保健食品中輔料多糖的研究

高 暢， 王蓮萍， 趙寶琴,*， 胡 萍， 崔 瑩， 高 陸

(1. 吉林省現(xiàn)代中藥工程研究中心有限公司，吉林長春 130000；2.長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林長春 130000)

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保健食品中輔料多糖的研究

高 暢1， 王蓮萍1， 趙寶琴1,2*， 胡 萍1， 崔 瑩1， 高 陸2

(1. 吉林省現(xiàn)代中藥工程研究中心有限公司，吉林長春 130000；2.長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林長春 130000)

[目的]比較保健食品中各輔料間多糖含量的差異以及不同條件對(duì)多糖含量的影響。[方法] 對(duì)7種稀釋劑木糖醇、甘露醇、蔗糖、赤蘚糖醇、淀粉、聚葡萄糖、麥芽糊精進(jìn)行考察，比較各輔料間多糖含量的差異，以及不同的醇沉濃度、不同對(duì)照品和不同的冷水浴時(shí)間對(duì)多糖含量的影響。[結(jié)果]將原料提取醇沉，應(yīng)用苯酚-硫酸比色法進(jìn)行測定，冷水浴時(shí)間在5 min時(shí)即能使反應(yīng)達(dá)到完全。分別以葡萄糖、葡聚糖為對(duì)照品時(shí)，各樣品多糖含量影響不大，7種輔料中，木糖醇、甘露醇、蔗糖和赤蘚糖醇中基本不含有多糖，淀粉中含有一定量多糖，聚葡萄糖和麥芽糊精中含有較多的多糖。[結(jié)論]研究可為藥品和保健品應(yīng)用藥用輔料提供選擇的依據(jù)。

輔料；多糖 ；保健食品

輔料是指生產(chǎn)藥品和調(diào)配處方時(shí)使用的賦形劑和附加劑，除了活性成分，其安全性已進(jìn)行了合理的評(píng)估，并且是包含在藥物制劑中的物質(zhì)，主要具有增溶、緩控釋、助溶、賦形、充當(dāng)載體、提高穩(wěn)定性等重要的功能作用，是可能會(huì)對(duì)藥品質(zhì)量、有效性和安全性有影響的重要成分[1-2]，廣泛地應(yīng)用于食品、藥品和保健品等行業(yè)。

輔料根據(jù)來源、作用、給藥途徑可以分為不同的種類，根據(jù)來源分為天然物、半合成物、全合成物；根據(jù)作用及用途分為稀釋劑、潤滑劑、增溶劑、粘合劑等；根據(jù)給藥途徑分為口服、注射、經(jīng)皮、鼻吸入、眼部給藥等[3]。筆者針對(duì)7種稀釋劑木糖醇、甘露醇、蔗糖、赤蘚糖醇、淀粉、聚葡萄糖、麥芽糊精進(jìn)行考察，比較各輔料間多糖含量的差異，以及不同的醇沉濃度、不同對(duì)照品和不同的冷水浴時(shí)間對(duì)多糖含量的影響。輔料應(yīng)用較廣，目前關(guān)于輔料中多糖含量的研究尚未見報(bào)道，該研究為藥品和保健品應(yīng)用藥用輔料提供選擇的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1輔料。木糖醇，甘露醇，蔗糖，赤蘚糖醇，淀粉，聚葡萄糖，麥芽糊精。

1.1.2主要儀器。 TDZ5-WS臺(tái)式低速多管自動(dòng)平衡離心機(jī)，4 000 r/min，長沙維爾康湘鷹離心機(jī)有限公司；50 ml離心管；Ultra-6100紫外分光光度計(jì)，北京普源精電科技有限公司；電熱恒溫水浴鍋，天津市泰斯特儀器有限公司。

1.1.3主要試劑。無水乙醇，北京化工廠；D-無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品，中國食品藥品檢定研究院；葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品，武漢百特純大分子科技有限公司；苯酚，北京化工廠；濃硫酸(比重為1.84)；沈陽市民聯(lián)化工有限公司。

1.2 樣品的提取樣品量稱取如表1所示。

表1 各樣品稱樣量

稱取樣品后，將各樣品置于100 ml容量瓶中，加水80 ml左右，于沸水浴中加熱1 h，冷卻至室溫后補(bǔ)加水至刻度，將此體積定為V1，混勻后過濾，棄去初濾液，收集余下濾液供沉淀粗多糖。

