可溶性人類白細(xì)胞抗原-G在惡性腫瘤中診斷價(jià)值的研究進(jìn)展

可溶性人類白細(xì)胞抗原-G在惡性腫瘤中診斷價(jià)值的研究進(jìn)展

宋新宇陳世雄曾凡軍高寶安

(三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院宜昌市中心人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，湖北宜昌443003)

關(guān)鍵詞〔〕可溶性人類白細(xì)胞抗原(sHLA)-G；惡性腫瘤；免疫逃逸

中圖分類號(hào)〔〕R73〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：宜昌市醫(yī)療衛(wèi)生科技計(jì)劃項(xiàng)目(A01301-16)

通訊作者：陳世雄(1963-)，男，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事肺癌研究。

第一作者：宋新宇(1979-)，男，副主任醫(yī)師，碩士，主要從事肺癌研究。

可溶性人類白細(xì)胞抗原(sHLA)-G在惡性腫瘤患者血漿中的表達(dá)水平明顯升高〔1〕，sHLA-G可能成為一種潛在的腫瘤標(biāo)記物，在鑒別良惡性腫瘤中發(fā)揮重要作用。腫瘤細(xì)胞表達(dá)HLA-G被認(rèn)為是其逃避宿主免疫監(jiān)視策略的主要途徑〔2〕。目前，已經(jīng)在多種腫瘤中發(fā)現(xiàn)異常的HLA表型，如：HLA多倍體、單倍體、等位基因丟失、HLA特定部位的低表達(dá)及上述異?？赡芡瑫r(shí)存在〔3〕。HLA異常不僅影響HLA-Ⅰ型腫瘤抗原復(fù)合體向腫瘤特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(CTLs)呈遞，還影響到自然殺傷(NK)細(xì)胞對(duì)腫瘤殺傷的易感性〔4〕。Campoli等〔5〕研究證實(shí)，特定的HLA缺失可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞逃避細(xì)胞免疫，同時(shí)抑制NK細(xì)胞的殺傷作用。表明腫瘤組織特異性介導(dǎo)HLA-G的表達(dá)在腫瘤發(fā)病中發(fā)揮重要作用。本文對(duì)SHLA-G在惡性腫瘤中診斷價(jià)值的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1HLA-G的來(lái)源、分類及功能

HLA-G最早發(fā)現(xiàn)于絨毛膜外的細(xì)胞滋養(yǎng)層〔6〕，其在免疫隔離部位的表達(dá)被認(rèn)為可能起著保護(hù)胎兒逃避母體同種異體識(shí)別的作用，隨后發(fā)現(xiàn)它在維持器官移植的免疫耐受和腫瘤細(xì)胞及病毒感染細(xì)胞的免疫逃逸中具有重要作用〔7〕。HLA-G是非經(jīng)典的HLA-Ⅰ類分子，它與HLA-Ⅰa 類抗原有較高的同源性〔8〕。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)HLA-G有17個(gè)等位基因〔9〕。其在mRNA水平選擇性剪切，表現(xiàn)出7種獨(dú)立形式，包括膜結(jié)合型(HLA-G1、G2、G3、G4)和三種可溶型(HLA-G5、G6、G7)〔10〕，另一種可溶型是從HLA-G1表面切割脫落產(chǎn)生的sHLA-G1〔11〕。HLA-G區(qū)別于其他HLA-Ⅰ類分子主要因其有以下特點(diǎn)：①低多態(tài)性；②局限性的組織分布；③選擇性剪切生成7種蛋白單體；④具有免疫耐受的生物學(xué)特性〔12〕。

正常組織中，生理性HLA-G表達(dá)僅限于絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)層，胸腺上皮細(xì)胞和角膜〔13〕等。而在病理狀況下，HLA-G可表達(dá)于移植組織〔14〕，惡性腫瘤細(xì)胞〔15〕，病毒感染細(xì)胞〔16〕和炎癥疾病〔17〕。到目前為止，在惡性黑色素瘤〔15〕、腎細(xì)胞癌〔18〕、肺癌〔19〕、卵巢癌、乳腺癌〔20〕和神經(jīng)膠質(zhì)瘤中〔21〕都發(fā)現(xiàn)有HLA-G蛋白的表達(dá)。

