結(jié)直腸腺癌患者術(shù)后組織真核翻譯起始因子3h、Survivin和增殖細(xì)胞核抗原表達(dá)及意義

趙成鵬 (南陽(yáng)市中心醫(yī)院外科，河南 南陽(yáng) 473000)

結(jié)直腸腺癌患者術(shù)后組織真核翻譯起始因子3h、Survivin和增殖細(xì)胞核抗原表達(dá)及意義

趙成鵬 (南陽(yáng)市中心醫(yī)院外科，河南 南陽(yáng) 473000)

目的 應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)結(jié)直腸腺癌患者術(shù)后組織中真核翻譯起始因子(EIF)3h、生存素(Survivin)和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)，探討三者在不同臨床病理特征中的表達(dá)意義。方法 94例結(jié)直腸腺癌術(shù)后組織作為觀察組，56例結(jié)腸腺瘤上皮內(nèi)瘤變組織作為對(duì)照組，距腫瘤邊緣＞5 cm的正常黏膜組織56例作為正常對(duì)照組。應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)3組中EIF3h、Survivin和PCNA的表達(dá)。結(jié)果 3組中EIF3h、Survivin和PCNA表達(dá)的陽(yáng)性率差異顯著。觀察組中EIF3h、Survivin和PCNA表達(dá)的陽(yáng)性率均與腫瘤的肌層浸潤(rùn)深度、脈管浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，EIF3h、Survivin表達(dá)的陽(yáng)性率均與分化程度密切相關(guān)。觀察組中EIF3h和PCNA、Survivin和PCNA的表達(dá)均呈正相關(guān)性。結(jié)論 EIF3h、Survivin和PCNA高表達(dá)在結(jié)直腸腺癌病變發(fā)生和進(jìn)展中有重要作用，EIF3h、Survivin均可能通過調(diào)節(jié)PCNA表達(dá)增殖過程發(fā)揮生物學(xué)功能。

結(jié)直腸腺癌;真核翻譯起始因子(EIF)3h;Survivin;增殖細(xì)胞核抗原(PCNA);免疫組化

結(jié)直腸腺癌是由上皮發(fā)生的惡性腫瘤，病變發(fā)展中癌基因啟動(dòng)細(xì)胞的增殖過程，引發(fā)細(xì)胞惡變及轉(zhuǎn)移〔1〕。真核翻譯起始因子(EIF)3h作為EIF家族中的重要亞基，不僅能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的正常調(diào)控和蛋白質(zhì)翻譯起作用，還對(duì)細(xì)胞惡變過程中增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)標(biāo)記的增殖起重要調(diào)節(jié)作用〔2，3〕。生存素(Survivin)是重要的凋亡抑制蛋白，可以抑制 caspase-3和caspase-7，進(jìn)而有效地調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的凋亡和增殖的過程〔4〕。PCNA是DNA聚合酶的輔助蛋白，參與DNA鏈的復(fù)制、修復(fù)，可作為細(xì)胞周期S期的特異性標(biāo)記〔5〕。本文關(guān)注結(jié)直腸腺癌患者術(shù)后組織中EIF3h、Survivin和PCNA的表達(dá)特征，探討其相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2011年1月至2013年12月我院行結(jié)直腸腺癌根治手術(shù)、同時(shí)經(jīng)病理醫(yī)師確診的94例患者作為觀察組，均符合WHO關(guān)于結(jié)直腸腺癌的具體標(biāo)準(zhǔn)，年齡51～83歲，平均(67.3±5.3)歲。56例結(jié)腸腺瘤上皮內(nèi)瘤變組織作為對(duì)照組，年齡54～82歲，平均(64.3±5.8)歲。距腫瘤邊緣＞5 cm 的正常黏膜組織56例作為正常對(duì)照組，年齡52～81歲，平均(65.3±5.5)歲。3組一般資料無(wú)明顯差別，具有可比性。

1.2 EIF3h、Survivin和PCNA蛋白的檢測(cè)方法 EIF3h、Survivin和PCNA蛋白均為濃縮液，EIF3h購(gòu)自Cell Signalign公司，Survivin和PCNA購(gòu)自北京中杉金橋生物工程公司。抗體按不同比例進(jìn)行稀釋后行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最佳的染色效果進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。正式實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化SP法，DAB染色，操作均由同一病理科主管技師完成，嚴(yán)格質(zhì)量控制。

1.3 EIF3h、Survivin和PCNA結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn) EIF3h和Survivin均以細(xì)胞質(zhì)中顯現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，PCNA以細(xì)胞核中顯現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，每張切片計(jì)數(shù)5個(gè)高倍(400倍)視野，計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞的百分率。EIF3h、Survivin和PCNA均以陽(yáng)性率≥5%計(jì)為陽(yáng)性，以陽(yáng)性率＜5%計(jì)為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 3 組中EIF3h、Survivin和PCNA表達(dá)陽(yáng)性率的比較 正常對(duì)照組、對(duì)照組、觀察組中EIF3h、Survivin和PCNA表達(dá)的陽(yáng)性率具有增高趨勢(shì)。見表1。