1.3 沉淀粗多糖設(shè)定不同的醇沉濃度進(jìn)行考察，分別為50%、60%、70%、80%、90%，按表2進(jìn)行取樣醇沉。

表2 不同醇沉濃度的取樣量及加醇量

各樣品按表2進(jìn)行醇沉，于4 ℃冰箱靜置過夜，以轉(zhuǎn)速4 000 r/min離心5 min,棄上清液，殘?jiān)孟鄳?yīng)的醇濃度10 ml進(jìn)行洗滌，離心后去除上清液，反復(fù)操作3次，殘?jiān)盟芙獠⒍ㄈ莸?5 ml(V3)。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制準(zhǔn)確吸取對(duì)照品使用液(葡萄糖95.5 μg/ml，葡聚糖112.1 μg/ml)0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml，分別置于具塞比色管中，各加水補(bǔ)至1.0 ml，精密加入5%苯酚溶液1.0 ml，搖勻，再精密加入濃硫酸5.0 ml，搖勻，至沸水浴中加熱20 min，取出，置冷水浴中分別冷卻(5、10、20 min)，考察冷水浴時(shí)間對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品吸光度的影響，以相應(yīng)試劑為空白，在488 nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5 樣品的測定樣品吸樣量(V4)按照吸光度進(jìn)行調(diào)整，補(bǔ)加水到1 ml，以“1.4”的方法測定吸光度值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上得到樣品的葡萄糖(葡聚糖)含量，計(jì)算樣品中的粗多糖含量。

1.6 計(jì)算公式多糖含量計(jì)算公式如下：

X= (m1×V1×V3)/(m2×V2×V4)×100

式中，X為樣品中粗多糖含量(以葡萄糖計(jì))(%)；m1為樣品測定液中葡萄糖的含量(mg)；m2為樣品質(zhì)量(g)；V1為樣品提取液總體積(ml)；V2為沉淀粗多糖所用樣品提取液體積(ml)；V3為粗多糖溶液體積(ml)；V4為測定用樣品液體積。

2 結(jié)果與分析

2.1 冷水浴時(shí)間對(duì)吸光度的影響由圖1可以看出，在冷水浴時(shí)間為5、10、20 min時(shí)，葡萄糖標(biāo)品和葡聚糖標(biāo)品吸光度變化不大。

葡萄糖和葡聚糖的線性關(guān)系也直觀地表明不同冷水浴時(shí)間對(duì)二者的吸光度影響不大，見表3。

表3 不同冷水浴時(shí)間對(duì)葡萄糖、葡聚糖標(biāo)品線性關(guān)系的影響

2.2 以葡萄糖為對(duì)照品各個(gè)樣品的多糖含量由圖2標(biāo)準(zhǔn)曲線可以得到葡萄糖含量和吸光度的線性關(guān)系為y=9.937 2x+0.129 8，R2=0.999 5，結(jié)合公式計(jì)算出各樣品的多糖含量。

由表4可以看出，木糖醇、甘露醇、蔗糖和赤蘚糖醇中多糖含量極低，可以忽略不計(jì)；聚葡萄糖在醇沉濃度為50%、60%、70%時(shí)，多糖含量較低，在醇沉濃度為80%和90%時(shí)，多糖含量分別為25.02%和39.05%；麥芽糊精在醇沉濃度50%～90%范圍多糖的含量均較高，其中醇沉濃度在80%時(shí)，多糖含量最高，為61.16%。

2.3 以葡聚糖為對(duì)照品各個(gè)樣品的含量由圖3標(biāo)準(zhǔn)曲線可以得到葡聚糖含量和吸光度的線性關(guān)系為y=7.997 3x+0.233 7，R2=0.999 1，結(jié)合公式計(jì)算出各樣品的多糖含量。

由表5可以看出，木糖醇、甘露醇、蔗糖和赤蘚糖醇中多糖含量同樣極低，淀粉中的多糖含量在0.3%左右；聚葡萄糖在醇沉濃度為50%、60%、70%時(shí)，多糖含量較低，在醇沉濃度為80%和90%時(shí)，多糖含量分別為22.62%和47.91%；麥芽糊精在醇沉濃度50%～90%范圍內(nèi)多糖的含量均較高，其中醇沉濃度在80%時(shí)，多糖含量最高，為62.85%。