Yie等〔22〕研究發(fā)現(xiàn)，僅在惡性腫瘤的腫瘤病灶內(nèi)檢測(cè)到HLA-G的表達(dá)，在其鄰近的非腫瘤組織卻很少發(fā)現(xiàn)，并且HLA-G的表達(dá)水平與腫瘤的不良預(yù)后密切相關(guān)。同時(shí)，Amiot等〔23〕研究也證實(shí)，HLA-G通過(guò)抑制免疫活性細(xì)胞的反應(yīng)介導(dǎo)免疫抑制及調(diào)節(jié)細(xì)胞的產(chǎn)生，能有效促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞逃避宿主的免疫監(jiān)視及攻擊，HLA-G在惡性腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸及腫瘤的進(jìn)展中有著重要的作用。

2HLA-G在惡性腫瘤中的表達(dá)

已有研究證實(shí)，腫瘤的HLA-Ⅰ型抗原表達(dá)是異常的，這與疾病的臨床發(fā)展及患者生存率有關(guān)。HLA-G的表達(dá)具有高度的組織限制性，除了在成人的免疫器官及造血細(xì)胞系中，其膜結(jié)合型、溶解型或HLA-G蛋白還可在一些特定的病理中發(fā)現(xiàn)，如：癌癥、移植、病毒感染性疾病〔5〕。Paul等〔24〕首次于1998年在黑素瘤中發(fā)現(xiàn)有HLA-G的表達(dá)。目前，在大部分正常組織和細(xì)胞均能檢測(cè)到基礎(chǔ)水平的HLA-G基因轉(zhuǎn)錄，而當(dāng)其翻譯為HLA-G蛋白時(shí)僅局限表達(dá)于部分正常組織，如：滋養(yǎng)層、胸腺、角膜、甲床、胰腺、內(nèi)皮祖細(xì)胞和紅系祖細(xì)胞〔13〕。隨后，在近三十種惡性腫瘤中均檢測(cè)到HLA-G表達(dá)，如血液系統(tǒng)及實(shí)質(zhì)性腫瘤〔25，26〕。HLA-G可以在細(xì)胞表面表達(dá)，也可分泌或合并入腫瘤源性的外來(lái)實(shí)質(zhì)體〔26，27〕。上述研究表明，不同腫瘤中HLA-G的表達(dá)水平是完全不同的。在葡萄膜黑色素瘤及喉癌中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)HLA-G的表達(dá)，而葡萄胎100%表達(dá)HLA-G是由于其胎盤作用的影響〔28〕。此外，HLA-G更易在腫瘤組織中被檢測(cè)到，其正常組織及鄰近非腫瘤組織還未發(fā)現(xiàn)有HLA-G蛋白的表達(dá)，表明它與腫瘤的生長(zhǎng)及進(jìn)展有特定關(guān)系〔12〕。與此研究結(jié)果一致，在黑素瘤病人中，HLA-G可在原發(fā)及繼發(fā)腫瘤部位發(fā)現(xiàn)，但在正常皮膚組織及恢復(fù)的腫瘤組織內(nèi)無(wú)表達(dá)〔29〕。同樣，在移植病人中如果同時(shí)發(fā)生了良性及惡性腫瘤，那么HLA-G的表達(dá)僅局限于惡性病灶處被發(fā)現(xiàn)〔30〕。既往研究發(fā)現(xiàn)，HLA-G在腫瘤病變區(qū)表達(dá)水平的高低與腫瘤的分期和惡性程度密切相關(guān)，且其相關(guān)度因腫瘤類型的不同而有很大差別，如，肺癌的惡性程度被認(rèn)為與HLA-G表達(dá)相關(guān)〔20〕，而腎癌則顯示與其沒(méi)有明顯相關(guān)性〔31〕。在黑色素瘤患者中，血漿中HLA-G水平與疾病晚期和腫瘤負(fù)荷相關(guān)〔15〕。

