呼吸道感染細菌培養(yǎng)及藥物敏感性試驗

卞永娟

呼吸道感染細菌培養(yǎng)及藥物敏感性試驗

卞永娟

作者結合相關文獻從培養(yǎng)基的選擇﹑接種方式及培養(yǎng)條件﹑初次培養(yǎng)24 h致病菌的選取與分純﹑結果報告與解釋等方面對呼吸道感染細菌培養(yǎng)及藥物敏感性試驗加以闡述, 進而明確病原體是進行感染性疾病治療的金標準。因此, 在技術上應盡量完善試驗條件, 爭取快速準確找到病原微生物。

呼吸道感染；細菌培養(yǎng)；藥物敏感性；試驗

引起呼吸道感染的常見細菌為革蘭陽性菌和革蘭陰性菌(肺炎鏈球菌﹑金黃色葡萄球菌﹑化膿性鏈球菌﹑流感嗜血桿菌﹑腦膜炎奈瑟菌﹑肺炎克雷伯桿等), 此外還有結核分枝桿菌等［1］。當懷疑呼吸道有細菌感染時, 建議先采樣進行細菌培養(yǎng)及藥物敏感性試驗, 同時根據病情決定是否經驗用藥, 等到培養(yǎng)及藥物敏感性試驗結果完成后及時調整用藥。隨著國家關于加強抗菌藥物規(guī)范使用文件的出臺, 臨床越來越重視細菌培養(yǎng)的必要性和重要性, 明確病原體是進行感染性疾病治療的金標準。因此, 在技術上應盡量完善試驗條件,爭取快速準確找到病原微生物。本文結合相關文獻就呼吸道感染細菌培養(yǎng)及藥物敏感性試驗加以闡述。

1 培養(yǎng)基的選擇

對于呼吸道病原體培養(yǎng)用的培養(yǎng)基應盡量滿足各類細菌的生長條件。通常選用包括哥倫比亞血培養(yǎng)基作為基礎培養(yǎng)基, 該培養(yǎng)基能夠使絕大多數的細菌生長, 用于細菌種類及比例的判斷及革蘭陽性菌的觀察與分離。巧克力培養(yǎng)基作為流感嗜血桿菌﹑卡他莫拉菌及其他革蘭陰性球菌, 如腦膜炎奈瑟菌及不動桿菌某些種的觀察和分離, 特別是流感嗜血桿菌只在巧克力培養(yǎng)基上才能夠生長良好［2,3］。

2 接種方式及培養(yǎng)條件

實驗室收到標本后應盡快接種。標本應先進行培養(yǎng)接種,再進行涂片, 以免在涂片過程中污染, 影響培養(yǎng)結果。根據涂片結果將拒收的不合格標本盡快通知臨床。涂片不合格,但已經接種的標本, 可報告培養(yǎng)的細菌種類及比例, 注明“疑似非下呼吸道標本”字樣［4］。

呼吸道標本的接種方法根據具體的標本類型略有不同。①上呼吸道來源的各類拭子在培養(yǎng)基一區(qū)進行反復涂抹。②痰液標本的接種應選取黃粘部位進行接種, 有條件的實驗室可以洗痰去掉唾液部分, 甚至將黏痰部位進行均質化后進行接種, 但整個過程應避免污染。③支氣管肺泡灌洗液標本應定量接種10 μl或20 μl。④組織標本應在無菌條件下研磨后接種, 若是針吸組織樣本可以直接接種到血培養(yǎng)基上, 用接種環(huán)將組織盡量鋪開與培養(yǎng)基充分接觸。

3 初次培養(yǎng)24 h致病菌的選取與分純

3.1 首次觀察時間為孵育后24 h, 對于生長不良的培養(yǎng)基應孵育48 h觀察第二次, 對于無菌生長的培養(yǎng)基應孵育72 h甚至更長時間才能做出無菌生長的報告。特殊細菌如結核分枝桿菌等應根據目的菌的生長情況延長培養(yǎng)時間。即使是24 h已經生長良好的培養(yǎng)基也應繼續(xù)培養(yǎng)48 h, 著重觀察有無類似博德特菌等慢生長菌的出現。

