUYan，TANJi-chao，SUNDing，XUHui-mian
（DepartmentofSurgicalOncology，The FirstHospital，China MedicalUniversity，Shenyang 110001，China）

Objective To investigate the relationship between the expression ofFascin and breastcancerprognosis.MethodsParaffin sections of breast cancer from 110 patients were investigated by immunohostochemistry with monoclonal anti-fascin antibody.Data of the Fascin expression and clinicopathological variables were analyzed for disease-free survival（DFS）and overall survival（OS）by Kaplan-miere and cox model.ResultsThe expression of Fascin was significantly associated with ER negative，PR negative and lymph node metastasis，but not with age，HER2 status and tumor size.The patients with positive expression of Fascin had shorter disease free survival time than those without Fascin expression.ConclusionHigh expression of Fascin is associated with poor prognosis in breast cancer.Fascin is an independent prognostic indicator of disease-free survival time.

Fascin；breast cancer；prognosis

R73

A

0258-4646（2015）08-0738-04

王鑫（1985-），男，醫(yī)師，碩士.

徐惠綿，E-mail：wx_19850131@163.com

2015-01-21

網(wǎng)絡(luò)出版時間：