3sHLA-G在診斷惡性腫瘤中的價(jià)值

源自于膜結(jié)合型HLA-G亞型的釋放及腫瘤本身分泌的周圍型sHLA-G抗原，尤其是HLA-G5，能夠影響腫瘤部位及整個(gè)循環(huán)中的抗腫瘤免疫應(yīng)答〔32〕。體內(nèi)HLA-G來(lái)源于免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的分泌，體外T細(xì)胞、樹突細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞均能分泌SHLA-G〔13，32〕。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)在乳腺癌和卵巢癌患者的惡性腹水中SHLA-G的水平明顯高于良性腹水，該發(fā)現(xiàn)提示HLA-G可能是一個(gè)潛在的腫瘤標(biāo)記物，可通過(guò)檢測(cè)腹水中SHLA-G來(lái)鑒別腹水的性質(zhì)〔20〕。對(duì)于晚期卵巢癌患者，其惡性積液中腫瘤細(xì)胞表達(dá)HLA-G與否可被用作判斷腫瘤是否對(duì)化療敏感的指標(biāo)〔33，34〕，除了對(duì)免疫細(xì)胞的抑制作用外，sHLA-G表達(dá)水平的高低被作為一種判斷良惡性腫瘤及健康指標(biāo)的工具，也參與疾病預(yù)后指標(biāo)的評(píng)估〔25〕。

Singer等〔20〕研究表明，卵巢癌與乳腺癌患者的惡性腹水中，sHLA-G水平明顯升高。sHLA-G水平在其受試者工作特征(ROC)曲線0.95以下作為評(píng)估診斷卵巢癌和乳腺癌的工具。同時(shí)，ROC曲線0.99和0.90以下作為卵巢癌和良性腫瘤及乳腺癌和良性腫瘤的區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)〔20，35〕。數(shù)據(jù)顯示，乳腺癌患者中sHLA-G的水平明顯高于健康對(duì)照組，其ROC曲線下面積為0.95〔36，37〕。

在小細(xì)胞肺癌、非小細(xì)胞肺癌、肺腺癌、鱗癌及未分化癌中，研究表明sHLA-G只在非小細(xì)胞肺癌中升高，以鱗癌為主。sHLA-G<40 ng/ml肺癌患者的生存率延長(zhǎng)，其水平與腫瘤分期有關(guān)，晚期及預(yù)后不良者其sHLA-G水平升高很明顯〔38，39〕。Morandi等〔40〕研究也證實(shí)，高水平的sHLA-G與成纖維神經(jīng)細(xì)胞瘤的復(fù)發(fā)密切相關(guān)。

在大腸癌患者中，sHLA-G水平明顯高于結(jié)腸增生性息肉、炎性結(jié)腸疾病及腺瘤患者。通過(guò)sHLA-G的ROC曲線在0.842以下來(lái)區(qū)分結(jié)腸的良性和惡性腫瘤〔41〕。鑒別良惡性結(jié)腸疾病時(shí)，sHLA-G要明顯優(yōu)于癌胚抗原(CEA)，而兩者結(jié)合診斷則更有意義。將大腸癌、胃癌、食管鱗狀細(xì)胞癌、非小細(xì)胞肺癌患者與正常對(duì)照組的sHLA-G進(jìn)行對(duì)比表明，診斷大腸癌和食管鱗狀細(xì)胞癌時(shí)，sHLA-G比CEA和鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC-Ag)更有意義。而在胃癌患者中，sHLA-G與CEA 兩者結(jié)合檢測(cè)則比單用sHLA-G要好〔22〕。sHLA-G比SCC-Ag或癌抗原(CA)125在辨別宮頸癌中更有意義〔42〕。

