梔子柏皮湯不同配伍在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究

黃健忠

梔子柏皮湯不同配伍在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究

黃健忠

目的 探討梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內(nèi)藥代動力學(xué)的影響。方法 將30只SD大鼠隨機(jī)分為5組, 每組6只。分別灌胃含等量梔子苷的梔子苷單體溶液及梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏、梔子-黃柏-炙甘草湯劑, 采用HPLC方法測定給藥后不同時間血藥濃度, 比較藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果 湯劑組AUT及T1/2顯著高于梔子苷單體組, 梔子-炙甘草、梔子-黃柏及梔子黃柏-炙甘草組T1/2、AUT0-t及AUT0-∞均顯著高于梔子組, 梔子-黃柏-炙甘草組AUT0-t、AUT0-∞、T1/2、Tmax及Cmax均高于其他組, 組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 梔子柏皮湯藥材間相互作用有助于促進(jìn)梔子苷吸收, 從而提高藥物生物利用度。

梔子柏皮湯；配伍；藥代動力學(xué)

梔子柏皮湯源于《傷寒論》, 由梔子、黃柏和炙甘草三種中藥組成, 在身黃發(fā)熱癥、傷寒治療方面具有良好功效［1］。藥代動力學(xué)可用于研究不同配伍對藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄的影響, 從而明確發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)［2］。本文就梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內(nèi)藥代動力學(xué)的影響進(jìn)行研究?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 梔子苷對照品購自中國藥品生物制品檢定所, 批號：110749-200714；中藥梔子、黃柏和炙甘草購自桂平市人民醫(yī)院藥劑科；色譜純乙腈和甲醇購自美國Tedia公司；分析純冰乙酸購自國藥化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器 高效液相色譜儀Agilent 1200型(美國Ailent公司)；高速冷凍離心機(jī)Z32HK型(上海賀默儀器科技有限公司)；真空干燥箱DZF-6020MBE型(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司)。

1.3 動物 SD大鼠, 雌雄各15只, 230～250 g, 南方醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供, 合格證號：0092481。

1.4 方法

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 精確稱量1 mg梔子苷對照品, 甲醇溶解配制成0.1 g/L儲液, 倍比稀釋成0.5、1、2、4、8、16、20 mg/L的系列工作液。

1.4.2 湯劑制備及含量測定 按10∶6∶3比例稱取梔子、黃柏及炙甘草, 100℃蒸餾水煎煮3次, 20 min/次, 煎液合并過濾取上清, 濃縮后取100 μl上清液甲醇稀釋至1000倍, 混勻后離心取上清液, 0.22 μm濾膜過濾后HPLC分析測定梔子苷含量。梔子、梔子-黃柏及梔子-炙甘草的湯劑制備及梔子苷含量測定方法同上。

1.4.3 色譜條件 Agilent TC-C18色譜柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm)；柱溫25℃；進(jìn)樣量為10 μl；流動相為0.1%冰乙酸水溶液-甲醇；檢測波長為238 nm。

1.4.4 藥代動力學(xué)實(shí)驗(yàn) 將30只SD大鼠隨機(jī)分為5組,每組6只。雌雄各3只, 實(shí)驗(yàn)前12 h禁食, 以40 mg/kg梔子苷的標(biāo)準(zhǔn)給予梔子苷單體、梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏和梔子-黃柏-炙甘草灌胃, 于給藥后6、15、30、45 min及1、2、4、6、8、10 h進(jìn)行眼眶取血, 肝素離心管離心取上清后凍存待測。

1.4.5 血漿樣品預(yù)處理 取200 μl血漿, 加600 μl乙腈混勻后離心取700 μl上清, 真空干燥后用100 μl的30%甲醇溶液進(jìn)行復(fù)溶, 然后測定。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用3P97藥代動力學(xué)軟件進(jìn)行血藥濃度-時間數(shù)據(jù)分析, 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 線性范圍 取200 μl SD大鼠空白血漿, 加入梔子苷系列工作液, 分別配制成0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60及2.00 mg/L樣品進(jìn)行測定, 以梔子苷峰面積為縱坐標(biāo),以梔子苷濃度為橫坐標(biāo), 得到線性方程為Y=0.6926X+0.0248 (r=0.9997), 線性范圍為0.06～2.00 mg/L。

2.2 藥代動力學(xué)研究 5組SD大鼠分別灌胃含等量梔子苷的梔子苷單體溶液及梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏、梔子-黃柏-炙甘草湯劑, 經(jīng)血藥濃度-時間數(shù)據(jù)分析結(jié)果表明,湯劑組AUT及T1/2顯著高于梔子苷單體組, 梔子-炙甘草、梔子-黃柏及梔子黃柏-炙甘草組T1/2、AUT0-t及AUT0-∞均顯著高于梔子組, 梔子-黃柏-炙甘草組AUT0-t、AUT0-∞、T1/2、Tmax及Cmax均高于其他組, 組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

中藥配伍是中醫(yī)藥基本理論之一, 是中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究的重要組成部分之一［3］。目前, 中藥方劑配伍的研究已經(jīng)從組織器官、動物模型發(fā)展到了藥細(xì)胞, 甚至分子水平［4］。中藥藥代動力學(xué)在考察中藥體內(nèi)分布、吸收、代謝和排泄方面具有重要作用［5］。本研究初步建立了利用HPLC研究梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內(nèi)藥代動力學(xué)影響的測定方法, 并利用此方法研究發(fā)現(xiàn), 湯劑給藥比梔子苷單體給藥生物利用度高, 全組方給藥比其他配伍給藥生物利用度高, 從而說明,梔子柏皮湯藥材間相互作用有助于促進(jìn)梔子苷吸收, 從而提高藥物生物利用度。

［1］ 張英豐, 董宇, 朱曉新.中藥復(fù)方藥代動力學(xué)研究的方法與思考.中國天然藥物, 2008, 6(5):321-324.

［2］ 韓靜文, 黃成, 宋玨, 等.梔子柏皮湯不同配伍在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2014, 20(8):110-113.

［3］ 黃立華, 夏侯林, 王建安.息香在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究.時珍國醫(yī)國藥, 2013, 24(4):813-814.

［4］ 張鵬, 楊秀偉.紫花前胡苷在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究.中國藥理學(xué)通報, 2008, 24(9):1240-1244.

［5］ 劉益華, 李晶, 林曼婷, 等.梔子有效成分梔子苷的現(xiàn)代研究進(jìn)展.中國藥學(xué)雜志, 2012, 47(6):406-309.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.05.203

2014-09-19］

537200 廣西桂平市人民醫(yī)院藥劑科