彭 娟,唐志晗,任 重,劉錄山,危當(dāng)恒,姜志勝(南華大學(xué)心血管疾病研究所,動(dòng)脈硬化學(xué)湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南衡陽421001)
TET2參與ox-LDL對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CSE/H2S體系的調(diào)控作用
彭娟,唐志晗,任重,劉錄山,危當(dāng)恒,姜志勝△
(南華大學(xué)心血管疾病研究所,動(dòng)脈硬化學(xué)湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南衡陽421001)
目的:觀察DNA甲基化修飾酶TET2對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)中CSE/H2S體系的影響。方法:用不同濃度(0、25、50、75、100 mg/L) ox-LDL處理HUVEC不同時(shí)間(0、12、24、48 h),RT-PCR和Western blot檢測細(xì)胞TET2和CSE表達(dá)變化,改良亞甲基藍(lán)分光光度法檢測培養(yǎng)液中H2S含量;用TET2過表達(dá)和TET2干擾質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染HUVEC,再用75 mg/L ox-LDL處理24 h,RT-PCR和Western blot檢測細(xì)胞TET2和CSE表達(dá),改良亞甲基藍(lán)分光光度法檢測培養(yǎng)液中H2S含量。結(jié)果: ox-LDL呈濃度和時(shí)間依賴性下調(diào)HUVEC中TET2和CSE mRNA和蛋白表達(dá),減少培養(yǎng)液中H2S含量,以75 mg/L ox-LDL處理24 h效果最為明顯; TET2過表達(dá)可逆轉(zhuǎn)ox-LDL引起的HUVEC中TET2和CSE表達(dá)下調(diào)以及培養(yǎng)液中H2S含量的降低,TET2干擾則作用相反。結(jié)論: DNA甲基化修飾酶TET2可上調(diào)HUVEC的CSE/H2S體系,有望成為CSE/H2S體系一個(gè)新的內(nèi)源性調(diào)控靶點(diǎn)。
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