在造血系統(tǒng)的惡性腫瘤中，慢性淋巴細(xì)胞性白血病、B-非霍奇金淋巴瘤、T-非霍奇金淋巴瘤患者血漿中sHLA-G水平均明顯升高。意外的是，在非霍奇金淋巴瘤中并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)sHLA-G與組織分類、腫瘤分級(jí)、淋巴細(xì)胞增多癥、誘導(dǎo)緩解延遲、復(fù)發(fā)和死亡間的相關(guān)關(guān)系。在慢性淋巴細(xì)胞性白血病患者中，也沒(méi)發(fā)現(xiàn)它與Binet分類、分級(jí)、CD38表達(dá)、淋巴細(xì)胞增多癥、誘導(dǎo)緩解延遲、復(fù)發(fā)和死亡間的關(guān)系。同樣也沒(méi)發(fā)現(xiàn)它與多發(fā)性骨髓瘤患者β2(微球蛋白-MG)及生存率之間的關(guān)系〔43～46〕。

綜上，sHLA-G在惡性腫瘤中的表達(dá)已有廣泛研究，目前也已證實(shí)它與多種惡性腫瘤相關(guān)。大量研究表明，在不同源性的造血系統(tǒng)腫瘤及實(shí)質(zhì)性腫瘤的病灶與血漿中，均可檢測(cè)到sHLA-G的高表達(dá)，sHLA-G的免疫抑制性及其與腫瘤患者不良預(yù)后的關(guān)系也一再被闡明。因此，可以認(rèn)為，sHLA-G可能是一種新型的腫瘤標(biāo)志物，在一些特定腫瘤中，它比CEA、CA125更有意義，可以作為一種鑒別良惡性腫瘤的新工具，為惡性腫瘤的早診早治提供新思路。當(dāng)然，在它投入臨床使用之前，仍需大量的臨床研究報(bào)道證實(shí)。

4參考文獻(xiàn)

1Rebmann V，Regel J，Stolke D，etal.Secretion of sHLA-G molecules in malignancies〔J〕.Semin Cancer Biol，2003；13(5)：371-7.

2Chang CC，Campoli M，F(xiàn)errone S.HLA class Ⅰ antigen expression in malignant cells：why does it not always correlate with CTL-mediated lysis〔J〕?Curr Opin Immunol，2004；16(5)：644-50.

3Lampen MH，van Hall T.Strategies to counteract MHC-Ⅰ defects in tumors〔J〕.Curr Opin Immunol，2011；23(2)：293-8.

4Chang CC，F(xiàn)errone S.Immune selective pressure and HLA class Ⅰ antigen defects in malignant lesions〔J〕.Cancer Immunol Immunother，2007；56(2)：227-36.

5Campoli M，F(xiàn)errone S.Tumor escape mechanisms：potential role of soluble HLA antigens and NK cells activating ligands〔J〕.Tiss Antigens，2008；72(4)：321-34.

6Kovats S，Main EK，Librach C，etal.A class Ⅰ antigen，HLA-G，expressed in human trophoblasts〔J〕.Science，1990；248(4952)：220-3.

7Carosella ED，Moreau P，Lemaoult J，etal.HLA-G：from biology to clinical benefits〔J〕.Trends Immunol，2008；29(3)：125-32.

8Ober C.HLA-G：an asthma gene on chromosome 6p〔J〕.Immunol Allergy Clin North Am，2005；25(4)：669-79.

9Le Discorde M，Le Danff C，Moreau P，etal.HLA - G* 0105N null allele encodes functional HLA-G isoforms〔J〕.Biol Reprod，2005；73(2)：280-8.

10Paul P，Cabestre FA，Ibrahim EC，etal.Identication of HLA-G7 as a new splice variant of the HLA-G mRNA and expression of soluble HLA-G5，-G6，and-G7 transcripts in human transfected cells〔J〕.Hum Immunol，2000；61(11)：1138-49.

11Park GM，Lee S，Park B，etal.Soluble HLA-G generated by proteolytic shedding inhibits NK-mediated cell lysis〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2004；313(3)：606-11.

12Carosella ED，Gregori S，LeMaoult J.The tolerogenic interplays among HLA-G，myeloid APCs，and regulatory cells〔J〕.Blood，2011；118(25)：6499-505.

