低氧調(diào)控Sirt6的表達(dá)及其機(jī)制研究

徐　穎，劉亞利，陳國(guó)強(qiáng)，△(中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所，上海0005)

低氧調(diào)控Sirt6的表達(dá)及其機(jī)制研究

徐穎1，劉亞利1，陳國(guó)強(qiáng)1，2△
(1中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院，2上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所，上海200025)

低氧是腫瘤的重要微環(huán)境，它主要通過(guò)低氧誘導(dǎo)因子實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤發(fā)生發(fā)展的調(diào)控。最近，我們報(bào)道多梳蛋白CBX4通過(guò)SUMO化修飾低氧誘導(dǎo)因子HIF-1，進(jìn)而增加其轉(zhuǎn)錄活性，促進(jìn)腫瘤新生血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移(Cancer Cell，2014，25: 118-131)。我們隨后的研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)CBX4進(jìn)行SUMO化修飾的HIF-1α不能結(jié)合Sirt6。后者是去乙?；竤irtuin家族中的一員，也可能是HIF-1轉(zhuǎn)錄活性的共遏制因子。有趣的是，我們發(fā)現(xiàn)低氧能夠下調(diào)Sirt6蛋白而非mRNA的表達(dá)。通過(guò)siRNA技術(shù)分別將低氧下發(fā)揮重要作用的兩個(gè)轉(zhuǎn)錄因子HIF-1α/HIF-2α進(jìn)行knockdown后發(fā)現(xiàn)，HIF-2α而不是HIF-1α介導(dǎo)了低氧對(duì)于Sirt6的調(diào)控。在常氧下轉(zhuǎn)染HIF-2α能夠劑量依賴地減少Sirt6的表達(dá)。低氧和過(guò)表達(dá)HIF-2α都能夠縮短Sirt6蛋白的半衰期。同時(shí)，在分別加入蛋白酶體抑制劑MG132、PS-341或溶酶體抑制劑CQ，發(fā)現(xiàn)Sirt6是通過(guò)蛋白酶體途徑而非溶酶體途徑發(fā)生降解。在此基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步通過(guò)雙熒光蛋白檢測(cè)系統(tǒng)尋找低氧下加速Sirt6降解的泛素E3連接酶。

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