3 討論

表4 以葡萄糖為對(duì)照品各個(gè)樣品的多糖含量

藥用輔料需要按照藥性理論進(jìn)行選擇，以保證藥物療效[4]，合理地使用輔料，才能保證藥物制劑發(fā)揮應(yīng)有的療效，藥用輔料是藥物制劑的基礎(chǔ)原料和重要組成成分，能夠加強(qiáng)藥品的穩(wěn)定性，提高生物利用度以及患者的順應(yīng)性，還對(duì)藥品的識(shí)別、提高藥物療效、降低毒副作用有很大關(guān)系[5]。因此研究開發(fā)、合理應(yīng)用新輔料，避免影響主料中的有效成分，提供專屬性，是研究輔料利用的核心意義。

表5 以葡聚糖為對(duì)照品各個(gè)樣品的多糖含量

該研究結(jié)果表明，冷水浴時(shí)間在5 min時(shí)即能使反應(yīng)達(dá)到完全，分別以葡萄糖和葡聚糖為對(duì)照品時(shí)，各樣品的多糖含量差別不大，醇沉濃度對(duì)多糖的含量有一定影響。研究的這7種輔料中，其中木糖醇、甘露醇、蔗糖和赤蘚糖醇中基本不含有多糖，淀粉中含有一定量多糖，聚葡萄糖和麥芽糊精中含有較多的多糖。

根據(jù)上述結(jié)果，可增加對(duì)輔料中成分的認(rèn)識(shí)，目前關(guān)于輔料成分的研究很少，該研究為糖尿病人或需要攝入多糖的特殊人群服用的藥品及保健品選擇輔料提供依據(jù)，具有一定的意義。由于該研究僅限于7種常用的稀釋劑，其他相關(guān)輔料在應(yīng)用選擇時(shí)，還需進(jìn)一步研究。

[1] 白彥明.我國藥用輔料的現(xiàn)狀及對(duì)策[J].北方醫(yī)學(xué)，2014(10)：95-96.

[2] 姚金成，劉穎，饒健，等.引起不良反應(yīng)的常見中藥輔料及監(jiān)管對(duì)策[J].中國藥房，2012,23(15)：1424-1426.

[3] 金勇，劉征宙，顧小焱，等.藥用輔料分類及其應(yīng)用[J].化學(xué)試劑，2013，35(10):904-906.

[4] 莊義修.淺談中藥輔料的選擇原則[J].中藥通報(bào)，1987(11):29-30.

[5] 馮青然.中藥制劑中新輔料及新工藝的應(yīng)用簡介[C]//首屆全國藥用新輔料與中藥制劑新技術(shù)應(yīng)用研討會(huì)資料匯編.中國中醫(yī)藥研究促進(jìn)會(huì)，2004：38-45.

Study on Polysaccharide Content in Excipients in Health Food

GAO Chang1, WANG Lian-ping1, ZHAO Bao-qin1,2*et al (1. Jilin Modern Chinese Medicine Research Center Co. Ltd., Changchun, Jilin 130000; 2. Changchun University of Traditional Chinese Medicine, Changchun, Jilin 130000 )

[Objective] To compare the polysaccharide content among all kinds of excipients in health food, and the affect on polysaccharide content under different concentrations of alcohol precipitation. [Method] Xylitol, mannitol, sucrose, erythritol, starch, polydextrose, malt dextrin were investigated. The difference of polysaccharide content among all kinds of excipients were compared, as well as effects of different alcohol concentration, different CK, different cold bath time on polysaccharide content. [Result] The raw material was extracted and alcohol precipitated, the phenol-sulfuric acid colorimetry was adopted for determination. When cold bath time was 5 min allows the reaction to reach full; with glucose, glucan as reference respectively, the polysaccharide content of each sample had little effect, among seven excipients, wherein xylitol, mannitol, sucrose and erythritol are substantially free of polysaccharide, starch contains a certain amount of polysaccharide, polydextrose and maltodextrin contain more polysaccharides than other excipients. [Conclusion] The study can provide reference for selecting excipients for drugs and health food.

Excipients; Polysaccharide;Health food

吉林省醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)資金項(xiàng)目(20130727079YY)。

高暢(1988- )，女，吉林德惠人，碩士，從事藥品保健品開發(fā)研究。*通訊作者，助理研究員，碩士，從事藥劑學(xué)研究。

2015-04-13

S-03

A

0517-6611(2015)16-274-03