13Carosella ED，Moreau P，Maoult JL，etal.HLA-G molecules：from maternal-fetal tolerance to tissue acceptance〔J〕.Adv Immunol，2003；81：199-252.

14Luque J，Torres MI，Aumente MD，etal.sHLA-G levels in the monitoring of immunosuppressive therapy and rejection following heart transplantation〔J〕.Transpl Immunol，2006；17(1)：70-3.

15Ugurel S，Rebmann V，F(xiàn)errone S，etal.Soluble human leukocyte antigen-G serum level is elevated in melanoma patients and is further increased by interferon-alpha immunotherapy〔J〕.Cancer，2001；92(2)：369-76.

16Lozano JM，González R，Kindelán JM，etal.Monocytes and T lymphocytes in HIV-1-positive patients express HLA-G molecule〔J〕.AIDS，2002；16(3)：347-51.

17Fainardi E，Rizzo R，Melchiorri L，etal.Presence of detectable levels of soluble HLA-G molecules in CSF of relapsing-remitting multiple sclerosis：relationship with CSF soluble HLA-Ⅰ and IL-10 concentrations and MRI findings〔J〕.J Neuroimmunol，2003；142(1-2)：149-58.

18Ibrahim EC，Guerra N，Lacombe MJ，etal.Tumor-specific up-regulation of the nonclassical class Ⅰ HLA-G antigen expression in renal carcinoma〔J〕.Cancer Res，2001；61(18)：6838-45.

19Urosevic M，Kurrer MO，Kamarashev J，etal.Human leukocyte antigen G up-regulation in lung cancer associates with high-grade histology，human leukocyte antigen class Ⅰ loss and interleukin-10 production〔J〕.Am J Pathol，2001；159(3)：817-24.

20Singer G，Rebmann V，Chen YC，etal.HLA-G is a potential tumor marker in malignant ascites〔J〕.Clin Cancer Res，2003；9(12)：4460-4.

21Wiendl H，Mitsdoerffer M，Hofmeister V，etal.A functional role of HLA-G expression in human gliomas：an alternative strategy of immune escape〔J〕.J Immunol，2002；168(9)：4772-80.

22Yie SM，Hu Z.Human leukocyte antigen-G(HLA-G)as a marker for diagnosis，prognosis and tumor immune escape in human malignancies〔J〕.Histol Histopathol，2011；26：409-20.

23Amiot L，F(xiàn)errone S，Grosse-Wilde H，etal.Biology of HLA-G in cancer：a candidate molecule for therapeutic intervention〔J〕?Cell Mol Life Sci，2011；68(3)：417-31.

24Paul P，Rouas-Freiss N，Khalil-Daher I，etal.HLA-G expression in melanoma，a way for tumor cells to escape from immunosurveillance〔J〕.Proc Natl Acad Sci 1998；95(8)：4510-5.

25Yan WH.HLA-G expression in hematologic malignancies〔J〕.Expert Rev Hematol，2010；3(1)：67-80.

26Yan WH.HLA-G expression in cancers：potential role in diagnosis，prognosis and therapy〔J〕.Endocr Metab Immune Disord Drug Targets，2011；11(1)：76-89.

27Riteau B，F(xiàn)aure F，Menier C，etal.Exosomes bearing HLA-G are released by melanoma cells〔J〕.Hum Immunol，2003；64(11)：1064-72.

28Goldman-Wohl D，Ariel I，Greenfield C，etal.A study of human leukocyte antigen G expression in hydatidiform moles〔J〕.Am J Obstet Gynecol，2001；185(2)：476-80.

29Paul P，Cabestre FA，Le Gal FA，etal.Heterogeneity of HLA-G gene transcription and protein expression in malignant melanoma biopsies〔J〕.Cancer Res，1999；59(8)：1954-60.

30Ibrahim C，Aractingi S，Allory Y，etal.Analysis of HLA antigen expression in benign and malignant melanocytic lesions reveals that upregulation of HLA-G expression correlates with malignant transformation；high inammatory inltration and HLA-A1 genotype〔J〕.Int J Cancer，2004；108(2)：243-50.