2.2 觀察組不同臨床特征中EIF3h、Survivin和PCNA表達(dá)陽(yáng)性率的比較 觀察組中EIF3h、Survivin和PCNA表達(dá)的陽(yáng)性率均與腫瘤的肌層浸潤(rùn)深度、脈管浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，EIF3h、Survivin表達(dá)的陽(yáng)性率均與分化程度密切相關(guān)。見表2。

表1 3組中EIF3h、Survivin和PCNA表達(dá)陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床特征中EIF3h、Survivin和PCNA表達(dá)陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

2.3 觀察組中EIF3h、Survivin和PCNA表達(dá)的相關(guān)性分析觀察組中 EIF3h 和PCNA(r=0.46，P=0.042 4)、Survivin 和 PCNA(r=0.45，P=0.029 8)的表達(dá)均呈正相關(guān)性。其他指標(biāo)間未見明顯的相關(guān)性(P＞0.05)。

3 討論

結(jié)直腸癌病因?qū)W顯示影響因素較多，遺傳易感性及分子通路的機(jī)制是當(dāng)今學(xué)者關(guān)注的重點(diǎn)。其中主要涉及腫瘤癌基因的活化、抑制基因的失活、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及異常增殖的啟動(dòng)〔6〕。但上述固有通路中的中間調(diào)節(jié)階段也有重要影響。研究認(rèn)為在腫瘤細(xì)胞形成過程中存在著一些固有時(shí)段，如翻譯起始階段40 S核糖體與mRNA結(jié)合需要一些因子幫助，而EIF3h能對(duì)此過程進(jìn)行調(diào)節(jié)〔7〕，同樣EIF3h異?；罨瘯r(shí)對(duì)核糖體復(fù)合物的功能起到關(guān)鍵性作用。EIF3h能使Met復(fù)合物穩(wěn)定地結(jié)合到40 S核糖體亞基上，并有助于保存這個(gè)復(fù)合物在60 S核糖體亞單位之上〔8〕。此時(shí)調(diào)節(jié)通路會(huì)形成明顯的變化，也使腫瘤處于異常增殖的過程中。如果當(dāng)外源性刺激或有絲分裂信號(hào)刺激細(xì)胞時(shí)，mTOR結(jié)合EIF3h，引起S6K1的過度磷酸化，不僅能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，還對(duì)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移有重要影響〔9〕。Survivin具有抑制細(xì)胞凋亡，干擾細(xì)胞周期，調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂，參與腫瘤微血管形成的功能，也是目前發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的凋亡抑制因子〔10，11〕。當(dāng)Survivin高表達(dá)時(shí)，腫瘤細(xì)胞凋亡率減少，并繼而引起增殖活性升高，使病變處于加速期〔12，13〕。PCNA是一種非組核蛋白，通過與周期性蛋白激酶結(jié)合引發(fā)細(xì)胞的增殖過程〔14，15〕。部分學(xué)者認(rèn)為PCNA表達(dá)較 Ki67要理想，可以囊括Ki67陽(yáng)性表達(dá)的所有細(xì)胞，因此其標(biāo)記增殖更加客觀全面〔16，17〕。

本實(shí)驗(yàn)提示EIF3h、Survivin和PCNA在結(jié)直腸癌變過程中有重要促進(jìn)作用。結(jié)腸腺瘤上皮內(nèi)瘤變作為癌變的前期改變對(duì)臨床有重要意義，而在上皮內(nèi)瘤變過程中，EIF3h、Survivin和PCNA均參與進(jìn)來(lái)。提示臨床中對(duì)部分上皮內(nèi)瘤變的患者，如果診斷為低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變，可以行EIF3h、Survivin和PCNA的檢測(cè)，如果三者高表達(dá)，說(shuō)明上皮內(nèi)瘤變處于進(jìn)展階段，病理診斷應(yīng)當(dāng)升級(jí)，或應(yīng)密切隨診，必要時(shí)積極進(jìn)行手術(shù)治療。EIF3h、Survivin和PCNA三種蛋白參與腫瘤的生長(zhǎng)、脈管的侵犯及淋巴結(jié)播散過程，此時(shí)EIF3h、Survivin和PCNA的高表達(dá)也提示腫瘤處于進(jìn)展期。EIF3h、Survivin參與了腫瘤的分化過程，即腫瘤中EIF3h、Survivin高表達(dá)使腫瘤的分化程度更低，細(xì)胞異型性更明顯，腫瘤的生長(zhǎng)更迅速，惡性程度更高。EIF3h和Survivin對(duì)腫瘤的促進(jìn)作用可能是通過調(diào)節(jié)PCNA表達(dá)的增殖過程起作用的。EIF3h、Survivin和PCNA高表達(dá)時(shí)引起腫瘤生長(zhǎng)的能力增強(qiáng)，向肌層浸潤(rùn)的程度增強(qiáng)，同時(shí)可能破壞脈管。近年也有學(xué)者認(rèn)為Survivin對(duì)腫瘤血管生成有影響〔18〕，因此EIF3h、Survivin和PCNA作用機(jī)制可能更復(fù)雜，其作用具體過程及通路需待更多基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)證實(shí)〔19，20〕。

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R735.35

A

1005-9202(2015)09-2444-03;

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.09.061

趙成鵬(1974-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事臨床外科學(xué)研究。

〔2013-12-07修回〕

(編輯 苑云杰)