趙嚴(yán)冬,劉潘虹,王曉彤,李健玲,王華東,陸大祥,戚仁斌△(暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系,國家中醫(yī)藥管理局病理生理實(shí)驗(yàn)室,暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院麻醉科,廣東廣州506)
Tau蛋白在缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡中的機(jī)制初探*
趙嚴(yán)冬1,2,劉潘虹1,2,王曉彤1,2,李健玲3,王華東1,2,陸大祥1,2,戚仁斌1,2△
(1暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系,2國家中醫(yī)藥管理局病理生理實(shí)驗(yàn)室,3暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院麻醉科,廣東廣州510632)
目的:初步探討缺氧/復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡模型中tau蛋白及其磷酸化水平、凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá)情況。方法:類神經(jīng)元PC12細(xì)胞體外培養(yǎng)并傳至第三代,進(jìn)行相應(yīng)處理,實(shí)驗(yàn)分組為正常對(duì)照組(control 組)、模型組(H/R組)。Annexin V-PI雙染流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)各組凋亡率以確定模型是否成功;造模成功后,使用RIPA裂解液提取蛋白; Western blotting技術(shù)檢測(cè)各組tau蛋白及其磷酸化、Bax和Bcl-2的表達(dá)變化。結(jié)果:與control組相比,H/R組細(xì)胞凋亡率顯著升高(P<0. 05),提示模型構(gòu)建成功; Westem blotting結(jié)果顯示,與control組相比,H/R組中tau蛋白表達(dá)顯著減少(P<0. 05),且tau蛋白Ser202位點(diǎn)的磷酸化水平顯著升高(P<0. 05),Bax/Bcl-2顯著升高(P<0. 05)。結(jié)論: Tau蛋白可能參與了缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡,其機(jī)制有待深入研究。
廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2014J4100098) ;廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.2014A030313394)
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