31Ibrahim C，Allory Y，Commo F，etal.Altered pattern of major histocompatibility complex expression in renal carcinoma：tumor-specific expression of the nonclassical human leukocyte antigen-G molecule is restricted to clear cell carcinoma while up-regulation of other major histocompatibility complex antigens is primarily distributed in all subtypes of renal carcinoma〔J〕.Am J Pathol，2003；162(2)：501-8.

32Rebmann V，Busemann A，Lindemann M，etal.Detection of HLA-G5 secreting cells〔J〕.Hum Immunol，2003；64(11)：1017-24.

33Rebmann V，Regel J，Stolke D，etal.Secretion of sHLA-G molecules in malignancies〔J〕.Semin Cancer Biol，2003；13(5)：371-7.

34Davidson B，Elstrand MB，McMaster MT，etal.HLA-G expression in effusions is a possible marker of tumor susceptibility to chemotherapy in ovarian carcinoma〔J〕.Gynecol Oncol，2005；96(1)：42-7.

35Mach P，Blecharz P，Basta P，etal.Differences in the soluble HLA-G blood serum concentration levels in patients with ovarian cancer and ovarian and deep endometriosis〔J〕.Am J Reprod Immunol，2010；63(5)：387-95.

36He X，Dong DD，Yie SM，etal.HLA-G expression in human breast cancer，implications for diagnosis and prognosis；and effect on allocytotoxic lymphocyte response after hormone treatment in vitro〔J〕.Ann Surg Oncol，2010；17(5)：1459-69.

37Chen HX，Lin A，Shen CJ，etal.Upregulation of human leukocyte antigen-G expression and its clinical signicance in ductal breast cancer〔J〕.Hum Immunol，2010；71(9)：892-8.

38Lin A，Zhu CC，Chen HX，etal.Clinical relevance and functional implications for human leukocyte antigen-G expression in non-small-cell lung cancer〔J〕.J Cell Mol Med，2010；14(9)：2318-29.

39Schütt P，Schütt B，Switala M，etal.Prognostic relevance of soluble human leukocyte antigen-G and total human leukocyte antigen class Ⅰ molecules in lung cancer patients〔J〕.Hum Immunol，2010；71(5)：489-95.

40Morandi F，Levreri I，Bocca P，etal.Human neuroblastoma cells trigger an immunosuppressive program in monocytes by stimulating soluble HLA-G release〔J〕.Cancer Res，2007；67(13)：6433-41.

41Zhu CB，Wang CX，Zhang X，etal.Serum sHLA-G levels，a useful indicator in distinguishing colorectal cancer from benign colorectal diseases〔J〕.Int J Cancer，2011；128(3)：617-22.

42Zheng N，Wang CX，Zhang X，etal.Up-regulation of HLA-G expression in cervical premalignant and malignant lesions〔J〕.Tiss Antigens，2011；77(3)：218-24.

43Leleu X，Le Friec G，F(xiàn)acon T，etal.Total soluble HLA class Ⅰ and soluble HLA-G in multiple myeloma and monoclonal gammopathy of undetermined signicance〔J〕.Clin Cancer Res，2005；11(20)：7297-303.

44Sebti Y，Le Maux A，Gros F，etal.Expression of functional soluble human leucocyte antigen-G molecules in lymphoproliferative disorders〔J〕.Br J Haematol，2007；138(2)：202-12.

45Amiot L，Onno M，Drénou B，etal.HLA-G class I gene expression in normal and malignant hematopoietic cells〔J〕.Hum Immunol，1998；59(8)：524-8.

46Yong P，Kim SJ，Lee SJ，etal.Serum level of soluble human leukocyte antigen-G molecules in non-Hodgkin lymphoma，does it have a prognostic value〔J〕?Leuk Lymphoma，2008；49(8)：1623-6.

〔2014-05-17修回〕

(編輯杜娟)