3.2 標本直接涂片鏡檢的結果可以用以指導解釋初次培養(yǎng)菌株情況的判斷, 培養(yǎng)基上的初培養(yǎng)菌種情況應當與標本涂片結果保持一致, 若一種甚至多種生長菌在標本涂片中沒有觀察到, 建議對標本進行雙人二次檢測。

3.3 可根據以下內容識別在培養(yǎng)基上生長的大量細菌為潛在的主要病原體, 而不屬于呼吸道正常菌群。①若一種菌株在培養(yǎng)基第二區(qū)甚至是更高區(qū)域生長的數量為中量或大量；②在標本涂片中為主要可疑致病菌但在培養(yǎng)物中數量較少；③雖然只在培養(yǎng)基第一象限生長, 但為純培養(yǎng)物沒有其他呼吸道正常菌群生長, 同時標本格蘭染色顯示是膿性標本。

3.4 痰涂片結果和培養(yǎng)結果不一致的原因分析 ①由于痰標本在進行培養(yǎng)和涂片時選取的部位不一致。②某些快生長菌所占比例并不多, 但由于其生長速度快﹑營養(yǎng)要求低, 能夠在培養(yǎng)過程中迅速變?yōu)閮?yōu)勢菌, 掩蓋了其他菌的生長, 造成結果不一致。③標本從采集到接種的時間過長, 造成一部分苛養(yǎng)菌死亡, 特別是流感嗜血桿菌, 在涂片中看到的只是菌體殘骸, 而非活菌［5］。

4 結果報告與解釋

呼吸道標本的細菌學檢查結果通常由涂片報告﹑培養(yǎng)及藥物敏感性報告組成。培養(yǎng)及藥物敏感性報告是對臨床更具有指導性意義的報告。

培養(yǎng)結果的參考價值一方面取決于患者的癥狀﹑特征,另一方面要結合痰涂片的結果判斷痰標本是否合格才能進一步參考。一份呼吸道標本細菌學檢查報告包括正常菌群部分﹑條件致病菌以及該菌的藥物敏感性試驗結果及解釋結果。正常菌群通常以半定量的形式報告, 在此處若不合格痰標本還會標注“疑似非下呼吸道標本字樣”, 以提示臨床醫(yī)生對此報告的參考程度。

痰標本細菌學培養(yǎng)報告通常有陰性報告和陽性報告。臨床可以參考此報告進行抗菌藥物治療, 具有重要的臨床參考價值［6］。

5 小結

在使用抗生素前, 應先收集標本, 對感染病原菌先進行培養(yǎng)和藥敏試驗, 然后根據試驗結果來選擇合適的抗生素,才能在臨床上正確使用抗菌藥物, 減少耐藥菌株和菌群失調的出現, 有的放矢及時治愈疾病。

［1］陳再玲. 654例下呼吸道感染患者痰培養(yǎng)病原菌及其藥物敏感試驗分析.中國醫(yī)學創(chuàng)新, 2012, 9(23):138-140.

［2］傅石明. 改進痰培養(yǎng)標本篩選方法的探討.中華醫(yī)院感染學雜志, 2012, 22(9):1991-1992.

［3］王惠萱, 李雪梅, 滕毅, 等. 臨床痰標本檢驗前期處理新方法研究. 國際檢驗醫(yī)學雜志, 2010, 31(8):898-899.

［4］賴群清. 住院老人痰標本細菌培養(yǎng)結果分析. 海南醫(yī)學, 2010, 21(3):59-60.

［5］陳麗華, 杜娟.痰標本直接涂片與細菌培養(yǎng)結果分析. 基層醫(yī)學論壇, 2012, 16(35):4729-4730.

［6］張旻, 盧少華. 500份痰標本細菌培養(yǎng)和藥敏試驗結果分析.中國醫(yī)藥科學, 2013, 3(24):121-122.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.22.196

2015-06-19］

136000 吉林省四平市結核病醫(yī)院